Химиотерапия Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

ХИМИОТЕРАПИЯ

Н. В. Андронова1, Е. М. Трещалина1, А. Л. Николаев2, Д. В. Филоненко2, А. В. Гопин2,

О. Л. Калия3, Г. Н. Ворожцов3

СОЧЕТАНИЕ ЛОКАЛЬНОЙ УЛЬТРАЗВУКОВОЙ ГИПЕРТЕРМИИ И ХИМИОТЕРАПИИ (ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ)

Ультразвуковая гипертермия (УЗ-ГТ) используется для лечения рака предстательной железы. Нами разрабатывается сонодинамическая ультразвуковая гипертермотерапия, которая заключается в сочетании УЗ-ГТ с различными противоопухолевыми цитостатиками.

Материалы и методы. УЗ-ГТ индуцировали с помощью модифицированной для мышей установки УСДТ-м. Параметры: 1-й облучатель 1,0 Вт/см2 с частотой 0,88 МГц; 2-й облучатель 2,0 Вт/см2 с частотой 2,64 МГц. Время воздействия 10 мин под контролем термометрии. Опыты проведены на в/м перевитой меланоме В16 мышей при температуре контактной среды (КС, вода) 40±0,2 °С. Использованы развившиеся опухоли среднего объема Уср = 0,8-1,2 см3. Противоопухолевый препарат гемзар вводили мышам за 15 мин до УЗ-ГТ однократно внутривенно в дозе 200 мг/кг. О терапевтическом успехе комбинации судили по коэффициенту усиления противоопухолевого эффекта (К),

рассчитаНН°му П° формуёе К = Tопыта/Tконтроля, где Т —

1 ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва 2 МГУ им. М. В. Ломоносова, Москва

3 ФГУП ГНЦ НИОПИК, Москва

время удвоения Уср опухоли. Отсроченный эффект оценивали по продолжительности жизни мышей, рассчитывая Т/С (%).

Результаты. Показано, что при температуре КС=40 °С в течение первых 5 мин в опухоли индуцировалась ГТ=44-45 °С, в течение последующих 5 мин температура оставалась стабильной. Эффективность одной УЗ-ГТ описывается как К=2,4, Т/С=116 %. Один гемзар был неактивен на развившейся опухоли. Эффективность сонодинамической УЗ-ГТ при введении гемзара описывается как К=4,8, Т/С=145 %, побочные эффекты — местновоспалительная реакция на локальное УЗ-воздействие.

Выводы. Использование УЗ-ГТ в онкологии имеет перспективы не только в монорежиме, ноив комбинации с противоопухолевыми препаратами. Сочетание УЗ-ГТ с цитостатиком (на примере гемзара) дает усиление противоопухолевого действия в 2 раза как в отношении первичного узла, так и по продолжительности жизни без усиления токсичности.

Г. Н. Апрышко1, Н. П. Ермакова1, А. М. Козлов1, Н. А. Лесная1, В. А. Исаев2

ИЗУЧЕНИЕ АНТИКАНЦЕРОГЕННОЙ И ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТИ ПИЩЕВОГО ПРОДУКТА "ЭЙКОНОЛ"

Задача исследования — оценить антиканцерогенную и противоопухолевую активность получаемого из тканей рыб пищевого масла «Эйконол», содержащего не менее 12 % эйкозапентаеновой и столько же докоза-гексаеновой кислот и следовые количества жирорастворимых витаминов.

Материалы и методы. Антиканцерогенный эффект оценивали в опытах по индукции у крыс опухолей молочных желез внутривенными введениями 4-

1 ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва 2 НПП «Тринита», Москва

кратно с недельным перерывом 2 мг диметил-бенз(б)антрацена. Эйконол добавляли в корм в количестве 10 или 20 % начиная за 15 дней до 1-го введения канцерогена и до конца наблюдения, которое составляло 8 мес. после начала индукции опухолей. При оценке лечебного эффекта эйконол начинали добавлять в корм после появления у крыс опухолей объемом около 2500 мм3. Противоопухолевое действие эйконола на перевиваемые опухоли оценивали на мышах с адено-

карциномой молочной железы Са755, аденокарциномой толстой кишки АКАТОЛ, раком легкого Льюис и РЛ67, саркомой 37, меланомой В16, добавляя его в корм либо вводя в желудок через зонд в дозах

0,05-1,0 мл на мышь. Противоопухолевый эффект оценивали по стандартной методике.

Результаты. Выявлена способность эйконола увеличивать латентный период возникновения индуцированных опухолей и уменьшать среднее количество опухолей, развившихся у одной крысы. Имели место единичные случаи кратковременной (3-4 нед.) стабилизации и регрессии индуцированных опухолей, чего не наблюдалось в контрольной группе. Более выраженным было влияние на продолжительность жизни крыс с индуцированными опухолями: из крыс, получавших с кормом 10 и 20 % эйконола, более 7 мес. прожили 75 и 62 % соответственно, из контрольных — только 12,5 %. Наблюдали антика-

хектическое действие эйконола на крыс с индуцированными опухолями. У мышей с опухолью АКАТОЛ эйконол увеличивал продолжительность жизни на

41 % ив небольшой степени (до 58 %) кратковременно тормозил рост опухоли, значительно (до 96 %), но кратковременно (примерно в течение 8 дней) тормозил рост аденокарциномы Са755. В небольшой степени (до 37 %) эйконол ингибировал метастазиро-вание рака легкого Льюис на фоне хирургического удаления первичного опухолевого узла. На меланому В16, саркому 37 и рак легкого РЛ67 эйконол значимого действия не оказывал. Токсического действия эйконола не наблюдали.

Выводы. Результаты данного исследования свидетельствуют о способности омега-3 полиненасыщен-ных жирных кислот и содержащих их продуктов ингибировать возникновение и рост экспериментальных опухолей.

Г. Н. Апрышко1, В. В. Решетникова1, Д. А. Филимонов2, А. А. Лагунин2, В. В. Поройков2

КОМПЬЮТЕРНОЕ ПРОГНОЗИРОВАНИЕ МЕХАНИЗМОВ ДЕЙСТВИЯ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ПРЕПАРАТОВ

1 ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва 2 ГУ НИИ БМХ им. В. Н. Ореховича РАМН, Москва

Современное направление разработки новых противоопухолевых лекарств — поиск таргетных препаратов, взаимодействующих с молекулярно-биологическими процессами и мишенями, специфическими для злокачественных клеток, одной из возможностей ускорения которого является компьютерное прогнозирование специфических биохимических механизмов действия по структурной формуле вещества.

Задача исследования — провести компьютерный прогноз ряда биохимических механизмов действия для низкомолекулярных противоопухолевых веществ по их структурной формуле.

Материалы и методы. Прогноз проводили для веществ, структурные формулы которых извлекали из корпоративной базы данных РОНЦ по противоопухолевым агентам формата MDL, с помощью разработанной в НИИ БМХ программы PASS, прогнозирующей для новых веществ со средней точностью 85 % одновременно около 1000 разных фармакологических эффектов и механизмов биологической активности, в т. ч. взаимодействие с известными молекулярными мишенями для противоопухолевых агентов. Для формирования комплекса прогнозируемых механизмов действия проводили системный анализ современного состояния молекулярной биологии злокачественного роста, возможностей и ограничений программы PASS.

Результаты. В комплекс прогнозируемых механизмов действия включены как классические для противоопухолевых веществ (алкилирующий, анти-метаболитный, антимитотический, интеркалирую-щий ДНК) механизмы, для которых число молекул в обучающем массиве PASS составляет по несколько сотен, а ошибка прогноза — около 10-15 %, так и биохимические механизмы и молекулярные мишени, для которых или содержание молекул в обучающем массиве относительно невелико (десятки веществ), или ошибка прогноза около 20 % (ингибитор ангиогенеза, антагонист факторов роста, агонист или антагонист гормонов, агонист или индуктор интерферона, ингибиторы рецепторов разных типов, ферментов сигнальной трансдукции, метаболизма нуклеотидов). Проанализированы связи между прогнозируемыми механизмами действия, определенной экспериментальным путем цитотоксичностью in vitro и спектром противоопухолевой активности in vivo для веществ разных химических классов.

Выводы. Апробированная методика может использоваться на этапе доэкспериментального (in silico) скрининга низкомолекулярных противоопухолевых агентов и для оптимизации схем экспериментального изучения новых веществ.

Д. Ю. Блохин

ПРИЧИНЫ ОГРАНИЧЕННОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ ТЕРАПИИ С ПОЗИЦИИ КЛЕТОЧНОЙ БИОЛОГИИ

Несмотря на расширяющийся арсенал противоопухолевых лекарственных средств, современное состояние консервативных методов лечения злокачественных опухолей далеко от совершенства. Наиболее серьезным препятствием к повышению эффективности специфической терапии опухолей по-прежнему остается фенотип множественной лекарственной устойчивости (МЛУ) опухолевых клеток, причем не только формирующийся в процессе предшествующего лечения онкологических больных, но и возникающий в ряде случаев спонтанно, в результате индивидуальных особенностей опухолевой прогрессии у больных, ранее не получавших противоопухолевой терапии.

Традиционно фенотип МЛУ связывают с гиперэкспрессией или гиперфункцией трансмембранных белков-переносчиков (АВС-транспортеры Pgp, MRP и BCRP), активно выбрасывающих из клеток-мишеней проникшие в них извне ксенобиотики, а также цитозольные белки LRP/MVP, секвестрирующие внутриклеточное распределение цитотоксинов. Показана стресс-индуцируемая природа гиперэкспрессии АВС-транспортеров.

Современная концепция механизмов цитотоксичности противоопухолевой терапии отводит центральную роль в ее суммарном эффекте феномену активации программы гибели клеток. Обратимое или необра-

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

тимое подавление программы гибели (супрессия про-и/или активация антиапоптогенных сигналов) ведет к формированию фенотипа МЛУ, а восстановление status quo (например, средствами генной терапии) повышает чувствительность клеток к противоопухолевым воздействиям.

Утрата отдельной клеткой в процессе опухолевой прогрессии программы собственной гибели сопровождается появлением мультирезистентного клона, клетки которого не способны к самоликвидации даже при наличии у них генетических повреждений, что может являться одной из причин формирования клеточного полиморфизма опухолей, в т. ч. анеуплоидии. Клетки с необратимо утраченной программой гибели перестают быть мишенями для средств противоопухолевой терапии. Такая ситуация — закономерное следствие применяющейся до настоящего времени системы отбора in vitro противоопухолевых средств: химические соединения, выбранные в качестве эффективных индукторов/активаторов программы клеточной гибели, оказываются малоактивными при ее репрессии.

Противоопухолевые средства с принципиально иными видами специфической активности могут быть найдены при использовании для скрининга in vitro клеточных культур с устойчиво репрессированной или полностью утраченной программой гибели клеток.

Л. 3. Болиева1, А. В. Сергеев2, Ф. К. Джиоев1

ВОЗМОЖНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ ПРЕПАРАТОВ С АНТИКАНЦЕРОГЕННОЙ АКТИВНОСТЬЮ В ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНЫХ ФИБРОАДЕНОМАТОЗОМ (ФАМ) МОЛОЧНЫХ

ЖЕЛЕЗ

1 Северо-Осетинская государственная медицинская академия, Владикавказ

2 ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

В последние годы активно развивается новое профилактическое направление — химиопрофилактика рака, которое предполагает использование биологически активных веществ, способных ингибировать процесс канцерогенеза на стадиях инициации и/или промоции. В многочисленных экспериментальных и эпидемиоло-

гических исследованиях показан превентивный эффект применения витаминов Е, С, бета-каротина, селена в отношении злокачественных новообразований разной локализации. Профилактическое действие данных микро-нутриентов связывают, прежде всего, с их антиокси-дантной активностью. Препарат Солодка разработан на

основе лиофилизированного экстракта из корня солодки голой и, по данным литературы, обладает антитоксическими, антиэстрогенными, противовоспалительными, антиканцерогенными свойствами.

Цель работы — изучить клиническую эффективность медикаментозного комплекса препаратов, обладающих антиканцерогенной активностью, у больных ФАМ.

Материалы и методы. В исследование было включено 130 больных ФАМ. Они были разделены на

2 возрастные группы: в первую вошли 32 женщины активного репродуктивного возраста (18-35 лет), во вторую — 98 женщин позднего репродуктивного возраста (36-45 лет). Пациентки принимали Каскатол (комплексный препарат, содержащий бета-каротин, витамины Е, С) по 3 драже в день, Неоселен — в дозе, эквивалентной 50 мкг селена в сутки, Солодку — по 4 драже в день непрерывно в течение 3 мес., ЭДАС-927 — по 5-7 гранул 3 раза в день в течение месяца. Эффективность медикаментозного комплекса оценивали по клинической и эхографической динамике па-

тологических изменений в молочных железах через 3 мес. после начала лечения.

Результаты. В результате проведенного лечения уменьшение субъективных проявлений мастопатии, таких как масталгия, синдром предменструального напряжения, отмечали 29 (90,6 %) женщин 1-й группы и 86 (87,8 %) — 2-й группы. По данным пальпаторного обследования, объективные признаки ФАМ уменьшились у 78,1 % больных 1-й группы и у 75,5 % пациенток 2-й группы. По данным эхографии, через 3 мес. приема препаратов положительные результаты были отмечены в 1-й группе у 78,1 %, во 2-й — у 74,5 % больных. Побочных эффектов проводимой терапии не выявлено.

Выводы. Эффективность комплексного применения Каскатола, селенита натрия и Солодки сопоставима с эффективностью используемых в настоящее время схем негормонального лечения ФАМ. Ввиду наличия у препаратов антиканцерогенной активности представляется перспективным их использование в терапии больных ФАМ с целью снижения риска развития рака молочной железы.

И. C. Бypeнин, Н. И. Полянская, З. В. Кузьмина

ИЗУЧЕНИЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТИ СОЕДИНЕНИЙ, ПОЛУЧЕННЫХ ИЗ МИЦЕЛИАЛЬНЫХ ГРИБОВ И ОБЛАДАЮЩИХ ВЫРАЖЕННЫМИ АНТИОКСИДАНТНЫМ СВОЙСТВАМИ

ГУ POHЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

В последние годы в медицине все шире используются соединения, обладающие высокой антиоксидант-ной активностью. В этом отношении особый интерес вызывают каротиноиды грибов, которые, благодаря наличию системы сопряженных двойных связей, являются мощными природными антиоксидантами и находят применение для лечения сердечно-сосудистых, глазных онкологических заболеваний. Исторически сложилось так, что первоначально как природный антиоксидант из каротиноидов использовали каротин, который научились получать биотехнологическим методом из грибов. А в конце 20-го столетия начались исследования по использованию в медицине другого ка-ротиноида — ликопина как средства, задерживающего развитие рака простаты.

Изучали противоопухолевый эффект субстанции ликопина, полученного в Институте микробиологии РАН на модели рака предстательной железы. Исследования проводили на крысах-самцах линии ACI с перевитой опухолью предстательной железы, полученной

из индуцированных новообразований. Крыс принудительно кормили суспензией ликопина в масле в дозе

0,1, 0,2 и 2,5 мг/кг. Крысы контрольной группы получали 0,2 мл растительного масла. Кормление начинали на следующий день после перевивки 1 раз в сутки в течение 30 дней.

Показано, что наибольший противоопухолевый эффект получен у животных, которым давали ликопин в дозе 2,5 мг/кг. Процент торможения роста опухоли (ТРО) в этой группе составил 62 %, а при кормлении в дозе 0,1 и 0,2 мг/кг ТРО составил 17 и 23 % соответственно.

Таким образом, полученные данные о противоопухолевом действии ликопинов открывают новые возможности изучения приоритетных схем новых каротиноидов типа ликопина для лечения гормонозависимых опухолей. В дальнейшем требуется отработка доз и режима введения ликопинов, разработка лекарственной формы, удобной для лечения, и совершенствование схем полиэндокринотерапии.

А. А. Вайнсон, В. В. Мещерикова, Н. Н. Касаткина

ОЦЕНКА РАДИОМОДИФИЦИРУЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ АРГЛАБИНА НА МОДЕЛИ ПЕРЕВИВНЫХ ОПУХОЛЕЙ И НОРМАЛЬНЫХ ТКАНЕЙ МЫШЕЙ

Арглабин — гидрохлорид диметиларглабина, лак-тона, выделенного в Институте фитохимии Казахстана из полыни гладкой. Он предложен в качестве противоопухолевого препарата и агента, усиливающего эффект лучевой терапии. В связи с испытанием препарата при лучевой терапии онкологических больных в РОНЦ РАМН возникла необходимость предварительного изучения его радиомодифицирующего действия в отношении перевивных опухолей и нормальных тканей мышей.

Эксперименты проведены на карциноме Эрлиха и меланоме В16, привитых в мышцу голени мышей; моделью нормальных тканей служила кожа стопы белых мышей Ва1Ь. Опухоли и концы лапок подвергали локальному облучению на терапевтической гамма-установке АГАТ, которая была снабжена стендом с коллиматорами, полностью защищавшими от облучения тело животного. Мощность дозы облучения при проведении экспериментов оставляла 1,66-1,64 Гр/мин.

Арглабин вводили внутрибрюшинно в физиологическом растворе в дозе 10 мг/кг за 30 мин до начала облучения, которое проводили в дозах 20 и 25 Гр. Критерием эффективности лучевого воздействия на опухоли служила динамика изменения объема голени, измеряе-

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

мого в течение месяца после воздействия, и динамика нарастания и спада лучевых реакций кожи, оцениваемая в течение 40 дней по общепринятой шкале.

После облучения солидной карциномы Эрлиха на фоне введения арглабина регрессия опухолей усиливалась, а их рост возобновлялся позднее. Динамика регрессии практически совпадала у животных, опухоли которых были облучены в дозе 25 Гр без препарата и в дозе 20 Гр на фоне введения арглабина. Это позволяет оценить радиосенсибилизирующий эффект арглабина в отношении опухоли как равный «1,25. Для меланомы В16 также получено увеличение степени лучевой регрессии в 1,2-1,3 раза. При изучении модифицирующего действия арглабина на лучевые реакции кожи установлено, что динамика и выраженность лучевых реакций при облучении в дозе как 20, так и 25 Гр были практически идентичны в контроле и группах с предварительным введением арглабина, что указывает на отсутствие его сенсибилизирующего действия в отношении кожи.

