CC BY
42
Медицинская Иммунология 2002, Т. 4, № 4-5, стр 633-636 О 2002, СПб РО РААКИ
Краткие сообщения
HLA-АНТИГЕНЫ 1 КЛАССА В ГРУППЕ ДЕТЕЙ С ПОВЫШЕННЫМ РИСКОМ РАЗВИТИЯ ИНСУЛИНЗАВИСИМОГО САХАРНОГО ДИАБЕТА
Рахимова Г.Н., Рахимова Д.А.
Институт эндокринологии АНРУз;
Институт иммунологии АНРУз
Резюме. Целью нашего исследования явилось изучение HLA-антигенов 1 класса у детей с повышенным риском развития инсулинзависимого сахарного диабета (ИЗСД).
В результате исследования было обследовано 83 ребенка в возрасте от 6 до 13 лет с транзиторной гипергликемией или наличием клинических симптомов сахарного диабета. Типирование HLA-антигенов проводили с помощью стандартного 2-ступенчатого лимфоцито-токсического теста (Terasaki J., 1978).
Результаты исследования показали истинную ассоциативную связь для HLA-антигенов - В8, В7, Cw4. Показатели относительного риска оказались для антигенов: В8-8,2; А25-7.5; В22-5,1- Статистически достоверно частыми гаплотипами с положительной величиной неравновесного сцепления явились гаплотипы: АЗ-В 8; А1-В13; А10-В14; А9-В50.
Ключевые слова: HLA-антигены, сахарный диабет.
Rakhimova G.N., Rakhimova D.A.
CLASS I HLA-ANTIGENS IN CHILDREN WITH HIGH RISK OF INSULIN-DEPENDENT DIABETES MELLITUS DEVELOPMENT
Abstract. The purpose of our investigation is to study the distribution of class I HLA-antigens in children who have a high risk of insulin-dependent diabetes mellitus (IDDM) development. We examined 83 children at the age from 6 to 13 with hypoglycemia or with clinical symptoms of IDDM. HLA-typing was performed by means of standard two-step microlymphocytotoxicity technique. The results of our investigation showed the association of IDDM with HLA-B8, B7, Cw4 antigens. The indices of relative risk were revealed for B8-8,2; A25-7,5; D22-5,l. The haplotypes A3-B8; A1-B13; A10-B14; A9-B50 had a high positive linkage with clinical symptoms. (Med.ImmunoL, 2002, vol.4, N 4-5, pp 633-636)
Введение Сама по себе идентификация этих маркеров име-
Инсулинзависимый сахарный диабет (ИЗСД) ет прогностическое, а не диагностическое значение,
представляет собой генетически детерминированное Необходимо отметить, что генетические маркеры
заболевание, в механизмах которого ведущее значе- имеют ограничения. В общей популяции они в знание имеют аутоиммунные процессы, приводящие к читальной степени теряют свою специфичность. В
нарушению продукции инсулина. В настоящее вре- связи с этим для прогнозирования ИЗСД предлага-
мя известно, что наиболее значимые ассоциации вы- ется стратегия множественных маркеров,
являются с антигенами системы HLA-B8, В15, DR3, Нашими исследованиями было показано, что
DR4 DQB1 [7 9] значения гликированного кератина, определяемые
У детей в возрасте до 6 лет риск развития ИЗСД на всем протяжении длины волос, были повышены
ассоциирован с HLA-антигенами DR3, DR4, В8 [2,10]. заД°ЛГ0 (за ь2 г°Да) до манифестации ИЗСД [5].
Гликированный фибриноген отражает гликемию за
-------------------------------------------- предшествующие 3-4 дня, а значит, отражает состо-
Адрес для переписки: яние углеводного обмена в настоящее время [6]. Для
700060, Узбекистан г.Ташкент, улТулямова, 74 уточнения прогноза ИЗСД мы считали интересным
Институт иммунологии АНРУз, заведующей изучить особенности распределения HLA-антигенов
лабораторией иммуногенетики Рахимовой Д.А. в группе детей, имеющих повышенный риск разви-
Тел.: (99871) 133-59-22, факс (99871) 133-08-55. тия инсулинзависимого сахарного диабета (ИЗСД).
Табл. 1.РАСПРЕДЕЛЕНИЕ Н1А-АНТИГЕН0В В ГРУППЕ ДЕТЕЙ С ПОВЫШЕННЫМ РИСКОМ РАЗВИТИЯ ДИАБЕТА (ПРРД)
НЬА Контроль N=301 ПРРД N=83
А1 22,6 20,6
А2 36,9 41,3
АЗ 19,3 23,8
А9 21,3 11,3
А10 13,3 25,4*
А11 18,3 19,0
А25 0,7 4,8*
А28 7,6 20,6
А29 - 6,3
АЗО 7,6 -
А32 1,7 3,17
АЗЗ - 1,6
Ауу36 1,0 -
Аш43 0,3 -
А-Ыапк 36,9 -
В5 22,9 7,9*
В7 11,9 30,2*
В8 4,7 28,6**
В12 9,3 6,3
В13 15,9 17,5
В14 8,3 6,3
В15 5,3 9,5
В16 4,9 17,5*
В17 10,9 9,5
В18 3,7 9,5
В21 10,3 1,6*
В22 1,3 6,3*
В27 8,9 9,5
В35 27,2 11,1*
В40 10,6 4,8
В41 7,0 6,3
В50 4,0 4,8
В51 2,0 4,8
В53 1,0 -
Вш61 0,3 -
В-Ыалк - -
01 4,7 7,9
02 16,3 6,3*
03 9,6 7,9
04 36,2 9,5*
05 2,3 -
06 2,0 -
Примечание: * - р<0,005; ** - р<0,001.
