CC BY
16
8. Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики: справочник / И.П. Кондрахин [и др.]. - М.: Колос, 2004. - 520 с.
9. Пребиотическая профилактика и терапия дисбактериозов / Г.В. Бовкун [и др.] // Ветеринария сельскохозяйственных животных. - 2008. - № 4. - С. 28-32.
10. Справочник по бактериологическим методам исследований в ветеринарии / А.Э. Высоцкий, З.Н. Барановская; МСХ и П РБ. - Минск: Белтаможсервис, 2008. - 823 с.
УДК 636.92.082.456
ГИСТОФИЗИОЛОГИЯ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ КРОЛЬЧИХ В ПЕРИОД РОДОВ НА ФОНЕ ВЛИЯНИЯ НЕОРГАНИЧЕСКОЙ ФОРМЫ СЕЛЕНА
И.В. ЧЕКУРОВ, Л.Л. АБРАМОВА ФГБОУ ВПО «Оренбургский государственный аграрный университет» г. Оренбург, ул. Челюскинцев, 18. Российская Федерация, 460795
(Поступила в редакцию 23.02.2012)
Введение. Манифестирующим этапом плодоношения у самок млекопитающих являются роды. Этот период ознаменован значительными морфофункциональными преобразованиями в организме матери и плода, что связанно с высокой лабильностью гормонального статуса как на подготовительном, так и на разрешающем этапе родов [1, 8].
Немаловажно влияние щитовидной железы (ЩЖ) на развитие и становление функций половых и молочных желез, что обусловлено воздействием тиреоидных гормонов (Т4, Т3) на протеиновый, углеводный и жировой обменные процессы в тканях [5,9].
Наиболее высокую активность в отношении клеток-мишеней имеет гормон трийодтиронин (Т3), хотя его содержание в плазме крови невысоко и составляет не более 1-2 % от общего содержания тиреоид-ных гормонов. Для поддержания эутиреоза важен физиологически обусловленный микроэлементный статус, так как большая часть Т3 периферической крови образуется путем удаления атома йода из внутреннего кольца молекулы тироксина (Т4) при участии селенсо-держащих ферментов - дейодиназ и лишь 20 % Т3 секретируется непосредственно тироцитами ЩЖ [2].
Дефицит селена вызывает ряд изменений в ферментативных системах организма, которые ведут к нарушению метаболизма тиреоидных гормонов, что может явиться причиной гипо- или гипертиреоза [3, 4].
Очевидна высокая роль микроэлементного статуса самок на всех этапах плодоношения, родов и лактации. Научный интерес представляет гистофизиология и адаптационная пластичность щитовидной железы в условиях гипоселеноза, что и определило актуальность наших исследований.
Цель работы - выявить реактивность и адаптационную пластичность структур щитовидной железы крольчих в период окрола на фоне влияния препарата «Е-селен».
Для реализации поставленной цели были определены следующие задачи:
- изучить морфофункциональные особенности ЩЖ интактных крольчих (не подвергшихся воздействию селенсодержащего препарата) в период родов;
- исследовать функциональную микроморфологию ЩЖ крольчих опытной группы в период родов, динамику взаимосвязи ее структур при воздействии препарата «Е-селен»;
- провести лабораторные морфологические и биохимические исследования крови крольчих обеих групп на содержание селена, а также концентрации тиреоидных и тиреотропного гормонов.
Материал и методика исследований. Опыт проводился в условиях КФХ «Раздолье» Тюльганского района Оренбургской области. Объектом исследования были шесть крольчих породы советская шиншилла в период родов, аналогов по возрасту и массе, разделенных на контрольную и опытную группы. Крольчихам опытной группы внутримышечно во внутреннюю поверхность бедра вводили препарат «Е-селен» (в дозе 0,04 мл/кг), являющийся воднодисперсным комплексом витамина Е (токоферол ацетат) и неорганической формы селена, представленной селенитом натрия. Дозирование препарата проводили в соответствии с действующим наставлением.
Материалом для исследования служили гистопробы ЩЖ опытной и контрольной групп крольчих. Гистологические пробы фиксировали в 10%-ном нейтральном растворе формалина. После общепринятой подготовки и дегидратации материал заключали в парафин и на микротоме изготавливали срезы толщиной 5-6 мкм, окрашивали гематоксилином Майера и эозином, световую микроскопию осуществляли при помощи микроскопа Micros MSD 500 (Австрия Х 1500), оснащенного цифровой камерой.
