Histological and morphometrical indices of chicken - broilers duodenum by the influence of probiotics, used in different doses Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

УДК619:611:018:619:615.3

Коцюмбас Г.1., д.вет.н., професор © Костинюк А.К., acnipaHT 1Щебентовська О.М., к.вет.н, наук. ствроб1тник Лъв\всъкий нацюналъныйутеерсытет ветерынарногмедыцыны та бютехнологт

iMeni С.З. Гжицъкого 1 Державный науково-дослгдний контрольный гнститут ветеринарных npenapamie та кормовых добавок

Г1СТОЛОГ1ЧН1 ТА МОРФОМЕТРИЧН1 ПОКАЗНИКИ 12-ПАЛ01

КИШКИ КУРЧАТ-БРОЙЛЕР1В ЗА ВПЛИВУ ПРОБЮТИК1В, ЗАСТОСОВАНИХ У Р13НИХ ДОЗАХ

У po6omi представлет ¿iстоструктура та морфометрычт показныкы довжыны ворсынок, глыбыны крыпт i товщыны м'язового шару стшки дванадцятыпалог кышкы курчат - 6pornepie за вплыву ргзных доз пробютыюв. Встановлено, що застосування пробютыюв «Probion» та «Bio» epi3rnx дозах спрыяе збыъшенню довжыны ворсынок i товщыны м'язового шару стшки. Найбыъш eipozidne збыъшення высоты ворсынок i товщыны м 'язового шару встановлено у 12-ты палш кышщ курчат - 6pornepie, яю спожывалы комбжорм з пробютыком «Probion» у do3i 1мг/кг.

Ключов1 слова: пробютычт препараты, курчата-бройлеры, дванадцятыпала кышка, ворсынкы, крыпты мopфoмempiя, гютоструктура,

Вступ. Для потреб птах1вництва шоземними i в1тчизняними ф1рмами винайдено й розробляеться велика кшьюсть пробютичних препарата. Основу ycix цих бюлопчних препарат1в утворюють б1фщо- i лактобактери, яю при своечасному ix заселенш у травну трубку, е симбютами оргашзму ссавщв i птищ з перших дшв життя. Адгезивш властивост1 цих бактерш допомагають затриматись im в пристшковому mapi кишок, що сприяе активному утворенню ними антибютикопод1бних речовин та пригшченню умовно-патогенно! мкрофлори.

Застосування пробютимв при вщгод1вл1 птищ, основу яких складають жив1 молочнокисл! та б1фщобактери, сприяе утворенню захисного шару у слизовш оболонщ кишок та затриманню проникнення токсишв, а це в свою чергу 3ano6irae виникненню захворювань оргашв шлунково - кишкового тракту та веде до пщвищення загально! резистентност1 оргашзму i продуктивное^ тварин. Пробютики не викликають звикання та не мають негативно! дп на оргашзм, але стимулюють захисш сили оргашзму [1,2,3,4].

Ентероцити слизово! оболонки дванадцятипало! кишки забезпечують всмоктування, залозист1 структури - видшенню травних секреив, а м'язова оболонка пересування вм1стимого в наступш вщдши кишок. Процеси всмоктування, секреци електролтв води залежать вщ скоординованост1

© Коцюмбас Г.1., Костинюк А.К., Щебентовська О.М., 2012

74

процеав прол1ферацп та диференщаци ентероцит1в. Кл1тини, що розмщуються в основ! крипт мають високу прол1феративну актившсть, але не несуть ознак диференщаци, тобто ще не здатш до всмоктування. При перемщенш з дна крипт на поверхню слизово! оболонки, ештел1альш кл1тини диференцшться та набувають повноцшно! здатност1 до всмоктування. Отже, виршальним фактором у процеа всмоктування е стан диференщаци ентероципв [5].

