CC BY
26
ПАТ0М0РФ0Л0Г1Я
© ^Куприянова Л. С.
УДК 618. 17-018. 74-092. 18-053. 18-02:618. 36-008. 6 12 Куприянова Л. С.
ИММУН0ГИСТ0ХИМИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ЭНД0ТЕЛИН-
ПРОДУЦИРУЮЩЕЙ АКТИВН0СТИ С0СУДИСТ0Г0 К0МП0НЕНТА МАТКИ
ПЛ0Д0В 0Т МАТЕРЕЙ, БЕРЕМЕНН0СТЬУ К0Т0РЫХ 0СЛ0ЖНЕНА
ПРЕЭКЛАМПСИЕЙ РАЗЛИЧН0Й СТЕПЕНИ ТЯЖЕСТИ
1Харьковский национальный медицинский университет М0З Украины
(г. Харьков)
2Харьковский национальный университет внутренних дел МВД Украины
(г. Харьков)
Настоящее исследование является фрагментом комплексной научно-исследовательской работы кафедры патологической анатомии Харьковского национального медицинского университета МОЗ Украины «Патологическая анатомия отдельных систем плода и новорожденного от матерей с осложненной беременностью» (номер государственной регистрации 010511002760), которая входит в координационный план приоритетных направлений, утвержденный Министерством здравоохранения Украины.
Вступление. Современные исследования показали, что эндотелий сосудов - это не только барьер между кровью и тканями, но и активный орган, основной функцией которого является поддержание гомеостаза [1]. Дисфункция эндотелия является ведущим звеном патогенеза в развитии плацентарной дисфункции, преэклампсии, формировании синдрома задержки внутриутробного развития плода. Изменения в структуре эндотелия способствуют развитию перинатальной патологии, что значительно ухудшает прогноз для новорожденного и ребенка в дальнейшем онтогенезе [3].
Установлено повышение уровня содержания эн-дотелина-1 в крови беременных с преэклампсией, а также развитие дисфункции эндотелия в сосудах плаценты при данной патологии. Изучено влияние данной патологии матери на закладку, формирование и становление функциональной активности в дальнейшем печени, тимуса, селезенки и головного мозга плода [8]. Однако особенности строения матки плодов от матерей с преэклампсией различной степени тяжести, в частности эндотелин-проду-цирующей активности сосудистого компонента, не изучены.
Цель исследования - выявление иммуногисто-химических особенностей эндотелин-продуцирующей активности сосудистого компонента стенки матки плодов от матерей, беременность у которых осложнена преэклампсией (ПЭ) различной степени тяжести.
Объект и методы исследования. Объектом исследования послужила матка плода. Учитывая основные этапы становления структурной организации и функциональной активности матки в период внутриутробного развития, плоды исследуемых групп разделены в соответствии со сроком геста-ции следующим образом: 22-28 недель и 29-36 недель. Группа контрольных наблюдений представлена плодами от матерей, беременность у которых по данным медицинской документации протекала физиологично. В группы сравнения вошли плоды от матерей с ПЭ различной степени тяжести.
Распределение плодов в исследуемых группах по срокам гестации и в соответствии с тяжестью ПЭ матери представлено в таблице 1.
Причиной гибели плодов исследуемых групп послужили: острое расстройство
Таблица 1
Распределение плодов в исследуемых
группах в соответствии со сроком гестации и степенью тяжести ПЭ матери
Группа 22-28 недель 29-36 недель Всего
Контроль 20 27 47
ПЭ легкой степени 5 10 12
ПЭ средней степени 8 9 17
ПЭ тяжелой степени 9 7 19
Всего 42 53 95
маточно-плацентарного кровообращения (преждевременная отслойка нормально расположенной плаценты), а также патология пуповины (абсолютная короткость пуповины, истинные узлы пуповины, многократное обвитие пуповины вокруг шеи и туловища плода).
Проведенные исследования полностью соответствуют законодательству Украины и отвечают принципам Хельсинкской декларации прав человека, Конвенции Союза Европы относительно прав человека и биомедицины (подтверждено заключением комиссии по биоэтике, протокол № 3, 2006 г).