Определение концентрации тиреоидных (тироксин - Т4 трийодти-ронин - Т3) и тиреотропного (ТТГ) гормонов в сыворотке крови осуществляли методом твердофазного иммуноферментного анализа на спектрофотометре «Multiscan Labsystems» (Финляндия) с использованием стандартных наборов реагентов.
Биохимическое исследование крови проводили по следующим показателям и методикам: количество гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов определялось гематологическим анализатором Medonk СА 620. Общий белок сыворотки крови исследовали по биуретовой реакции, АСТ и АЛТ - кинетическим спектрофотометрическим методом.
Химико-аналитическое исследование количественного содержания селена в сыворотке крови осуществляли усовершенствованным флуо-риметрическим методом [7], на спектрофлуориметре SOLAR CM-2203.
Морфометрическое исследование гистоструктур щитовидной железы проводили по П.А. Чумаченко [6] с использованием лицензионной программы «ТестМорфо - 4.0».
Статистическую обработку данных результатов исследований осуществляли при использовании программы «Microsoft Excel». Взаимовлияние морфометрических показателей гистоструктур выражали через коэффициенты парной корреляции.
302
Результаты исследований и их обсуждение. У крольчих контрольной группы, не подвергавшихся воздействию селенсодержащего препарата, ЩЖ имела типичное дольчатое строение, с поверхности покрыта капсулой, которая отдает в паренхиму железы соединительнотканные трабекулы с мелкопетлистой сетью сосудов гемомикроцир-кулятроного русла (ГМЦР). Паренхима железистых долек представлена структурно-функциональными единицами - фолликулами, собранными в значительные по численности группы (рис. 1, А).
Средний диаметр фолликула составлял 7,6±0,32 мкм, просвет -эпителиальный индекс Брауна (ПЭИ) был на уровне 1,62. Полости фолликулов заполнены однородным коллоидом бледно-розового цвета, индекс накопления (ИН) - 1,31.
Базальная мембрана фолликулов ровная, тонкая, имеет четкий контур, выстлана одним слоем тироцитов низкопризматической формы, с диаметром 2,9±0,12 мкм (рис. 1, Б). На апикальном полюсе тироцитов хорошо выражен слой гликокалекса. Цитоплазма тироцитов окси-фильна, ядра (диаметр 1,6±0,15 мкм) с выраженной базофилией участков конденсированного гетерохроматина, ядерно-цитоплазматическое соотношение (ЯЦС) - 0,3.
У крольчих опытной группы на фоне влияния неорганической формы селена (препарат «Е-селен») фолликулы ЩЖ имели средний диаметр 8,8±0,64 мкм, в составе железистых долек формируют многочисленные группы (рис. 2, А). Полости в значительной части фолликулов запустевшие или содержат незначительное количество гомогенного коллоида розового цвета (ПЭИ - 3,55, ИН - 2,4).
Рис. 1. Щитовидная железа крольчихи в период родов. А, Б - контрольная группа, гематоксилин-эозин, ув. х 200; 1500; 1 - фолликулы; 2 - тироциты; 3 - кальцитониноциты; 4 - базальная мембрана; 5 - коллоид
Тироциты (диаметр 1,8±0,10 мкм) - вариабельной формы от низкопризматических до уплощенных, их ядра (0,98±0,062 мкм) содержат
303
значительное количество конденсированного гетерохроматина, ЯЦС -0,07 (рис. 2, Б).
По результатам морфологических и биохимических исследований крови в контрольной и опытной группах крольчих не выявлено отклонений показателей от общепринятой для кроликов нормы.
Рис. 2. Щитовидная железа крольчихи в период родов.
А, Б - опытная группа, гематоксилин-эозин, ув. х 200; 1500;
1 - фолликулы; 2 - тироциты; 3 - кальцитониноциты;
4 - трабекулы; 5 - коллоид
В опытной группе крольчих выявлен стимулирующий гемопоэти-ческий эффект препарата «Е-селен», выражавшийся в увеличении количества эритроцитов на единицу объема крови (6,5 %) и возрастании в них концентрации гемоглобина на 6,5 % в сравнении с контрольной группой. Также наблюдалось выраженное иммуномодулирующее действие препарата на клеточное звено неспецифической резистентности организма крольчих опытной группы, о чем свидетельствовало увеличение концентрации лейкоцитов в периферической крови на 18 % по отношению к контрольной группе.