Тому важливим е визначення дози рекомендованого пробютика, який сприяв би оптим1заци процешв травления, покращенню трофжи ентероцит1в, нормал1заци моторики кишечника, позитивно впливав би на загальний стан та обмшш процеси в оргашзмг

Метою 1 завданням дослщжень було вивчити вплив сухого пробютика «РгоЬюп» (виробник Корея) у доз1 0,5 мг/кг та 1 мг/кг корму 1 пробютика «Вю» (виробник Имеччина) у доз1 0,4 мг/кг корму на пстоструктуру та морфометричш показники 12-ти пало! кишки

Матер1ал 1 методи дослщження. Дослщ проводили на курчатах-бройлерах породи «КоЬЬ-500» в умовах виробництва на ф1рм1 „Его". Було сформовано чотири групи курчат-бройлер1в, масою тша 37-40 г, по 300 гол1в у кожнш. Курчатам I, II I III груп згодовували збалансований за кормовими одиницями корм з пробютиком. I група - комбшорм +«РгоЬюп» в доз1 1 мг/кг корму, II група - комбшорм + «РгоЫоп» в доз1 0,5 мг/ кг корм 1 III група комбжорм + пробник «Вю» в доз1 0,4 мг/ кг корму. Птищ контрольно! групи (IV) згодовували комбжорм без пробютика. Курчатам ус1х дослщних груп випоювали воду. На 43 добу дослщу по 10 курчат з кожно! групи зважували, забивали, вщбирали кров, проводили патологоанатом1чний розтин I вщбирали шматочки дванадцятипало! кишки, яю фжсували в 10 % нейтральному формалЫ, з наступною заливкою у парафш згщно методики. Зр1зи виготовлялись на мкротом1 МС-2, товщиною у 6 мжрон. Препарати фарбували гематоксилшом та еозином, Ван-Лзон[6]. Мткроскошю та фотографування проводили за допомогою мжроскопа ОЫМРиБ СХ-41 . Вираховували довжину ворсинок, глибину крипт, товщину м'язово! оболонки. Отриманий матер1ал обробляли методом вар1ацшно! статистики. Достов1ршсть р1знищ м1ж трупами встановлювали за критер1ем Стьюдента.

Результати дослщжень. При пстоморфометричному дослщженш стшки 12-пало! кишки у процеЫ росту I розвитку курчат встановлено. що в уЫх дослщних групах найбшьшо! довжини ворсинки слизово! оболонки кишки досягали на 15 добу. Так, на 15 добу досл1ду вже вщзначалась корелящя довжини ворсинок I глибини крипт у дослщних групах. У цей перюд, у курчат I групи довжина ворсинок становила 1676 мкм, що на 225 мкм бщьше, шж у курчат ГУ (контрольно!) групи. При цьому у курчат II I III груп спостеркали под1бну динамку. Довжина ворсинок дванадцятипало! кишки курчат II I III груп достов1рно збшьшувалось вщповщно на 330 мкм (р<0,001) I 73 мкм у пор1вняно з контрольною групою. Глибина крипт дванадцятипало! кишки I групи курей-бройлер1в на 15 добу дослщу становила 221,2 мкм, що на 43 мкм бщьше, шж у контрольнш груш. У курчат-бройлер1в IIIIII груп глибина також

75

збшьшувалась, вщповщно, на 28,2 \ 1,66 мкм. Стввщношення довжини ворсинок до глибини крипт становила е у I грут -1: 0,132; II груш - 1 : 0,11; III груш - 1 : 0,12; ГУ груш - 1 : 0,12 (табл.1)

Таблиця 1

Пстоморфометричш показники дванадцятипало¥ кишки __на 15 добу дослщу __

Показники 1групи 2 групи 3 групи 4 групи

Довжина ворсинок,мкм 1676±31,3 1781±39,0*** 1524±28,0*** 1451±28,2

Глибина крипт, мкм 221±6,5* 206±3,0 179±4,7 178±3,8

Сп1вв1дношення ДВ/ГК 1 : 0,13 1 : 0,11 1 : 0,11 1 : 0,12

** - р< 0,001 у пор1внянш з контролем

* - р< 0,05 у пор1внянш з контролем

На 30 добу згодовування корм1в з пробютиком у 12-ти палш кишщ курчат-бройлер1в ус1х дослщних труп вщзначали, у пор1внянш, з 15 добою, незначне зменшення довжини ворсинок . Пор1внюючи у цей перюд довжину ворсинок слизово1 оболонки 12-пало! кишки з контрольною групою, слщ вщзначити, що у I груш птищ дослщжуваш показники були найвищими { сягала 1321 мкм, а в курчат II групи 1231 мкм. Довжина ворсинок I {II труп зростала на 280 мкм та на 190 мкм вщповщно. Стввщношення довжини ворсинок до глибини крипт також дещо змшювались \ становили у I груш 1: 0,11; у II груш - 1 :0,12; III грут - 1 : 0,14; ГУ грут - 1 : 0,11 (табл.2).