Таким образом, арглабин может рассматриваться как препарат, обладающий радиосенсибилизирующим действием для опухолей и не усиливающий лучевые реакции нормальных тканей.

В. В. Валъский

ПЕРВЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ПРИМЕНЕНИЯ МАЛЫХ ДОЗ 5-ФТОРУРАЦИЛА В КОМБИНИРОВАННОМ ЛЕЧЕНИИ УВЕАЛЬНЫХ МЕЛАНОМ

НИИ глазных болезней им. Гельмгольца, Москва

Локальное контактное облучение (брахитерапия) увеальной меланомы, как показывают многочисленные наблюдения, характеризуется более благоприятным прогнозом для жизни — 5-летний период переживают более 88 % леченых больных, в то время как после энуклеации этот показатель составляет 70-77,5 %. Считается, что брахитерапия показана при толщине опухоли до 6,5 мм, а при юкстапапиллярной локализации — до 3 мм. Учитывая вышесказанное, актуальным является поиск путей повышения эффективности

и расширение показаний для органосохранного лечения меланом хориоидеи.

Материал и методы. Комбинированное лечение получали 30 больных меланомой хориоидеи в возрасте от 17 до 72 лет, из них у 19 больных (1-я группа) опухоль располагалась юкста- и парапапиллярно. Средняя проминенция новообразования в 1-й группе составила 5,2 мм (от 1,6 до 7,3 мм) и 7,5 мм (от 1,5 до 10 мм) — во 2-й группе. Брахитерапию проводили по стандартной методике, расчетная доза на верхушке

опухоли составляла 90-140 Гр. 125 мг 5-фторурацила в 250 мл физиологического раствора вводили внутривенно в течение часа. Сроки введения: 2 дня до начала облучения, на протяжении всех дней облучения и 2 дня после окончания брахитерапии. Суммарная доза 5-фторурацила составила от 1,125 до 2,125 г.

Результаты. Срок наблюдения за леченными больными составил от 3 до 12 мес. Проанализированы результаты, полученные через 3 мес. после окончания комбинированной терапии. Уменьшение про-

миненции меланомы получено у всех больных. В 1-й группе толщина опухоли сократилась в среднем на 53 % (от 15 до 78 %), во 2-й группе — в среднем на 38 % (от 5 до 66 %). Осложнений на введение 5-фторурацила не было.

Выводы. Полученные результаты использования малых доз 5-фторурацила в комбинации с брахитера-пией позволяют расширить показания для органосохранного лечения увеальной меланомы, в т. ч. при юк-стапапиллярной локализации опухоли.

С. М. Галачиев1, Ф. К. Джиоев1, А. В. Сергеев2

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ СЕЛЕНИТА НАТРИЯ И ОКИСИ ЦИНКА ДЛЯ СНИЖЕНИЯ ТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ СВИНЦА

1 Северо-осетинская государственная медицинская академия, Владивосток

2 ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

Задачи исследования. Свинец (СВ) попадает в окружающую среду, главным образом, при бытовом и промышленном сжигании газа, мазута, нефти, бензина, угля. Это привело к превращению свинцового отравления из области профессиональных заболеваний в разряд экопатологий. СВ включен в список загрязняющих веществ ВОЗ и ЮНЕП как токсический металл

1-го класса опасности.

Целью настоящей работы явилось экспериментальное изучение возможности фармакологической коррекции токсического действия СВ эссенциальными микроэлементами — селеном и цинком.

Материалы и методы. Работа проводилась на 140 крысах-самцах линии Вистар. Животные были разделены на 4 группы. 1-я группа — контрольная. Крысы

2-й группы получали ежедневно с кормом 30 мг/кг ацетата свинца (АСВ); 3-я группа, кроме АСВ, получала 2 раза в неделю 0,4 мг/кг селенита натрия (СН); 4-я группа получала АСВ и 2 раза в неделю 5 мг/кг окиси цинка (ОЦ). Продолжительность эксперимента составила 12 мес. Содержание малонового диальдегида (МДА) и активность ферментов ПОЛ в сыворотке крови определяли по общепринятым методам. Содержа-

ние СВ в тканях определяли на масс-спектрометре.

Результаты. Включение СН и ОЦ в рацион крыс на фоне хронической свинцовой интоксикации снижало общетоксическое действие СВ, что проявлялось в повышении показателей выживаемости, прироста массы тела животных, ослаблении тяжести анемии, снижении концентрации МДА и повышении активности супероксиддисмутазы и глутатионпероксидазы, повышении концентрации тиоловых групп и снижении концентрации СВ в тканях печени и костях. В контроле до конца эксперимента дожили 85 % животных, во 2, 3 и 4-й группах — 42,5, 67,5 и 55,0 % соответственно. В контроле масса тела животных за 12 мес. увеличилась на 102 %, а у крыс 2, 3 и 4-й групп — на 56,9, 76,8 и 68,6 % соответственно. Через 12 мес. содержание гемоглобина и эритроцитов у крыс 2-й группы снизилось на 41,6 и 39,6 % по сравнению с контролем, тогда как в 3-й и 4-й группах это снижение было достоверно ниже на 15-25 %.

Выводы. СН и ОЦ ослабляют тяжесть хронической свинцовой интоксикации и могут быть рекомендованы для включения в число профилактических препаратов.

С. М. Гогин, В. М. Матросов, М. И. Афанасъев

ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ОТЕЧЕСТВЕННОГО ПРЕПАРАТА ПОЛИДАН ПРИ ЛЕЧЕНИИ ЛЕЙКОПЕНИЙ, ВЫЗВАННЫХ ПРИМЕНЕНИЕМ ЦИТОСТАТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ

Задача исследования — оценить эффективность отечественного препарата полидан (Ро1уёапит Ка^и КискоБрегтаЙБ) в качестве стимулятора лейкопоэза при цитостатической терапии.

Материалы и методы. Были изучены результаты обследования больных, получавших циостатическое лечение по поводу рака молочной железы (РМЖ) — 21 пациентка, рака яичников (РЯ) и эндометрия (РЭ) — 9 пациенток, лимфогранулематоза (ЛГМ) и лимфосарко-мы — 12 пациентов, сарком мягких тканей (СМТ) — 4. Всего 46 человек.

Больные были условно разделены на группы по количеству проведенных курсов химиотерапии следующим образом: менее 3 курсов — 14 человек; от 4 до

6 курсов — 22 человека; более 6 курсов — 10 человек.

Было выделено 2 подгруппы по уровню лейкоцитов в крови перед началом и на следующий день после введения препаратов: Л < 2000 — 24 пациента; Л > 2000 — 22.

Проведено также распределение на 2 подгруппы по возрасту: до 50 лет — 18 больных; 50 лет и старше — 28.

Полидан вводился в дозе 5,0 п/к или в/м однократно или с интервалом в 72 ч.

Результаты. У пациентов в возрастной группе до 50 лет и количеством курсов 1-3 лейкопения была, как правило, не менее 2000 и достаточно было однократного введения для повышения на следующий день

Костромской областной онкологический диспансер

уровня лейкоцитов в крови более 3000. В группе старше 50 лет и с лейкопенией менее 2000, а также количеством курсов ПХТ более 6 однократного введения препарата было недостаточно, требовалось повторное введение через 72 ч. Следует отметить, что третьего введения не потребовалось ни в одном из случаев. Уровень лейкоцитов поднимался выше 3000.

У больных с количеством курсов 4-6 в обеих возрастных группах при различных локализациях злокачественных опухолей число однократных и двукратных введений препарата было одинаковым. Необходимо отметить, что, как правило, повторные введения полидана требовались больным, получающим многокомпонентные схемы ПХТ при системной патологии.

Выводы.

1. Применение препарата полидан позволяет быстро справиться с лейкопенией, вызванной ПХТ, значительно сокращает сроки восстановления показателей крови и позволяет выдерживать интервалы между курсами лечения, а также избавляет от необходимости ге-мотрансфузионной терапии.

2. Экономическая эффективность в сравнении с аналогичным препаратом лейкомакс (молгромос-тим), выпускаемым Sandos Schering Plough, при однократном применении составляет: полидан — 1, лейкомакс — 3. Таким образом, лечение в 3 раза дешевле, что особенно актуально при дефиците бюджета на местах.

А. К. Голомидова, Т. А. Богуш, А. Б. Бердалин, А. В. Мареева, Ю. А. Кинзирская,

А. Ю. Барышников

ФУНКЦИОНАЛЬНО АКТИВНЫЙ МЯР-ПОКАЗАТЕЛЬ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ ТКАНИ ЛЕГКОГО МЫШЕЙ К КАНЦЕРОГЕНЕЗУ

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

Участие АВС-транспортеров — маркеров множественной лекарственной резистентности в защите нормальных тканей от воздействия токсических веществ, в т. ч. и канцерогенов, — является безусловно доказанным фактом. Однако связь функциональной активности

отдельных транспортных белков с процессом канцерогенеза разных органов и тканей не столь очевидна и является предметом активного изучения, т. к. к настоящему времени описано значительное число химических соединений, являющихся канцерогенными для человека.

Цель настоящего исследования — изучение роли функциональной активности двух представителей ABC-транcпoртерoв (Pgp и MRP) в процессе канцерогенеза легких у мышей.

Материалы и методы. Функциональную активность Pgp и MRP оценивали методом проточной цито-флюориметрии, адаптированным для исследования плотных тканей по изменению внутриклеточного накопления в ткани легкого модельного субстрата доксоруби-цина при воздействии специфических ингибиторов — верапамила и генистеина соответственно. Исследованы мыши 2 линий, отличающиеся по чувствительности ткани легкого к спонтанному и индуцированному уретаном канцерогенезу: линии CBA характеризуются резистентностью, BALB/c — высокой чувствительностью. Проведена дифференцированная оценка функциональной активности Pgp и MRP в добавочной доле, правом и левом легком обеих линий мышей (всего З1 мышь).

Результаты. У мышей BALB/c выявлено значительное увеличение частоты экспрессии функции

MRP в добавочной доле по сравнению с правым и левым легким — 83, 39 и 47 % соответственно. У мышей CBA частота экспрессии функции MRP была одинаковой в добавочной доле, правом и левом легком и составила 83, 92 и 83 % соответственно. Частота экспрессии функции Pgp в добавочной доле, правом и левом легком была приблизительно одинаковой у мышей внутри каждой из исследованных линий и между линиями — около 25 %.

Выводы. Выявленная обратная корреляция между чувствительностью ткани легкого к канцерогенезу и частотой экспрессии функции MRP, но не Pgp, позволяет заключить, что функционально активный MRP является маркером чувствительности ткани легкого к канцерогенным воздействиям и может быть использован как дополнительный прогностический маркер при мониторинге и наблюдении за группами повышенного риска.

Исследование поддержано грантом РФФИ № 0404-49-391.

Л. Б. Горбачева, Л. Ю. Дедерер

ИССЛЕДОВАНИЕ МЕХАНИЗМОВ ЛЕКАРСТВЕННОЙ УСТОЙЧИВОСТИ К ЛИЗОМУСТИНУ (НИТРУЛЛИНУ)

Институт биохимической физики им. Н. М. Эмануэля РАН, Москва

Существование врожденной или приобретенной в процессе лечения лекарственной устойчивости ограничивает эффективность химиотерапии опухолевых заболеваний. Препарат лизомустин (нитруллин) относится к классу N-алкил-М-нитрозомочевин (АНМ) и, как было показано Н. М. Перетолчиной, характеризуется очень высокой активностью в отношении ряда экспериментальных опухолей животных. Известно, что между близкими аналогами АНМ не существует полной перекрестной резистентности, которая может быть обусловлена различиями в механизмах лекарственной устойчивости. В опытах на мышах с лейкозом L1210/0 (исходный чувствительный штамм) и L1210/H (штамм, резистентный к нит-руллину) было показано, что в условиях in vivo и in vitro не выявлено различий во внутриклеточной концентрации нитруллина в клетках обоих типов. При введении мышам с лейкозом L1210/0 однократных терапевтических доз нитруллина отмечается существенное ингибирование синтеза макромолекул, которое падает в ряду ДНК — РНК — белок. Выявлена положительная корреляция между включением радиоактивного предшественника в ДНК и активностью ДНК-полимеразы-альфа как в чувствительном, так и в резистентном штамме. В клетках L1210/H на всем протяжении опыта отмечается существенное

увеличение активности ДНК-полимеразы-бета. В клетках лейкоза Ы210/МНМ нитруллин индуцирует практически полное торможение синтеза ДНК и частичное — в клетках Ь1210/ВСКи. В клетках Ы210/Н отмечается более быстрое восстановление включения радиоактивных предшественников (2-14С-тимидин, 2-14С-уридин) в ДНК и РНК. Вероятнее всего, нарушения во вторичной структуре ДНК не определяют возникновения резистентности к нитрулли-ну, тем более, что, в отличие от ВСКи, нитруллин практически не вызывает образования межнитевых сшивок ДНК-ДНК. Не выявлено заметных отличий в скорости седиментации нуклеоидов клеток Ы210/0 и Ы210/Н в градиенте плотности нейтральной сахарозы в условиях высокой ионной силы и в присутствии этидиума бромида. В клетках резистентного штамма обнаружена повышенная концентрация внутриклеточного глутатиона. Уровни 06-алкилгуанин-ДНК трансферазы (06-АТ) в обоих штаммах практически не различаются, так же как и рибонуклеотидре-дуктазы и тимидинкиназы. Выявлены различия в механизмах резистентности к нитруллину и арано-зе: возникновение устойчивости к аранозе сопровождается резким увеличением активности 06-АТ, а к нитруллину — существенной активацией ДНК-полимеразы-альфа и -бета.

А. Н. Гришанина, Т. А. Богуш, А. В. Конухова, А. Б. Равчеева, И. Д. Калганов, В. Ю. Кирсанов, Р. Ю. Раманаускайте, А. Ю. Барышников

ИНГИБИРОВАНИЕ ФЕНОТИПА МНОЖЕСТВЕННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ РАКА ТОЛСТОЙ КИШКИ ПРИ ПРИМЕНЕНИИ 5-ФТОРУРАЦИЛА

Рак толстой кишки (РТК) характеризуется высокой частотой экспрессии фенотипа множественной лекарственной резистентности (МБИ), в реализации которой ведущая роль принадлежит функционированию АВС-транспортеров, выбрасывающих цитостатики из клеток. Учитывая выявленное нами ингибирующее воздействие таксанов и препаратов платины на активность АВС-транспортеров, а также важность поиска подходов к преодолению лекарственной резистентности, целью исследования явилось изучение влияния 5-фторурацила (5-ФУ), широко используемого для лечения РТК, на фенотип МБИ по накоплению и распределению модельного МБИ-препарата доксорубицина (Док) в клетках РТК.

Материалы и методы. Исследование проведено на образцах хирургического биопсийного материала опухолей (12 — РТК, 2 — метастазы РТК в легкие) методом проточной цитофлюориметрии, адаптированным для исследования плотных тканей. Фенотип МБИ оценивали по изменению внутриклеточного накопления Док при воздействии специфических ингибиторов Pgp (верапамил) и МИР (генистеин).

Результаты. Фенотип МБИ ^р+ и/или МИР+) установлен в 100 % случаев. Более чем в половине ис-

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

следованных опухолей, а также в 1 из 2 случаев метастазов показано увеличение внутриклеточного накопления Док после воздействия 5-ФУ. Выявлены две реакции клеток на воздействие 5-ФУ: увеличение внутриклеточного накопления Док сопровождалось повышением содержания антрациклина в цитоплазме опухолевых клеток и/или значительным увеличением содержания Док в ядре.

Выводы.

1. 5-ФУ может ингибировать фенотип МБИ в РТК, увеличивая накопление МБИ-препаратов в опухолевых клетках, в т. ч. в ядре. Последнее наиболее важно, т. к. именно содержание в ядре и взаимодействие с ядерными мишенями является определяющим в реализации специфической активности большинства ци-тостатиков.

2. Полученные данные показывают, что при последовательности ежедневного введения 5-ФУ и антрациклина или другого МБИ-препарата может быть реализована специфическая активность последних при лечении РТК в результате ингибирования антиметаболитом фенотипа МБИ.

Исследование поддержано грантом РФФИ № 04-

04-49-391.

Н. С. Жангабылов1, Л. Б. Горбачева2, С. М. Адекенов1

К ВОПРОСУ ИЗУЧЕНИЯ МЕХАНИЗМА ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ДЕЙСТВИЯ СЕСКВИТЕРПЕНОВОГО ЛАКТОНА АРГЛАБИНА И ЕГО ГИДРОХЛОРИД ДИМЕТИЛАМИНОПРОИЗВОДНОГО

1 Инсmиmym фиmoxимии МOH РК, Kapaгaндa, Kaзaxсmaн

2 Инсmиmym биохимической физики им. Н. М. Эмануэля РАН, Москва

Задача исследования — этап изучения возможного механизма противоопухолевого действия препарата арглабин.

В настоящей работе изучено влияние лактона арглабина на синтез ДНК в клетках лейкоза Р388 мышей и взаимодействие гидрохлорида диметиламино-арглабина с ДНК и азотистыми основаниями в условиях in vitro.

Материалы и методы. Сесквитерпеновый лактон арглабин, гидрохлорид диметиламиноарглабина (АГ), мыши БББ1 (С57В1/6хББА2) с лимфоцитарным лейкозом Р388, предшественники синтеза ДНК: 2-14С-тими-дин и 2-14С-дезоксиуридин, деградированная ДНК спермы лосося, азотистые основания: дезоксиадено-зинмонофосфат (дАМР), дезоксигуанозинмонофосфат (ёвЫР), дезоксицитидинмонофосфат (ёСМР), дезок-

ситимидинмонофосфат (dTMP), ДНК тимуса теленка (все реактивы фирмы Serva).

Результаты. При введении сесквитерпенового лактона арглабина 1- и 5-кратно в дозах 110 и 50 мг/кг соответственно в опухолевых клетках лимфоцитарной лейкемии Р388 синтез ДНК подавляется по основному пути (включение 2-14С-дезоксиуридина) и запасному (включение 2-14С-тимидина). При этом через 3 ч после однократного введения арглабина происходит незначительная стимуляция включения 2-14С-тимидина, что характерно для большинства противоопухолевых препаратов.