Работа была проведена в соответствии с требованиями «Инструкции о проведении судебно-медицинской экспертизы» (приказ МОЗ Украины № 6 от 17.01.1995), в соответствии с требованиями и нормами, типичным положением по вопросам этики МОЗ Украины № 690 от 23.09.2009 г.
Методы исследования: антропометрический, макроскопический, органометрический, морфо-метрический, гистологический, иммуногистохими-ческий, статистический.
Антропометрическим методом установлены показатели массы и длинны тела плодов. Органо-метрическим методом определены длина и масса матки плодов исследуемых групп. Из каждого органа вырезали по три кусочка, проводили по спиртам различной концентрации и фиксировали в 10 % растворе нейтрального формалина. По окончании фиксации материала кусочки заливали в парафин
для изготовления блоков. С каждого блока производили серийные срезы толщиной 1-3 мкм [7], которые окрашивали гистологическим (гематоксилином и эозином, пикрофуксином по ван-Гизон) и имму-ногистохимическим методом (непрямым методом Кунса в модификации M. Brosman (1979)) для типи-рования эндотелина-1 [9]. Интенсивность свечения препаратов, обработанных МКАт, определялась при использовании метода количественного определения содержания антигена в биологических тканях и выражалась в условных единицах свечения (усл. ед. св.) [6]. Морфометрическим методом установлены показатели толщины стенки матки. Статистическое исследование проводилось на микроскопе Olympus B x -41 с использованием программ DP-Soft 4 (Version 3:1) и Microsoft E x cel [2]. Полученные цифровые данные обработаны методами вариационной статистики с вычислением: средней арифметической, среднеквадратичного отклонения, достоверности разницы, средней ошибки средней арифметической [2].
Результаты исследования и их обсуждение.
Антропометрические показатели плодов в соответствии со сроком гестации и степенью тяжести ПЭ матери представлены в таблице 2.
Анализируя данные таблицы 2, можно сказать, что показатели массы тела и длины тела плодов от матерей с ПЭ различной степени тяжести достоверно снижены в сравнении с таковыми в группе контрольных наблюдений (р < 0,05). Причем отмечается Таблица 2
Антропометрические показатели плодов в соответствии со
сроком гестации
Группа Масса тела, кг Длина тела,м
Срок гестации 22-28 недель 29-36 недель 22-28 недель 29-36 недель
Контроль 1097,84 ± 170,88 3681,58 ± 128,13 35,95 ± 2,65х10~2 47,86 ± 1,67х10~2
ПЭ легкой степени 607,50 ± 21,26х10~3* 2748,75 ± 96,21* 28,12 ± 2,15х10~2* 43,5 ± 1,52х10~2*
ПЭ средней степени 565,6 ± 19,8х10~3* 2365,56 ± 82,78* 25,89 ± 0,91х10~2* 31,70 ± 1,12х10 2*
ПЭ тяжелой степени 494,45 ± 17,27х10~3* 1165,67 ± 40,78* 23,89 ± 0,84х10~2* 30,44 ± 1,07х10~2*
Примечание: *р < 0,05 (по сравнению с контролем). Таблица 3 Показатели массы и длины матки плодов исследуемых групп
Группа Масса матки, кг Длина матки, м
Срок гестации 22-28 недель 29-36 недель 22-28 недель 29-36 недель
Контроль 3,28 ± 0,11х10_3 4,87 ± 0,17х103 2,69 ± 0,09х10~2 3,88 ± 0,14х10~2
ПЭ легкой степени 2,95 ± 0,10х10_3* 4,52 ± 0,15х10_3* 2,41 ± 0,08х10~2* 3,65 ± 0,13х10~2*
ПЭ средней степени 2,41 ± 0,08х10_3* 4,07 ± 0,14х10_3* 2,28 ± 0,08х10~2* 3,47 ± 0,12х10~2*
ПЭ тяжелой степени 2,24 ± 0,07х10_3* 3,86 ± 0,03х10_3* 2,11 ± 0,07х10~2* 3,35 ± 0,11х10~2*
Примечание: *р < 0,05 (по сравнению с контролем).
