Химико-фармацевтическая стандартизация РутРсСо Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»



| 18 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ

НОВАЯ СИСТЕМА АДРЕСНОЙ ДОСТАВКИ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ПРЕПАРАТОВ -ЦИТОТОКСИЧЕСКИЕ ЛИПОСОМЫ, НЕСУЩИЕ СПЕЦИФИЧЕСКИЕ УГЛЕВОДНЫЕ ДЕТЕРМИНАНТЫ Е.Л. Водовозова, А.М. Козлов* Г.П. Гаенко, Н.С. Сапрыкина* Е.В. Моисеева, Н.В. Бовин, Ю.Г. Молотковский Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, Москва *Российский онкологический научный центр им. H.H. Блохина РАМН Известно, что малигнизированные клетки экспресси- также упрощает процедуру приготовления лекарственных руют на своей поверхности специфические углеводсвязы- липосом: монояамеллярные липосомы среднего диамет-вающие белки (мембранные лектины) в гораздо большей ра 100 нм получаются методом экструзии суммарной сус-степени, чем нормальные. Мы использовали это явление пензии всех компонентов. Мы синтезировали ряд липид-для адресной доставки липосом, нагруженных цитоток- ных производных известных противоопухолевых препа-сическим агентом, к клеткам опухолей. Специфичность ратов: сарколизина (мерфалана, Mrph), рубомицина и мембранных лектинов определялась с помощью визуаль- метотрексата. Разработан оригинальный метод синтеза ной оценки аффинности широкого набора синтезирован- углеводных векторов для липосом на основе гептадецило-ных углеводных (моно- и олигосахаридных) флуоресце- вого эфира полиэтиленгликоля (степень полимеризации инмеченых зондов - конъюгатов с полиакриламидом - к 6-9). Липидные производные Mrph в форме липосом с фиксированному на предметных стеклах клеточному ма- различными векторами проявили лучшие терапевтичес-териалу. В экспериментах in vitro показано, что липосо- кие свойства по сравнению с исходным Mrph на мышах с мы, несущие специфические липофильные гликоконъюга- экспериментальным лейкозом Р-388 (увеличение продол-ты (векторы), связываются с клетками лейкоза человека жительности жизни, УПЖ, в 2 раза), на модели мышей с HL-60 и аденокарциномы легких человека на 50-80% эф- высокой частотой спонтанного развития аденокарцино-фективнее, чем липосомы без вектора или липосомы с не- мы молочной железы (УПЖ в 4 раза). Данные первых активным углеводным лигандом, а при добавлении в их экспериментов на модели мышей с карциномой легкого состав липофильного производного сарколизина прояв- Лыоис - торможение скорости роста опухоли на 40%, ляют в 2-4 раза большую цитотоксическую активность. УПЖ на 20%. Полученные результаты свидетельствуют о Включение лекарства в липидный бислой липосом в виде перспективности предложенного нами подхода в области липофильного биодеградируемого предшественника по- направленной доставки противоопухолевых лекарств, зволяет уменьшить утечку препарата из липосомы как в Необходимы эксперименты по изучению биораспределе-кровотоке, так и на стадии ее взаимодействия с клеткой, а ния препаратов и оптимизации режимов их введения. ХИМИКО-ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ СТАНДАРТИЗАЦИЯ РутРсСо Л.Г. Гатинская, С.Ф. Голубева, H.A. Дмитричева Е.В. Игнатьева, Б.С. Кикотъ, И.А. Машалова, И.В. Ярцева Российский онкологический научный центр им.И.И.Блохина РАМН РутРсСо - окта(пиридиниометил)фталоцианин ко- ласти спектра. В связи с интенсивной окраской прозрач-бальта октахлорид - синтезирован в ФГУП “ГНЦ “НИО- ность раствора препарата определяли для 0,02% раство-ПИК” среди других водорастворимых фталоцианиновых ров. Содержание хлора определяли методом сжигания в комплексов кобальта(Н) в качестве потенциальных пре- колбе с кислородом по Шенигеру. Для количественного паратов для бинарной каталитической терапии злокаче- определения основного вещества разработана методика, ственных опухолей. В РОНЦ РАМН изучается противо- основанная на определении содержания кобальта после опухолевая активность каталитической системы на осно- разложения навески РутРсСо серной кислотой концент-ве комплекса РутРсСо с терафталом типа «сэндвич». Зада- рированной при нагревании, сплавления остатка с кали-ча настоящей работы - первичная химико-фармацевти- ем надсернокислым с последующим комплексонометри-ческая стандартизация РутРсСо. Подлинность препарата ческим титрованием раствора полученного плава. В ходе подтверждается электронным спектром поглощения, ха- химико-фармацевтического исследования определены так-рактерным для фталоцианинов, и его ИК-спектром. На- же следующие показатели: растворимость, pH, потеря в личие кобальта в молекуле РутРсСо подтверждается ха- массе при высушивании. Основные показатели качества рактерной реакцией с роданидом аммония после сжига- субстанции РутРсСо приведены в таблице 1 (стр. 19). ния препарата в присутствии концентрированной серной Работа поддержана Правительством г.Москвы. Авто-кислоты. Цветность раствора препарата охарактеризо- ры благодарят В.М.Негримовского и Е.А.Лукъянца за предо-вана интенсивностью полосы поглощения в видимой об- ставленные для исследования образцы РутРсСо.

