CC BY
35
© В. І. Шепітько, В. В. Кацай
УДК 611. 41+618. 36-001. 18-089. 843
В. І. Шепітько, В. В. Кацай
ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕМОМІКРОЦИРКУЛЯТОРНОГО РУСЛА СЕЛЕЗІНКИ ПРИ ТРАНСПЛАНТАЦІЇ КРІОКОНСЕРВОВАНОЇ ПЛАЦЕНТИ ТА ГОСТРОМУ АСЕПТИЧНОМУ ЗАПАЛЕННЯ ЧЕРЕВНОЇ ПОРОЖНИНИ У ЩУРІВ
ВДНЗ України «Українська медична стоматологічна академія» (м. Полтава)
Робота є фрагментом НДР «Експериментально-морфологічне вивчення дії трансплантатів кріокон-сервованої плаценти на морфофункціональний стан ряду внутрішніх органів», № державної реєстрації 010811001572.
Вступ. Як відомо, судинна система селезінки має низку особливостей, які забезпечують виконання функцій цього органу. У ворота селезінки входить селезінкова артерія, яка розгалужується на систему гілок, розміщених у трабекулах селезінки, що мають назву трабекулярних артерій. Трабекулярні артерії поділяються на артерії білої пульпи селезінки, навколо яких групуються лімфоцити і формуються пе-ріартеріальні лімфатичні піхви, та лімфоїдні вузлики селезінки [3, 8].
В останній час підвищився негативний вплив екологічно несприятливих факторів, як на організм в цілому, так і на органи імунної системи зокрема. Це приводить до порушення морфофункціонального стану гемомікроциркуляторного русла (ГМЦР), яке забезпечує формування Т- та В-лімфоцитів в селезінці [2, 3].
Застосування трансплантації кріоконсервованої плаценти людини, як коректора патологічних станів відкриває нові можливості. Фармакологічні засоби часто не можуть адекватно допомогти хворим, особливо у випадках захворювань нез’ясованого ґенезу, а також при дистрофічних та обмінних видах патології, це спонукає до пошуку альтернативних шляхів впливу з метою активації природного потенціалу репаративних можливостей цілісного організму [7]. В зв’язку з цим розробка нових методів терапії органів імунної системи шляхом створення і дослідження дії тканинних препаратів, особливо плаценти є актуальним [6].
Метою даного дослідження було вивчення змін гемомікроциркуляторного русла селезінки при трансплантації кріоконсервованої плаценти на тлі гострого асептичного запалення черевної порожнини.
Об’єкт і методи дослідження. Об'єктом дослідження були селезінки, що вилучені у 125 статевозрілих щурів-самців лінії «Вістар», масою 280-340г
Утримання тварин та експерименти проводилися відповідно до положень «Європейської конвенції про захист хребетних тварин, які використовуються для експериментів та інших наукових цілей» (Страсбург 1985), «Загальних етичних принципів експериментів на тваринах», ухвалених Першим національним конгресом з біоетики (Київ, 2001).
Тварини були розділені на 4 групи: 1-а група -контрольна (інтактні тварини); 2-а група - тварини яким була введена одноразово кріоконсервована плацента, 3-а група - тварини яким було змодельо-вано гостре асептичне запалення черевної порожнини шляхом внутрішньоочеревенного введення 5 мг Х-карагінену («Бідта” США) в 1 мл фізіологічного розчину на 1 тварину; 4-а група - тварини, яким на фоні змодельованого гострого асептичного запалення черевної порожнини була одноразово введена кріоконсервована плацента. Тварин виводили з експерименту шляхом передозування тіопентало-вого наркозу згідно встановлених термінів (1, 2, 3, 5, 7, 10, 14, 21, 30 доби) [5].
Фрагменти селезінки ущільнювали в парафін та епоксидну смолу за загальноприйнятою методикою. Зрізи фарбували гематоксилін-еозином та толуїдиновим синім. Отримані дані оцінювали по загальноприйнятих статистичних методах [1, 4].