прямая тесная взаимосвязь между уровнем снижения антропометрических показателей плода и степенью тяжести ПЭ матери: так, минимальные изменения показателей отмечаются у плодов от матерей с ПЭ легкой степени, максимальные изменения характерны для показателей плодов от матерей с ПЭ тяжелой степени (г = + 0,5) (р < 0,05).
Форма матки плодов исследуемых групп была грушевидной и располагалась таким образом, что дно и тело органа располагалось справа в полости большого таза, а шейка матки - в полости малого таза. Передняя поверхность органа прилегала к мочевому пузырю, задняя поверхность граничила с прямой кишкой.
Усредненные показатели массы и длины органа плодов исследуемых групп представлены в таблице 3.
Данные таблицы 3 свидетельствуют о том, что органометрические показатели органа плодов от матерей с ПЭ различной степени тяжести достоверно снижены в сравнении с таковыми у плодов контрольных наблюдений (р < 0,05). Показатели массы и длины органа снижены минимально у плодов от матерей с легким течением ПЭ, максимально - у плодов от матерей с тяжелой степенью ПЭ, что позволяет установить прямую тесную взаимосвязь между снижением указанных органометриче-ских показателей и степенью тяжести ПЭ матери (г = + 0,5) (р < 0,05).
Усредненные показатели толщины стенки матки плодов исследуемых групп представлены в таблице 4.
Оценивая приведенные в таблице 4 показатели, можно прийти к выводу, что показатели толщины стенки матки у плодов от матерей с ПЭ различной степени тяжести достоверно снижены в сравнении с таковыми в группе контрольных наблюдений (р < 0,05). Обращает внимание прямая тесная взаимосвязь между уровнем снижения показателя толщины стенки органа и степенью тяжести ПЭ матери (г = + 0,5) (р < 0,05).
При обзорном микроскопическом исследовании препаратов, окрашенных гематоксилином и эозином, установлено, что вне зависимости от срока гестации стенка органа представлена тремя основными слоями (эндометрием, миометрием и периметрием), граница между которыми четко определяется.
Гистологическое строение основных компонентов стенки матки у плодов группы контроля в различные сроки гестации типично. Обращает на себя внимание более четкая структурная организация мышечных волокон миометрия у плодов в сроке гестации 29-36 недель. Сосуды органа во всех наблюдениях тонкостенные, единичные - спазмированы.
У плодов от матерей с ПЭ легкой степени строение гистологическое стенки матки практически не отличалось от такового в группе контрольных наблюдений.
Характерными особенностями в строении стенки органа у плодов от матерей с ПЭ средней и тяжелой степени являются: пролиферативная активность железистого эпителия; хаотичное расположение с нарушением структурной взаимосвязи между мышечными волокнами в составе ми-ометрия. При окраске срезов пикрофуксином по ван-Гизон установлено массивное разрастание соединительной ткани, как в собственной пластинке слизистой оболочки, так и в структурах мышечного слоя стенки матки. Сосуды миометрия резко полнокровны, расширены, местами в них определяются стазы. Стенки сосудов утолщены. Эндотелий сосудов подвержен выраженным дистрофическим, местами некротическим изменениям.
Таблица 4
Показатели толщины стенки матки плодов исследуемых групп
Группа Толщина стенки матки у плодов в сроке 22-28 недель, м Толщина стенки матки у плодов в сроке 29-36 недель, м
Контроль 5,25 ± 0,18х10_3 7,91 ± 0,27х10_3
ПЭ легкой степени 4,97 ± 0,17х10_3* 7,57 ± 0,26х10"3*
ПЭ средней степени 4,81 ± 0,16х10_3* 7,40 ± 0,25х10"3*
ПЭ тяжелой степени 4,21 ± 0,15х10_3* 7,15 ± 0,25х10"3*
Примечание: *р < 0,05 (по сравнению с контролем).
Таблица 5
Интенсивность свечения эндотелина-1 в сосудах стенки матки плодов исследуемых групп (усл. ед. св.)
Группа Интенсивность свечения эндотелина-1 у плодов в сроке 22-28 недель Интенсивность свечения эндотелина-1 у плодов в сроке 29-36 недель
Контроль 0,340 ± 0,012 0,350 ± 0,012
ПЭ легкой степени 0,420 ± 0,014* 0,470 ± 0,016*
ПЭ средней степени 0,470 ± 0,016* 0,490 ± 0,017*
ПЭ тяжелой степени 0,510 ± 0,018* 0,550 ± 0,019*
Примечание: *р < 0,05 (по сравнению с контролем).