Таблиця 2

Пстоморфометричш показники дванадцятипало*1 кишки _ на 30 добу дослщу __

Показники 1групи 2 групи 3 групи 4 групи

Довжина ворсинок,мкм 1321±22,9*** 1231±33 1036±25,9 1041±21,3

Глибина крипт, мкм 145±2,4* 155±3,1 148±3,3 120±2,3

Стввщношення 1 : 0,11 1 : 0,12 1 : 0,14 1 : 0,11

*** - р< 0,001 у пор1внянш з контролем

* - р< 0,05 у пор1внянн1 з контролем За свплооптичного досл1дження дванадцятипало! кишки дослщних груп на 43 добу дослщу в1дзначалась р1зниця у структурнш перебудов1 трубчастого органа. В ус1х досл1дних групах ворсинки довг1, листовидно! форми, добре структурован1, щ1льно прилягали одна до одно!. Пор1внюючи слизовий, п1дслизовий I серозний шари кишечника дослщних курчат з контрольною групою, виразно виступае у I та II групах ч1тке паралельне, дещо ущ1льнене розм1щення ворсинок слизово! оболонки, тод1 як в контрольнш I ГУ групах ворсинки були меншими I розм1щувались не так густо (рис.1, рис.2, рис.3, рис.4). Ворсинки ч1тко контуроваш, вкрит1 цил1ндричним еп1тел1ем. У процес1 збшьшення висоти ворсинок, зростала к1льк1сть стовпчастих еп!тел1оцит1в, кишкових ендокриноцит1в та келехопод1бних кл1тин. Адже активний процес травления I всмоктування в1дбуваеться власне стовпчастими кл1тинами.

76

Рис. 1. Ворсинки СЛИ30В01 оболонки 12-иало1 кишки контрольно!* групи. Ван-Пзон. Ок. 10, об. 10

Рис.2. Ворсинки слизово1 оболонки 12-пало1 кишки курчат I групи. Ван-Г1зон. Гематоксилш та еозин. Ок. 10, об. 10

Рис. 3. Ворсинки СЛИ30В01 оболонки 12-пало1 кишки курчат II групи Ван-Лзон. Ок. 10, об. 10._

Рис. 4. Ворсинки слизово1 оболонки 12-пало1 кишки III групи. Ван-Пзон. Ок. 10, об. 10

В иявлена гютоструктурна перебудова травноТ трубки кишечника була пщтверджена морфометричними показниками. В1рог1дне зб1льшення довжини ворсинок \ глибини крипт вщзначали у I \ II дослщних трупах на 43 добу, проте найвищими показники цих структур були у I досл1дн1й груп1 курчат, яким згодовували з кормом 1 г/кг пробютика «РгоЫоп» У першш груп1 висота ворсинок становила 1553 мкм., у II груп1 - 1493 мкм., а в III груш - 1355, а в контрольны 1370 мкм. Разом з тим у I \ II дослщних групах в1дзначали в1рог1дне потовщення м'язового шару дванадцятипалоТ кишки. Товщина м'язового шару зростала у I груш на 492 мкм., а в II груш на 310 мкм., а у III груш на 26 мкм. (табл. 3)

77

Таблиця 3

Гктоморфометричш показники дванадцятипало1 кишки та м'язового _ шару на 43 добу дослщу__

Показники 1 групи 2 групи 3 групи 4 групи

Довжина ворсинок,мкм 1553±44,4** 1496±26,1* 1355±21,4 1370±31,9

Глибина крипт, мкм 137±3,2** 130±3,1* 124±2,0 101±2,2

Сп1вв1дношення ДВ/ГК 1 : 0,09 1 : 0,08 1 : 0,09 1 : 0,07

Товщина м'язового шару, мкм (M± m ) 1002,5 ±60,75 820,5 ± 30,5 536,3 ±36,82 510,25 ±31,44

** - р< 0,01 у пор1внянш з контролем

* - р< 0,05 у пор1внянш з контролем Як видно з таблиц! № 3, та на рис.6, 7 найбшьше потовщення м'язового шару 12 палоТ кишки вщзначаеться у курчат-бройлер1в I \ II дослщних груп, що сприяло покращенню та нормал1защ1 моторики кишечноТ трубки. При фарбуванш поперечного зр1зу ст1нки за Ван-Пзон, добре проглядаеться товстий, жовто-коричнево забарвлений циркулярний шар м'язовоТ оболонки. Найб1льш виражена г1пертроф1я гладких м'яз1в в1дзначаеться саме цього шару, що ймов1рно, зумовлено посиленням моторно - евакуаторноТ д1яльност1 кишок (рис.5, рис. 6, рис. 7).