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ №1/том1/2003

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ

Таблица 1.

Основные показатели качества субстанции RumPcCo серии 592-1

Описание Раство- римость Прозрач- ность раствора Цветность раствора pH Потеря в массе при высушивании, % Содержание хлора, % Количественное определение, %

Черный с фиолетовым оттенком кристал. порошок с металлическим блеском Растворим в воде 1:24 0,02 % водный раствор прозрачен При л=675 нм D для 0,0008 % водного р-ра 0,50 4,1 для 0,2 % водного р-ра 10,9 18,71 91,69

ИЗУЧЕНИЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ДЕЙСТВИЯ КОМПЛЕКСА АЦЕТИЛАЦЕТОНАТА МЕДИ С МЕЛФАЛАНОМ НА МОДЕЛИ КАРЦИНОМЫ ПОЧКИ

Р. Германна, Ю. Фихнаа, К. Унгерь, С Д. Задолинная“, В.П. Татарскийа, HAEMATO-basics, Biotechnologiepark TGZ-III, Germany, Luckenwaldeл Klinic für Tumorbiologie, Tumor Biologe Center, Germany, Freiburgb

5мг/кг. Во второй серии препараты давали с 10 по 14 день после перевивки опухоли в дозах: М - 5мг/кг, МОС*М - 5мг/ кг и 7,5мг/кг. Эксперименты I и II серий были закончены соответственно на 19 и 18 день с начала опытов. В первой серии экспериментов МОС*М снижал рост опухоли (по массе) до 70%, а мелфалан до 60% по сравнению с контролем. Ингибирование числа метастазов в легких при введении МОС*М достигало 66%, а при введении М - 40%. Количество метастазов в лимфоузлах кишечника снижалось с 40 (в контроле) до 0,6 и 2,4 в группах животных, получавших МОС*М и М соответственно. Во второй серии опытов торможение роста опухоли в группах МОС*М (7,5мг/ кг) и М (5мг/кг) составило 55 и 37% соответственно. Ингибирование метастазов в лимфоузлах животных этих групп достигло 100 и 28%>, а число метастазов в легких снизилось до 65 и 6%. Специально проведенные исследования не выявили антиангиогенезной активности МОС*М.

Таким образом, препарат МОС*М в ранние и поздние сроки лечения животных показал достоверную противоопухолевую и антиметастатическую активность.

Комплекс ацетилацегоната меди с мелфаланом - L-a-мино-Ь-пара-бис(Ь-лорэтил)-аминофенил-аланином (МОС*М) проявил противоопухолевую активность в экспериментах in vivo на опухолях различной этиологии (саркома, меланома, лейкемия). Представляло интерес изучить влияние этого соединения на рак почки.

Исследование проводилось на модели карциномы почки (RENKA) на мышах линии Balb. Эта модель является репрезентативной в оценке широкого спектра противоопухолевого действия новых препаратов так как дает возможность оценить не только торможение роста опухоли, но и выявить способность препарата ингибировать метастази-рование в лёгкие, селезёнку и лимфоузлы. Помимо этого, используемая модель позволяет оценить антиангиогенные способности препаратов.

Нами изучалось сравнительное действие препарата МОС*М и мелфалана (М) в зависимости от схемы и дозы их введения. В первой серии экспериментов препараты внут-рибрюшинно вводили с 1 по 7 день после перевивки опухоли в дозах: М - 5мг/кг веса животных, МОС*М - 2,5мг/кг и

МЕТОДЫ СТАНДАРТИЗАЦИИ БИОМАГНИТНЫХ СОРБЕНТОВ

Е.А. Голенкина Российский Онкологический научный центр им. Н.Н.Блохина РАМН, г. Москва

В последние годы в лаборатории медицинской биотехнологии НИИ ЭДиТО РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН совместно с Институтом биохимической физики РАН разрабатываются технологии синтеза мелкодисперсных магнитоуправляемых носителей и сорбентов для диагностики и терапии злокачественных опухолей. Целью данной работы явилось определение оптимальных физико-химических параметров магнитных сорбентов и создание комплекса методов для их стандартизации,

В работе использовали микросферы на основе магнетита и полистирола. Для ковалентного связывания протеинов поверхность микросфер активировали разными концентрациями n-толуолсульфонилхлорида (n-Ts-CI). Магнитные свойства частиц (намагниченность насыщения, остаточную намагниченность, коэрцитивную силу) измеряли на ВН-метре марки 7000А (USA). Размеры частиц определяли методом динамического лазерного светорассеяния на анализирующем устройстве Nicomp 370.

№1/том1/2003

РОССИЙСКИЙ БИОТБРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