Материалы и методы
Нами обследовано 83 ребенка в возрасте от 6 до 13 лет с транзиторной гипергликемией или наличием клинических симптомов сахарного диабета (СД) (сухость во рту, жажда, обильное мочеиспускание, похудание). Все больные были обследованы на содержание гликированного гемоглобина НЬА1с, гли-кированного кератина волос (ГКВ), гликированного фибриногена (ГФ), с одновременным проведением глюкозотолерантного теста (ТТГ).
Типирование НЬА-антигенов проводили с помощью стандартного двухступенчатого микролимфоци-то-токсического теста (ТегаэаЫ1978) с использованием кроличьего комплемента. Для типирования НЬА-антигенов использовали сыворотки Санкт-Петербургского НИИ Гематологии и переливания крови. В работе использованы 34, 37 панели. В качестве контрольной группы использовали результаты типирования 301 здорового донора, представленного Институтом иммунологии АНРУз, лабораторией тканевого типирования. Достоверность различий частот НЬА-антигенов в группе больных и здоровых определяли по точному двустороннему тесту Фишера для четырехпольных таблиц. Выраженность ассоциаций НЬА-антигенов в группе больных и здоровых определяли по точному двустороннему тесту Фишера для четырехпольных таблиц. Выраженность ассоциаций НЬА-антигенов с заболеванием определяли по показателю относительного риска (Ш1). Также рассчитывали показатели этиологической (ЕБ) и превентивных (11Р) фракций [3].
Результаты и обсуждение
Распределение НЬА-антигенов в группе детей с повышенным риском развития диабета (ПРРД) представлено в таблице 1.
Как видно из таблицы, у детей с ПРРД в сравнении с контрольной группой отмечается увеличение частоты встречаемости следующих антигенов: по локусу НЬА-А это: А2 (41,3%), АЗ (23,8%), А10 (25,4%), А1 и А28 (20,6%). Достоверная разница в частоте встречаемости установлена для антигенов: А10 (25,4% против 13,3% в контроле, р<0,05); А25 (4,8% против 0,7% в контроле, р<0,05).
По локусу НЬА-В с высокими частотами встречались антигены: В7 (30,2%), В8 (28,6%), В16 и В13 (17,5%), В22 (6,3%), В35 (11,1%). Достоверность в частоте встречаемости установлена для антигенов В7 (30,2% против 11,9% в контроле, р<0,05), В8 (28,6% против 4,7 в контроле), В16 (17,5% против 4,9% в контроле, р<0,05).
Необходимо отметить, что наряду с повышением частоты вышеназванных антигенов имелись такие, которые встречались с пониженной в сравнении с контролем частотой. Это такие антигены как: В5 (7,9% против 22,9% в контроле), В21 (1,6% про-
тив 10,3% в контроле), В35 (11,1% против 27% в контроле). Из числа антигенов НЬА-С\у локуса достоверная разница в частоте встречаемости была установлена для антигенов С\у2 (6,3% против 16,3% в контроле), С\у4 (9,5% против 36,2% в контроле).
Из всех вышеперечисленных ассоциаций истинная связь была установлена для антигенов: НЬА-В8 (Рс<0,0001), В7 (Рс<0,001), С\у4 (Рс<0,0001).
Значимые антигены в группе детей с ПРРД представлены в таблице 2.
Как показано в таблице, степень относительного риска (ЫЫ) довольно высока при наличии в фенотипе НЬА-антигенов В8, А25, В22 и В7. Риск развития заболевания при наличии указанных антигенов в 8, 7, 5, 3 раза выше по сравнению с таковыми, кто не содержит этих антигенов в составе НЬА-фе-нотипа. При наличии в НЬА-фенотипе антигенов В5, В21, С\у2, С\у4, согласно полученным нами данным, риск заболевания незначительный (ИИ соответственно 0,28; 0,14; 0,17; 0,18), что может свидетельствовать о возможном участии этих антигенов с резистентностью к развитию заболевания.
Нами в исследовании были изучены и гаплоти-пы в группе детей с повышенным риском развития диабета. Изучение гаплотипических ассоциаций
показало, что достоверно частыми гаплотипами с положительной величиной Б- (дельта - показатель неравновесного сцепления) явились гаплотипы, представленные на таблице 3.
Как представлено на таблице, гаплотипы А2/В8, А1/В13, А10/В14, А9/В50 встречались достоверно часто. Наибольшая частота гаполтипа (Н) и наибольшее значение показателя неравновесного сцепления (Б) установлены в отношении гаплотипов А2/ В8 и А1/В13. Эти данные говорят о значимости данных гаплотипов в передаче предрасположенности к заболеванию.
