CC BY
46
Иммуногенетические особенности клинического течения хронического ... 309
Е Л. Назарова, И. А. Докшина, В. И. Шардаков,
В. Т. Демьянова, Е. Н. Зотина
Иммуногенетические особенности клинического течения хронического лимфолейкоза
ФГБУН «Кировский НИИ гематологии и переливания крови ФМБА России»
Среди заболеваний системы крови хронический лимфолейкоз (ХЛЛ) по своей частоте превалирует у лиц пожилого возраста. Эта патология является также наиболее распространенной в странах Европы и Северной Америки, где на долю ХЛЛ приходится около 30% от всех гемобластозов. В настоящее время важное этиопатогенетическое значение при ХЛЛ придается нарушению баланса между апоптозом и пролиферацией лимфоидных клеток, где значимую роль играют генетические факторы, опосредующие соотношение и активность этих процессов, а также определяющие скорость развития и прогрессирования заболевания. К сожалению, с молекулярно-генетических позиций ХЛЛ изучен недостаточно полно. Так, подавляющее число работ по исследованию роли различных генов- кандидатов в формировании подверженности хроническому лимфолейкозу - проведено за рубежом, тогда как в Российской Федерации основное внимание в решении этой проблемы уделено лишь генам системы детоксикации ксенобиотиков. Роль иных генетических вариантов, а также изменений профиля экспрессии генов иммунного ответа в формировании и клиническом течении ХЛЛ среди населения России изучена крайне слабо. Не установлены четкие клиникогенетические параллели с учетом клинического течения ХЛЛ, а оно весьма вариабельно: от «тлеющего» до прогрессирующего характера течения заболевания.
Целью настоящего исследования являлась оценка мутационного статуса генов иммунного ответа в качестве прогностического критерия при доброкачественном и прогрессирующем течении ХЛЛ.
Проведен ретро- и проспективный анализ клинических данных у 30 больных ХЛЛ - жителей Кировской области, иден-
310
Вопросы онкогематологии
тифицирующих себя как русские. В исследование вошли пациенты, у которых диагноз заболевания установлен на основании классических критериев в период с 2001 по 2013 гг. Среди них наблюдалось 17 мужчин и 13 женщин (соотношение 1,3:1).
Геномное тестирование 19 полиморфных участков 14 генов иммунного ответа (ILlfr IL2, IL4, IL6, IL10, IL17A, TNF, TLR2, TLR3, TLR6, TLR9, CD14, FCGR2A) проводили методом полимеразной цепной реакции с аллель-специфичными праймерами и электрофоретической детекцией продуктов реакции в агарозном геле. Распределение генотипов по исследуемым полиморфным локусам проверяли на соответствие равновесию Харди-Вайнберга с помощью точного теста Фишера. Для расчета результатов использовали пакет программ Statistica V.12 и MS Office Excel 2003. Статистически значимыми считали различия при p<0,05. Анализ межгенных взаимодействий выполнялся с помощью непараметрической программы GMDR (Generalized Multifactor - Dimensionality Reduction) [Lou X.Y. et al., 2007; http://www.healthsystem. vir-ginia.edu/internet/addiction-genomics/Software/].
Характеристика обследованных больных представлена в таблице.
Таблица - Характеристика групп больных хроническим лимфолейкозом____________________________________________
Показатель Доброкачественная форма (n=17) Прогрессирующая форма (n=13)
Пол: - мужской - женский - соотношение 10 (58,8%) 7 (41,2%) 1,4:1 7 (53,9%) 6 (46,1%) 1,2:1
Возраст на момент постановки диагноза (лет), Ме (25-75%) 56 (54-64) 58 (58-73)
Стадия ХЛЛ на момент постановки диагноза (по Binet J. L. et al., 1981): - А - В - С 2 (11,8%) 15 (88,2%) 0 (0%) 0 (0%) 11 (84,6) 2 (15,4)
Число пациентов, нуждающихся в лечении на момент постановки диагноза 11 (64,7%) 10 (76,9%)
Период от момента постановки диагноза до начала терапии (мес.), Ме (25-75%) 19 (8-34) 12 (4-12)
Общая выживаемость (число больных) 17 (100%) 8 (61,5%)*
Бессобытийная выживаемость (мес.), Ме (25-75%) 25 (23-36) 36 (14-60)
Примечание. Ме - медиана показателя; 25-75%о - верхний и нижний квартили; * - достоверность различий показателя в группах больных ХЛЛ.
Иммуногенетические особенности клинического течения хронического ... 311
Не было выявлено гендерных, возрастных отличий показателей в изучаемых группах, а также сроков начала лечения и бессобытийной выживаемости. В 15,4% случаев прогрессирующее течение заболевания устанавливалось у пациентов в момент постановки диагноза уже на стадии С, что не наблюдалось при доброкачественном течении процесса. Найдены отличия в общей выживаемости между I и II группами пациентов (100% vs. 61,5%, Х2=7,85, р=0,0051): за период наблюдения умерли 5 больных с прогрессирующим ХЛЛ вследствие перехода заболевания в терминальную фазу.
Учитывая роль генетической компоненты в развитии и течении ХЛЛ, нами была изучена частота распространения аллелей и генотипов генов иммунного ответа при доброкачественном и прогрессирующем течении ХЛЛ.
Установлено, что при доброкачественном течении ХЛЛ:
- достоверно чаще выявлялся мутантный аллель А гена TNF (G-308A) (28,1% vs. 7,7%; х2=3,90; р=0,05; OR=4,70 (95%CI: 0,9224,10)),
- мутантный аллель С гена TLR9 (T-1237C) (25,0% vs. 3,8%; Х2=4,90; р=0,03; OR=8,33 (95%CI: 0,97-71,76)),
- мутантный аллель А гена TLR2 (Arg753Gln) (50,0% vs. 15,4%; х2=3,80; р=0,05; OR=5,50 (95%CI: 0,91-33,18)),
- реже - аллель «дикого типа» С гена IL6 (C-174G) (12,5% vs. 46,2%; х2=4,07; р=0,04; OR=6,00 (95%CI: 0,95-37,77)).
При анализе межгенных взаимодействий выявленных генов-кандидатов предрасположенности к развитию прогрессирующего течения ХЛЛ были найдены статистически достоверные сочетания гаплотипов в двух- и трехлокусной моделях. Так, при наличии генотипа ТТ гена TLR9 (T-1237C) в сочетании с генотипом GG гена TLR2 (Arg753Gln) риск развития прогрессирующей формы заболевания возрастал в 23,8 раза (х2=6,23; р=0,01; OR=23,83 (95%CI: 1,50-377,42)), а при сочетании вышеуказанных гаплотипов с генотипом GG гена TNF (G-308A) - в 36 раз ((Х2=6,70; р=0,01; OR=36,00 (95%CI: 1,43-905,40)).
Таким образом, с доброкачественным характером течения ХЛЛ и, следовательно, выживаемостью пациентов уже в момент постановки диагноза коррелируют присутствие мутантных аллелей генов TNF, TLR9 и TLR2, а также низкая частота выявления аллеля «дикого типа» гена IL6. Кроме того, наличие комбинации нормальных гомозигот генов TNF, TLR9 и TLR2 увеличивает вероятность развития прогрессирующей формы заболевания, что может способствовать оптимизации выбора терапии.
