CC BY
70
УДК 612.018: 571.113: 618.1
гормональные и генетические особенности женщин с невротическими психическими расстройствами
Дюдмила Александровна Рядовая1, Елена владимировна гуткЕвиЧ1, любовь Аглямовна АгАРковА2, наталья Алексеевна гАБитовА2
1НИИ психического здоровья СО РАМН 634014, г. Томск, Сосновый бор
2НИИ акушерства, гинекологии и перинатологии СО РАМН 634063, г. Томск, ул. Сергея Лазо, 5
Исследовали содержание стероидных и тиреоидных гормонов и полиморфизм генов 5-HTR2A и 5-НТТ у психически здоровых женщин и женщин с невротическими психическими расстройствами (истерическими и расстройствами адаптации с преобладанием депрессивных реакций) репродуктивного возраста. Выявлены гормональные и генетические особенности.
ключевые слова: стероидные и тиреоидные гормоны, гены серотонинового обмена.
введение
Беременность и рождаемость типично связаны с положительными эмоциями и с материнством, но действительность состоит в том, что так дело обстоит не для всех женщин и не для всех беременностей. Вынашивание беременности может нарушаться по многим причинам, связанным со здоровьем как матери, так и плода. Уменьшение числа детей в семьях в развитых странах делает чрезвычайно важным здоровье женщины и оптимальный исход каждой беременности. В современном мире женщина постоянно подвергается воздействию неблагоприятных, потенциально стрессогенных факторов, следствием чего являются невротические психические расстройства. В то же время инфантилизм — биологический, психофизиологический и психический — является базисом многих патологических состояний, в том числе истерических [1]. Реакция эндокринной системы организма при этом обусловлена усилением активности гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой и гипоталамо-гипофизарно-тиреоидной систем, находящихся в реципрокных отношениях с серотонинергической системой мозга [2, 3]. По данным ряда авторов [4, 5, 6], уменьшение содержания биогенных аминов в головном мозге коррелирует с гиперпродукцией кортикостероидов и снижением концентрации тиреоидных гормонов.
Метаболизм серотонина играет определенную роль в формировании и проявлении симптомов психических расстройств [7, 8, 9].
Целью исследования являлось изучение гормональных показателей и генетических маркеров у женщин репродуктивного возраста, психически здоровых и с невротическими психическими расстройствами (на модели истерических расстройств невротического уровня и расстройств адаптации с преобладанием депрессивных реакций). В задачи исследования входило: 1) Определение содержания кортизола и дегидроэпиандростерона у психически здоровых лиц, пациентов с истерическими невротическими расстройствами и расстройствами адаптации с преобладанием депрессивных реакций. 2) Исследование уровней трийод-тиронина, тироксина и тиреотропного гормона. 3) Изучение полиморфизма гена серотонино-вого рецептора типа 2А 5-НТЯ2А и гена переносчика серотонина 5-НТТ.
Материал и методы
Исследование проводили в группе психически здоровых лиц (68 женщин, средний возраст 38,8 ± 13,8 лет), лиц с истерическими расстройствами невротического уровня — F44, МКБ-10 (93 женщины, средний возраст 41,3 ± 14,3 лет) и лиц с расстройствами адаптации с преобладанием депрессивных реакций — F 43.20, F43.21, F43.22, МКБ-10 (60 женщин, средний возраст 42 ± 13,1 лет), исследования соответствовали этическим стандартам био-этического комитета, на их проведение были получены информированные согласия. У здоровых лиц и в группе лиц с психическими расстройствами кровь для биологических
Рядовая Л.А. — м.н.с. лаборатории клеточных и молекулярно-биологических исследований, e-mail: [email protected] Гуткевич Е.В. — вед.н.с. отделения эндогенных состояний Агаркова Л.А. — директор
Габитова Н.А. — ученый секретарь, e-mail: [email protected]
исследований брали из локтевой вены утром натощак при поступлении в стационар. Концентрацию гормонов дегидроэпиандросте-рона (ДГЭАС), кортизола, трийодтиронина (Т3), тироксина (Т4) и тиреотропного гормона (ТТГ) определяли в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа в соответствии с инструкцией по применению наборов реактивов для иммуноферментного определения гормонов в сыворотке крови человека (ЗАО «Алкор Био», Санкт-Петербург; ЗАО «ВЕКТОР-БЕСТ», Новосибирск).