Иммуногистохимическим методом выявлено усиление интенсивности свечения эндотелина-1 в сосудах артериального типа стенки матки плодов от матерей с ПЭ в сравнении с контрольными наблюдениями. Показатели интенсивности свечения эндотелина-1 в сосудах стенки матки плодов исследуемых групп представлены в таблице 5.
Анализируя данные таблицы 5, можно прийти к выводу, что в сосудах артериального типа стенки матки плодов от матерей с ПЭ различной степени тяжести отмечается достоверное усиление интенсивности свечения эндотелина-1 (р < 0,05) в сравнении с таковым в группе контрольних наблюдений. Усиление интенсивности свечения эндотелина-1 находится в прямой взаимосвязи со степенью тяжести ПЭ матери.
По данным современной отечественной и зарубежной литературы обменные и метаболические нарушения в организме беременной при ПЭ способствуют усилению эндотелин-продуцирующей активности сосудистого компонента внутренних органов плода [4, 5]. Эндотелин-1 влияет на метаболизм коллагена и, таким образом, стимулирует синтез соединительной ткани в стенке сосуда [10].
Проведенное исследование позволило выявить особенности эндотелин-продуцирующей активности сосудистого компонента стенки матки плодов от матерей с ПЭ различной степени тяжести. Так, показано, усиление свечения эндотелина-1 в артериях стенки матки плодов от матерей с ПЭ в сравнении
с таковым у плодов группы контроля. Установлена прямая тесная взаимосвязь между уровнем свечения эндотелина-1 и степенью тяжести ПЭ матери.
Выводы.
1. Антропометрическим методом выявлено достоверное снижение показателей массы и длины тела плодов от матерей с ПЭ в сравнении с таковыми у плодов группы контроля. Установлена прямая тесная взаимосвязь между уровнем снижения антропометрических показателей и степенью тяжести ПЭ матери. Однонаправленные изменения отмечаются при изучении показателей массы и длины органа, а также толщины стенки матки плодов групп сравнения.
2. Гистологическое строение стенки матки плодов от матерей с ПЭ средней и тяжелой степени отличается от такового в группе контрольных наблюдений выраженной пролиферативной активностью железистого эпителия; нарушением структурной организации мышечных волокон в составе миоме-трия; массивным разрастанием соединительной ткани в как в собственной пластинке слизистой оболочки, так и в структурах мышечного слоя стенки матки.
3. В сосудах артериального типа стенки матки плодов от матерей с ПЭ выявлено усиление свечения эндотелина-1 в сравнении с таковым в группе контрольных наблюдений. Степень продукции эн-дотелина-1 варьирует в соответствии со степенью тяжести ПЭ матери.
4. Учитывая роль эндотелина-1 в регуляции тонуса сосудистой стенки и способности к вазокон-стрикции, можно предположить, что усиление эн-дотелин-продуцирующей активности сосудистого компонента стенки матки плодов от матерей с ПЭ будет способствовать нарушению кровоснабжения фетального органа, стимулируя при этом развитие склеротических процессов.
5. Выявленные особенности в строении сосудистого компонента матки плодов от матерей с ПЭ могут привести к нарушению структурной организации и снижению функциональной активности органа в дальнейшем онтогенезе.
Перспективы дальнейших исследований. Иммуногистохимическим методом выявить особенности эндотелин-подуцирующей активности сосудистого компонента яичников и маточных труб плодов от матерей, беременность у которых осложнена ПЭ различной степени тяжести.
Литература
1. Аронскинд Е. В. Состояние здоровья детей, перенесших критические состояния в периоде новорожденности / Е. В. Аронскинд, Л. А. Уфимцева, Э. Г. Курова [и др.] // Педиатрия. - 2004. - № 1. - С. 39-42.
2. Атраментова Л. А. Статистические методы в биологии / Л. А. Атраментова, О. М. Утевская. - Горловка, 2008. - 247 с.
