Таблица 2
Результаты культурально-биологических исследований проб почвы при санации дезинфектантами на наличие микобактерий
Вид дезинфектанта, концентрация, время экспозиции Взятие образцов на глубине Результат биопробы Срок падежа морских свинок Первичный рост культур с биопробы
Вироцид 2,5%, 3 ч Поверхность 5 см 10 см 15 см 20 см + + + + + На 33-41-й день На 48-57-й день
Бэби Дез Ультра 50%, 3 ч Поверхность 5 см 10 см 15 см 20 см + + + + На 38-47-й день На 49-63-й день
Поверхность +
5 см +
Бромосепт-50 5%, 3 ч 10 см + На 31-37-й день На 51-56-й день
15 см +
20 см +
Выводы
1. В почве M. bovis сохраняют свою жизнеспособность на поверхности и глубине (5, 10, 15, 20 см) при обработке дезинфектантами: Вироцид 0,5%-, 2,5%-ный; Бэби Дез Ультра 10%-ный; Бромосепт-50 1%-, 5%-ный растворы с экспозицией 1, 2, 3 ч с увеличенным объемом до 17,7 л/м2, а также с регламентированной нормой инструкцией дезинфицирующих средств
0,2-0,5 л/м2.
2. Раствор Бэби Дез Ультра 50%-ный с экспозицией 1, 2, 3 ч оказал губительное воздействие на M. bovis, находящиеся в почве на поверхности, а на глубине 5, 10,
15, 20 см микобактерии сохраняли свою способность расти и размножаться на питательных средах и оказывали вирулентные свойства в отношении лабораторных животных.
Библиографический список
1. Бакулова И.А., Третьякова А.Д. Руководство по общей эпизоотологии. — М.: Колос, 1979. — 424 с.
2. Шаманский Г.И. Мараловодство на Алтае и болезни маралов. — М., 1931. — С. 27-28.
3. Наставление по диагностике туберкулёза. — М., 2002. — 64 с.
+ + +
УДК 619:636.32/38-053.31:591.46:611-018 Ю.Н. Фисенко,
Н.И. Рядинская, С.Г. Катаманов
ГИСТОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ РЕПРОДУКТИВНЫХ ОРГАНОВ САМОК ОВЕЦ ЗАПАДНО-СИБИРСКОЙ МЯСНОЙ ПОРОДЫ
Ключевые слова: гистология, репродуктивные органы, самка, овца, западносибирская порода, мясная порода.
Введение
Воспроизводительная функция овец тесно связана с многочисленными изменениями, протекающими в организме и, особенно в половой системе, эти изменения в зависимости от условий существования, могут быть по-разному выражены у новых пород [1].
Западно-сибирская мясная порода создавалась в период с 1998 по 2010 гг. и была утверждена весной 2011 г. на базе племенного завода ОАО «Степное» Родинского района Алтайского края. В качестве материнской основы породы были использованы кулундинские короткожирнохвостые овцы, которые скрещивались с баранами южной мясной породы с дальнейшим разведением помесей желательного типа «в себе». Овцы данной породы являются скороспелыми животными. Для них свойственна повышенная
полиэстричность, позволяющая получать и выращивать приплод в те сезоны года, которые неприемлемы для других пород, а высокая интенсивность роста молодняка обеспечивает возможность их реализации на мясо в 6-7-месячном возрасте [2].
Гистологическое строение полового аппарата представляет как теоретический интерес в аспекте возрастных и породных особенностей онтогенеза, так и практическую ценность в отношении определения степени готовности к воспроизводству и установления продолжительности племенного использования животных [3, 4]. Поэтому целью наших исследований стало изучить гистологические особенности репродуктивных органов у овец западно-сибирской мясной породы в постнатальном онтогенезе.
Задачи исследования:
1) изучить фолликулогенез и особенности микроструктуры яичника у овец западно-сибирской мясной породы;
2) исследовать динамику структурных показателей стенки маточных труб и матки у исследуемых овец в постнатальном онтогенезе.