Гидрохлорид диметиламиноарглабина (АГ) реагирует в условиях in vitro с деградированной ДНК

при инкубации на протяжении 2 сут при температуре

4 °С. Также результаты подтверждают, что в условиях эксперимента наблюдается взаимодействие АГ с пуриновыми и пиримидиновыми основаниями, причем в большей степени с dAMP и dGMP, чем с dСMP и dТMP.

Выводы. В результате проведенного исследования впервые установлено, что сесквитерпеновый лактон арглабин в условиях in vivo вызывает заметное и устойчивое ингибирование синтеза ДНК в опухолевых клетках как по запасному пути, так и, особенно, de novo. Наблюдаемые эффекты частично обусловлены взаимодействием АГ с нуклеотидами in vitro.

Е. В. Игнатъева, А. П. Полозкова, О. Л. Орлова, М. А. Кортава, И. В. Ярцева, Л. Г. Гатин-

ская, А. А. Виланская, Н. А. Оборотова

ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ВКЛЮЧЕНИЯ ДОКСОРУБИЦИНА В ТЕРМОЗАВИСИМУЮ ЛИПОСОМАЛЬНУЮ ЛЕКАРСТВЕННУЮ ФОРМУ

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

В ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН на протяжении многих лет ведутся исследования по поиску новых средств доставки противоопухолевых препаратов. В ранее проведенных исследованиях в качестве новой лекарственной формы доксорубицина нами предложены длительно циркулирующие термочувствительные липосомы, которые должны захватывать достаточное количество препарата и при нагревании до 42±1 °С высвобождать его в окружающую среду.

Материалы и методы. Для получения «пустых» липосом использовали дипальмитоилфосфатидилхо-лин (DPPC), дистеароилфосфатидилхолин (DSPC) фирмы Lipoid в соотношении 9:1. Для стерической стабилизации липосом использовали PEG-2000-DSPE. Включение доксорубицина в липосомы проводили с помощью рН-градиентного метода в весовом соотношении препарат/липид — 0,2:1. Не включенный в липосомы доксорубицин отделяли методом гель-фильтрации, пропуская через колонку с Сефадек-сом G-50. На выходе из колонки получали две фракции: однородную эмульсию (липосомы) и прозрачный раствор невключенного доксорубицина. Содержание

доксорубицина определяли в исходной липосомаль-ной дисперсии и в обеих фракциях. Эффективность включения доксорубицина в липосомы оценивали методом прямой спектрофотометрии при длине волны X = 252±2 нм.

Результаты. Исследование влияния вспомогательных веществ на спектральные характеристики доксорубицина показало, что присутствие БРРС, ББРС и РЕв-2000-ББРЕ не изменяет положения характеристического максимума, однако эти липиды имеют небольшое собственное поглощение (около 0,07 при X = 252 нм). Поэтому для количественного определения доксорубицина в термолипосомах был применен метод дифференциальной спектрофотометрии с использованием в качестве раствора сравнения раствор «пустых» липосом, приготовленный точно так же, как раствор термолипосом, содержащих доксорубицин.

Выводы. Установлено, что включение доксорубицина в липосомы составляет 70-75 %. Таким образом, разработанный метод количественного определения доксорубицина позволяет контролировать включение препарата в липосомы.

С. М. Киселев1, А. М. Козлов1, А. В. Аклеев2, А. Ю. Барышников1

ИЗУЧЕНИЕ АНТИИНВАЗИВНОЙ АКТИВНОСТИ В СИСТЕМЕ IN VITRO ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ, ПРИМЕНЯЕМЫХ В ОНКОЛОГИЧЕСКОЙ ПРАКТИКЕ

1 ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

2 ФГУ Уральский научно-практический центр радиационной медицины

Способность опухолевых клеток инвазировать прилежащие нормальные ткани является одной из характерных особенностей проявления их злокачественности и высокого метастатического потенциала. В связи с этим разработка подходов к оценке антиинвазив-ной активности в эксперименте является основой для поиска потенциальных ингибиторов метастазирова-ния, а также выявления особенностей терапевтического действия лекарственных средств, применяемых в онкологической практике.

Цели и задачи — изучение антиинвазивной активности цисплатина, винбластина, винкристина, так-сотера и доксорубицина в системе in vitro.

Материалы и методы. Для проведения инвазивного теста использованы клетки меланомы Mel-1, клетки фибросаркомы HT1080 человека. Тест проводили в 24-луночных планшетах со вставочными ячейками, покрытыми матригелем. Опухолевые клетки, прошедшие через полупроницаемую мембрану (8 мкм) с матригелем, фиксировали и окрашивали по Лейшману. Число опухолевых клеток, прошедших через барьер, подсчитывали под микроскопом. Биологический эффект тестируемого соединения определяли по изменению количества опухолевых клеток, про-

шедших через соединительнотканный барьер по сравнению с контролем (интактные клетки без препарата).

Результаты. С использованием модифицированной методики инвазивного теста исследована антиин-вазивная активность противоопухолевых препаратов в диапазоне концентраций, не оказывающих цитоток-сического действия. Цисплатин ингибировал инвазию клеток Ме1-1 и НТ1080 на 30 (12 мкМ) и 45 % (7 мкМ) соответственно. Винбластин, винкристин и таксотер также проявили антиинвазивную активность — 35 % (10 нМ Ме1-1), 18 % (3 нМ НТ1080), 40 % (7 нМ Ме1-1), 25 % (5 нМ НТ1080), 53 % (30 нМ Ме1-1), 45 % (25 нМ НТ1080) соответственно. Доксорубицин не оказывал ингибирующего эффекта на инвазивную активность опухолевых клеток. Напротив, прослеживалась тенденция к стимуляции инвазивной активности опухолевых клеток исследуемых линий.

Выводы. Получены новые экспериментальные данные, характеризующие особенности биологического действия противоопухолевых препаратов, которые могут быть полезными для корректировки терапевтических схем применения изученных препаратов с учетом выявленной антиинвазивной активности в эксперименте.

С. М. Киселев1, А. М. Козлов1, А. В. Аклеев2, В. А. Макаров3, О. Б. Рябова3,

А. Ю. Барышников1

ИССЛЕДОВАНИЕ АНТИИНВАЗИВНОЙ АКТИВНОСТИ ИНГИБИТОРОВ ЯДЕРНОГО ФАКТОРА ТРАНСКРИПЦИИ NF-KB В СИСТЕМЕ IN VITRO

1 ГУ POHЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

2 ФГУ Уpaльский нayчнo-npaкmичeский цeнmp paдиaциoннoй медицины

3 Гoсyдapсmвeнный научный цеHmp по aнmибиomикaм, Москва

Высокий уровень активности ОТ-кВ в опухолевых клетках коррелирует с выраженным метастатическим потенциалом. ОТ-кВ, регулирующий активность более 200 генов, в т. ч. ключевых медиаторов инвазивной активности (ММП, урокиназы, 1САМ-1, УСАМ-1,

ELAM-1), — перспективная мишень антиметастатиче-ской терапии.

Цель — изучение in vitro антиинвазивной активности новых химических соединений, а также применяемых в медицинской практике лекарственных

средств, являющихся ингибиторами фактора транскрипции ОТ-кВ.

Материалы и методы. Изучены новые химические соединения: натриевая соль 1,4-диокса-8-азаспи-ро[4,5]-декан-8-карбодитионовой кислоты (10226098), его нециклический аналог (ОБР-555), 3-циано-4,6-ди-метил-5-нитро-2-пиридинил-К",К-диметилкарбодити-оат (10226156), 3-нитро-2-пиридинилтетрагидро-1(2Н) — пиридинкарбодитиоат (10126072), а также известные фармакологические средства трентал и эуфиллин.

В инвазивном тесте использованы клетки меланомы линии Ме1-1 и клетки фибросаркомы линии НТ1080 человека. Тест проводили в 24-луночных планшетах со вставочными ячейками, покрытыми матригелем. Опухолевые клетки, прошедшие через полупроницаемую мембрану (8 мкм) с матригелем, фиксировали и окрашивали по Лейшману. Число опухолевых клеток, прошедших через барьер, подсчитывали под микроскопом. Антиинвазивный эффект рассчитывали по формуле КИ* = [(А - В)/А]100 %, где А — количество опухолевых клеток, прошедших через барьер без добавления тестируемого соединения; В — количество опухолевых клеток, прошедших через барьер с добавлением тестируемого соединения.

Результаты. Показано, что соединение 10226098 обладает более высоким антиинвазивным потенциа-

лом Ки HT1080 = 60 % (3 мкМ), Ки Mel-1 = 40 % (100 мкМ) по сравнению с нециклическим аналогом — соединением ОБР-555 Ки HT1080 = 36 % (20 мкМ), Ки Mel-1 = 25 % (200 мкМ). Соединение 10226156 в концентрации 7 мкМ ингибировало на 40 % инвазивность клеток Mel-1, эффекта в отношении клеток фибросаркомы выявлено не было. Для проявления антиивазивной активности соединения 10226172 перед проведением теста необходима преин-кубация до 3 сут с клетками. При данных условиях теста ингибирование инвазии клеток линий Mel-1 (3 мкМ) и HT1080 (3 мкМ) составило соответственно 65 и 73 %.

При исследовании антиинвазивной активности препаратов трентала и эуфиллина выявлен минимальный эффект: для трентала Ки Mel-I = 17 % (1,2 мМ), Ки HT1080 = 25 % (0,7 мМ); для эуфиллина Ки Mel-1 = 13 % (0,6 мМ), Ки HT1080 = 31 % (0,7 мМ).

Выводы. Среди ряда новых химических соединений и применяемых в медицинской практике лекарственных средств — ингибиторов ядерного фактора транскрипции NF-kB выявлена способность подавления инвазивной активности клеток меланомы и фибросаркомы человека in vitro. Возможность использования ингибиторов опухолевой инвазии, в частности как компонентов комбинированной терапии, нуждается в углубленном исследовании.

Н. К. Клаан1, Г. Н. Апрышко2

КЛАССИФИКАТОР МИШЕНЕЙ ДЕЙСТВИЯ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ СРЕДСТВ

Задача исследования — сформировать классификатор известных в настоящее время биологических мишеней действия средств лекарственного лечения злокачественных опухолей.

Материалы и методы. Системный анализ современного состояния молекулярной биологии злокачественного роста, экспериментальной и клинической химиотерапии и биотерапии злокачественных опухолей с использованием доступных мировых ресурсов научно-технической информации по биологии и медицине.

Результаты. Выделены звенья опухолевого патогенеза, являющиеся ключевыми для создания лекарств, действие которых направлено на блокирование пролиферации опухолевых клеток, процессов инвазии, метастазирования и ангиогенеза или на иммунную систему. Сформирован открытый классификатор мишеней действия химиотерапевтических и биотерапевти-ческих средств лечения рака. Выделены мишени раз-

1 ВИНИТИ РАН, Москва

2 ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

ных уровней, а именно: биологические системы, органы, ткани, клетки, субклеточные структуры, биохимические процессы, структурные и информационные молекулы, рецепторы, ферменты. Определены иерархические, перекрестные и обратные связи между мишенями разных и одинаковых уровней. Дано краткое описание каждой мишени, ее значения для патогенеза опухоли, известные для нее лекарственные средства, находящиеся на разных стадиях экспериментального и клинического изучения. Для рецепторов приведены эндогенные и экзогенные лиганды. Определены синонимы, приведены общепринятые сокращения и английские варианты терминов.

Выводы. Разработанный классификатор может быть использован как справочный материал при создании баз данных по биологически активным веществам, для подготовки тезауруса или толкового словаря по химио- и биотерапии опухолей.

Т И. Клочкова

СТАНДАРТИЗАЦИЯ ЛИОФИЛЬНО-ВЫСУШЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ

Государственная Фармакопея СССР XI издания, Фармакопеи США и Великобритании не имеют специальной статьи, регламентирующей требования к качеству лиофилизированных препаратов. На основании собственных исследований и анализа имеющихся данных по стандартизации сделана попытка сформулировать требования к показателям качества, зависящим от способа получения.

Описание. В описание субстанций правильнее вводить термин «лиофилизированный порошок» без определения его структуры, а для лекарственной формы — «лиофилизированная сухая пористая масса». Цвет полученной массы бывает однородным, четким или с оттенком, которых может быть несколько.

Растворимость. Указывается время полного растворения при получении раствора в соответствии с инструкцией по применению. Данный раздел включается при необходимости.

Средняя масса и однородность по массе. Представленные в ГФ XI допустимые отклонения от средней массы содержимого одного сосуда можно использовать для характеристики однокомпонентных препаратов. Выбор интервала для многокомпонентного состава обусловлен содержанием по массе всех компонентов и должен иметь большее значение.

Прозрачность. Растворы лиофилизированных препаратов прозрачны, иногда имеет место легкая опалесценция, особенно у препаратов белкового происхождения.

Цветность. Некоторые вещества могут иметь два или несколько оттенков получаемых растворов. Поэто-

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

му в разделе «Цветность» для этих препаратов вводится два или больше эталонов.

рН. Лиофилизированные препараты могут иметь два показателя значения рН. Основной заданный интервал значений рН, который определяется в воде, и интервал значений рН в прилагаемом растворителе.

Однородность дозирования. Наиболее рациональным подходом к определению данного показателя является решение Фармакопеи США, которая рекомендует определять среднюю массу или однородность дозирования. Во всех случаях определения однородности дозирования отклонение содержания действующего вещества не должно превышать ±15 %.

Остаточная влажность, или потеря влаги при высушивании. Остаточная влажность в лиофилизи-рованном препарате является основным показателем, характеризующим эффективность процесса, а также пригодность препарата к длительному хранению. В конце процесса лиофилизации этот показатель не превышает 3 %. В процессе хранения возможно увеличение влажности до 10-15 %. Значение остаточной влажности для каждого препарата устанавливается экспериментально.

Остаточные органические растворители. Данный показатель включается в нормативный документ, если в процессе получения продукта использовались органические растворители для растворения действующего вещества. Несмотря на имеющиеся публикации, основная часть работ по стандартизации носит частный характер. Поэтому выработка общих требований к качеству лиофильно-высушенных лекарств является актуальной.

Н. П. Коновалова, С. А. Гончарова, Т А. Раевская, А. А. Терентьев, М. А. Лапшина, Л. Р. Арсланбаева

К ВОПРОСУ О МЕХАНИЗМЕ ДЕЙСТВИЯ ДОНОРОВ ОКСИДА АЗОТА НА РАЗВИТИЕ ЛЕКАРСТВЕННОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ОПУХОЛЕЙ

Институт проблем химической физики РАН, Черноголовка

Ранее нами было показано, что доноры оксида азота задерживают развитие лекарственной устойчивости лейкемии Р388 к циклофосфану.

Задача. В продолжение этих исследований была изучена проапоптотическая активность донора оксида

азота из класса органических нитратов.

Материалы и методы. Количество апоптотичес-ких клеток определяли морфологически с помощью флюоресцентной микроскопии с использованием смеси красителей акридинового оранжевого и этидиума

бромида через различные интервалы времени после воздействия КО-донором на штамм лейкемии Р388.

Результаты. Показано, что через 6 ч после введения КО-донора количество апоптотических клеток увеличивается в 4 раза по сравнению с контролем. Методом иммуноблоттинга исследовано влияние КО-до-нора на экспрессию белка р53 в клетках чувствитель-

ного и резистентного штаммов лейкемии Р388. Обнаружено, что экспрессия белка р53 при действии N0-донора практически не меняется.

Выводы. Полученные данные позволяют предположить, что наблюдаемые терапевтические эффекты не связаны с р53-зависимыми молекулярными механизмами.

Н. Ю. Кульбачевская, Л. М. Михайлова, А. А. Сергеев, О. И. Коняева, Е. Л. Членова

МЕТОДИКА ВНУТРИПЛЕВРАЛЬНОГО ВВЕДЕНИЯ ПРЕПАРАТОВ СОБАКАМ

Цель исследования — разработка методики внут-риплеврального введения препаратов собакам.

Материалы и методы. Исследования проведены на 6 собаках породы английский бигл. За основу методики по внутриплевральному введению препаратов взяты методики по проведению плевральной пункции у собак [Винефильд В. Е., 2000; Шейбниц X. И., Брасс В., 2001].

Результаты. Разработана методика внутриплев-рального введения препаратов собакам. Собака находится в положении стоя и удерживается ассистентами за шею и под пах. На левой стороне грудной клетки в области двенадцатого межреберья выбривают кожу в месте инъекции (~2х2 см2). Место инъекции обезболивают введением около 0,5 мл 0,5% раствора новокаина. Для манипуляции используют иглы типа «Рекорд» 18в, систему для переливания крови, шприцы стеклянные многоразовые «Рекорд». После анестезии кожу прокалывают пункционной иглой и сдвигают краниально до уровня седьмого межреберья в область наибольшего изгиба ребер. Межреберные мышцы про-

ГУ РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН, Москва

калывают под прямым углом; иглу вводят по верхнему краю нижележащего ребра во избежание повреждения межреберных сосудов и нервов; затем иглу разворачивают параллельно позвоночному столбу так, что она располагается срезом к легкому и продвигается внутри плевральной полости краниально на 2-3 см. Иглу фиксируют прижатием к ребру. В этом положении к игле подключают трубку системы для переливания крови, к которой присоединен шприц с препаратом. Препарат вводят медленно, чтобы избежать попадания раствора под кожу. После окончания введения иглу извлекают, а собаку несколько раз перекладывают с одного бока на другой (по 10 мин на каждом боку).

Выводы. Используемые манипуляции животные переносят хорошо. Применение указанной методики позволяет ввести препараты в плевральную полость без повреждения ткани легкого. Разработанная методика внутриплеврального введения препаратов позволяет увеличить количество моделей для доклинического изучения препаратов, предназначенных для введения в плевральную полость.