Выделение ДНК из венозной крови проводили стандартным методом с использованием протеиназы К и фенол-хлороформа [10]. Создание банка ДНК и генетические исследования проводились на базе лаборатории клеточных и молекулярно-биологических исследований (руководитель лаборатории — д.м.н., проф. С.А. Иванова) и лаборатории клинической генетики (руководитель лаборатории — д.б.н. В.Е. Голим-бет) ГУ НЦ психического здоровья РАМН.* Для определения аллельного полиморфизма в локусе Т102С гена 5-HTR2A проводили полимеразную цепную реакцию (ПЦР) с помощью праймеров 5'-TCTGCTACAAGTTCTGGCTT-3, и 5'-CTGCAGCTTTTTCTCTAGGG-3', для анализа полиморфизма А-1438^ гена 5-HTR2A в реакционную смесь вносили праймеры с последовательностью нуклеотидов 5'-AAGCTG-CAAGGTAGCAACAGC-3' и 5'-ААССААСТТА-ТТТССТАССАС-3'. Для выявления рестрикционного полиморфизма реакционную смесь обрабатывали ферментом Mspl в течение 12 часов при 37 °С с последующим разделением полученных фрагментов в 3% агарозном геле, окрашенным бромистым этидием. Для определения полиморфизма в локусе VNTR-17 гена 5-НТТ проводили ПЦР с использованием олиго-нуклеотидных праймеров 5'-GTCAGTATCA-CAGGCTGCGAG-3' и 5'-TGTTCCTAGTCT-TACGCCAGTG-3', полиморфизм в локусе 5'-HTTLPR гена 5-НТТ выявляли с помощью праймеров 5'-GGCGTTGCCGCTCGTAATGC-31 и 5'-GAGGGACTGAGCTGGACAACC-3'. Полученные VNTR-17 и 5'-HTTLPR ПЦР-фрагменты разделяли в 5%-ном полиакриламидном геле. Фрагменты визуализировали и идентифицировали в УФ-свете при длине волны 495 нм.
Статистическую обработку результатов производили с помощью программ STATISTICA, версия 6.0 для Windows, Microsoft Excel и GraphPad Prism, версия 5.0. Достоверность различий определяли с использованием непараметрического рангового критерия Краскела-Уоллиса. Нормальность генеральной совокупности оценивали с помощью критерия Колмогорова-Смирнова. Для корреляционного анализа использовали критерий Спирмена. Для проверки соответствия эмпирического распределения частот генотипов теоретически ожидаемому равновесному распределению Харди-Вейнберга использовался модифицированный критерий х2 Пирсона (р), определяемый с помощью программы GraphPad Prism, версия 5.0. При попарном сравнении частот аллелей и генотипов в группах психически здоровых лиц и лиц с психическими расстройствами применяли критерий х2 (р) с поправкой Йетса для небольших выборок. Различия считали достоверными при уровне статистической значимости р < 0,05.
Результаты
Изучение стероидных гормонов в сыворотке крови показало, что концентрация кортизола у лиц с расстройствами адаптации с преобладанием депрессивных реакций достоверно выше соответствующего показателя в группе лиц с истерическими невротическими расстройствами и психически здоровых людей (р < 0,05) (табл. 1). Содержание ДГЭАС у пациентов с расстройствами адаптации достоверно снижено по сравнению с контролем и показателями в группе лиц с истерическими расстройствами (р < 0,05). Соотношение ДГЭАС к кортизолу, характеризующее анаболическо-катаболический баланс и устойчивость организма к различным нарушениям [11], снижено в группе лиц с расстройствами адаптации по сравнению со значениями в группе психически здоровых людей и другой группы пациентов (р < 0,05).
Исследование тиреоидных гормонов выявило повышенный уровень содержания трий-одтиронина (Т3) у лиц с истерическими невротическими расстройствами по сравнению с данными в группе больных с расстройством адаптации с преобладанием депрессивных реакций и в группе психически здоровых
* Выражаем благодарность за оказанную помощь в выполнении генетических исследований научным сотрудникам лаборатории клинической генетики (руководитель лаборатории — д.б.н. В.Е. Голимбет) ГУ НЦ психического здоровья РАМН канд.б.н. Лаврушиной О.М. и д.м.н. Коровайцевой Г.И.