Объекты и методы
Материал для исследования брали от овец западно-сибирской мясной породы в возрасте 1 сут., 1, 4, 6, 8 и 12 месяцев, в количестве 18 гол. в ОАО «Степное» Ро-динского района Алтайского края.
Для выявления структурных компонентов органов материал отбирали сразу после убоя животных и фиксировали в 10%-ном растворе формалина. После фиксации материал уплотняли с помощью заливки в парафин. Срезы толщиной 2-7 мкм получали на санном микротоме для парафиновых срезов (МПС-2) и окрашивали гематоксилином Эрлиха с эозином, хромотропом 2 В с водным голубым по Слинченко [5].
Морфометрию проводили с помощью микроскопа марки ZEISS Lab. A1, AxioCam ERc5s Configuration Tool, для подсчета структурных компонентов использовали программу Axiovision Rel. 4.8. Полученный числовой материал микрометрических измерений подвергали статистической обработке с использованием стандартных компьютерных программ Microsoft Excel, «Биометрия», учебного пособия по биометрии [6].
Результаты исследований
У исследуемых овец яичник с поверхности покрыт зачатковым эпителием, толщина которого увеличивается от 2,8±0,06 мкм у новорожденных до 14,0±0,06 мкм у 12 месячных (рис. 1). С возрастом зачатковый эпителий в отдельных участках уплощается. Под эпителием располагается белочная
оболочка из плотной соединительной ткани, толщиной от 5,5±0,06 до 19,2±0,15 мкм соответственно, которая также претерпевает возрастные изменения (рис. 1).
В мозговой зоне, толщиной от
50,7±5,02 мкм у животных в возрасте 1 сут. до 111,0±0,55 мкм у животных 12 мес. расположены крупные кровеносные, лимфатические сосуды, нервы и соединительная ткань (рис. 1).
В корковой зоне толщиной от
92,7±11,95 мкм у новорожденных до 117,0±0,26 мкм у двенадцатимесячных заложены фолликулы, которые находятся на различных стадиях развития и делятся на: примордиальные фолликулы в количестве с 125,0±5,20 до 90,0±0,58 шт. в период с 1 сут. до 12 месяцев; первичные фолликулы в количестве с 5,0±0,58 до 7,0±0,58 шт.; вторичные фолликулы в количестве — с 3,0±0,58 до 6,0±0,58 шт.; третичные фолликулы в количестве с 3,0±0,33 до 12,0±0,88 шт. соответственно. Между фолликулами располагается соединительная ткань, где проходят сосуды и нервы.
140
120
100
80
60
40
20
■ 1-х суток
□ 1 месяц
□ 4 месяца
■ 6 месяцев
□ 8 месяцев 12 месяцев
Корковый Мозговой Зачатковый Белочная
слой слой эпителий оболочка
0
Рис. 1. Толщина слоев в яичнике у самок овец западно-сибирской мясной породы
в постнатальном онтогенезе, мкм
У новорожденных ягнят в корковой зоне располагаются примордиальные фолликулы, которые имеют округлую форму с крупным шаровидным ядром в центре, снаружи окружены мембраной и одним слоем плоских фолликулярных клеток; первичные фолликулы, характерным признаком которых является однослойный плоский эпителий и развивающиеся вторичные фолликулы с фолликулярной полостью.
В яичниках ягнят месячного возраста появляются третичные фолликулы, в которых имеется полость с хорошо выраженным яйценосным бугорком и ооцитом, зернистый слой — гранулеза и соединительнотканный слой — тэка. Корковая зона у ягнят этого возраста хорошо сформирована (рис. 2).