А. В. Ланцова, Н. А. Оборотова, Н. М. Перетолчина, А. П. Полозкова, О. Л. Орлова,

3. С. Шпрах, А. Ю. Барышников

БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ЛИПОСОМАЛЬНЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ПРЕПАРАТОВ - ПРОИЗВОДНЫХ НИТРОЗОАЛКИЛМОЧЕВИНЫ

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

Цель исследования — изучить противоопухолевую активность липосомальных лекарственных форм отечественных препаратов лизомустин и бис(хлорэ-тил)нитрозомочевины (БХНМ) в зависимости от состава лекарственной формы.

Материалы и методы. Лизомустин и БХНМ — 1,3-бис(2-хлорэтил)-1 -нитрозомочевина, воспроиз-

веденная субстанция кармустина (В1СКИ) — синтезированы в Институте химии Уральского отделения Академии наук России и изучены в ГУ РОНЦ РАМН. Они отвечают требованиям Фармакопейных статей.

Вспомогательные вещества: лецитин (фосфоти-дилхолин) — Е-80, холестерин, кардиолипин, фосфо-

тидилэтаноламинполиэтиленгликоль — 2000 (PEG-2000-PE) — Lipoid, Германия, дистеароилфосфотиди-лэтаноламинполиэтиленгликоль — 5000 (PEG-5000-DSPE) — Avanti Polar Lipids, США.

Для стерической стабилизации липосомальных лекарственных форм в составы липидной оболочки включили PEG-5000-DSPE (ЛЛФ-5000) и PEG-2000-PE (ЛЛФ-2000) — липиды как для лизомустина, так и для БХНМ.

Биологическую активность новых липосомальных лекарственных форм лизомустина и БХНМ изучали на экспериментальной модели опухоли мышей — лейкозе L1210, гибриды BDF1 (DBA2xC57Bl/6), самцы.

Результаты. Лизомустин на мышах с лейкозом L1210 в ЛЛФ-5000 в дозах от 125 до 225 мг/кг при однократном внутрибрюшинном применении проявил максимальный терапевтический эффект, при этом излечено 100 % мышей. Гибели животных от токсичнос-

ти не выявлено, в то время как в ЛЛФ-2000 100% излечение наблюдалось только при дозе 175 мг/кг.

БХНМ при лейкозе Ь1210 в ЛЛФ-5000 проявил максимальный терапевтический эффект в дозах 40 и 45 мг/кг при однократном внутрибрюшинном применении, излечение животных составило 100 %. В дозе 50 мг/кг выявлена 100% гибель животных от токсичности. При применении ЛЛФ-2000 БХНМ 100% излечения не выявлено.

Выводы.

1. Разработаны модели лекарственных форм лизомустина и БХНМ в виде ПЭГ-липосом.

2. Лизомустин в ЛЛФ-5000 является более эффективной лекарственной формой по сравнению с ЛЛФ-2000, т. к. позволяет расширить диапазон доз от 125 до 225 мг/кг, излечивая 100 % животных, и снизить токсичность препарата.

3. БХНМ в ЛЛФ-5000 вызвала 100% излечение животных от лейкоза Ь1210 в дозах 40 и 45 мг/кг.

Н. А. Лесная

ХРОНОТОКСИКОЛОГИЯ АРАНОЗЫ

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

Араноза — новый отечественный противоопухолевый препарат из класса нитрозопроизводных. Как и другие препараты этого класса, араноза имеет ограничения в применении, связанные с побочным действием, сила и выраженность которого зависит от применяемых доз и режима. Это является обоснованием для поиска путей повышения избирательности терапевтического действия препарата. Одним из способов решения этой проблемы может быть использование хронотоксикологических сведений для разработки рациональных режимов терапии.

Цель исследования — изучение токсичности ара-нозы в зависимости от фактора времени.

Материалы и методы. Опыты проведены в зимний период на интактных мышах-гибридах ВББ1 самках и параллельно на самцах. Животные были распределены на 8 групп, по 7-9 мышей в каждой. Аранозу применяли в дозе 550 мг/кг, соответствующей приблизительно ЛД50. В каждой группе животных препарат вводили однократно в 2, 5, 8, 11, 14, 17, 20 или 23 часа. Наблюдение за животными — 6 мес. Результаты оценивали по гибели мышей, верификацию токсической гибели проводили по картине патологических изменений при вскрытии павших животных. Статистическая обработка проведена по критерию %2.

Результаты. Установлено, что чувствительность мышей обоего пола к токсическому действию аранозы

зависит от времени суток, к которому приурочено воздействие. Суточные (циркадные) колебания токсичности аранозы у самцов и самок имеют вид кривых с двумя пиками максимальной гибели: в группах с утренними и вечерними часами введения. Характер кривых для самок и самцов различается по амплитуде колебаний и не совпадает по фазам. У самцов максимум превышает минимум в 5 раз, у самок — в 2-3 раза. Кроме суточных установлены многодневные колебания чувствительности мышей к аранозе также с двумя фазами максимальных показателей гибели: 1-я фаза — с 9-го по 27-й день, 2-я фаза — с 81-го по 183-й день. Многодневные колебания реактивности различаются у самок и самцов: в течение 1-го месяца в группах самцов пало 72 % мышей, а среди самок — лишь 9 %; в течение 3-6 мес. среди самцов гибель составила 28 %, а у самок достигла 91 %. Амплитуды многодневных колебаний токсичности аранозы у самцов и самок также не совпадают. Если инъекцию самцам проводили в 5 ч утра, животные погибали в первые двое суток, что не характерно для аранозы. Если инъекцию проводили самкам в 2, 5, 8, 14 или 17 часов, то гибели не было в течение месяца.

Выводы. Отмеченные особенности чувствительности мышей разного пола к аранозе позволяют предположить неодинаковую органную тропность препарата для самок и самцов.

Н. А. Лесная, Е. М. Трещалина, В. И. Романенко

ЭФФЕКТИВНОСТЬ ТРОЙНЫХ КОМБИНАЦИЙ С ВКЛЮЧЕНИЕМ АРАНОЗЫ, ЦИСПЛАТИНА И ДАКАРБАЗИНА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

Цель исследования — оценить эффективность комбинаций с включением аранозы, цисплатина и да-карбазина в зависимости от сочетания и последовательности введения препаратов.

Материалы и методы. Проведены 2 серии экспериментов на мышах — гибридах ВББ1 с внутри-брюшинным лимфолейкозом Ь1210 и началом лечения через 24 ч после трансплантации. Изучены 4 схемы тройных комбинаций препаратов в сравнении с двойными комбинациями и с монотерапией. Препараты вводили в дозах, близких к максимально переносимой (МПД) и в 1/2 МПД внутрибрюшинно одновременно через 10-15 мин или последовательно через 1-2 дня. Курс комбинированного лечения составлял 3-4 дня. Эффективность оценивали по увеличению продолжительности жизни мышей (УПЖ) в леченных группах в сравнении с контролем без лечения. Терапевтический выигрыш комбинированного лечения оценивали по стандартным критериям (аддитивность, суммация, потенцирование). Данные обрабатывали статистически с использованием метода Фишера—Стьюдента в модификации Р. Б. Стрелкова.

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

Результаты. При двойной комбинации потенцирующий эффект получен только при сочетании арано-за+цисплатин в МПД, УПЖ = 290 % при хорошей переносимости лечения. Тройные комбинации дакар-базин+цисплатин+араноза в различной последовательности введения были существенно менее эффективны и сопровождались гибелью мышей от токсичности. При уменьшении доз препаратов до 1/2 МПД в таких сочетаниях эффективность была на уровне монотерапии аранозой, а число погибших от токсичности мышей сокращалось до единичных случаев. Введение первым дакарбазина в тройной комбинации приводило к резкому снижению или исчезновению эффекта. Двойные комбинации с использованием дакарбазина также были неэффективны и сопровождались гибелью мышей от токсичности в зависимости от величины примененной дозы препарата.

Выводы. Использование дакарбазина в сочетании с цисплатином и аранозой в двойных или тройных комбинациях независимо от схемы применения и доз комбинантов нецелесообразно, т. к. приводит к снижению эффективности и/или ухудшению переносимости лечения.

В. Г. Лихванцева1, Н. А. Оборотова2, Л. М. Когония1, О. Ю. Мерзлякова1, М. И. Тюрина1, А. Г. Маркосян1, О. А. Анурова2, Н. А. Филлипова1

СКРИНИНГ-ОЦЕНКА ВОЗМОЖНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ АРАНОЗЫ В ЛЕЧЕНИИ УВЕАЛЬНЫХ МЕЛАНОМ

Меланома сосудистого тракта — одна из наиболее злокачественных внутриглазных опухолей, представляющая угрозу не только зрению, но и жизни пациента. Химиотерапия в лечении этих опухолей используется исключительно на диссеминированных стадиях. Несмотря на самые жесткие схемы и сложные комбинации препаратов, ее эффективность не превышает 10 %, а продолжительность ремиссии — не более 4 мес. Наряду с высокой химиорезистентностью самой опухоли в качестве причин низкого ответа признают наличие гематоофтальмического барьера (аналога ге-матоэнцефалического), не позволяющего достичь вы-

1ГУ НИИ глазных болезней РАМН, Москва

2 ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

сокой концентрации препарата в самой опухоли, в связи с чем мы предприняли поиск отечественных препаратов, проникающих через гематоэнцефалический барьер и потенциально эффективных в лечении опухолей меланоцитарного ряда. Для этих целей подходила араноза. Препарат нашел применение в лечении меланомы кожи и ее метастазов в мозг.

Цель работы — скрининг-оценка возможности применения аранозы в лечении увеальных меланом.

Материалы и методы. Аранозой лечили 5 пациентов с далеко зашедшей стадией неопластического процесса (Т3-4К0М0), которым органосохранное лече-

ние было не показано. Возраст пациентов колебался от 30 до 76 лет. Размеры первичного узла варьировали по толщине от 11 до 8 мм, а в диаметре — от 20 до 16 мм. Аранозу вводили из расчета 600 мг/м2/сут 3 дня подряд с интервалами в 3 нед., 3-4 курсами, после чего проводили энуклеацию. Энуклеированный глаз подвергли гистологическим исследованиям с анализом степени патоморфологических изменений, вызванных указанным воздействием, на световом и электронно-микроскопическом уровнях. Ход лечения контролировали по данным УЗИ и с помощью фотографической регистрации картины глазного дна. При анализе размеров опухоли использовали комбинацию современных ультразвуковых технологий с определением индекса плотности и васкулогенности опухоли, размеров зон некроза и индекса соотношения объема зон не-

кроза к объему опухоли, гемодинамических показателей кровотока в сосудах опухоли.

Результаты. Частичная регрессия от 10 до 30 % от исходного объема опухоли зафиксирована у 3 из 5 пациентов после проведения 3 курсов химиотерапии. Ги-стоморфологические и УЗИ-данные подтвердили присутствие клинического эффекта.

Выводы. Полученные данные являются предварительными, но они обнадеживают. Для детального анализа необходимы более многочисленные и продолжительные наблюдения.

Оптимизацию лечебного эффекта мы видим в поиске комбинаций аранозы с другими химиотерапевтическими препаратами, разработке липосомальных форм препарата, что позволило бы осуществить его адресную доставку или комбинации с другими методами лечения.

^. Г. Мeepoвuч1, М. Янг2, П. Джианг2, Р.-М. Хоффман2, В. П. Гepaсuмeня3, А. Е. Opлoв3,

А. П. Caвuцкuй1, В. O. Попов1

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МЕЛАНОМЫ B16-F0, ЭКСПРЕССИРУЮЩЕЙ ЗЕЛЕНЫЙ ФЛЮОРЕСЦИРУЮЩИЙ БЕЛОК (GFP), ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ КОМБИНИРОВАННОГО ДЕЙСТВИЯ ЦИКЛОФОСФАНА И ЭКСТРАКТА МИЦЕЛИЯ ВЕШЕНКИ

1 Инсmumym биохимии им. А. Н. Баха РАН, Москва

2 AntiCancer, Inc., ЄША

3 ЗAO «Пульмомед», Москва

Использование моделей опухолей, экспрессирующих цветные флюоресцирующие белки, — перспективное направление экспериментальной онкологии. Метод позволяет наблюдать in vivo за развитием опухоли и ее ответом на введение противоопухолевых препаратов без дополнительного введения контрастирующих агентов или субстратов.

Задача исследования — изучение сочетанного воздействия циклофосфана и экстракта мицелия Pleurotus ostreatus (вешенки) на меланому B16-F0, экспрессирующую GFP.

Материалы и методы. Исследования проводили на мышах C57Bl/6 массой 23-30 г. Суспензию полученной в Anticancer, Inc культуры клеток B16-F0-GFP перевивали подкожно в область спины по 106 клеток. На 5-е сутки после перевивки были сформированы 4 группы животных. Животным 1-й и 2-й групп цикло-фосфан вводили однократно внутрибрюшинно в дозе 300 мг/кг. Экстракт мицелия вешенки вводили внутрибрюшинно в дозе 100 мг/кг ежедневно в течение 10 дней (суммарная доза 1 г/кг) животным 1-й и 3-й групп (животным 1-й группы первую инъекцию вводили через 2 ч после введения циклофосфана). В 4-й

группе (контроль) животные не получали препаратов. Измеряли массу тела, размеры опухоли и количество лейкоцитов в периферической крови, а также 2-3 раза в неделю регистрировали с помощью ССБ-камеры флюоресцентные изображения опухолей при облучении светом с длиной волны 470 нм.

Результаты и выводы. Показана возможность прижизненного наблюдения за развитием меланомы В16-Р0-вРР и ее ответом на противоопухолевую терапию. Метод позволил через 2 сут после перевивки визуализировать опухоли, которые не определялись пальпаторным методом. Показан высокий противоопухолевый эффект комбинации циклофосфана и экстракта мицелия вешенки (ТРО = 94 %), не превышающий эффекта циклофосфана. При проведении терапии циклофосфаном и экстрактом мицелия вешенки количество лейкоцитов в периферической крови мышей снижается в 1,97 раза на 3-е сутки после начала введения препаратов, тогда как после проведения терапии циклофосфаном — в 3,7 раза. Экстракт мицелия вешенки в дозе 100 мг/кг при внутрибрюшинном введении в течение 10 дней тормозит рост меланомы В16-Р0-вРР на 61 %.

И. Б. Меркулова, Л. М. Михайлова, Н. Ю. Кулъбачевская, Т. В Абрамова, Ю. Е. Чикунова, Е. Л. Членова, Н. П. Ермакова, О. И. Коняева, В. Е. Липатова

ПАТОМОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА МЕСТНОТКАНЕВЫХ РЕАКЦИЙ ПРИ ВНУТРИПЛЕВРАЛЬНОМ ВВЕДЕНИИ КАТАЛИТИЧЕСКОЙ СИСТЕМЫ "ТФ+АК" У ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ

Частое осложнение при ряде злокачественных опухолей — опухолевый (метастатический) плеврит. При лечении онкологических больных с выпотом в плевральную полость актуален подбор препаратов, обладающих местным склерозирующим действием.

Цель работы — патоморфологическая оценка местнотканевых реакций при внутриплевральном введении каталитической системы «ТФ+АК» животным.

Материалы и методы. В предварительном опыте использовано 30 неинбредных крыс-самцов, у которых внутрибрюшинное однократное применение «ТФ+АК» в МПД (80 мг/кг) по ТФ в 0,5 и 1% растворах использовали для моделирования склерозирования брюшины (серозной оболочки). Исследование брюшной полости проведено на 3, 15 и 45-е сутки опыта. Локальное действие «ТФ+АК» на плевру (серозную оболочку) исследовали у 30 мышей и 6 собак после однократного внутриплеврального введения «ТФ+АК» на 3, 15 и 45-е сутки наблюдения. Мышам «ТФ+АК» вводили в МПД (50 мг/кг) по ТФ в 0,5 и 1% растворах. Собакам «ТФ+АК» вводили в дозе 5 и 16 мг/кг по ТФ в 0,5% растворе. На аутопсии проводили макроскопическое обследование брюшной и плевральной полостей. Для гистологического исследования брали участки брюшины, плевры, диафраг-

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

мы, места сращений внутренних органов или легких. Материал подвергали общепринятым гистологическим методам обработки и окраски.

Результаты. «ТФ+АК» при внутрибрюшинном введении крысам вызывает воспаление брюшины с образованием асцита, содержащего большое число клеток, деструктивные и продуктивные изменения в париетальной и висцеральной брюшине, образование соединительнотканных спаек, наиболее выраженных на 15-е и 45-е сутки. У мышей после внутриплеврального введения «ТФ+АК» к 15-м суткам отмечены признаки плеврита (серозита), перикардита и плевродеза. «ТФ+АК» при внутриплевральном введении собакам вызывает в плевре развитие очаговых продуктивных воспалительных изменений, выражающихся в макрофагальной инфильтрации, образовании отдельных фиброзных спаек, преимущественно между легочной и диафрагмальной плеврой, а также серозной оболочкой перикарда.

Выводы. Патоморфологическая оценка местнораздражающего действия каталитической системы «ТФ+АК» при внутриплевральном введении мышам и собакам показала, что «ТФ+АК» приводит к образованию соединительнотканных спаек между листками плевры, вызывая неполную облитерацию плевральной полости.

Л. М. Михайлова, О. И. Коняева, И. Б. Меркулова, Е. Л. Членова, Н. П. Ермакова, Н. Ю. Кулъбачевская, Т. В. Абрамова, Ю. Е. Чикунова, Р. И. Якубовская, А. А. Панкратов

ТОКСИЧНОСТЬ БИНАРНОЙ КАТАЛИТИЧЕСКОЙ СИСТЕМЫ "ЭФИТЕР + АСКОРБИНОВАЯ КИСЛОТА" ПРИ ПРИМЕНЕНИИ

У СОБАК

Цель исследования — доклиническое изучение токсичности бинарной каталитической системы (БКС) «Эфитер + Аскорбиновая кислота» («ЭТФ-К+АК») при применении у собак.

Эфитер, созданный в ФГУП ГНЦ НИОПИК, представляет собой метилполиэтиленгликолевый эфир ок-

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

та-4,5-дикарбоновой кислоты фталоцианаина кобальта, который включен в пропиленгликолевый эфир в-циклодекстрина (ЭТФ-К). Экспериментальные исследования показали высокую и воспроизводимую противоопухолевую активность эфитера (ЭТФ-К) в сочетании с аскорбиновой кислотой (АК).

