CC BY
35
not exceed 9,9%. This is connected with the special features of landscape and the ecological factors.
ГИСТОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ТКАНЕЙ ТРЕМАТОД ДО И ПОСЛЕ ДЕЙСТВИЯ АНТИГЕЛЬМИНТИКАМИ
Бибик О.И. *, Архипов И.А. **
*ГОУ ВПО Кемеровская государственная медицинская академия **ВНИИ гельминтологии им. К.И. Скрябина Россельхозакадемии
Введение. Одной из актуальных проблем в развитии гельминтологической науки (ветеринарном и медицинском аспектах) является изучение гистохимической реактивности тканей гельминтов, подвергшихся химиотерапии. Знание изменений специфики обменных процессов в тканях под действием антигельминтиков, по сравнению с нормой, даёт возможность оценить эффективность препарата, выявить пути его проникновения в организм гельминта, раскрыть механизм его действия на паразита [1-4].
Материалы и методы. Объектами исследований служили трематоды вида Fasciola hepatica, Fasciola gigantica и Dicrocoelium lanceatum, собранные из желчных протоков печени спонтанно инвазированных животных до и после лечения разными антигельминтиками. Материал фиксировали в растворе метилового спирта и ледяной уксусной кислоты в соотношении 3:1, а затем в 70% спирте. Обрабатывали полученных трематод по общепринятым гистологическим методам. Гистохимически выявлялись: суммарные белки методом сулемма-бромфеноловый синий по Бонхагу; гликоген и нейтральные мукополисахариды Шик-реакцией по Мак-Манусу; кислые мукополисахариды (гексозаминогликаны) альциановым синим по Стидмену и Моури при низких значениях рН (2,0-3,0) и толуидиновым синим при рН=4,0 и рН=6,0. Оценка результатов гистохимических реакций проводилась с помощью светового микроскопа, путём сравнения окраски с контрольными препаратами.
Результаты исследований. Углеводный и энергетический обмены гельминтов во многом определяют направление и характер основных биохимических процессов паразитов, являются их отражением к условиям обитания в организме хозяина и интересны для исследователей в решении ряда практических задач медицинской и ветеринарной гельминтологии при разработке высокоэффективных антигельминтиков.
Сравнительный анализ распределения углеводно-белковых комплексов в тканях трематод показал большую разницу в реактивности тканей F. hepatica, F. gigantica и D. lanceatum до и после химиотерапии антигельминтиками. Воздействие антигельминтиков проявлялось снижением степени окраски
органов и тканей трематод при гистохимических реакциях и подтверждает нарушение их физиологического состояния.
Гистохимические реакции демонстрируют нарушение обменных процессов в жизненно важных морфофункциональных блоках трематод и показывают глубокие изменения, которые в первую очередь, связаны с углеводами, проявляющиеся с одной стороны, в исчезновении гликогена в паренхиме и мышцах, а с другой - в увеличении количества гексозаминогликанов в наружном тегументе и в апикальной части кишечного эпителия гельминтов. Исчезновение гликогена из тканей паразита вызвано блокировкой его синтеза и повышенным расходованием гликогена, который был депонирован ранее, что связано с экстремальными условиями вызванными воздействием препарата. Последствием этих нарушений является углеводная дистрофия и тканевая декомпозиция. Прекращение энергообмена через паренхиму в органы паразита, свидетельствует об эффективности воздействия препарата на трематод и жизнеспособности их в целом.
Изменение концентрации углеводных метаболитов внутри тела трематод после действия антигельминтика вызвано разрушением наружного гликокаликсного слоя тегумента, эпителия кишечника и матки. Это способствует нарушению барьерной функции пограничных органов и не ограничивает проникновение токсических веществ вовнутрь тела трематод.
Нарушение антигельминтиками тинкториальных свойств в пограничных зонах трематод, подтверждается ослаблением окрашивания тканевых структур альциановым синим. Наименьшая интенсивность окраски проявляется в кишечном эпителии, что указывает на проникновение антигельминтиков через органы пищеварительной системы трематод.