лиц (табл. 2). Концентрация тироксина (Т4) у больных истерическими невротическими расстройствами достоверно выше показателей психически здоровых лиц и значений в группе пациентов с расстройствами адаптации (р < 0,05). У лиц с расстройствами адаптации выявлен статистически значимый повышенный уровень тиреотропного гормона (ТТГ) по сравнению со значениями психически здоровых лиц (р < 0,05). Таким образом, для пациентов
с истерическими невротическими расстройствами характерна повышенная концентрация трийодтиронина, тироксина и тиреотропного гормона при физиологических концентрациях кортизола, ДГЭАС и соотношения ДГЭАС/ кортизол. Для лиц с расстройствами адаптации с преобладанием депрессивных реакций характерен высокий уровень концентрации кортизола, снижение содержания ДГЭАС и соотношения ДГЭАС/кортизол на фоне
Таблица 1
Содержание стероидных гормонов у лиц с психической адаптацией и дезадаптацией
Показатель кортизол (нмоль/л) дгэас (мкг/мл) дгЭАс/кортизол
Пациенты с истерическими невротическими расстройствами 489,75 ± 19,3 2,59 ± 0,19 0,58 ± 0,04
Пациенты с расстройствами адаптации с преобладанием депрессивных реакций 642,87 ± 29,05*# 1,51 ± 0,1*# 0,26 ± 0,02*#
Психически здоровые лица 443,13 ± 23,00 2,44 ± 0,24 0,60 ± 0,07
Примечание: здесь и в табл. 2 и 3: * — р < 0,05 по сравнению с психически здоровыми лицами; # — р < 0,05 по сравнению с пациентами с истерическими невротическими расстройствами.
Таблица 2
Содержание тиреоидных гормонов у лиц с психической адаптацией и дезадаптацией
Показатель трийодтиронин т3 (нмоль/л) тироксин т4 (пмоль/л) тиреотропный гормон (ттг) (ммЕ/л)
Пациенты с истерическими невротическими расстройствами 1,71 ± 0,12 23,68 ± 1,07* 1,8 ± 0,21
Пациенты с расстройствами адаптации с преобладанием депрессивных реакций 1,26 ± 0,02 14,69 ± 0,53# 2,63 ± 0,3*
Психически здоровые лица 1,34 ± 0,04 17,64 ± 1,43 1,2 ± 0,15
Таблица 3
Частоты генотипов полиморфных локусов Т102С и A-1438-G гена 5-HTR2A
локус т102с гена 5-ШГ2А локус А-1438-С гена 5-ШТ2А
тт (А1А1) абс. % ) % 2 ^ 5 • < о (б а сс (А2А2) абс. % АА абс. % ас абс. % сс абс. %
Пациенты с расстройством адаптации * ,3 8, 3 18 50,0* 15 41,7 2 12,5 6 37,5 8 50,0
Пациенты с истерическим расстройством 9 19,6 15 32,6 ,8 7, 2 2 5 11,4* 11 34,3* 19 54,3*
Психически здоровые лица ,9 5, 2 2 2 4, 3 9 2 34 40,0 19 22,3 39 45,9 27 31,8
снижения концентрации трийодтиронина и тироксина и повышения уровня тиреотроп-ного гормона.
Генотипирование по локусу Т102С гена серотонинового рецептора типа 2А 5-HTR2A выявило статистически значимые различия между распределением генотипов А1А1 и А1А2 у пациентов с расстройствами адаптации с преобладанием депрессивных реакций по сравнению с психически здоровыми лицами (х2 = 4,26; df = 1; р = 0,02) (табл. 3). Выявлена тенденция различий между распределением генотипов А1А1, А1А2 и А2А2 локуса Т102С среди пациентов с расстройствами адаптации и контрольной группой (х2 = 5,4; df = 2, р = 0,07). Статистический анализ выявил достоверные различия между распределением генотипов АА, AG и GG локуса А-1438^ гена 5-HTR2A у пациентов с истерическими расстройствами и психически здоровых людей (х2 = 7,2; ^ = 2; р = 0,03).
Анализ полиморфизма локуса VNTR-17 гена переносчика серотонина 5-НТТ выявил достоверные различия между распределением генотипов 12 12, 12 10 и 12 9 среди лиц с расстройствами адаптации и психически здоровых людей (х2 = 7,2; df = 2; р = 0,03) и тенденцию различий между распределением этих генотипов среди пациентов с истерическими расстройствами и контрольной группой (х2 = 5,4; df = 2, р = 0,07). Частота аллеля L локуса 5'-HTTLPR гена 5-НТТ выше у пациентов с расстройствами адаптации с преобладанием депрессивных реакций, чем частота этого аллеля у лиц с истерическими невротическими расстройствами и психически здоровых лиц (65,1%, 61,7% и 59,2% соответственно). Таким образом, показана ассоциация локуса Т102С гена рецептора серотонина типа 2А 5-HTR2A с расстройствами адаптации с преобладанием депрессивных реакций и локуса А-1438^ этого же гена с истерическими невротическими расстройствами. Лица с истерическими расстройствами и расстройствами адаптации отличаются распределением генотипов локуса У№ГК.-17 и 5'-HTTLPR гена переносчика серотонина 5-НТТ.