Материалы и методы. Исследования были проведены на собаках породы английский бигл — самках и самцах. ЭТФ-К вводили животным в виде 10% водного раствора внутривенно, многократно, ежедневно в течение 15 дней в суммарных дозах 190, 950 и 1900 мг/кг. АК применяли внутривенно через час после введения ЭТФ-К в виде 5% официнального раствора в дозах, соответствующих молярному соотношению ЭТФ/АК, равному 1:30 (весовое соотношение 1:0,354). Оценивали количественную токсичность БКС и ее влияние на морфофункциональное состояние органов и тканей животных (качественная токсичность).

Результаты. Определены 3 уровня токсических доз «ЭТФ-К+АК»: высокие токсические дозы (ВТД)

— МПД = 1900 мг/кг, низкие токсические дозы (НТД)

— 950 мг/кг и высокие нетоксические дозы (ВНТД) — 190 мг/кг. Была установлена хорошая переносимость БКС животными при применении во всех изученных дозах. «ЭТФ-К+АК» в ВТД и НТД вызывал токсические морфофункциональные изменения в печени в виде дистрофических изменений клеток печени и уменьшения уровня креатинина и общего белка в сыворотке

крови собак в 1,5-2 раза по сравнению с фоновыми показателями. «ЭТФ-К+АК» в ВТД и НТД влиял также на периферическую кровь собак, уменьшая в 1,5-2 раза общее количество эритроцитов, уровень гемоглобина и снижая в 1,5-2 раза показатели гематокрита. При введении животным БКС во всех изученных дозах наблюдалось окрашивание мочи в синий цвет, в ВТД и НТД — окрашивание также слизистых рта и кожи. Интенсивность и длительность окраски зависели от величины примененной дозы. «ЭТФ-К+АК» не оказывал токсического действия на функциональное состояние сердечно-сосудистой системы, легких, почек, желудочно-кишечного тракта и поджелудочной железы. Однако данные патоморфологических исследований показали, что «ЭТФ-К+АК» вызывал у животных обратимые дистрофические изменения в почках, выраженные воспалительные изменения в легких, а в ВТД и НТД — обратимые изменения в щитовидной железе (деструкция тиреоидного эпителия), яичниках (повреждение яйцевых фолликулов) и надпочечниках (дистрофия клеток клубочковой зоны). «ЭТФ-К+АК» при применении в ВНТД не вызывал морфофункциональных изменений в органах и тканях собак.

Л. М. Михайлова, Н. Ю. Кулъбачевская, И. Б. Меркулова, О. И. Коняева, Е. Л. Членова,

Н. П. Ермакова, А. А. Сергеев, Ю. Е. Чикунова, Т. В. Абрамова, В. Е. Липатова

ТОКСИЧНОСТЬ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ БИНАРНОЙ КАТАЛИТИЧЕСКОЙ СИСТЕМЫ "ТЕРАФТАЛ + АСКОРБИНОВАЯ КИСЛОТА" ПРИ ВНУТРИПЛЕВРАЛЬНОМ ВВЕДЕНИИ ЖИВОТНЫМ

Цель исследования — доклиническое изучение токсичности бинарной каталитической системы (БКС) «Терафтал + Аскорбиновая кислота» («ТФ+АК») при внутриплевральном введении.

Материалы и методы. Исследование проведено на 150 мышах-гибридах Б1, 30 неинбредных крысах и 6 собаках породы английский бигл. «ТФ+АК» вводили внутриплеврально (в/пл), однократно в дозах 16 и 5 мг/кг (по ТФ) в 0,5 и 1% концентрациях. ТФ применяли одновременно с АК в фиксированном дозовом соотношении 1:2,2. Введение «ТФ+АК» в плевральную полость мышей проводили по методике, разработанной в ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН [Трещалина Е. М., Андронова Н. В., 2000]. «ТФ+АК» вводили в плевральную полость собак по методике, разработанной авторами настоящего исследования. Срок наблюдения за животными — 45 сут. Полученные данные по токсичности при в/пл введении сравнивали с данными по токсичности при внутривенном введении.

Результаты. Установлены количественные критерии токсичности КС: ЛД10 (МПД) — 62 мг/кг, ЛД50 =

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

80 мг/кг (на мышах); высокая нетоксическая доза (ВНТД) — 5 мг/кг и низкая токсическая доза (НТД) — 16 мг/кг (на собаках), характеризующие токсичность «ТФ+АК» при однократном в/пл применении. Определена «узкая» широта токсического действия «ТФ+АК» при в/пл введении.

Однократное в/пл введение «ТФ+АК» в ВНТД и МПД вызывает развитие асептического продуктивного воспаления в плевральной полости и наружных оболочках перикарда, выраженные признаки которого сохраняются в течение всего срока наблюдения. Воспалительные изменения сопровождаются образованием фиброзных спаек, преимущественно между плеврой и перикардом. «ТФ+АК» вызывает образование спаек между листками плевры, выраженность которых находится в прямой зависимости от дозы БКС.

«ТФ+АК» при в/пл применении в переносимых дозах не влияет на общее состояние и поведение животных. Установлено, что БКС при в/пл введении в 1,5-2 раза менее токсична, чем при в/в применении. Влияние БКС на морфофункциональное состояние ор-

ганов и тканей животных аналогично влиянию «ТФ+АК» при внутривенном введении.

Выводы. Полученные данные по доклиническому изучению токсичности каталитической системы при

внутриплевральном применении «ТФ+АК» позволяют рекомендовать БКС в 0,5% концентрации для плевро-склерозирующей терапии онкологических больных с опухолевыми плевритами.

Л. М. Михайлова, Н. П. Ермакова

ФАРМАКОЛОГИЧЕСКАЯ СОВМЕСТИМОСТЬ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ПРЕПАРАТОВ ВЕПЕЗИДА И ЛИЗОМУСТИНА

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

Основанием для проведения исследований явились случаи непрогнозируемых осложнений у больных при комбинированном применении вепезида и лизомустина в дозах 100 и 300 мг/м2 соответственно в режиме внутривенного последовательного введения препаратов.

Цель исследования — изучение фармакологической совместимости вепезида и лизомустина при внутривенном последовательном (одновременном) применении.

Материалы и методы. В работе использовали 200 мышей-самцов Б1 (СВЛхС57В1/6-), массой 20-25 г. Препараты вводили внутривенно. Вепезид применяли животным однократно в интервале доз 30, 60, 80, 120, 150 и 180 мг/кг, лизомустин — сразу после введения вепезида в однократной переносимой дозе для мышей, равной 120 мг/кг, адекватной по номинальному значению дозе лизомустина для человека (300 мг/м2). Лизомустин вводили животным однократно в интервале доз 180, 200, 240, 260, 300 и 400 мг/кг. Вепезид применяли сразу после введения лизомустина в однократной переносимой дозе для мышей, равной 30 мг/кг, адекватной по номинальному значению дозе вепезида для человека (100 мг/м2). Параллельно оценивали токсичность лизомустина и вепезида в отдельности.

О токсичности комбинации лизомустина и вепезида судили по изменению ЛД10 и ЛД50 препаратов, срокам гибели, клинической картине интоксикации, поведенческим реакциям, изменению массы тела, аутопсии павших животных. Расчетывали токсические дозы по методу Литчфилда—Уилкоксона.

В результате проведенных исследований установлено, что лизомустин при комбинированном применении с вепезидом влияет на токсичность последнего, увеличивая ее в 2,8 раза. МПД (ЛД10) вепезида при этом уменьшается в среднем со 100 (86-117) до 34 (27-42) мг/кг, а среднесмертельная доза (ЛД50) — со 155 (132-181) до 52 (43-65) мг/кг. В то же время вепезид при комбинированном применении с лизомусти-ном увеличивает токсичность последнего в 1,6 раза. При этом МПД лизомустина уменьшается в среднем с 206 (200-212) до 125 (109-144) мг/кг, а ЛД50 — с 250 (242-258) до 177 (154-204) мг/кг.

Выводы. Полученные результаты показывают, что одновременное применение вепезида и лизомустина вызывает усиление токсичности названных препаратов, что свидетельствует о фармакологической несовместимости лизомустина и вепезида. Полученные данные необходимо учитывать при их клиническом применении.

Т. Г. Николаева, Г. В. Вышинская

ИЗУЧЕНИЕ ПРОГНОСТИЧЕСКОЙ ЗНАЧИМОСТИ УРОВНЯ 8-ФАЗНЫХ КЛЕТОК, ПЛОИДНОСТИ И РЕЦЕПТОРНОГО СТАТУСА ПРИ ЗАПУЩЕННОМ РАКЕ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

Опухоли одного генеза весьма вариабельны и не тью при этом заболевании указывают на значитель-могут быть оценены только по клинико-морфологиче- ные различия в характере болезни: от высокопрогрес-ской картине болезни. Клинические наблюдения за сивных форм заболевания до весьма доброкачествен-ходом течения рака молочной железы и выживаемос- ного течения.

Задачей исследования было изучение кинетических параметров опухолей молочной железы.

Материалы и методы. У 70 больных местнораспространенным раком молочной железы, не получающих противоопухолевой терапии в ткани первичной опухоли был определен уровень Б-фазных клеток, плоидность и содержание рецепторов стероидных гормонов. Уровень Б-фазных клеток и плоидности определяли методом проточной цитофлюориметрии. После биопсии первичной опухоли больным проводили курсы химиотерапии по схеме САБ. Оценивали лечебный эффект в соответствии с критериями ВОЗ.

Результаты. При анализе данных не отмечено зависимости между содержанием Б-фазных клеток и эффективностью проведенной химиотерапии. Среднее содержание Б-фазных клеток в опухоли эффективно леченных больных составила 26,6±2,7 %, а при неэффективном лечении этот показатель был равен 21,7±3,0 % (разница не достоверна). Анализ выживаемости больных в зависимости от содержания Б-фаз-ных клеток в опухоли показал статистически достоверные различия в выживаемости между группами с фракциями Б-фазных клеток до 12 % и более. Медиана выживаемости больных и 5-летняя выживаемость при уровне Б-фазных клеток менее 12 % составили соответственно 42 мес. и 40%в отличие от групп с буль-шим (более 12 %) уровнем Б-фазных клеток, где аналогичные показатели составили 23,8 мес. и 15,5 %. Самыми неблагоприятными в прогностическом отношении оказались анеуплоидные опухоли (медиана выживаемости в этой группе больных составила 20

мес., для больных диплоидными опухолями — 31 мес.

3- и 5-летняя выживаемость больных анеуплоидными опухолями составила 30,5 и 13,2 %, выживаемость больных диплоидными опухолями оказалась лучше —

42 и 28 % соответственно.

Проанализирована выживаемость больных в зависимости от уровня рецепторов эстрогена и прогестерона в ткани опухоли. Медиана выживаемости при отрицательных уровнях рецепторов эстрогена и прогестерона составила соответственно 17,5 и 19,5 мес. При рецепторположительных опухолях медиана выживаемости больных составила 34 (эстрогенположи-тельные) и 37 (прогестеронположительные) мес. Ане-уплоидия и высокий уровень Б-фазных клеток часто коррелируют с отсутствием рецепторов эстрогенов и прогестерона в ткани опухоли. Отмечены достоверные различия в выживаемости между больными с ре-цепторотрицательными и рецепторположительными диплоидными и анеуплоидными опухолями. По результатам многофакторного анализа изученных биологических характеристик информативная значимость располагается в такой последовательности: уровень Б-фазных клеток, рецепторный статус и плоидность.

Выводы. Выявлена прогностическая значимость показателей плоидности, доли Б-фазных клеток и содержания рецепторов стероидных гормонов в отношении общей выживаемости больных местнораспространенным раком молочной железы. Анеуплоидия, высокий уровень Б-фазных клеток и отсутствие рецепторов стероидных гормонов прогнозируют наиболее неблагоприятный вариант течения болезни.

М. В. Oгopoднuкoвa, Е. Ю. Лысюк, Ю. В. Шишкин, А. Ю. Бapышнuкoв

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ИНДУКЦИИ АПОПТОЗА ПРОТИВООПУХОЛЕВЫМИ ПРЕПАРАТАМИ ЦИКЛОПЛАТАМОМ И ОКСАЛИПЛАТИНОМ

Цель работы — сравнительное изучение апоптоза, индуцированного действием отечественных противоопухолевых препаратов циклоплатам и оксалиплатин.

Материалы и методы. К суспензии клеток линии Jurkat (5-104 клеток/180 мкл среды) добавляли 20 мкл цитостатика в концентрациях 0,5-10-5, 1-10-5

и 1-10-4М, инкубировали 24 или 48 ч при температуре 37 °С в атмосфере 5% С02. Контролем служили ин-тактные клетки, которые инкубировали в тех же условиях, но в отсутствии препарата. После окончания инкубации клетки окрашивали аннексином V FITC (Caltag) и пропидиума йодидом PI (Sigma) по стандартной методике. Оценку проводили по следующим критериям: живые клетки (АnV-PI-), ранние апоптоти-ческие клетки (АnV+PI-), предположительно поздние апототические или некротические клетки (АnV+PI+).

ГУ РОНЦ им Н. Н. Блохина РАМН, Москва

Результаты. Под действием циклоплатама в концентрациях 0,5 10-5, 110-5, 1-10-4М (инкубация 24 ч) количество клеток в раннем апоптозе (АпУ+Р1-) составило 23,6, 34,7 и 30,9 %, тогда как для оксалиплати-на — 3,3, 4,0 и 29,9 % соответственно. Количество клеток, положительных по АпУ+ и Р1+ (предположительно поздние апототические или некротические клетки), для циклоплатама составило 2,4, 3,5 и 18 %, а для окса-липлатина— 1,8, 1,5 и 3,2 % соответственно. При увеличении времени инкубации до 48 ч под действием циклоплатама количество клеток в раннем апоптозе (АпУ+Р1-) несколько уменьшилось и составило 15,7, 22,8 и 20,2 %. Для оксалиплатина количество ранних апоптотических клеток при использовании концентраций 1 -10-5, 1-10-4 М увеличилось и составило 11,9 и 10,2 % соответственно. Количество положительных

по АпУ+ и Р1+ клеток для циклоплатама значительно увеличилось и составило 9,2, 20,9 и 39,2 %, а для окса-липлатина — 4,8, 3,1 и 12,2 % соответственно.

Выводы. Под действием циклоплатама при инкубации 24 ч количество клеток в раннем апоптозе (АпУ+Р1-) и предположительно в позднем апоптозе или некрозе (АпУ+Р1+) увеличивается пропорционально

увеличению дозы цитостатика. При увеличении времени инкубации до 48 ч процент клеток в раннем апоптозе уменьшается, а в позднем апоптозе или некрозе — увеличивается. При действии оксалиплатина прослеживается аналогичная тенденция. Циклоплатам, в отличие от оксалиплатина, индуцирует гибель опухолевых клеток по типу апоптоза более эффективно.

С. И. Павлова1, И. Г. Козлов1, А. В. Сергеев2, М. В. Максимова2

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ЭКСТРАКТА КОРНЯ СОЛОДКИ И ГЛИЦИРРИЗИНОВОЙ КИСЛОТЫ В ХИМИОТЕРАПИИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ НОВООБРАЗОВАНИЙ

1 Российский государственный медицинский университет, Москва

2 ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

Одним из биологически активных компонентов экстракта корня солодки (ЭКС) является тритерпено-вый гликозид глицирризиновой кислоты (ГК). Гидрофильная углеводная часть гликозида представлена 2 молекулами глюкуроновой кислоты, а гидрофобным агликоном является глицирретовая кислота. Содержание ГК в корнях солодки достигает 24 %, что может определять фармакологическую активность ЭКС.

Задача исследования — изучить возможность использования ЭКС и препарата глицирам (глицирризи-нат аммония) в химиотерапии злокачественных новообразований.

Материалы и методы. Противоопухолевую и антитоксическую активность in vivo оценивали по показателю увеличения продолжительности жизни в процентах к контролю, антиоксидантную активность — в цветной реакции с тиобарбитуровой кислотой, индуцируя пероксидацию в гомогенате печени, уровень общей глюкуроновой кислоты — карбазоловым методом, активность МОС — в тесте гексеналового сна.

Результаты. В эксперименте на мышах-самцах BDF1 с перевиваемым внутрибрюшинно лейкозом Р388 не отмечено значимого увеличения продолжи-

тельности жизни мышей под влиянием различных доз ЭКС и препарата глицирам, однако стимуляции роста опухоли также не наблюдалось. При комбинировании ЭКС в дозе 0,1 г/кг или эквивалентного количества глицирама с цитостатиками обнаружено умеренное потенцирование противоопухолевого эффекта цикло-фосфамида в терапевтической дозе 50 мг/кг. В опытах на интактных мышах в модели цитостатического токсикоза с использованием летальных доз циклофосфа-мида различные дозы ЭКС и глицирама увеличивали продолжительность жизни мышей на 140-367 % по сравнению с контролем. Параллельно в опытах in vitro показано, что курсовое введение ЭКС в дозе 1,0-0,01 г/кг повышает антиоксидантный потенциал, содержание свободной и связанной глюкуроновой кислоты в печени как у мышей с лейкозом, так и у интактных мышей, а также корригирует снижение активности МОС печени, вызванную лейкозом Р388.

Выводы. ЭКС и глицирам не оказывают стимулирующего действия на лейкоз Р388, но способны снижать токсическое действие циклофосфамида. Антитоксическое действие ЭКС, по-видимому, определяется содержащейся в экстракте ГК.

Л. В. nmenwmem

ДИАГНОСТИКА, ПРОГНОЗ, ЛЕЧЕНИЕ ПРИ МЕТАСТАЗАХ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОЙ ОПУХОЛИ БЕЗ ВЫЯВЛЕННОГО ПЕРВИЧНОГО ОЧАГА (РАСШИРЕННЫЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ РЕГИОНАЛЬНОГО ИСПОЛЬЗОВАНИЯ)

ГУЗСООД, Екатеринбург

Задачи исследования. Известно, что пациенты кующего онколога как в диагностическом, так и в лес ОНПЛ, несмотря на небольшое количество в общей чебном планах. Прогноз у них в целом остается не-популяции онкобольных, сегодня сложны для практи- удовлетворительным. Следовательно, не исчерпаны

возможности повышения уровня специализированной помощи таким пациентам. Было сделано предположение, что при ОНПЛ оправдано вычленение максимально информативной диагностической цепочки и разработка рекомендаций по лечению, применимых в местных условиях.

