CC BY
155. Покровский В.К., Тимченко Н.Ф., Недашковская Е.П., Григорьева Г.А. Термолабильный летальный токсин Yersinia pseudotuberculosis. Журн. микробиол. 2008,6:63-66.
6. Терентьев JI.JL, Терентьева Н.А., Захарова Л.А., Рассказов В.А. Тимидинкиназа из яйцеклеток морского ежа. Биохимия. 1990, 55 (В. 12): 2293-2299.
7. Терентьева Н.А., Тимченко Н.Ф., Персиянова Е.В., Рассказов В.А. Действие термолабильного летального токсина Yersinia pseudotuberculosis на эмбриогенез и биосинтез ДНК, РНК и белка в эмбрионах морского ежа Strongylocentrotus intermedius. Тихоокеанский медицинский журнал. 2010, 3: 81-84.
8. ТимченкоН.Ф., НедашковскаяЕ.П.,ДолматоваJI.С., Сомова-Исачкова Л.М.Токсины Yersinia pseudotuberculosis. Владивосток,-2004. '
9. Тимченко Н.Ф., Терентьев Л.Л., Недашковская Е.П., Разник Н.В., Рассказов В.А. Действие термостабильного токсина Yersinia pseudotuberculosis на биосинтез ДНК, РНК и белка в эукариотических клетках. Эпидемиология и инфекционные болезни. 2002,1: 22-25.
10. Bradford М.М. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye-binding. Anal. Biochem. 1976,72: 248-254. .
IT.'KukHanova M., Krayevsky A., Terentyeva N. et al. Inhibition of replicative DNA synthesis in nuclei of Strongylocentrotus intermedius urchin embryosby 2',3'-dideoxy-3'-aminonucleoside-
. ^'-triphosphates. Biochim. Biophys. Acta. 1984,783:221-226.
12.Lockmann H.A., Gillespie R.A., Baker B.D. et al. Yersinia pseudotuberculosis produces a cytotoxic necrotizing factor. Inf. Immun. 2002,70 (5): 2708-2714.
13. Pha K.', Navarro L. Yersinia type III effectors perturb host innate immufie responses. Wbrld J. Biol. Chem. 2016, 7 (1): 1-13.
14. Tlmchenko N.F., Adgamov R.R., Ermolaeva S.A. friability in the functional domains of the Rho-modifying toxins of Yersinia pseudotuberculosis. Adv. Exp. Med. Biol. 2010, 954: 261-266.
15.\&n Rompay A.R., Johansson M., Karlsson A. Substrate specificity and phosphorylation of antiviral and anticancer nucleoside analogues by human deoxyribonucleoside kinases and ri-bonucleoside kinases. Pharmacol. Ther. 2003,100 (2): 119-139.
' • Поступила 01.06.16
Контактная информация: Терентьева Наталья Александровна, к.б.н., ч
690022, Владивосток, пр. 100 лет Владивостоку, 159, р.т. 8(423)231-07-03
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2016 ,
Д.А.Левченко, В.Д.Кругликов, А.С.Водопъянов, С.В.Титова, И. В.Архангельская, Н. Б. Непомнящая, М. И. Ежова
ГИС: ВОЗМОЖНОСТИ АНАЛИЗА ДАННЫХ ФЕНО- И ГЕНОТИПИРОВАНИЯ ХОЛЕРНЫХ ВИБРИОНОВ OI СЕРОГРУППЫ ЭЛЬ ТОР, ИЗОЛИРОВАННЫХ ИЗ ВОДНЫХ ОБЪЕКТОВ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРВДЫ НА ТЕРРИТОРИИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
Ростовский-на-Дону противочумный институт
Цель. Применение авторской ГИС «Холера 1989-2014» для систематизации атокси-генных штаммов холерных вибрионов OI серогруппы (ctxAB-tcpA-, ctxAB-tcpA+), выделенных из водных объектов окружающей среды, по фено- и генотипу. Материалы и методы. Изучена выборка из 304 штаммов Vibrio cholerae 01. Проведено выявление 39 генов, связанных с патогенностью. Дискриминационную способность набора генов определяли по формуле Симпсона. Кластерный анализ проводили по методу UPGMA. Результаты. С помощью ГИС был проведен анализ многолетних данных о циркуляции водных штаммов V. cholerae 01 на территории субъектов страны. Показана возможность систематизации фенотипов изолированных штаммов по заданным параметрам. Разработана экспериментальная программа для выявления наличия/отсутствия различных генов и их комбинаций для генотипирования. Заключение. Установлено, что ГИС позволяет проводить анализ фенотипов по заданным параметрам, а также осуществлять ориентировочную
систематизацию генотипов атоксигенных штаммов холерных вибрионов 01 по оптимально достаточной детекции 14 генов.