3. Абдиримова А. Д. Взаимосвязь интенсивности выявления элементов воспаления и этиологических агентов воспалительных заболеваний органов малого таза у женщин / А. Д. Абдиримова, Г. В. Туйчиева, Г. Д. Матризаева // Вюник проблем бюлогп i медицини. - 2014. - Вип. 4, Т. 4 (116). - С. 46-49.
4. Архипюна Т. Л. Концентра^я ендотелшу-1 в плазм1 кров1 у хворих на синдром полкютозних яечниюв ¡з нормальною та надлишковою масою тта / Т. Л. Архипюна, Т. Л. Любимова, Л. I. Зайцева // Зб. матерiалiв науково-практичноУ конференцп з мiжнародною участю «Ендокринна патолопя у вковому аспекп» (Харюв, 27-28 листопада 2014 р.). -Харюв, 2014. - С. 9-10.
5. Владика О. Функцп ендотелiальних кштин в нормi та при патологи / О. Владика // Зб. матерiалiв х IV Мiжнародного медичного конгресу студенев та молодих вчених, (Тернопть, 13-15 квтя, 2010 р.). - Тернопть, 2010. - С. 220.
6. Губша-Вакулк Г. I. Патент на корисну модель «Спосiб юльюсного визначення вмюту антигену в бюлопчних тканинах» / Г. I. Губша-Вакулк, В. Д. Марковський, I. В. Сороюна, О. В. Юхтенко, Л. С. Купрiянова, Р. В. Сидоренко. и200906730, 2009.
7. Жакота Д. А. Модернизация методов взятия и подготовки тканей для гистологического исследования / Д. А. Жакота, А. С. Тертычный, Е. А. Рыжов [и соавт.] // Архив патологии. - 2010. - № 6. - С. 52-54.
8. Климов В. А. Эндотелий фетоплацентарного комплекса при физиологическом и патологическом течении беременности / В. А. Климов // Акушерство и гинекология. - 2008. - № 2. - С. 7-10.
9. Кононский А. И. Гистохимия / А. И. Кононский. - Киев : «Вища школа», 1976. - 277 с.
10. Кузьмина И. Ю. Роль системы гомеостаза и патологии спиральных артерий в патогенезе развития хронической гипоксии плода / И. Ю. Кузьмина, И. Н. Щербина, О. А. Кузьмина // Експериментальна i кшшчна медицина. - 2012. -№ 1 (54). - С. 153-155.
УДК 618. 17-018. 74-092. 18-053. 18-02:618. 36-008. 6
1МУН0Г1С0Х1М1ЧН1 0С0БЛИВ0СТ1 ЕНД0ТЕЛ1Н-ПР0ДУКУЮЧ0Т АКТИВН0СТ1 СУДИННОГО КОМПОНЕНТУ МАТКИ ПЛ0Д1В В1Д МАТЕР1В, ВАГ1ТН1СТЬ У ЯКИХ УСКЛАДНЕНА ПРЕЕКЛАМПС16Ю Р13Н0Г0 СТУПЕНЮ ТЯЖК0СТ1
Купр1янова Л. С.
Резюме. В результат проведеного дослщження показано посилення ендотелш-продукуючо'| активной судинного компонента стшки матки плодiв вщ матерiв з ПЕ порiвняно з групою контрольних спостережень. Встановлена прямий тюний взаемозв'язок мiж рiвнем посилення свтння ендотелЫу-1 i ступенем тяжкост ПЕ матерг Виявлен особливост будови судинного компонента органу будуть сприяти порушенню кровопо-стачання фетального органу i розвитку склеротичних процеЫв у ньому. Порушення ендотелш-продукуючо'|
активност судин матки плод1в вщ матер1в з ПЕ можуть призвести до порушення структурно! оргаызаци та зниження функцюнально! активност органу в подальшому онтогенез!.
Ключовi слова: плод, матка, прееклампЫя, ендотелш-1.