У ярок в возрасте 4 мес. на поверхности вторичных фолликул при окраске хромотропом 2В с водным голубым обнаруживается блестящая оболочка в виде яркорозового слоя, которая является продуктом деятельности овоцита и фолликулярных клеток. В крупных третичных фолликулах имеется хорошо выраженная гранулеза, а с 6- до 8-месячного возраста наблюдается ее интенсивный рост. В яичниках годовалых ярок отмечается увеличение кровеносных
сосудов и образование лунок лопнувших фолликулов, являющихся следствием овуляции. Все фолликулы в диаметре достоверно увеличиваются с периода новорожденности до годовалого возраста, а с 4 месяцев появляется сформированное желтое тело диаметром 106,9±0,90 мкм. Наличие желтого тела в яичниках свидетельствует о появлении у них полноценных половых циклов и связывается с наступлением половой зрелости и высоким темпом роста яичников, следовательно, и влияет на способность этих овец к оплодотворению (рис. 2, табл. 1).
Гистологическое строение маточных труб характеризуется наличием трех оболочек — слизистой, мышечной и серозной, толщина которых к 12 месяцам достоверно увеличивается по отношению к новорожденным: слизистой — в 2 раза, мышечной — в 4, серозной — в 3 раза (табл. 2).
В стенке маточной трубы обнаружены хорошо развитые продольные первичные и вторичные складки, эпителий, покрывающий слизистую этих складок, однослойный призматический мерцательный, имеет реснички.
ИГ
Ж
&
¥
сГ
Рис. 2. Количество фолликул в яичнике у самок овец западно-сибирской мясной породы
в постнатальном онтогенезе, шт.
Таблица 1
Динамика диаметра фолликулов у самок овец западно-сибирской мясной породы, мкм
Возраст животного Примордиальные фолликулы Первичные фолликулы Вторичные фолликулы Третичные фолликулы Желтое тело
1 сутки 2,9±0,09 27,0±1,56 39,2±5,46 - -
1 месяц 4,05±0,78* 29,8±0,17* 47,8±1,07* 224,1± 10,91 -
4 месяца 6,1±0,12'” 36,5±8,57* 85,1 ± 7,01” 448,2± 140,30* 106,9±0,90
6 месяцев 6,9±0,03'” 39,5±7,91* 87,0±7,01” 453,2±141,45* 109,0±0,92*
8 месяцев 8,4±0,64 42,4±8,08* 89,4±6,96" 552,1±86,43 111,7±0,46"
12 месяцев 8,6±0,61 44,4±8,23* 90,0±7,94" 554,5±86,14 113,6±0,69
* P<0,05; ** P<0,01; *** P>0,00, разница статистически достоверна в сравнении с предыдущим показателем.
Таблица 2
Толщина стенки маточной трубы у овец западно-сибирской мясной породы, мкм
Возраст животного Толщина стенки маточной трубы, мкм
слизистая оболочка мышечная оболочка серозная оболочка
1 сутки 32,5±0,29 21,5±0,29 19,3±0,43
1 месяц 38,5±0,29’’’ 33,8±6,22’ 23,5±0,87’’
4 месяца 44,5±0,29’’’ 42,0±1,15’’’ 27,0±3,46’
6 месяцев 48,5±0,29’’’ 51,3±0,17’’’ 41,3±1,59’’’
8 месяцев 54,5±0,29’’’ 68,8±11,11’’ 48,0±0,29’’’
12 месяцев 60,6±0,35’’’ 84,8±3,03’’’ 65,5±0,29’’’
* P<0,05; ** P<0,01; *** P>0,001, разница статистически достоверна в сравнении с предыдущим показателем.
У новорожденных ягнят в слизистой оболочке имеются сложные складки, но к периоду полового созревания количество и величина их значительно возрастают: у новорожденных — 20,0±0,58, одномесячных — 25,0±0,58, четырехмесячных — 40,0±0,58, шестимесячных — 46,0±0,58, восьмимесячных — 48,0±0,58, а у годовалых —
50,0±0,58. Толщина складок с возрастом также изменяется: у новорожденных —
31,8±3,21 мкм, у одномесячных, в сравнении с новорожденными, увеличивается в
1,4 раза, четырехмесячных — в 4, шестимесячных и восьмимесячных — в 5, а у годовалых — в 6 раз.