Материалы и методы. Нами проанализированы результаты медикаментозной терапии у пациентов с ОНПЛ по завершению полноценного диагностического этапа за период 2002-2004 гг. В изучаемую группу включали пациентов с морфологически подтвержденным наличием злокачественной опухоли, получивших по ходу лечения не менее 2 «оценочных» циклов ПХТ.

Клинические (объем метастатического поражения, локализация вторичных очагов) и морфологические результаты (данные цитологии, гистологии, ИГХ) оценивали с учетом прогностических факторов.

На собственном материале доказана целесообразность этапного подхода к диагностике при ОНПЛ, большое значение морфологии при планировании терапии и необходимость учета факторов прогноза.

Результаты. Оценка эффекта ПХТ у исследуемой группы пациентов указывает на высокую по сравнению с другими вариантами ценность платиносодержащих режимов.

Выводы. Создание диагностических и лечебных рекомендаций по терапии вышеуказанного сложного контингента больных чрезвычайно актуально в местных условиях.

Целесообразность получения высоких непосредственных результатов ПХТ у пациентов с ОНПЛ в ряде случаев сомнительна. Альтернативой цитостатиче-ской терапии может быть адекватная поддерживающая терапия.

Л. В. Платинский, В. В. Брюзгин, В. Д. Соколова, Л. В. Манзюк

РЕЗУЛЬТАТЫ ПРИМЕНЕНИЯ АРАНОЗЫ ПРИ МЕТАСТАЗАХ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ НОВООБРАЗОВАНИЙ РАЗНЫХ ЛОКАЛИЗАЦИЙ В ГОЛОВНОЙ МОЗГ

Лечение отечественным противоопухолевым препаратом аранозой в сочетании с другими противоопухолевыми лекарствами проведено 24 больным с множественными метастазами в головной мозг, подтвержденными компьютерной томографией. У 6 больных выявлен одиночный метастаз, у 3 — 2 метастаза, у 15 — множественные метастазы. Первичная опухоль локализовалась: в легком — у 3 больных, в молочной железе — у 4 больных, меланома — у 6 больных, саркома мягких тканей — у 2 больных, другие локализации — по 1 больному. Общее состояние больных по шкале ВОЗ в среднем 2,4. Мужчин было 10, женщин 14. Возраст от 32 до 49 лет (в среднем — 42 года).

Лечение проводилось в амбулаторных условиях. Араноза вводилась ежедневно по 0,5 г в течение

2 дней, затем по 0,5-1,0 г через день. Суммарная доза составила от 2,0 до 4,0 г, в среднем — 2,6 г. Одновременно больные получали: при раке легкого — ци-сплатин и этопозид или паклитаксел, при раке молочной железы — фторафур, при меланоме — дакарбазин и цисплатин, при саркоме мягких тка-

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

ней — винкристин, доксорубицин, циклофосфан и препараты платины. Число курсов — от 1 до 7. Кроме того, больным проводилась симптоматическая терапия: кортикостероиды, спазмолитики (трентал или винпоцетин)и др.

Объективное улучшение зарегистрировано у 7 (29 %) больных (при раке легкого — у 1 больного, раке молочной железы — у 1, меланоме — у 3, саркоме мягких тканей — у 1), стабилизация процесса — у 5 больных. Субъективный эффект наблюдался у 12 пациентов. Продолжительность частичной ремиссии колебалась от 2 до 11 мес. Токсичность 111-1У степени: лейкопения — у 11 больных, тромбоцитопения — у 9, рвота — у 3 пациентов. Другие побочные реакции наблюдались в единичных случаях. Все токсические проявления были непродолжительными и носили обратимый характер.

Таким образом, полученные данные указывают на целесообразность включения аранозы в комбинированную химиотерапию при метастазах злокачественных новообразований в головной мозг.

Л. В. Платинский, В. В. Брюзгин, Ю. Н. Соколов

СЕГИДРИН В ЛЕЧЕНИИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЕЙ РАЗЛИЧНЫХ ЛОКАЛИЗАЦИЙ

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

Сегидрин — один из немногих отечественных препаратов, назначаемых в случаях, когда возможности химиотерапии практически исчерпаны. Однако, несмотря на положительные результаты, полученные при клинических испытаниях, сегидрин назначается сравнительно редко. В настоящем исследовании оценивается роль сегидрина как противоопухолевого средства. Кроме того, в задачу исследования входило определение симптоматического действия препарата, его способность уменьшать болевой синдром, а также изучалось влияние сегидрина на эффективность химиотерапии.

216 больных разными злокачественными новообразованиями получали сегидрин в качестве единственного противоопухолевого или симптоматического средства, после того как возможности химиотерапии были исчерпаны. Все больные были с распространенной стадией заболевания и ранее получили от 2 до 19 курсов химиотерапии. Общее состояние большинства больных, по критериям ВОЗ, в среднем оценивалось как 2,9.

Сегидрин назначался амбулаторно по 1 таблетке (60 мг) 2-3 раза в день. Курс лечения — 1 мес. Интервал между курсами — 2 нед. Больные получили от 1 до

7 курсов. Продолжительность лечения от 1 до 9 мес.,

в среднем — 2,5 мес. Частичный объективный эффект выявлен у 22 (10,2 %) больных (по 1 наблюдению при раке носоглотки, мелкоклеточном раке легкого, меланоме и др.). Симптоматическое улучшение проявилось в снижении лихорадки, дыхательной недостаточности, отеков, интенсивности болей, уменьшении кровохарканья, улучшении общего самочувствия, повышения двигательной активности, улучшения аппетита у 45,6 % больных.

Для изучения влияния сегидрина на эффективность химиотерапии проведено сравнительное нерандомизированное исследование. 340 больных различными злокачественными новообразованиями получали только химиотерапию. Аналогичная химиотерапия в сочетании с сегидрином проведена 318 больным. Из них 174 больных получали сегидрин по 60 мг 2 раза в день и 144 пациента — 3 раза в день.

По сводным данным, отмечено незначительное (на 7,4 %), но статистически достоверное увеличение эффективности химиотерапии при использовании сегидрина.

Таким образом, сегидрин может быть рекомендован пациентам с опухолями, резистентными к химиотерапии, а также в тех случаях, когда возможности химиотерапии исчерпаны.

С. В. Саакян, М. Г. Жилъцова

РОЛЬ ПОЛИХИМИОТЕРАПИИ В ЛЕЧЕНИИ ОПУХОЛЕЙ ГЛАЗА И ОРБИТЫ У ДЕТЕЙ

Несмотря на достигнутые успехи в лечении рети-нобластомы (РБ) — внутриглазной злокачественной опухоли оптически деятельной части сетчатки и орбиты — рабдомиосаркомы (РМС), терапия их представляет значительные трудности. До настоящего времени остается актуальным подбор оптимальных протоколов лекарственной терапии и отработка методов комбинированного лечения этих больных.

Цель работы — оценить роль полихимиотерапии (ПХТ) в лечении опухолей глаза и орбиты.

МНИИ ГБ им. Гельмгольца, Москва

Материалы и методы. Пролечено 56 детей с разными формами (моно- и билатеральная) РБ и 14 детей с РМС орбиты. Средний возраст детей с РБ составил 28 мес., а с РМС — 7,5 лет. Больным с РБ на первом этапе проводилась неадъювантная химиотерапия по схеме: 18,7 мг/кг массы тела карбоплатина и 0,05 мг/кг винкристина в/в 1 раз в 3 недели. Всего проводилось 6 курсов. Группа детей с РМС получала комплексную терапию, включающую ПХТ по 2 протоколам — VAC (дактиномицин, винкристин, циклофосфан) и CWS-

96. Для морфологического подтверждения диагноза всем детям с РМС и 12 детям с РБ проведены ТИАБ (тонкоигольная аспирационная биопсия) и иммуногис-тохимическое исследование.

Результаты. На фоне ПХТ наблюдалась регрессия опухоли у всех больных РБ, при этом толщина опухоли уменьшилась на 58 % уже после 2 курсов лечения; резорбция патологического очага выявлена у 7 больных с проминенцией образования 2,5 мм. В группе

больных с РМС регрессия новообразования отмечена в 49 % случаев, причем побочные эффекты более выражены при применении протокола CWБ-96.

Выводы. Неадъювантная ПХТ позволила расширить показания к проведению органосохранного лечения с использованием брахитерапии и лазердеструк-ции, в результате чего удалось сохранить глаза у детей с бинокулярной формой РБ и избежать калечащих операций (экзентерации) орбиты у детей с РМС.

А. В. Сергеев, М. Я. Шашкина, Е. Н. Анашкина, Г. И. Кабацкая, Л. И. Карасева

СОЗДАНИЕ И ИСПОЛЬЗОВАНИЕ НОВОГО ПОКОЛЕНИЯ СРЕДСТВ ХИМИОПРОФИЛАКТИКИ РАКА

Задачи исследования. В соответствии с общепринятыми принципами создания и использования средств химиопрофилактики рака (ХПР) ранее нами были разработаны препараты, обладающие антимутагенными, антиканцерогенными и иммуномодулирующими свойствами: бета-каротин, бетаск, каскатол, каскорутол и др. В последнее время наметилась тенденция использовать в качестве средств ХПР соединения, обладающие наряду с вышеперечисленными свойствами антитоксической, антиэстрогенной, противовоспалительной активностью. В связи с этим нами разработана серия новых средств ХПР на основе лиофилизированных экстрактов лекарственных растений и проведены доклинические и клинические наблюдения возможности их использования в онкологической практике.

Результаты. Создана рецептура и технология изготовления фитопрепаратов на основе лиофилизированных экстрактов корня солодки, травы эхинации, плодов шиповника, березового гриба чаги. Препараты Солодка, Эхинация, Шиповник разработаны в форме драже, Чаговит — в форме твердых желатиновых капсул. Установлены критерии стандартизации и контроля качества, сроки годности препаратов. Подготовлена и утверждена нормативно-техническая документация и получено разрешение на промышленный выпуск

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

всех фитопрепаратов. В доклинической части исследования изучена иммуномодулирующая, антитоксическая, антиоксидантная активность новых средств ХПР. Все препараты в оптимальной для каждого из них концентрации обладали широким спектром имму-нотропной активности, усиливая пролиферацию спле-ноцитов мышей BALB/с в ответ на митогены и аллоантигены, дополнительное образование Т-киллеров в смешанной культуре лимфоцитов, цитотоксическую активность естественных киллеров и перитонеальных макрофагов. Экстракт солодки снижал токсическое действие циклофосфана и повышал антиоксидантный потенциал организма. Проведены рандомизированные клинические наблюдения по использованию препаратов Солодка и Чаговит в группах онкологического риска у злостных курильщиков и у женщин с мастопатиями. Предварительные результаты показали положительное влияние фитопрепаратов при их длительном систематическом применении на состояние пациентов. Наблюдения продолжаются.

Выводы. Разработанные нами фитопрепараты могут рассматриваться как потенциальные средства ХПР и одновременно использоваться как фармакологические средства «терапии сопровождения» при комплексном лечении онкологических заболеваний.

В. Б. Сирота1, М. В. Мезенцева2, В. Э. Щербенко2, С. С. Алъжанов3, К. Ж. Мусулманбеков1

АРГЛАБИН В ЛЕЧЕНИИ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

1 Карагандинская государственная медицинская академия, Казахстан

2 НИИЭМ им Н. Ф. Гамалеи РАМН, Москва

3 Институт фитохимии МОН РК, Караганда, Казахстан

Цель исследования — определить роль арглабина в комплексном лечении рака молочной железы (РМЖ) и оценить его влияние на показатели интерферонов и цитокинов у данной группы больных.

Материалы и методы. Исследовано 140 больных РМЖ со II и III стадиями процесса, разделенные на группы. 1-я группа — 30 больных РМЖ, в комплексное лечение которых было включено интратумораль-ное введение арглабина при предоперационной лучевой терапии (ЛТ) мелкими фракциями из расчета 2 мг препарата на 1 см3 опухоли 2 раза в неделю. Радикальная мастэктомия производилась через 10 дней с последующей химиогормонотерапией согласно алгоритму лечения. 2-я группа — 42 больных РМЖ, в лечение которых включен курс неоадъювантной монотерапии ар-глабином на фоне предоперационной ЛТ. Арглабин вводили из расчета 185 мг/м2 в виде 2% раствора внутривенно за 15-20 мин до сеанса ЛТ. Количество введений 15-20. 3-я группа— 18 больных РМЖ, получавших арглабин в монорежиме до начала предоперационной ЛТ в той же дозе, в количестве 15 внутривенных введений. 4-я (контрольная) группа — 50 больных, получавших комплексное лечение без арглабина (ЛТ + радикальная мастэктомия + химиогормонотерапия).

Методика фракционирования дозы у всех больных одинакова. Исследовались непосредственные и отдаленные результаты лечения. Определяли влияние арглабина на интерфероновый и цитокиновый статусы, цитокиновый профиль и показатели системы ПОЛ-АОЗ крови больных.

Результаты. Интратуморальное и внутривенное введение арглабина в сочетании с предоперационной ЛТ у больных РМЖ повышает эффект последней на 30 % и показатели полной регрессии опухоли на 43 и 37 % соответственно. Показатели 2-, 3-летней выживаемости при внутривенном применении арглабина на фоне ЛТ составили 93 и 90 % соответственно, что достоверно выше, чем при проведении только облучения (63 и 53 %). Арглабин на фоне ЛТ оказывает позитивное воздействие на систему ПОЛ-АОЗ в целом, что проявляется в снижении степени аккумуляции диеновых конъюгат в 1,3 раза, кетодиенов — в 1,5 раза и молекул средней массы — в 1,3 раза в эритроцитах крови, коэффициента липопероксидации — в 1,5 раза.

Выводы. Данные, полученные в ходе исследования системы интерферона и цитокинов у больных РМЖ, свидетельствуют о высокой иммунокорригирующей способности арглабина.

3. С. Смирнова, И. Ю. Кубасова, Л. М. Борисова, М. П. Киселева, Т. Д. Миникер,

И. Л. Плихтяк, С. Я. Мелъник

ИЗУЧЕНИЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТИ ПРОИЗВОДНОГО ИНДОЛО [2,3-А] КАРБАЗОЛА ЛХС-1006

Известно, что синтетические и природные соединения класса №гликозидов индоло[2,3-а]карбазола обладают различными видами биологической активности, в т. ч. противоопухолевой. Среди них найдены вещества, являющиеся ингибиторами протеинкиназы С, топоизомераз I и II, а также циклинзависимой киназы СБК-1.

По результатам прескрининга, проведенного в ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН и Национальном институте рака США, а также по данным биохимических исследований, для изучения противоопухолевой активности на перевиваемых опухолях животных было

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

отобрано производное ЛХС-1006, полученное разработанным нами ранее методом. Структура данного соединения была подтверждена методами УФ-, ИК-, ЯМР-спектроскопии и масс-спектрометрии.

Цель настоящей работы — изучение противоопухолевой активности ЛХС-1006 при лимфолейкозе Ь1210 и аденокарциноме молочной железы Са755.

Материалы и методы. Ь1210 перевивали мышам линии БВЛ2 внутрибрюшинно по 1 • 106 лейкозных клеток в 0,3 мл среды 199, а Са755 — мышам-гибри-дам ВББ1 подкожно в правую подмышечную область по 0,5 мл среды 199, содержащей 50 мг опухолевой

ткани. ЛХС-1006 растворяли в ДМСО (10% раствор) и физиологическом растворе и вводили внутрибрю-шинно ежедневно в течение 5 дней в широком диапазоне доз от 10 до 125 мг/кг. Критериями эффективности служили увеличение продолжительности жизни опытных животных по сравнению с контрольными (УПЖ, %) и торможение роста опухоли (ТРО, %).

Результаты. Показано, что при Ь1210 соединение ЛХС-1006 вызывает увеличение продолжительности жизни опытных животных по сравнению с контрольными в дозе 50 мг/кг, которое составляет только 18 %. При этом выявлена доза ЛД50, равная 100 мг/кг.

В отношении Са755 соединение ЛХС-1006 было более эффективным, и после его введения в максимально переносимой дозе 75 мг/кг в течение 5 дней ТРО составляло 81 %.

Выводы. Данные о наличии противоопухолевой активности при Са755 у соединения ЛХС-1006, а также ранее полученные данные для соединений того же класса — ЛХС-999 и ЛХС-1054 дают нам основание продолжить изучение противоопухолевой активности №гликозидов с различными углеводными остатками и/или модифицированным индолокарбазольным агликоном.

И. И. Сходкина1, Н. П. Коновалова1, Р. А. Котельникова1, Е. С. Фрог1, Г. Н. Богданов1,

В. С. Романова2

ХЕМОСЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЕ ДЕЙСТВИЕ НИТРОКСИЭТИЛПРОИЗВОДНОГО ФУЛЛЕРЕНА С60 В КОМБИНАЦИИ С ЦИТОСТАТИКАМИ

1 Институт проблем химической физики РАН, Черноголовка

2 Институт элементоорганического синтеза РАН, Москва

Серьезной проблемой химиотерапии опухолей является относительно высокая токсичность современных цитостатиков. В связи с этим проводятся многочисленные исследования, направленные на разработку способов повышения чувствительности опухолей, что позволит снизить дозы вводимых препаратов без потери противоопухолевой эффективности. В настоящей работе было синтезировано нитроксиэтилпроизводное Ь-пролил-фуллерена С60 (НЭПФ), образующее при биотрансформации монооксид азота.

Показано, что полученное соединение проникает через липидный бислой биологических мембран и выступает вектором доставки N0 к клеткам-мишеням.

Цель. Настоящая работа посвящена изучению хемосенсибилизирующего действия НЭПФ при комбинированной химиотерапии лимфоцитарной лейкемии Р388 циклофосфаном (ЦФ).