Общий и биохимический анализ крови, Р<0,05
Показатели Контроль «Е-селен»
НЬ, г/л 101,7±1,2 108,3±1,2
Эритроциты, 1012/л 4,92±0,06 5,24±0,04
Лейкоциты, 109/л 7,22±0,12 8,53±0,20
Общий белок, г/л 54,00±0,14 61,25±1,41
Альбумин, % 37,84±0,11 39,4±0,50
а-глобулин, % 15,07±0,03 19,07±0,30
Р-глобулин, % 24,80±0,21 15,27±0,02
у-глобулин, % 22,29±0,21 26,26±0,31
АсАТ, ммоль/л 0,36±0,03 0,28±0,02
АлАТ, ммоль/л 0,44±0,01 0,31±0,02
Коэффициент де Ритиса 0,83±0,05 0,90±0,06
Отмечалась интенсификация пластического обмена (анаболизма), характеризовавшаяся возрастанием концентрации общего сывороточ-
304
ного белка крови на 13,5 %, преимущественно за счет а-глобулина - на 26,5 % и у-глобулина - на 17,8 %, а также альбумина - на 4 % в сравнении с контрольной группой животных (таблица). Концентрации таких сывороточных белков, как альбумина и а-глобулина - важные критерии не только функционирования гепатобилиарной системы, но и являют собой высоко аффинные транспортные молекулы для тирео-идных гормонов.
Вводимый препарат не оказывал токсического действия на организм беременных крольчих и не вызывал деструктивных изменений в паренхиме печени (АлАТ - 0,31±0,023) и миокарде (АсАТ - 0,28± ±0,021).
Уровень гипофизарной регуляции синтеза тиреоидных гормонов оценивали по цельному неотделимому индексу (ЦНИ - отношение суммы концентраций тиреоидных гормонов к концентрации ТТГ в сыворотке крови). Так, у крольчих опытной группы ЦНИ составил 136,7±0,42, что на 48,5 % превышает этот показатель у крольчих контрольной группы. Возрастание ЦНИ косвенно свидетельствовало об активном выбросе тиреоидных гормонов из ЩЖ.
Тиреоидный статус крольчих обеих групп в период окрола был относительно стабилен. У крольчих опытной группы он характеризовался положительной динамикой нарастания концентраций тироксина на 15 %, трийодтиронина - на 3,5 % (Т4 / Т3 - 7,5:1), тогда как концентрация ТТГ снизилась на 5 % по отношению к контрольной группе. После инъекции крольчихам препарата «Е-селен» концентрация селена в сыворотке крови в сравнении с фоновым уровнем возросла на 150 % (рис. 3).
,V, ^[/,71.'
■ Контрольная группа □ Опытная группа
Рис. 3. Концентрация селена в сыворотке крови крольчих в период родов
Системный анализ позволил выявить ряд морфофункциональных изменений в сосудах ЩЖ. Так, в контрольной группе отмечали тенденцию к уменьшению диаметров артерий, артериол, прекапилляров (г = 0,93), которую, видимо, можно объяснить высоким уровнем
305
нейропептидных гормонов гипоталамуса (вазопрессин, окситоцин) в период родов, воздействующих на миоциты стенок сосудов. Со стороны посткапиллярных, собирательных и мышечных венул выявлена тенденция к увеличению диаметров (г = 0,95), что, вероятно, характеризовало активный вынос из ЩЖ тиреоидных гормонов, преимущественно за счет Т3 (г = 1).
На фоне влияния препарата «Е--селен» выявлена специфическая гемодинамика: артериальное и венозное звено ЩЖ, включая ГМЦР, на всем протяжении имело тенденцию к уменьшению своего диаметра (г = 0,97 и г = 0,88 соответственно), что характеризовало регулируемое выведение Т4 и Т3 из ЩЖ (г = -0,96).
В крови самок контрольной группы возросшая концентрация ТТГ индуцировала новые синтетические процессы в ядрах тироцитов (г = 0,99) и ускорила вывод продуктов предыдущих секреторных циклов из тироцитов (г = -0,86) в коллоид фолликулов, что выразилось в увеличении диаметров последних (г = -1). Поскольку увеличение удельной массы железистой паренхимы органа (г = -0,98) сопровождалось прямо пропорциональным приростом интерстиция (г = -0,98), происходило увеличение общей массы щитовидной железы.
У крольчих опытной группы в сыворотке крови высокая концентрация тиреоидных гормонов, обусловленная активизацией фазы выведения продуктов предыдущих синтезов из цитоплазмы тироцитов (г = 0,99), сочетанная с возросшим уровнем селена, оказывала опосредованное ингибирующее воздействие на тиреотропоциты аденогипо-физа, снижая тем самым концентрацию ТТГ (г = -1). Сниженный уровень ТТГ в сыворотке крови сдерживал синтетические процессы в ядрах тироцитов (г = -0,96). Высокодостоверные положительные связи концентрации тиреоидных гормонов (Т4, Т3) с концентрацией селена в крови (г = 0,97) свидетельствовали об усилении конверсии тироксина в трийодтиронин (Т4—> Т3) в периферических тканях.