Бледное окрашивание толуидиновым синим паренхимы трематод с ослаблением эффекта метахромазии, свидетельствует о структурной дезорганизации основного цементирующего вещества соединительной ткани. Происходит нарушение изоосмии ткани внутренней среды и гомеокинеза гельминта, тело трематод теряет упругость, меняется его форма.
После воздействия антигельминтиков у трематод в тканевых структурах всех органов происходит изменение природы белкового компонента, перераспределение его функциональных групп, о чём свидетельствует, извращённое окрашивание бромфеноловым синим. Это подчёркивает дегенерацию ядерных структур, несостоятельность белкового обмена. Действие одних антигельминтиков смещает белковое равновесие в сторону увеличения белков основной природы, другие же вызывают перераспределение кислых белков. Преобладание зелёного цвета в тканях указывает на большое количество мукополисахаридов. Действие препаратов демонстрирует и наличие нехарактерного коричнево-болотного, окрашивания тканевого субстрата, что, вероятно, вызывается денатурацией белков необратимого характера.
Гистохимически установлено, что все антигельминтики вызывают структурные изменения в тканях тегумента, паренхимы, пищеварительной и половой систем трематод, которые выражаются дистрофиями разного генеза: 1) декомпозицией - наблюдается деструкция углеводно-белковых комплексов, с высвобождением и накоплением белков или углеводов; 2) инфильтрацией (дистрофия количественного характера) - отмечается накопление белков и углеводов; 3) извращённым синтезом (дистрофия качественного характера) на уровне белков. Гистохимическая гиперплазия характеризуется увеличением количества белков хлопьевидной формы, что проявляется при окрашивании бромфеноловым синим и, указывает на нарушение внутриклеточного транспорта продуктов метаболизма. Выявляемый некробиоз тканей трематод подтверждает необратимые дистрофические изменения на уровне нарушения углеводного и белкового обменов. Исчезновение гликогена после воздействия антигельминтика, указывает на преобладание в тканях трематод катаболических реакций над анаболическими, а значит, происходит нарушение биохимических путей синтеза жизненно важных веществ.
Заключение. Гистохимический анализ реактивности тканей трематод после действия антигельминтиков показал изменение активности клеточных элементов тканей гельминтов и выявил перераспределение в них основных веществ, указывая на нарушение углеводного и белкового обменов в организме трематод.
Литература: 1. Бибик О. И. Морфофункциональная характеристика органов и тканей паразита и хозяина при трематодозах после химиотерапии антигельминтиками // Автореф. дис... докт. биол. наук. - М., 2012. - 49 с. 2. Гребенщиков В. М. Микроморфологические и гистохимические исследования половой системы и гаметогенеза некоторых трематод в норме и при действии антигельминтиков // Автореф. дис... канд. биол. наук. - Алма-Ата, 1984. - 20 с. 3. Кошкина Н. Г. Микроморфологические исследования изменений тканей трематод и цестод при действии некоторых антигельминтиков // Автореф. дис... канд. биол. наук. - Кемерово, 1970. - 18 с. 4. Начева, Л.В. Морфоэкологический анализ и эволюционная динамика тканевых систем трематод, реактивность их органов и тканей при действии антигельминтиков // Автореф. дис. докт. биол. наук. - М., 1993. - 57 с.
Histochemical analysis of trematode tissues before and following treatment by anthelmintics. Bibick O.I., Archipov I.A. Kemerovo State Medical Academy; All-Russian K.I. Skryabin Scientific Research Institute of Helminthology.
Summary. Histochemical analysis of trematode tissue reactivity following action of anthelmintics showed change of cell element activity of helminth tissues and revealed redistribution of the main substances what demonstrated disturbances of carbohydrate and protein metabolism in trematodes.