Заключение
Состояние психического здоровья женщин репродуктивного возраста обусловливается нарушениями функциональных возможностей всей адаптивной системы в целом, при этом не только изменяется абсолютная концентрация гормо-
нов, но и нарушается равновесное состояние между ними. Полиморфизм генов-кандидатов психических расстройств и их генопродукты с большой вероятностью образуют единую ось, которая участвует в индивидуальном ответе на стрессорные ситуации.
Работа выполнена при поддержке грантами РГНФ № 06-06-00691а, № 07-06-95673и/М и № 08-06-00284а.
Литература
1. Семке В.Я. Превентивная психиатрия. Томск: Изд-во Том. Ун-та, 1999. 403 с.
Semke V.Ya. Preventive psychiatry. Tomsk: Tomsk University publishing House, 1999. 403 p.
2. Ressler K.J., Nemeroff C.B. Role of serotonergic and noradrenergic systems in the pathophysiology of depression and anxiety disorders. Depression and Anxiety 2000. 12 (Suppl. 1): 2-19.
3. Rosmond R., Bouchard C, Bjorntorp P. 5-HT2A receptor gene promoter polymorphism in relation to abdominal obesity and cortisol. Obes. Res. 2002. 10 (7): 585-589.
4. Bauer M, Heinz A., Whybrow P.C. Thyroid hormones, serotonin and mood: of synergy and significance in the adult brain. Mol. Psychiatry 2002. 7 (2): 140-156.
5. Bliss E.L., Zwanziger J. Brain amines and emotional stress. J. Psychiat. Res 1966. 4: 189-198.
6. Tafet G.E., Bernardi R. Psychoneuroendocrinolo-gical links between chronic stress and depression. Prog. Neuropsychopharmacol. Biol. Psychiatry 2003. 27 (6): 893-903.
7. Голимбет В.Е. Молекулярно-генетические исследования эндогенных психозов. Сибирский вестник психиатрии и наркологии 2008. 1 (48): 37-41.
Golimbet V.E. Molecular-genetic investigations of endogenous psychosis. Sibirski vestnik psikhiatrii i narkologii 2008. 1 (48): 37-41.
8. Зозуля А.А., Кост Н.В., Балашов A.M. Нейроэндокринные пептиды в регуляции тревоги // Актуальные вопросы теоретической и клинической психоэндокринологии: Сборник науч. трудов. М. 2007. 106-118 с.
Zozulya A.A., Kost N.V., Blashov A.M. Neuroendocrine peptides in anxiety regulation // Actual problems of theoretical and clinical psychoendocrinology. Collection of scientific papers М.; 2007. 106-118 р.
9. Bondy В., Erfurth A., de Jonge S. et al. Possible association of the short allele of the serotonin transporter promoter gene polymorphism (5-HTTLPR) with violent suicide. Mol Psychiatry 2000. 5: 193-195.
10. Sambrook J., Fritsch E.F., Maniatis T. Molecular cloning. N.Y.: Cold Spring Harbor Lab.Press, 1989. 923 p.
11. Гончаров Н.П., Кация Г.В., Нижник А.Н. Деги-дроэпиандростерон и функции мозга. Вестник Российской АМН 2005. 8: 37-43 с.
Goncharov N.P., Katsiya G.N., Nizhnik A.N. Dehydro-epiandrosterone and brain functions. Vestnik Rossiiskoi AMN, 2005. 8: 37-43 р.
hormonal and genetic peculiarities of women with psychoneurotic disorders
Lyudmila Aleksandrovna RYADovAYA1, Elena vladimirovna GuTKEvicH1, Lyubov Aglyamovna AGARKovA2, Nataliya Alekseevna GABITOvA2
institute of the Russian Academy of Medical Sciences Research Institute for mental health of Siberian Branch RAMS Sosnovyi Bor settlement, Tomsk, 634014
2Institute of the Russian Academy of Medical Sciences Research Institute for obstetrics, gynecology, and perinatology of Siberian Branch RAMS
5, Sergei Lazo str., Tomsk, 634063
We study concentrations of steroid and tireoid hormones and polymorphic variants of genes 5-HTR2A and 5-HTT at mentally healthy women and women with dissociative (conversion) disorders and patients with adjustment disorders of reproduction age. We revealed the hormonal and genetic peculiarities.
Key words: steroid and thyreoid hormones, genes of serotonin exchange.
Ryadovaya L.A. — the younger scientific employee of laboratory of cellular and molecular-biological investigations, e-mail: [email protected]
Gutkevich E.V. — the leading scientific employee of department of schizophrenic disorders, e-mail: [email protected] Agarkova L.A. — director
Gabitova N.A. — academic secretary, e-mail: [email protected]