Под эпителием располагается собственная пластинка слизистой оболочки, состоящей из рыхлой соединительной ткани. Под-слизистой основы в маточных трубах нет, поэтому далее идет средняя мышечная оболочка, состоящая из внутреннего циркулярного гладкомышечного слоя и наружного продольного, который слабо развит. Снаружи располагается тонкая серозная оболочка.
Матка представлена несколькими отделами — рога, тело и шейка, причем тело без резких границ переходит в рога матки; все они характеризуются наличием 3 обо-
лочек — слизистой (эндометрий), мышечной (миометрий) и серозной (периметрий). Толщина стенки в роге, теле и шейке матки равномерно увеличиваются к 12-месячному возрасту (табл. 3, 4).
В эндометрии тела и шейки наблюдается складчатость. Ширина и длина складок с возрастом изменяются: у новорож-
денных ширина 10,0±0,29 мкм и длина 90,3±0,43 мкм, у одномесячных, в сравнении с новорожденными, увеличивается ширина в 1,2 раза и длина — в 1 раз, четырехмесячных ширина — в 2 раза и длина — в 1,2 раза, шестимесячных ширина — в 2 раза и длина — в 1,3 раза, восьмимесячных ширина — в 3 раза и длина — в 1,4 раза, а у годовалых ширина — в 3,3 раза и длина — в
1,5 раза.
Слизистая рога матки выстлана однослойным цилиндрическим эпителием, причем в участках, покрывающих карункулы, клетки ниже и уже. В толще слизистой оболочки расположены многочисленные крупные трубчатые ветвящиеся маточные железы, а ближе к поверхности — мелкие. Мышечная оболочка состоит из двух слоев: циркулярного и продольного. Рога матки сверху покрыты серозной оболочкой.
Таблица 3
Толщина стенки рогов матки у овец западно-сибирской мясной породы, мкм
Возраст Правый рог Левый рог
периметрий миометрий эндометрий периметрий миометрий эндометрий
1 сутки 18,8±0,43 53,8±0,15 68,8±0,43 19,8±0,43 55,8±0,43 69,3±0,43
1 месяц 21,8±0,15’’ 56,8±0,43” 70,8±0,43 21,3±0,72’ 56,8±0,15’ 72,8±0,43
4 месяца 46,8±1,59’’’ 82,5±15,88* 79,3±0,72 32,0±0,58’’’ 77,0±12,70’ 107,5±1,44’’’
6 месяцев 52,3±14,29’ 99,3±0,15”' 94,8±0,43”' 36,0±0,29’’’ 80,0±4,62 111,0±0,58’’’
8 месяцев 65,5±0,29”' 103,3± 0,72” 97,9±0,06”' 39,3±0,43’’’ 94,8±0,15’’’ 119,0±0,58’’’
12 месяцев 70,8±0,43”' 108,5±0,87” 104,0± 0,58”’ 43,0±0,29’’’ 104,5±0,29’’’ 125,0±0,58’’’
* P<0,05; ** P>0,01; *** P>0,001, разница статистически достоверна в сравнении с предыдущим показателем.
Таблица 4
Толщина слоев стенки тела и шейки матки у овец западно-сибирской мясной породы, мкм
Возраст Тело матки Шейка матки
периметрий миометрий эндометрий периметрий миометрий эндометрий
1 сутки 60,3±0,72 103,3± 1,01 104,8± 0,15 37,8±0,43 104,5±0,29 156,3±1,30
1 месяц 61,3±0,15’ 106,5±0,29’ 106,8±0,43” 40,8±0,43’’ 112,5±1,44’’ 159,8±0,43’
4 месяца 72,3±0,43”' 114,5±0,29 112,5±0,29”' 46,8±1,59’’ 125,8±0,43’’’ 165,8±0,43
6 месяцев 76,5±0,29”' 119,5±0,29”' 116,5±0,29”' 50,5±0,58’’’ 136,8±0,15’’’ 169,8±0,15
8 месяцев 83,5±0,87”' 129,5±0,29”' 122,8± 0,43”’ 68,8±14,29* 175,0±0,58’’’ 177,5±1,44
12 месяцев 89,5±0,29”' 156,5±1,44”' 127,5±0,87’’’ 73,0±13,28* 181,8± 0,72’’’ 181,5±1,44’’’
* Р<0,05; ** Р<0,01; *** Р>0,001, разница статистически достоверна в сравнении с предыдущим показателем.