Результати досліджень та їх обговорення. На поперечних перерізах мікросудин визначалось еритроцити, в просвіті судин - плазма крові. Ендо-теліоцити синусоїдів розташовані суцільним шаром на суцільній базальній мембрані. По поверхні гемо-капілярів визначались поодинокі лімфоцити, макрофаги, фібробласти, ретикулярні волокна.
В лімфоїдних вузликах селезінки щурів мор-фометричний аналіз діаметрів показав, що ар-теріолярна ланка ГМЦР при одноразовій трансплантації кріоконсервованої плаценти на 2-у добу суттєво спазмується (р<0,05), на 7-14-у доби суттєво (р<0,05) розширяється, а на 21-30-у доби відновлюється до значень контролю.
Діаметр капілярів показав, що на 2, 7, 14-у доби цей параметр більший від значень контролю. При цьому на 2-у добу при р<0,05, а на 7-у - при р<0,01, на 14-у - при р<0,05. Тобто йде поступове збільшення кровонаповнення капілярної ланки з піком на 7-у добу, а на 21-30-у доби цей параметр відповідає контролю.
Венули при одноразовому введенні ККП також збільшуються в діаметрі, але це збільшення є статистично не достовірним.
Аналіз діаметрів ГМЦР при змодельованому гострому асептичному запаленні черевної порожнини показав, що цей параметр в артеріолах (рис. 1) зменшується. Але зменшення його відбувається не рівномірно, якщо на 1-у добу зменшення діаметру статистично не достовірне, то на 2-у зменшення
-,-Д АРТ -в-Д КАП -*-Д ВЕН
Рис. 1. Динаміка змін діаметрів ГМЦР селезінки при змодельованому гострому асептичному запаленні черевної порожнини.
-Ф-ДАРТ Д КАП Д ВЕН
Рис. 2. Динаміка змін діаметрів ГМЦР селезінки при одноразовому введенні кріоконсервованої плаценти на тлі гострого асептичного запалення черевної порожнини.
діаметру є суттєвим (р<0,001), крім того це суттєве зменшення зменшується на 7-у добу. На 10-у добу йде суттєве збільшення діаметру від значень контролю при р<0,001. На 14-у добу йде різке зменшення цього показника від значень 10-ї доби та контролю (р<0,001). На 21-у добу зменшення діаметру від значень контролю суттєве але при р<0,05 і тільки на 30-у добу цей показник знаходиться в межах контролю.
Діаметр капілярів (рис. 1) протягом експерименту збільшувався включно до 30-ї доби. На 1-у добу збільшення діаметру, як і для артеріол, не суттєве. Вже на 2-у збільшення діаметру встановлено при р<0,05. На 3, 5, 7-у доби збільшення діаметрів в порівнянні з контролем суттєве при р<0,001, але між собою статистично не достовірне. Крім того порівняння діаметрів капілярів в терміни 3,5,7 діб з аналогічними термінами для артеріол суттєвих відмінностей не виявлено. Пік збільшення діаметру капілярів припадає на 10-у добу, цей показник суттєво більший від контролю та 7-ї доби спостереження. Порівняння значень діаметрів контролю та 30-ї доби показує, що останній в середньому більший від контролю, але значення його не суттєве при р<0,05.
Діаметр венул (рис. 1) протягом експерименту також суттєво збільшується. Але аналіз показників
діаметрів показує, що збільшення проходить не рівномірно. Так на 1-у добу збільшення, в порівнянні з контролем, суттєве при р<0,001, на 2-у добу цей показник зменшується в порівнянні з попереднім терміном (1-а доба) суттєво при р<0,01, але являється достатньо високим при порівнянні з групою контролю. Найбільшим показником та суттєво відмінним, у порівнянні з контролем, та після якого йде спад величини діаметра венул припадає на 3-у добу. Після цього терміну визначається незначне зменшення показників діаметрів венул протягом 5,7,10,14,21-ї діб, але вони є суттєво більшими від групи контролю. І тільки на 30-у добу цей показник є більшим але не суттєво відрізняється від значень в контролі.