УДК: 618. 17-018. 74-092. 18-053. 18-02:618. 36-008. 6
ИММУН0ГИСТ0ХИМИЧЕСКИЕ 0С0БЕНН0СТИ ЭНД0ТЕЛИН-ПР0ДУЦИРУЮЩЕЙ АКТИВН0СТИ С0СУДИСТ0Г0 К0МП0НЕНТА МАТКИ ПЛ0Д0В 0Т МАТЕРЕЙ, БЕРЕМЕНН0СТЬ У К0Т0РЫХ 0СЛ0Ж-НЕНА ПРЕЭКЛАМПСИЕЙ РАЗЛИЧН0Й СТЕПЕНИ ТЯЖЕСТИ
Куприянова Л. С.
Резюме. В результате проведенного исследования показано усиление эндотелин-продуцирующей активности сосудистого компонента стенки матки плодов от матерей с ПЭ в сравнении с таковой в группе контрольных наблюдений. Установлена прямая тесная взаимосвязь между уровнем усиления свечения эн-дотелина-1 и степенью тяжести ПЭ матери. Выявленные особенности строения сосудистого компонента органа будут способствовать нарушению кровоснабжения фетального органа и развитию склеротических процессов в нем. Нарушение эндотелин-продуцирующей активности сосудов матки плодов от матерей с ПЭ могут привести к нарушению структурной организации и снижению функциональной активности органа в дальнейшем онтогенезе.
Ключевые слова: плод, матка, преэклампсия, эндотелин-1.
UDC 618. 17-018. 74-092. 18-053. 18-02:618. 36-008. 6
Immunohistochemical Peculiarities of Endothelin-Producing Activity of the Vascular Component of the Uterus Fetus from the Mothers with Preeclampsia Varying Severity
Kupriyanova L. S.
Abstract. The purpose of research - immunohistochemical detection of peculiarities of endothelin-producing activity of the vascular component of the fetus uterine wall.
The object of the study were the uterus of the fetus. Given the main stages of the structural organization and functional activity of the uterus during fetal development, the fetuses studied groups divided according to gestational age as follows: 22-28 weeks and 29-36 weeks.
Methods: anthropometric, macroscopic, organometric, histologic, histochemical, morphometric, statistical.
Results and discussion - prominent pecularities in the structure of the body wall in fetuses of mothers with PE moderate and severe are the proliferative activity of the glandular epithelium; randomly distributed in violation of the structural relationship between the muscle fibers in the composition of the myometrium. When stained sections pikrofuksin by van-Gieson a massive proliferation of connective tissue in the lamina propria and in the structures of the muscle layer of the uterus. Myometrium vessels sharply congested, enlarged, sometimes they define stasis. Vessel walls are thickened. Vascular endothelium is e x posed to severe dystrophic, sometimes necrotic changes. Immunohistochemistry revealed increased luminescence intensivity of endothelin-1 in the blood vessels such as the uterine wall fetuses from mothers with PE
Conclusions. 1. Anthropometric method showed a significant decline in body weight and length fetuses from mothers with PE compared with those in fetuses of the control group. A direct close relationship between the level of reduction of anthropometric indices and the severity of PE mother. Unidirectional marked changes in the study parameters body weight and length, and the thickness of the uterine wall fruit comparison groups. 2. Histological structure of the uterine wall fruit from mothers with PE moderate and severe differs from that in the control group observations pronounced proliferative activity of the glandular epithelium; violation of the structural organization of the muscle fibers in the composition of the myometrium; massive proliferation of connective tissue in the lamina propria and muscle layers in the structures of the uterine wall. 3. The blood vessels in the uterus type fruits from mothers with PE detected luminescence enhancement of endothelin-1 in comparison with that in the control group of observations. The degree of production of endothelin-1 varies in accordance with the severity of PE mother. 4. Given the role of endothelin-1 in the regulation of vascular tone and ability to wall vasoconstriction suggests that increased endothelin-producing activity of the vascular component of the uterine wall fetuses of women with PE would contribute to impaired blood supply to the fetal body, while stimulating the development of atherosclerotic processes. 5. Identification of features in the structure of the vascular component of the uterus fruit from mothers with PE may disrupt the structure and reduction of functional activity of the body in the future ontogenesis.
Keywords: fetus, uterus, preeclampsia, endothelin-1.
Рецензент - проф. Старченко 1.1.
Стаття надшшла 04. 03. 2015 р.