Слизистая тела матки также покрыта однослойным цилиндрическим эпителием. Здесь обнаруживаются маточные железы. Основу шейки матки составляет двухслойная гладкая мускулатура: циркулярный и продольный слои, которые пронизаны множеством эластических волокон, обусловливающих твердую консистенцию органа. Слизистая оболочка шейки матки покрыта высоким цилиндрическим эпителием. В годовалом возрасте в шейке матки значительно утолщается продольный слой мышечной оболочки.
У новорожденных ягнят карункулы представлены в виде небольших возвышений слизистой оболочки. В верхушке рогов матки карункулов нет, слизистая оболочка образует продольные складки. У ягнят в месячном возрасте начинается образование маточных желез, количество этих желез небольшое, но к 8 месяцам их число значительно увеличивается. Карункулы в рогах матки, заканчивают свое формирование к 6-месячному возрасту, у годовалых ярок они содержат кровеносные сосуды. На слизистой оболочке рогов матки в четыре ряда расположены карункулы. Их количество увеличивается с возрастом: у новорожденных ягнят — 44,0±3,22, одномесячных — 45,0±1 ,15, 6-месячных — 48,0±1,32, 12-месячных ярок — 53,0±1,27.
Выводы
У новорожденных ягнят количество примордиальных фолликул наибольшее, а первичные и вторичные фолликулы имеются в небольшом количестве. У 4-месячных ярок обнаруживается желтое тело. К 12-месячному возрасту в сравнении с новорожденными примордиальные фолликулы уменьшаются в 2 раза, первичные фолликулы увеличиваются в 1,4 раза, а вторичные — в 2 раза.
В эпителии слизистой оболочки маточных труб складки с возрастом становятся толще
и к 12 мес. четко отграничены. Толщина складок увеличивается к 12 мес. по сравнению с новорожденными в 6 раз. Мышечная оболочка маточных труб к 12-месячному возрасту утолщается и увеличивается в сравнении с новорожденными в 12 раз.
Толщина стенки матки к 12 мес. в сравнении с новорожденными увеличивается: периметрий в правом роге — в 4 раза и левом — в 2, миометрий в правом и левом роге — в 2, эндометрий в правом — в 1,5 и левом роге — в 1,8 раза; в теле матки периметрий и миометрий — в 1,5 раза, эндометрий — в 1,2; в шейке матки: периметрий — в 2 раза, миометрий — в 1,7 и эндометрий — в 1,2 раза. На слизистой оболочке рогов матки в четыре ряда расположены карункулы. Их количество с возрастом увеличивается.
Библиографический список
1. Водолазский М.Г. Сравнительная оценка воспроизводительной функции ярок ставропольской породы в зависимости от возраста первого осеменения: дис. ... канд. вет. наук. — Ставрополь, 1984. — С. 10.
2. Батурин А., Киба Л., Кирилин А. Важней всего: государственный племенной завод «Степной». — 2008. — 100 с.
3. Васильев Ю.Г., Трошин Е.И., Яг-лов В.В. Цитология, гистология, эмбриология. — СПб.: Лань, 2009. — С. 553-561.
4. Соколов В.И., Чумасов Е.И. Цитология, гистология, эмбриология. — М.: КолосС, 2004. — С. 325-331.
5. Слинченко, Н.З. Окраска хромотропом 2В // Архив патологии. — 1964. — № 2. — С. 120.
6. Коростелева Н.И., Рабинович И.Е. Учебное пособие по биометрии для студентов и аспирантов зооинженерного и ветеринарного факультетов. — Барнаул, 1992. — 108 с.
+ + +