Реакція артеріолярної ланки (рис. 2) ГМЦР при гострому асептичному запаленні черевної порожнини на введення кріоконсервованої плаценти показує, що суттєве зменшення діаметрів виявляється протягом 1, 2, 3 доби експерименту при р<0,01. Починаючи з 5 і до 30 доби значення діаметру суттєво не відрізняється від контролю.
Діаметр капілярів (рис. 2) суттєво збільшується на 1-3 доби, а потім поступово зменшується, в порівнянні з попередніми термінами, до 10-ї доби, залишаючись суттєво більшим від контролю. На 14-30 доби показник діаметрів ланок ГМЦР суттєво не відрізняється від контролю, тобто відновлення цього показника припадає на 14 добу.
Венулярна ланка (рис. 2) ГМЦР селезінки суттєво реагує на введення кріоконсервованої плаценти за рахунок збільшення діаметрів на протязі 1-5 діб, з піком на 5 добу. Починаючи з 7 доби визначається зменшення діаметрів відносно попереднього терміну, але воно не суттєве з групою контролю, тобто відновлення відтоку крові починається з 7-ї доби.
Висновки.
1. На одноразове введення кріоконсервованої плаценти ГМЦР селезінки реагує суттєвими змінами діаметрів артеріолярної та капілярної ланок протягом 2-7 діб експерименту. На 14-у добу відмічається відновлення вивчених параметрів до показників в контролі, що вказує на незначну імунну відповідь та перебіг в межах фізіологічних реакцій.
2. При гострому асептичному запаленні черевної порожнини реакція ГМЦР суттєво визначається протягом всіх термінів експерименту.
3. Введення кріоконсервованої плаценти на тлі експериментального гострого асептичного запалення черевної порожнини викликає відновлення діаметрів ГМЦР до значень групи контролю вже з 5-7 доби, що вказує на лікувальні властивості біологічно активних речовин плаценти.
Перспективи подальших розробок. В подальшому планується вивчення реакції гемомікроцирку-ляторного русла органів імунної системи на трансплантацію кріоконсервованої плаценти, як в нормі, так і при корекції патологічних станів викликаних в результаті екологічних негараздів.
Література
1. Автандилов Г. Г. Медицинская морфометрия / Г. Г. Автандилов. - Москва: Медицина. - 1990. - 178 с.
2. Влияние микроэлемента цинка на развитие асептического воспаления слизистой оболочки в области зева у крыс, вызванного введением карагинена / А. С. Козлюк, О. Ф. Мельников, М. Д. Тимченко, С. В. Тимченко // Журнал вушних, носових і горлових хвороб. - Київ, 2001. - № 6. - С. 22-26.
3. Золотаревская М. В. Особенности ультраструктуры селезенки после введения иммунотропных препаратов в експерименте / М. В. Золотаревская // Клінічна анатомія та оперативна хірургія. - 2011. - Т. 10, № 4 (38). - С. 23-28.
4. Лапач С. Н. Статистические методы в медико-биологических исследованиях с использованием Exel / С. Н. Лапач,
A. В. Чубенко, П. Н. Бабич. - Киев: Морион, 2000. - 320 с.
5. Общие этические принципы работы с экспериментальными животными при проведении медицинских и биологических исследований / Національний конгрес з біоетики (Київ 17-20 вересня 2001 р.) // Ж. АМН України. - 2001. - Т. 7, № 4. - С. 814-816.
6. Шепітько В. І. Дослідження активності деяких дегідрогеназ у тканинах алогенної плаценти при дії гіпотермії /
B. І. Шепітько // Вісн. проблем біології і медицини. - 2002. - Вип.. 5. - С. 101-104.
7. Шепітько В. І. Морфофункціональний стан селезінки після алотрансплантації плаценти / В. І. Шепітько // Вісн. морфології. - 2003. - Т. 9, № 2. - С. 198-200.