Материалы и методы. В качестве хемосенсибилизатора использовали НЭПФ. Опыты проводили на

мышах линии ВББ1 с лейкемией Р388. Было исследовано влияние НЭПФ на противоопухолевую активность ЦФ, который вводили в низкой неэффективной дозе (30 мг/кг) дважды. НЭПФ вводили в дозе 50 мг/кг, с 1-х по 5-е сутки после трансплантации. Результаты оценивали по степени выживаемости и изменению индекса увеличения средней продолжительности жизни животных (УПЖ, %).

Результаты. Показано, что в случае применения комбинированной терапии (ЦФ+НЭПФ) выживаемость животных к 60-м суткам составила 63 % (при введении одного ЦФ к 30-м суткам пали все животные). Продолжительность жизни животных при лечении ЦФ составила 142 % по сравнению с контролем, а в случае комбинации ЦФ + НЭПФ — 265 %.

Выводы. Показан хемосенсибилизирующий эффект нитроксиэтилроизводного Ь-пролил-фуллерена С60 при химиотерапии лейкемии Р388 циклофосфаном, вводимым в низких малоэффективных дозах.

Р. А. Тацков, Ю. И. Бородин

ПЕРВЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ЛОКАЛЬНОЙ ХИМИОТЕРАПИИ МИТОМИЦИНОМ-С В КОМБИНИРОВАННОМ ЛЕЧЕНИИ ЭПИБУЛЬБАРНОЙ МЕЛАНОМЫ

Сложность лечения меланом конъюнктивы обусловлена высокой вероятностью метастазирования при хирургических вмешательствах и недостаточной эффективностью локального облучения.

НИИ глазных болезней им. Гелъмголъца, Москва

Цель работы — изучить возможность комбинированного лечения эпибульбарной меланомы с использованием локальной химиотерапии митомицином-С (ММС).

Материалы и методы. В период с 2001 по 2004 г. пролечено 26 больных с эпибульбарной меланомой в стадии Т1-4^М0. Срок наблюдения составил от 3 мес. до 3 лет. Инстилляции водного 0,04% раствора ММС по 1 капле 4 раза в день проводились в течение 14 дней, после чего выполнялась брахитерапия по радикальной программе (21 глаз в стадии Т3-Т4) или экс-цизия новообразования (5 глаз в стадии Т1-Т2) с аппликацией 0,04% ММС на ложе опухоли в течение

5 мин. Удаленные опухоли верифицированы гистологически.

Результаты. Первые признаки реакции опухоли на инстилляции ММС отмечены на 3-и сутки в виде ее отека, появлялась смешанная сосудистая инъекция ок-

ружающей конъюнктивы. На 7-е сутки появлялось разряжение пигмента на поверхности опухоли. На 10-14-е сутки отмечен некроз на поверхности опухоли. После комбинации ММС с брахитерапией полная регрессия опухоли наблюдалась в сроки от 3 до 6 мес. При динамическом наблюдении за больными в сроки от 3 до 36 мес. признаков локального рецидива, региональных и отдаленных метастазов не выявлено. Аллергических реакций на инстилляцию ММС не отмечено.

Выводы. Предварительные результаты включения ММС в схему комбинированной терапии позволяют расширить показания для органосохранного лечения меланом эпибульбарной локализации.

А. Н. Тевяшова1, Е. Н. Oлсyфьeвa1, А. А. 0munь2, И. Д. Tpeщaлuн1, Е. М. Tpeщaлuнa2,

М. Н. Пpeoбpaжeнскaя1

ПОЛУЧЕНИЕ НОВЫХ УГЛЕВОДСОДЕРЖАЩИХ ПРОИЗВОДНЫХ АНТРАЦИКЛИНОВЫХ АНТИБИОТИКОВ

1 ГУ НИИ по изысканию новых антибиотиков им. Г. Ф. Гаузе РАМН, Москва

2 ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

Природные антрациклиновые антибиотики — дау-норубицин, доксорубицин являются высокоэффективными препаратами, применяемыми в современной химиотерапии опухолевых заболеваний, однако их использование ограничено побочными токсическими эффектами, а также явлением множественной лекарственной устойчивости (МБИ) опухолевых клеток к применяемым препаратам. В этой связи поиск новых антрациклиновых препаратов как биосинтетического происхождения, так и полученных в результате модификации природных антибиотиков, является актуальной задачей.

Исходными соединениями для модификации были даунорубицин и полусинтетический карминомицин, полученный с выходом 30 % из даунорубицина. Нами был разработан метод получения конъюгатов антрациклиновых антибиотиков — доксорубицина и 14-ги-дроксикарминомицина — с моно- и дисахаридами реакцией восстановительного алкилирования аминогруппы остатка даунозамина. Использованный подход позволил избежать восстановления 13-кето-группы в молекуле антрациклинового антибиотика.

Среди серии полученных производных доксорубицина и 14-гидроксикарминомицина наиболее

перспективными оказались два соединения: конъюгат доксорубицина и мелибиозы и конъюгат 14-гид-роксикарминомицина с галактозой. Конъюгат доксорубицина и мелибиозы в экспериментах in vivo в эквитоксических дозировках обладал меньшей кумулятивной токсичностью по сравнению с доксору-бицином. Конъюгат 14-гидроксикарминомицина с галактозой, аналогично карминомицину, был одинаково активен в отношении чувствительных клеток и MDR-резистентных клеток лейкоза и рака молочной железы (K562, K562i/S9, MCF-7, MCF-7Dox соответственно). В предварительных экспериментах in vivo использование конъюгата 14-гидрокси-карминомицина с галактозой для лечения мышей с лейкозом Р388 приводило к полному излечению животных.

Впервые получены ковалентно связанные конъюгаты доксорубицина с высокомолекулярным полисахаридом (галактоманнаном). Новые производные можно рассматривать как депо-формы доксорубицина. Изучение их активности на моделях in vitro показало, что эти конъюгаты сохраняют активность в отношении культур B16-F1, MCF-7 и HT-29.

И. Д. Tpeщaлuн1, Д. А. Бодягин1, Э. Р. Пepeвepзeвa1, И. А. Ефименко2

ПОВЫШЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕЧЕНИЯ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЕЙ С ПОМОЩЬЮ НОВОГО КОМПЛЕКСНОГО СОЕДИНЕНИЯ ПАЛЛАДИЯ - ЭФАЗОЛА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

1 ГУ НИИ по изысканию новых антибиотиков им. Г. Ф. Гаузе РАМН, Москва

2 ИОНХ им. Н. С. Курнакова РАН, Москва

Поиск путей повышения эффективности лечения злокачественных опухолей в настоящее время остается актуальным. Целью исследования являлось выявление возможности повышения противоопухолевой активности и снижения побочного действия некоторых противоопухолевых препаратов или локального облучения при сочетании их с препаратом эфазол.

Материалы и методы. Линейным мышам в мышцу бедра прививали Са755 или асцитную карциному Эрлиха по 1-106 клеток. Лечение начинали при объеме опухоли 1 см3. Локальное облучение опухолей производили однократно в дозе 45 Гр при помощи установки ГУТР (Цезий 137). Циклофосфамид вводили внут-рибрюшинно однократно в дозе 200 мг/кг, циспла-тин — внутрибрюшинно пятикратно через 72 ч в разовой дозе 1,5 мг/кг. Эфазол, представляющий собой комплексное соединение хлористого палладия (II) с гидрохлоридом эфедрина, вводили внутривенно в дозе 15 мг/кг через 15 мин после облучения или на следующие сутки после введения цитостатиков. Противоопухолевый эффект оценивали по изменению

объема опухолей и количеству излеченных мышей, гематомодифицирующую активность эфазола — по числу кариоцитов костного мозга и лейкоцитов периферической крови.

Результаты. Эфазол не влиял на скорость роста экспериментальных опухолей и продолжительность жизни мышей. При облучении или применении цитостатиков происходило уменьшение объема опухолей с последующим возобновлением роста. Сочетание облучения или цитостатиков с эфазолом приводило к регрессии опухолей с последующим излечением. Эфазол не влиял на клеточность костного мозга и периферическую кровь. Применение эфазола после облучения или цитостатиков не купировало развития лейкоцитопе-нии, но способствовало более быстрому восстановлению показателей периферической крови и числа кариоцитов костного мозга.

Выводы. Применение эфазола повышает эффективность и снижает гематотоксическое действие рентгеновского облучения, циклофосфамида и цисплатина.

Л. Г. Typгyнoвa1, Р. C. Дoсмaгaмбemoвa1, Н. C. Умбemaлuнa1, К. К. Hayp-збаев2,

O. И. Недова2

АРГЛАБИН В ЛЕЧЕНИИ ГЕМОБЛАСТОЗОВ

1 Kapaгaндuнскaя гoсyдapсmвeннaя медицинская академия МЗ РК, Kaзaxсmaн

2 Oблaсmнaя клиническая больница, Kapaгaндa, Kaзaxсmaн

Цель работы — изучение противоопухолевого эффекта арглабина при хронических лейкозах, влияние его на функциональные показатели печени, почек, гемостаз, иммунный статус и качество жизни больных.

Материалы и методы. Обследовано 40 больных с хроническими лейкозами (11 больных с хроническим миелолейкозом (ХМЛ), 29 — с лимфопролиферативными заболеваниями (ЛПЗ); мужчин — 14, женщин — 26). Средний возраст составлял 58±14,6 лет, длительность заболевания — от 3 мес. до 4 лет. Монотерапия арглабином проведена 21 пациенту (5 — с ХМЛ, 16 — с ЛПЗ), комбинированная терапия — 19

больным, из них 6 — с ХМЛ (арглабин, гидреа, цито-зар) и 13 — с ЛПЗ (арглабин+СОР). Использованы общеклинические методы исследования, гемограмма, миелограмма, исследование коагулограммы, иммунограммы. Качество жизни исследовалось при помощи опросника EORTC QLQ-C30 (version 3.0). В контрольную группу вошло 25 больных, получавших стандартную терапию (10 с ХМЛ — интерферон, гидреа, цито-зар; 15 с ЛПЗ — СОР).

Результаты. Установлено, что при лечении хронических ЛПЗ арглабином в сочетании с химиотерапией клинико-гематологическое улучшение отмечается

в 1,6 раз чаще по сравнению с монотерапией арглабином (р<0,05) и в 1,2 раза чаще по сравнению со стандартной химиотерапией. Применение арглабина характеризовалось тенденцией к улучшению иммунного статуса, уменьшением частоты инфекционных осложнений, улучшением показателей коагулограммы и качества жизни больных (р<0,05). Сопоставимость результатов лечения, полученных у больных с ХМЛ, при проведении стандартной терапии с интерфероном и замене его арглабином обнадеживает в плане воз-

можности использования арглабина в комбинированной терапии ХМЛ.

Выводы. Полученные результаты свидетельствуют о возможности лечения арглабином хронических ЛПЗ в виде монотерапии или в сочетании с цитостатиками при условии дифференцированного подбора больных и выбора тактики лечения. Необходимо дальнейшее изучение эффективности арглабина, включая длительное динамическое наблюдение за больными с учетом отдаленных результатов лечения.

Б. С. Федоров, М. А. Фадеев, Г. И. Козуб, Н. П. Коновалова, Т. А. Сашенкова

РАЗРАБОТКА НАУЧНЫХ ОСНОВ СИНТЕЗА ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ И АНТИМЕТАСТАТИЧЕСКИХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ С ПОВЫШЕННОЙ СЕЛЕКТИВНОСТЬЮ ДЕЙСТВИЯ

Институт проблем химической физики РАН, Черноголовка

В современной клинической практике при лечении злокачественных опухолей и их метастазов широко используются комплексные соединения платины (цисплатин и карбоплатин) или их комбинации с другими цитостатиками. Существенными недостатками этих препаратов являются высокая токсичность (ЛД50 равна 12,5 мг/кг для цисплатина и 36 мг/кг — для кар-боплатина), узкий интервал терапевтических доз и чрезвычайно низкая селективность действия. Все это ограничивает возможности их практического применения.

Еще одной нерешенной проблемой следует считать отсутствие в фармакологической практике анти-метастатических лекарственных средств.

Цель настоящей работы — синтез неизвестных ранее комплексных соединений платины, подавляющих развитие метастазов злокачественных опухолей.

Работа базируется на идее использования в качестве лигандов полифункциональных биогенных мем-бранотропных соединений — производных никотиновой и изоникотиновой кислот. Особое внимание в работе уделено синтезу замещенных амидов, содержащих группировки, способные в условиях биотрансформации генерировать монооксид азота. На сегодняшний день нами синтезирован ряд металлоком-плексов на основе замещенных амидов никотиновой и изоникотиновой кислот и тетрахлорида платины общей формулы:

Р1С14х2РуС(0)К,

где Я= *1НСН2СН20Н; ^СН2СН20Н)2; МНС(СН20Н)3; *1НСН2СН20Ш2; Ъ1НСН2С(0)МНСН2СН20Ш2; Ъ1Н0Н.

Эти соединения при низкой острой токсичности (ЛД50 = 300-1000 мг/кг) и отсутствии миелосупрес-сии проявляют высокую антиметастатическую активность при экспериментальных меланоме В16 и карциноме легких Льюис (ингибирование процесса метаста-зирования составляет 96-98 %). Несколько

металлокомплексов ингибируют процесс метастазиро-вания на 96 % при экспериментальной меланоме В16 при пероральном введении.

В настоящее время нами синтезирован широкий спектр метаболически активных соединений — генераторов N0, которые при их использовании в качестве хемосенсибилизаторов в цитостатической химиотерапии опухолей способны усиливать противоопухолевый эффект этих цитостатиков. Использование нескольких синтезированных нами соединений позволяет при минимальных дозах (1-2 мг/кг) цитостатиков и N0-доноров полностью ингибировать процесс мета-стазирования при экспериментальной меланоме В16. Проявляется также высокий терапевтический эффект при лейкозах (100% выживание животных при лейкемии Р388 при минимальных терапевтических дозах одного и другого препаратов, когда по отдельности ни один, ни другой препарат не проявляют активности).

В. А. Филов

СЕГИДРИН В ХИМИОТЕРАПИИ: МЕХАНИЗМЫ ДЕЙСТВИЯ И ЭФФЕКТЫ

ГУ НИИ онкологии им. проф. Н. Н. Петрова, Санкт-Петербург

Сегидрин является ингибитором метаболизма ксенобиотиков. Так, в случае асцитной гепатомы Зайдела, лимфосаркомы Плисса и саркомы 180 комбинирование неэффективных доз сегидрина и тиофосфамида приводит к задержке роста соответственно на 85, 70 и 60 %. Комбинирование с циклофосфамидом, задерживающим рост саркомы 180 на 70 %, снижает эффект до 40 %. В обоих случаях сегидрин тормозит метаболизм другого препарата, но в первом это приводит к эффекту, во втором, где для проявления действия необходим метаболизм, — снижает эффект. Сегидрин воздействует на изоферментный состав митохондриальной МАО и сильно ингибирует ее активность, что ведет к накоплению биогенных аминов. Препарат вызывает значительное снижение митотической активности опухолевых клеток, причем уменьшение числа делящихся клеток происходит за счет снижения количества профаз; следовательно, интерфазные клетки замедляют прохождение по циклу и задерживаются с вступлением в митоз. Кроме того, сегидрин способен повреждать митотический аппарат опухолевых клеток. Препарат является стабилизатором цитомембраны и мембран клеточных органелл. При этом, в частности, имеет место выраженное изменение белкового состава мембран митохондрий. Сегидрин ингибирует витамин В6, приводя к его дефициту. В результате воздействия сегидрином в микросомах опухоли Уокер

значительно уменьшается активность глюкозо-6-фо-сфатазы, УДФазы, нейтральной и щелочной фосфатаз; активность АТФазы митохондрий возрастает. В токсических дозах сегидрин ингибирует глкжонеогенез, подавляя ключевой фермент этого процесса — фосфоэ-нол-пируваткарбоксигеназу. Механизм действия сегидрина, таким образом, включает несколько звеньев, ведущим в которых, по нашему мнению, является ингибирование МАО.

В соответствии со скромными противоопухолевыми эффектами сегидрина в эксперименте они таковы же ив клинике: 0,8 % с объективным эффектом «3», 3,4 % — с «2», стабилизация процесса — 35,5 %. Существенно лучших результатов удалось добиться при первичных опухолях головного мозга. Однако симптоматическое действие сегидрина (снижение лихорадки, иногда до полной нормализации температуры тела, уменьшение/исчезновение кровохарканья, уменьшение дыхательной недостаточности и отеков, нормализация лабораторных показателей, значительное улучшение общего самочувствия, появление аппетита, снижение или полное купирование болей вплоть до отказа от наркотиков, положительное психотропное действие и др.), достигнутое в 46,5 % случаев, свидетельствует о существенном улучшении качества жизни больных и выводит этот препарат в область лечения больных с исчерпанными возможностями какого-либо иного лечения.

Н. И. Чевардов, Л. В. Толстых, К. Г. Пузаков, И. А. Зайцева, Ю. Н. Потапов

ПРИМЕНЕНИЕ ТАКСОТЕРА У ПАЦИЕНТОК С ВИСЦЕРАЛЬНЫМИ МЕТАСТАЗАМИ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

Областной клинический онкологический диспансер, Воронеж

Задача работы — оценить эффективность применения таксотера у больных генерализованным раком молочной железы с вторичными висцеральными изменениями.

Материалы и методы. 19 пациенток с метастазами рака молочной железы в печень и/или легкие получали курсы химиотерапии по схеме: таксотер в дозе 75 мг/м2 1 день и доксорубицин в дозе 50 мг/м2 1 день каждый 21-й день. Возраст пациенток колебался от 34 до 72 лет, в среднем — 46 лет. Общее состояние 11 больных, по критериям ВОЗ, было равно 1, у одной па-

циентки — 2 и у 6 больных — 3. В среднем каждая пациентка получила 6 курсов химиотерапии. Эффективность лечения оценивалась по результатам компьютерной томографии согласно критериям ВОЗ.

Результаты. Объективный эффект лечения составил 52,6 %, при этом полный регресс метастазов был достигнут у 5 (26,3 %) пациенток, частичный — у 5 (26,3 %). Стабилизация процесса наблюдалась у 4 больных, прогрессирование — у 5 пациенток. Среднее время до прогрессирования заболевания после дости-

жения полной регрессии метастазов составило 12,6 мес., частичной регрессии — 6,5 мес. Продолжительность жизни при отсутствии эффекта от химиотерапии в среднем была 3,2 мес. Основными проявлениями токсичности лечения была алопеция (100 % пациенток), транзиторная нейтропения 1-3б, которая не требовала использования колониестимулирующих факторов и не была причиной удлинения интервала между курсами.