Результаты типирования антигенов системы НЬА в группе детей с повышенным риском развития диабета, выделенных на основании метаболических показателей углеводного обмена, свидетельствуют о значительном разнообразии антигенов, ассоциированных с восприимчивостью и/или резистентностью к развитию заболевания. Полученные результаты отражают, вероятно, полиэтиологический характер предиабета. Выявленные в нашем исследовании истинные связи с Н ЬА-антигеном В8 подтверждают данные литературы. Истинная связь с НЬА-антигеном В8, имеющим сильное неравновесное сцепление с генами локуса (БИЗ), указывает на
Табл. 2. ЗНАЧИМЫЕ АНТИГЕНЫ В ГРУППЕ ДЕТЕЙ С ПРРД (N=63)
Н1А Р Рс ЯР ЕР РР
А10 0,0361 Нд 2,1 0,13 -
А25 0,0322 Нд 7,5 0,03 -
В5 0,0056 Нд 0,3 - 0,1
В7 0,0007 Нд 3,2 0,21 -
В8 <0,0001 <0,0001 8,2 0,25 -
В16 0,0016 Нд 4,0 0,14 -
В21 0,0256 Нд 0,1 - 9
В22 0,0332 Нд 5,1 0,05 -
В35 0,0090 Нд 0,3 - 2,3
Сш2 0,0047 Нд 0,2 - 4,0
ОыА 0,00001 <0,001 0,2 - 4,0
Примечание: Р - достоверность различий;
Рс - коррекция значения Р на число исследованных антигенов; ЯН - показатель относительного риска;
ЕЯ - показатель превентивной фракции;
РР - показатель превентивной фракции.
Табл. 3. ЗНАЧЕНИЕ НЕРАВНОВЕСНОГО СЦЕПЛЕНИЯ ДЛЯ ГАПЛОТИПОВ В ГРУППЕ С ПРРД
Гаплотип Н 0 (дельта)
А2-В8 0,0786 0,6424
А1-В13 0,04358 0,0358
А10-В14 0,0230 0,0186
А9-В50 0,0156 0,0143
Примечание: Н - частота гаплотипов: й - показатель неравновесного сцепления.
существенную роль нарушений функций иммуно-компетентных клеток в развитии заболевания, особенно их иммунорегуляторных субпопуляций [7, 9]. Кроме того, известна тесная ассоциация антигена НЬА-В8 с заболеваниями аутоиммунного генеза, для которых характерно значительное снижение функциональной активности Т-лимфоцитов-супрессоров [1, 9]. Ассоциации с антигеном НЬА-В8 были установлены также при обследовании больных инсулинзависимым сахарным диабетом в узбекской популяции [4]. Полученные результаты могут служить в качестве дополнительных иммуногенетических критериев для выявления лиц с высокой степенью риска развития инсулинзависимого сахарного диабета.
Список литературы
1. Авербах М.М,. Мороз А.М., Апт А.С. Иммуногенетика инфекционных заболеваний. - М., 1985.
2. Осокина И.В., Щербачева Л.Н., Лебедев Н.Б. и др. Эндогенная секреция инсулина и ее взаимосвязь с иммуногенетическими маркерами у детей младшего возраста, больных ИЗСД. // Проблемы эндокринологии. - 1995. - № 1. - С. 4-6.
3. Певницкий Л.А. Статистическая оценка ассоциаций НЬА-антигенов с заболеваниями // Вестник АМН. - 1988. - № 7. - с. 48-51.
4. Рахимова Д.А. Наследственная предрасположенность к инсулинзависимому сахарному диабету в узбекской популяции. // Проблемы биологии и медицины. - 1997. - № 3. - С. 84-88.
5. Рахимова Г.Н., Акбаров З.С., Туракулов Я.Х. Определение времени возникновения сахарного диабета по уровню гликированного кератина в волосах // Проблемы эндокринологии. - 1992. - № 3. - С. 21-23.
6. Рахимова Г.Н., Акбаров З.С. Диагностическое значение определения гликированного кератина волос и гликированного фибриногена в диагностике ранних стадий нарушений углеводного обмена у детей и подростков // Журнал теоретической и клинической медицины. - 1999. - № 1. - С. 80-84.
7. Bingley P.J., Bonifacio Е., Gale Е.А.М. Can we ready predict IDDM? // Diabetes. - 1993. - Vol. 42(4).
- P. 213-220.
8. Deschamps I., Boitard C., Hors J. et al. // Diabetologia. - 1992. - Vol. 35, Suppl. 1. - 135A.
9. Pickup J.C., Williams G. Textbook of diabetes. -2-Ed. - London, 1997. - P. 13.1.-13.13.
10. Yamamoto A.M., Deschamps I., Garchon H.J. et al. Young age and HLA markers enhance the risk of Progression to type 1 diabetes in antibody-positive siblings of diabetic children. //J. Autoimmun. - 1998.
- Vol. 11(6). - P. 643-650.
поступила в редакцию 29.10.2002 принята к печати 30.05.2002