УДК 611. 41+618. 36-001. 18-089. 843
ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕМОМІКРОЦИРКУЛЯТОРНОГО РУСЛА СЕЛЕЗІНКИ ПРИ ТРАНСПЛАНТАЦІЇ КРІОКОНСЕРВОВАНОЇ ПЛАЦЕНТИ ТА ГОСТРОМУ АСЕПТИЧНОМУ ЗАПАЛЕННЯ ЧЕРЕВНОЇ ПОРОЖНИНИ У ЩУРІВ Шепітько В. І., Кацай В. В.
Резюме. Дослідження проведено на 125 статевозрілих щурах-самцях лінії «Вістар». На одноразове введення кріоконсервованої плаценти ГМЦР селезінки реагує суттєвими змінами діаметрів артеріолярної та капілярної ланок протягом 2-7 діб експерименту. На 14-у добу відмічається відновлення вивчених параметрів до показників в контролі, що вказує на незначну імунну відповідь та перебіг в межах фізіологічних реакцій. При гострому асептичному запаленні черевної порожнини реакція ГМЦР суттєво визначається протягом всіх термінів експерименту. Введення кріоконсервованої плаценти на тлі експериментального гострого асептичного запалення черевної порожнини викликає відновлення діаметрів ГМЦР до значень групи контролю вже з 5-7 доби, що вказує на лікувальні властивості біологічно активних речовин плаценти.
Ключові слова: щур, селезінка, гемомікроциркуляторне русло, кріоконсервована плацента.
УДК 611. 41+618. 36-001. 18-089. 843
ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕМОМИКРОЦИРКУЛЯТОРНОГО РУСЛА СЕЛЕЗЕНКИ ПРИ ТРАНСПЛАНТАЦИИ КРИ-ОКОНСЕРВИРОВАННОЙ ПЛАЦЕНТЫ И ОСТРОМ АСЕПТИЧЕСКОМ ВОСПАЛЕНИИ БРЮШНОЙ ПОЛОСТИ У КРЫС
Шепитько В. И., Кацай В. В.
Резюме. Исследование проведено на 125 половозрелых крысах-самцах линии «Вистар». На однократное введение криоконсервированной плаценты ГМЦР селезенки реагирует существенными изменениями диаметров ар-териолярного и капиллярного звеньев в течение 2-7 суток эксперимента. На 14-е сутки отмечается восстановление изученных параметров к показателям в контроле, что указывает на незначительній иммунный ответ и течение в пределах физиологических реакций. При остром асептическом воспалении брюшной полости реакция ГМЦР существенно определяется в течение всех сроков эксперимента. Введение криоконсервированной плаценты на фоне экспериментального острого асептического воспаления брюшной полости вызывает восстановление диаметров ГМЦР до значений группы контроля уже с 5-7 суток, что указывает на лечебные свойства биологически активных веществ плаценты.
Ключевые слова: крыса, селезенка, гемомикроциркуляторного русло, криоконсервированная плацента.
ийС 611. 41+618. 36-001. 18-089. 843
Characteristic of Hemomicrocirculatory Bed of Spleen with Transplantation of Cryopreserved Placenta and Acute Aseptic Inflammation of the Abdominal Cavity of Rats Shepitko V. I., Katsay V. V.
Summary. The research was conducted on 125 adult male rats line “Wistar”. The hemomicrocirculatory bed of spleen reacts with significant changes in the diameter of the capillary and arteriolar sections to a single injection of cryopreserved placenta within 2-7 days of the experiment. The researched parameters has been restored on the 14th day. This indicates a minor immune response and flow within the physiological reactions. The reaction of hemomicrocirculatory bed is determined during all periods of the experiment at acute aseptic inflammation of the abdominal cavity. Transplantation of cryopreserved placenta against the background of experimental acute aseptic inflammation of the abdominal cavity causes recovery of diameters of hemomicrocirculatory bed to values of the control group from 5-7 days. This indicates that biologically active substances of placenta have therapeutic properties.
Key words: rat, spleen, hemomicrocirculatory bed, cryopreserved placenta.
Стаття надійшла 4. 02. 2013 р.
Рецензент - проф. Шерстюк О. О.