Выводы. Применение схемы химиотерапии с так-сотером у больных раком молочной железы при наличии висцеральных метастазов приводит к достижению значимого контроля над заболеванием с полной регрессией опухоли у части больных. Лечение хорошо переносится даже достаточно ослабленными пациентами, не требует дорогостоящей поддерживающей терапии и госпитализации.

Н. Н. Чepныx, И. C. Бyлaвuнa, В. Б. Шаманский

КЛИНИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ЛИЗОМУСТИНА ПРИ НЕОПЕРАБЕЛЬНОМ РАКЕ ЛЕГКОГО В КАЧЕСТВЕ ПРЕПАРАТА 2-Й ЛИНИИ

ГУЗO Cвepдлoвскuй oблaсmнoй онкологический дuсnaнсep

В исследование включено 29 больных неоперабельным раком легкого. У всех пациентов диагноз верифицирован морфологически: в 3 случаях — мелкоклеточный рак и в 26 — немелкоклеточный. Всего было проведено 78 курсов лечения (в среднем — 2,7). Лечебный эффект оценен у 23 пациентов.

Лизомустин вводился в дозе 550 мг/м2 в/в капель-но или струйно медленно на 5% растворе глюкозы с интервалом 3-4 нед..

Назначению лизомустина предшествовали неоднократные (от 2 до 10) курсы цитостатической терапии (чаще всего — этопозид и цисплатин) с антрацик-лином, включающие комбинации МАСС, САР.

При мелкоклеточном раке лечебный эффект оценен у 2 пациентов: у 1 — частичная регрессия, у 1 — прогрессирование.

При немелко клеточном раке эффект оценен у 21 пациента. Объективная регрессия опухоли составила 19,1 % (1/3), в т. ч. одна полная ремиссия. Стабилизация отмечена в 47,6 % случаев (10 из 21). Прогрессирование зарегистрировано у 7 (33,3 %) пациентов.

Гематологическая токсичность лизомустина была незначительной (не более 2-й степени, по шкале ВОЗ) и в основном выражалась в умеренной лейкопении. Из проявлений негематологической токсичности зарегистрирована алопеция (14 %); эметогенное действие лизомустина вполне успешно купировалось однократным введением ондансетрона.

Заслуживает внимания случай полной ремиссии у пациента с периферическим раком левого легкого T2N0M + (BRA) с множественными метастазами в головной мозг и выраженной неврологической симптоматикой. После 2 циклов цитостатической терапии, включавшей применение этопозида, цисплатина и бе-лустина и не приведшей к регрессу неврологической симптоматики, подключение к лечению лизомустина в дозе 300 мг/м2 позволило добиться полной ремиссии после 5 циклов химиотерапии. Компьютерная томография органов грудной клетки и головного мозга подтвердила резорбцию опухоли и метастазов. Длительность полной ремиссии составляет к настоящему времени уже 9 мес.

Е. Л. Членова, Л. М. Михайлова, И. Б. Мepкyлoвa, O. И. Коняева, Н. Ю. Ky.льбачевская, Н. П. Еpмaкoвa, T. В. Aбpaмoвa, Ю. Е. Чи^нова, А. Л. Николаев

БЕЗОПАСНОСТЬ ОТЕЧЕСТВЕННОЙ УСТАНОВКИ УСДТ, ПРЕДНАЗНАЧЕННОЙ ДЛЯ СОНОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ ОНКОЛОГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

Цель исследования — изучение безвредности экспериментальной отечественной установки УСДТ и определение биологического действия ультразвука (УЗ), генерируемого ею, при фиксированной частоте и времени воздействия.

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

Установка УСДТ предназначена для сонодинами-ческой терапии злокачественных опухолей. Аппарат работает в сканирующем и направленном режимах. Терапевтическая эффективность установки обеспечива-

ется сочетанным действием акустических колебаний двух частот — 0,7 и 2,64 МГц, акустическое поле формируется сложением полей отдельных облучателей.

Материалы и методы. Исследования проведены на 300 неинбредных крысах. Их помещали в специальное фиксирующее устройство — домик, а УЗ-воздей-ствию подвергался хвост животного, который опускали в ванну с водой. Животных подвергали УЗ-воздей-ствию в терапевтическом режиме (суммарная интенсивность 3 Вт/см2 с двух полей) с максимально возможной для данной установки суммарной интенсивностью 6 Вт/см2 и промежуточной интенсивностью 4,5 Вт/см2. Функциональную и гистологическую оценку влияния УЗ на органы и ткани проводили после однократного и многократного воздействий. Оценивали системное и локальное воздействия УЗ установки УСДТ.

Результаты. Установлено, что однократное УЗ-воздействие разной интенсивности в сканирующем режиме не вызывает изменений со стороны систем и органов животных и не влияет на поведенческие реакции крыс.

При многократном УЗ-воздействии разной интенсивности у животных не отмечали изменений в поведении. Из клинических проявлений зафиксировано умеренное кратковременное повышение температуры тела крыс. Оценивая влияние УЗ установки УСДТ при многократном воздействии на системы и органы животных, отмечали дозозависимое повышение лейкоцитов и незначительное снижение гемоглобина.

Проведенные исследования показали, что УЗ установки УСДТ обладает локальным повреждающим действием, которое проявляется в виде деструктивно-воспалительных изменений в месте воздействия — отеком соединительной ткани и мышц, полнокровием сосудов, выраженной воспалительной инфильтрацией, а также деструкцией мышечных волокон. Степень повреждения тканей зависит от интенсивности и режима применения прибора. При использовании УЗ установки УСДТ в сканирующем режиме с терапевтической интенсивностью локальная токсичность отсутствовала.

Выводы. В результате проведенных исследований установлена безвредность использования экспериментальной установки УСДТ.

А. Шеллер

ПРИМЕНЕНИЕ АРГЛАБИНА У БОЛЬНЫХ С ДИССЕМИНИРОВАННЫМ ОПУХОЛЕВЫМ ПРОЦЕССОМ

Leonardis Кііпік, Бад-Хайльбрун, Федеративная Республика Германия

Цель исследования — изучение противоопухолевой эффективности препарата арглабин при лечении больных с опухолями разной локализации и диссеми-нацией опухолевого процесса.

Материалы и методы. В исследование было включено 34 больных раком III и IV стадии с разной локализацией опухоли, прогрессированием заболевания после комплексной терапии и развившейся устойчивости к полихимиотерапии. 11 пациентов имели индекс Карновского ниже 60-50 %. Контрольная группа составляла 80 больных с раком III и IV стадии. В основной группе 21 пациент получил 1 курс арглабина, 10 больных — 2 курса, 2 больных — 3 и 1 пациент —

4. Арглабин применяли в дозе 5 мг/кг массы тела пациента в комбинации с различными режимами стандартной полихимиотерапии соответственно локализации опухоли. Исследовали непосредственные результаты лечения, качество жизни и определяли реакцию опухолевых маркеров на арглабинотерапию.

Результаты. Из 34 пациентов у 2 был достигнут полный регресс опухоли, у 6 — частичный, у 7 больных — стабилизация процесса и у 18 пациентов —

прогрессирование заболевания. В общем у 44 % пациентов, получавших арглабин, наблюдался положительный эффект. Медиана выживаемости от начала лечения арглабином составила 4,3 мес. В контрольной группе у всех 80 пациентов наблюдалось прогрессирование опухолевого процесса с летальным исходом. Реакция опухолевых маркеров на арглабинотерапию с полихимиотерапией: у 14 пациентов — повышение показателей опухолевых маркеров, у 6 пациентов — без изменения, у 12 пациентов — снижение показателей, у 2 пациентов показатели не контролировались в динамике. Таким образом, у 36 % больных (1/3) наблюдалось снижение показателей опухолевых маркеров в крови.

Выводы. Полученные результаты свидетельствуют о том, что сочетание арглабина со стандартными режимами полихимиотерапии у больных с диссеминированными формами опухолей и развившейся устойчивостью к химиопрепаратам приводит к улучшению качества жизни больных, лучшей переносимости стандартной химиотерапии, снижению показателей опухолевых маркеров в крови.

3. С. Шпрах

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ИЗОЛЯТОРОВ В ПРОИЗВОДСТВЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ ДЛЯ ИНЪЕКЦИЙ (НА ПРИМЕРЕ ПРОЕКТА РЕКОНСТРУКЦИИ С ТЕХНИЧЕСКИМ ПЕРЕВООРУЖЕНИЕМ ОПЫТНО-НАРАБОТОЧНОЙ ЛАБОРАТОРИИ ГУ РОНЦ ИМ. Н. Н. БЛОХИНА РАМН)

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

Использование барьерных технологий, или изоляторов, в фармацевтической промышленности обусловлено повышением требований к защите как лекарственного средства от воздействия окружающей среды, так и персонала от токсичных продуктов производства, например цитостатиков. Изоляторы полностью защищают фармацевтический продукт от оператора и окружающей среды, создавая физический барьер в виде стенок, выполненных из различных легко стерилизуемых материалов, и повышенного давления воздуха.

Проектом технического перевооружения опыт-но-наработочной лаборатории ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН предусмотрено использование 100 % изоляторов фирмы Ьа СаШепе (Франция), в которых поддерживается отрицательное давление во внутренней рабочей зоне и положительное давление окружающей среды. Воздух внутри изоляторов стерилен и очищен от аэрозольных частиц с помощью высокоэффективных фильтров (класс А). При производстве противоопухолевых лекарственных средств в опыт-но-наработочной лаборатории основные технологические операции — розлив во флаконы, лиофилизация,

укупоривание — будут проводиться в отдельных, но соединенных между собой в единую систему изоляторах. Кроме того, проектом реконструкции лаборатории предусмотрено использование изоляторов при взятии навесок действующего вещества, деконтаминации поверхностей флаконов с готовым продуктом и в контрольно-аналитической лаборатории. Использование изоляторов сделает процесс производства закрытым, что позволит исключить риск контаминации, связанной с присутствием операторов, обеспечит высочайший уровень безопасности и легкий контроль производственного процесса — за процессом можно наблюдать непосредственно в любой момент без каких-либо приспособлений.

В соответствии с требованиям Биёга1ех 4.0 систему изоляторов в опытно-наработочной лаборатории планируется расположить в чистых помещениях класса Б, что позволит использовать для организации технологического процесса помещения минимальной площади (около 350 м2) и значительно снизить как капиталовложения (до 10-20 %), так и, в дальнейшем, эксплуатационные расходы (возможная экономия до 40-50 %).

З. С. Шпрах

ОСНОВНЫЕ ПРИНЦИПЫ ПРОЕКТИРОВАНИЯ ПРОИЗВОДСТВА ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ ДЛЯ ИНЪЕКЦИЙ (НА ПРИМЕРЕ ПРОЕКТА РЕКОНСТРУКЦИИ С ТЕХНИЧЕСКИМ ПЕРЕВООРУЖЕНИЕМ ОПЫТНО-НАРАБОТОЧНОЙ ЛАБОРАТОРИИ ГУ РОНЦ ИМ. Н. Н. БЛОХИНА РАМН)

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

В соответствии с Федеральной целевой програм- витию онкологической помощи населению Россий-мой «Предупреждение и борьба с заболеваниями со- ской Федерации» 2002-2006 гг.) в Российском онколо-циального характера» (подпрограмма «О мерах по раз- гическом научном центре им. Н. Н. Блохина РАМН

(ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН) организуется производство противоопухолевых лекарственных средств. Проект реконструкции с техническим перевооружением опытно-наработочной лаборатории ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН разработан ООО ПСП «Чистый воздух» в соответствии с требованиями Национального стандарта Российской Федерации ГОСТ Р 52249-2004 «Правила производства и контроля качества лекарственных средств», требованиями вМР Европейского Союза и Биёга1ех 4.0. Проект предусматривает производство жидких (растворов) и лиофилизированных лекарственных средств для инъекций во флаконах. Прототипами планируемых к выпуску препаратов послужили араноза (лиофилизат для приготовления раствора для инъекций) — препарат, разработанный в ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, и широко используемый в медицинской практике раствор

5-фторурацила для инъекций.

Анализ всех стадий производства, подготовка блок-схем всего процесса позволили определить коли-

чественные параметры производства (годовая мощность — до 8 млн флаконов) и основные требования к набору и качеству помещений. Поскольку бульшая часть противоопухолевых препаратов относится к 1му классу опасности по токсичности, при создании проекта основное внимание уделено безопасности персонала. С другой стороны, термолабильные противоопухолевые лекарственные средства для инъекций не выдерживают финишной стерилизации и должны производиться асептически, что подразумевает повышенные требования к качеству технологической среды. Для комплексного решения указанных выше задач в опытно-наработочной лаборатории предусмотрено использование барьерных технологий, или изоляторов, на всех стадиях технологического процесса.

В декабре 2004 г. проект реконструкции с техническим перевооружением опытно-наработочной лаборатории ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН получил положительную оценку Центра Госсанэпиднадзора г. Москвы.

А. Е. Щекотихин1, А. А. Штиль2, В. Н. Буянов3, М. Н. Преображенская1

ПОИСК ПРОИЗВОДНЫХ 4,11-ДИАМИНОНАФТО[2,3-/]ИНДОЛ-5,Ю-ДИОНА ДЛЯ ПРЕОДОЛЕНИЯ ЛЕКАРСТВЕННОЙ УСТОЙЧИВОСТИ ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК

Ранее нами синтезирован аналог антрациклино-нов — 4,11-дигидроксинафто[2,3-/]индол-5,10-дион, показана высокая антипролиферативная активность его алкиламинопроизводных и установлено, что некоторые производные 4,11-дигидроксинафто[2,3-/]ин-дол-5,10-диона активны в отношении опухолевых клеток с множественной лекарственной устойчивостью (МБИ) Известно, что производные 1,4-диаминоантра-хинона и его аналогов (аметантрон, пиксантрон) обладают высокой противоопухолевой активностью и низкой кардиотоксичностью. Недостатком препаратов этого класса является недостаточная активность в отношении МБК опухолевых клеток. Поэтому производные 4,11-диаминонафто[2,3-/]индол-5,10-диона перспективны для поиска новых химиотерапевтических средств, активных в отношении резистентных опухолевых клеток.

Цель исследования — изучение связи структура — активность в отношении МБК опухолевых клеток в ряду производных 4,11-диаминонафто[2,3-/]ин-дол-5,10-диона.

Результаты. Изучение синтезированной серии производных 4,11-бис[(2-аминоэтил)амино]нафто[2,3-/]индол-5,10-диона показало, что структура аминог-

1 ГУ НИИНА им Г. Ф. Гаузе, Москва

2 ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

3 РХТУ им. Д. И. Менделеева, Москва

рупп боковых цепей существенно влияет на антипро-лиферативную активность в отношении MDR опухолевых клеток с экспрессией P-гликопротеина (Pgp). Так, для клеток лейкоза K562 и ее устойчивой Pgp-положительной сублинии K562i/S9 индекс резистентности для 4,11-бис[(2-метиламиноэтил)амино]- и 4,11-бис[(2-диметиламиноэтил)амино]нафто[2,3-/]индол-5,10-дионов ниже, чем для адриамицина. Наличие других заместителей в боковой цепи либо в 1-м или 3м положении индольного фрагмента приводит к потере активности для клеток K562i/S9. Практически одинаковая цитотоксичность всей серии 4,11-диамино-нафто[2,3-/]индол-5,10-дионов для линии карциномы кишечника HCT116 (p53+7+) и ее изогенной сублинии с отсутствием гена p53 (p53-/-) свидетельствует, что, в отличие от адриамицина, противоопухолевая активность нафтоиндолов не зависит от p53.

Выводы. Показана возможность химических модификаций 4,11-диаминонафто[2,3-/]индол-5,10-диона для создания соединений, вызывающих гибель опухолевых клеток с разными механизмами лекарственной устойчивости.

Работа выполнена при поддержке гранта РФФИ №03-03-32090.

И. В. Ярцева, Л. Г. Гатинская, Н. А. Дмитричева, Е. В. Игнатьева, Б. С. Кикоть

ВЫБОР ОПТИМАЛЬНЫХ УСЛОВИЙ ДЕГИДРАТАЦИИ ТЕРАФТАЛА

ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

Терафтал — натриевая соль окта-4,5-карбоксифта-лоцианина кобальта (II) — новый отечественный препарат для каталитической терапии злокачественных опухолей.

Одним из обращающих на себя внимание свойств терафтала является его высокая способность удерживать воду. Однако при стандартизации препарата для определения содержания основного действующего вещества и других количественных показателей необходимо точное знание содержания в нем воды. Изучение условий высушивания терафтала показало, что препарат, полученный в промышленных условиях, содержит до 7 % адсорбционной или гигроскопической воды, удаляемой при нагревании на воздухе до постоянной массы при температуре 125 °С. Вещество, высушенное таким образом, сохраняет характеристический электронный спектр поглощения; не наблюдается также изменений при анализе ВЭЖХ. Это свидетельствует об устойчивости субстанции препарата к нагреванию в данных условиях. Прочно связанная вода начинает отщепляться при более высоких температурах.

При выдерживании препарата на воздухе до постоянной массы при температуре 250 °С зарегистрировано дополнительное уменьшение массы вещества. Потеря в массе составляла около 17 % от исходной навески. Спектрофотометрически, однако, было показано, что в этих условиях вещество не только теряет присоединенную воду, но и начинает медленно разлагаться. Дальнейшее нагревание при более высоких температурах приводит к выраженному разложению вещества. Поскольку удаление прочно связанной воды на воздухе сопровождается окислительной деструкцией препарата, для получения практически безводного вещества можно предложить как один из вариантов высушивание его в вакууме при температуре 110 °С в присутствии оксида фосфора (V). Отсутствие деструкции терафтала в этих условиях показано спектрофотометрически.

Работа поддержана Правительством г. Москвы. Авторы благодарят Г. Н. Ворожцова, О. Л. Калию, Е. А. Лукьянца за сотрудничество и предоставленные для исследования образцы терафтала.