Рис. 5. Серозиий, м'язовий, Рис. 6. Серозний, м'язовий, и1дслизовий i слизовий шар12-пало*1 и1дслизовий i слизовий шар12-кишки курчат контрольно! груии иало1 кишки курчат I групи Ваи-Ван-Лзон. Ок. 10, об. 10._ Пзон. Ок. 10, об. 10._

Адже, завдяки скороченням м'язовоТ оболонки здшснюються активн1 перистальтичн1 рухи, що сприяе перем1шування xiMycy та евакуац1я вм1стимого по травн1й трубщ. У III rpyni курчат, яю споживали проб1отик «Bio» у доз1 0,4 мг/кг товщина ст1нка м'язового шару залишалась майже на pißHi контрольноТ групи, проте спостер1галось потовщення серозноТ оболонки (рис. 5, рис.8).

78

1

1

г

Я

? ■ 4

-Г. "

.аДКдЯВЯИЯР

щ

ж

I I

Рис. 7. Серозний, м'язовий, пщслизовий i слизовий шар12-иало1 кишки курчат II групи. Ван-Пзон. Ок. 10, об. 10_

Рис. 8. Серозний, м'язовий, пщслизовий i слизовий шар12-пало1 кишки курчат III групи. Ван-Пзон. Ок. 10, об. 10

Отже, проведеними гютолопчними та морфометричними дослщженнями стшки 12-ти палоТ кишки встановлено, що у курчат-бройлер1в, яким згодовували з кормом пробютик «Probion» в доз1 1 мг/кг i 0,5 мг/ кг корму вщзначаеться найбшьш в1рогщне збшьшення довжини ворсинок слизовоТ оболонки i товщини ст1нки м'язового шару, що вказуе на активний процес травления, всмоктування та бшьшу рухову активнють кишечноТ трубки птищ.

Лггература

1. Бондаренко В.М., Чупринина Р.П. Воробьева М.А., Механизм действия пробиотических препаратов. БИОпрепарати.2003.№3.С.2-5.

2. Калачнюк Г.1., Пробютики у тваринництвь // Тваринництво УкраТни.-

1996.

.-№5.-С. 16-18.

3. Бойко Н.В., Компенсаторна мкрофлора слизових оболонок в процесах модулящТ профшактичних та ¡мунних властивостей оргашзму. «Ветеринарна бютехнолог1я» Бюлетень. Матер1али м1жнародно1 науково-практичноТ конференци. КиТв. 2008. №13(том 2). Г89 С.7-22.

4. Тибшка A.M., «Сумарна кшькють кишкових ворсинок у курей з р1зним типом автономного тонусу». Науковий вюник ЛНУВМ та БТ iM. С.З.Гжицьгого. 2011. Том 13№4 (50) частина 2. С. 230-234.

5. Автандилов Г.Г.Медицинская морфометр1я.-М.:Медицина,1990.-384с.

6. Меркулов Г.А., Курс патогистологической техники. - Л.: Изд. мед. литературы, 1961. - 339с

79

Summary

Kotsiumbas G.I., Kostynjuk A.K., Shchebentovska O.M. Lviv national university of veterinary medicine and biotechnologies named

after S.Z.Grhytskyi.

State research control institute of veterinary preparation and fodder adolitive.

HISTOLOGICAL AND MORPHOMETRICAL INDICES OF CHICKEN -BROILERS DUODENUM BY THE INFLUENCE OF PROBIOTICS, USED IN

DIFFERENT DOSES This work deals with histostructure and histomorphometrical indices of hair length, crypt depth and muscle layer thickness, the wall of chickens-broilers duodenum by the influence of different doses ofprobiotics.

If was determined that using probiotics "Probion'' and "Bio'' in different doses favour veritable rising of hair length, the thickness of muscle layer wall, that indicates the active process of digestion, absorbion and improvement and normalization of poultry intestine tube digestion.

Key words: probiotical preparations, duodenum, histomorphometria, histostructuve.

Рецензент - д.вет.н., професор Урбанович П.П.

80