Таким образом, неорганический препарат «Е-селен» оказывал позитивное воздействие на пластический обмен, гемо- и лимфопоэз. Ти-реоидный статус крольчих в период родов характеризовался эутирео-зом, что объяснимо «интенсификацией» метаболизма Т4—Т3 в периферических тканях при участии селеноцистеинзависимого фермента 5'-дейодиназы, тогда как в условиях контрольной группы животных отмечался «экстенсивный» рост концентрации тиреоидных гормонов в сыворотке крови, что выражалось в увеличении массы щитовидной железы.
Заключение. Результаты исследований позволяют утверждать, что для поддержания эутиреоза в период массового окрола высоко значение обеспеченности крольчих селеном. Препарат «Е-селен» усиливает конверсию Т4— Т3 в периферических тканях, что позволяет поддерживать тиреоидный гомеостаз, инициируя физиологически обусловленные функциональные и органические изменения в гистофизиологии щитовидной железы.
ЛИТЕРАТУРА
1. Дерябина, Е.Г. Современные данные о влиянии половых стероидов на патогенез заболеваний щитовидной железы у женщин / Е.Г. Дерябина, Н.В. Башмакова // Российский вестник акушера-гинеколога. - 2008. - № 6. - С. 52-55.
2. Щитовидная железа. Фундаментальные аспекты / под ред. проф. А.И. Кубарко и проф. S.Yamashita. - Минск - Нагасаки, 1998. - 368 с.
3. Мурох, В.И. Роль селена в организме животного и человека / В.И. Мурох // Вести Национальной академии наук Беларуси. - 2002. - N° 3. - С. 99-105.
4. Мохорт, Е.Г. Роль селена в патогенезе йодной недостаточности / В.И. Мурох // Белорусский медицинский журнал. - 2003. - № 3. - С. 88-94.
5. Чумаченко, П.А. Молочная железа и эндокринный комплекс (морфофункцио-нальные отношения) / П.А. Чумаченко. - Рязань, 2007. - 171 с.
6. Чумаченко, П.А. Щитовидная железа: морфометрический анализ / П.А. Чумаченко // Фундаментальные исследования. - 2009. - № 5. - С. 136-141.
7. Anipko, V.V. Definition of selenium concentrations change in a blood after application of selenium preparations by fluorometric technique / V.V. Anipko, V.S. Maryakhina, L.L. Abramova // Topic problem of biophotonics 3 international symposium, 16-22 July, 2011., St-Peterburg - Nizhniy Novgorod, Russia, 2011. - P. 77-78.
8. Alwan, A.F. Sheep Fetal Thyroid Histological Development, With Adult Plasma T4 and T3 Hormones Concentrations / Jornal of Animal and Veterinary Advances. - 2009. -№ 8. - P. 2115-2117.
9. Neepa, Y. Choksi. Role of Thyroid Hormones in Human and Laboratory Animal Reproductive Health / Neepa Y. Choksi [et al.] // Defects Research (Part B). - 2003. - P. 479-491.
УДК 619:613.31
ЭКОЛОГИЧЕСКИЙ МОНИТОРИНГ ВОДОИСТОЧНИКОВ ВОКРУГ ЖИВОТНОВОДЧЕСКОЙ ФЕРМЫ
М.В. МЕДВЕДСКАЯ, А.М. СУББОТИН УО «Витебская ордена «Знак Почета» академия ветеринарной медицины» г. Витебск, Республика Беларусь, 210026
(Поступила в редакцию 29.02.2012)
Введение. Проблема загрязнения водных ресурсов и их защита от воздействия антропогенных факторов стала одной из главных для современности.
Большую опасность для водных ресурсов и окружающей среды представляют животноводческие фермы и комплексы, расположенные чаще всего на возвышенных элементах рельефа, иногда у водоемов.
Цель работы - изучить влияние животноводческой фермы на качество воды в ближайших водоисточниках.
Материал и методика исследований. Работа выполнялась в 20072010 гг. Представленные материалы получены на основе собственных исследований, выполненных на кафедре зоологии УО «Витебская ордена «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины» и в условиях животноводческой фермы на 1200 голов крупного рогатого скота «Эксперементальная база Тулово» Витебского района Витебской области. Объектом исследования служили источники водоснабжения на ферме и в поселке Тулово.
307