Журн. микробиол., 2016, № 6, С. 19—25
Ключевые слова: ГИС «Холера 1989-2014», холерные вибрионы 01 серогруппы, динамика выделения, фёно- и генотипирование
D.A.Levchenko, V.D.Kruglikov, A.S.Vodopianov, S.V.Titova, I. VArkhangelskaya, N.B.Nepomnyaschaya, M.I.Ezhova
GIS: CAPABILITIES OF DATA ANALYSIS OF PHENO- AND GENOTYPING OF EL TOR Ol SEROGROUP CHOLERA VIBRIOS ISOLATED FROM AQUATIC OBJECTS OF THE ENVIRONMENT IN RUSSIA FEDERATION
Rostov-on-Don Institute for Plague Control, Russia
; Aim. Application of the authors' GIS «Cholera 1989-2014» for systematization of atoxigenic strains of serogroup Ol cholera vibrios (ctxAB-tcpA-, ctxAB-tcpA+), isolated from aquatic objects of the environment by pheno- and genotype. Materials and methods. A sample of 304 Vibrio cho-lerae Ol strains was studied. Isolation of 39 genes related to pathogenicity was carried out. Discrimination ability of a set of genes was determined by Simpson formula. Cluster analysis was carried out by UPGMA method. Results. Analysis of multi-year data on aquatic V. cholerae Ol strains in country's subject was carried out using GIS. A possibility of systematization ofphenotypes of the isolated strains by defined parameters was shown. An experimental program for detection of presence/lack of various genes and their combinations for genotyping was developed. Conclusion. GIS was established to allow to panyout .analysis of phenotypes by defined parameters, as well as implement approximate systematization of genotypes of atoxigenic strains of cholera vibrios Ol by optimally sufficient detection of 14 genes.
Zh. Mikrobiol. (Moscow), 2016, No. 6, P. 19-25
| Keywords: GIS «Cholera 1989-2014», cholera vibrios serogroup Ol, isolation dynamics, pheno-and genotyping
ВВЕДЕНИЕ
Проведение мониторинговых исследований проб из объектов окружающей среды на холеру являются важнейшей составляющей эпидемиологического надзора, в том числе для предупреждения водного пути распространения инфекции [4].
Территория Российской Федерации не является эндемичной по холере, в то же время, ежегодное выделение атоксигенных штаммов холерных вибрионов Ol серогруппы (ctxAB-) из вёдных объектов окружающей среды указывает на необходимость выявления потенциальных и реальных рисков контаминации Vibrio cholerae 01 и устранения указанного риска [6]. В отсутствии у штаммов холерного вибриона генов холерного токсина особое значение имеет наличие ряда генетических детерминант дополнительных токсинов, количество и уровень экспрессии которых могут различаться от штамма к штамму [3]. В то же время, обращает на себя внимание появление клонов, не имеющих полного кластера коровой области СТХф, но содержащих кластер VPI (tcpA и toxT), которые могут происходить из токсигенных штаммов V. cholerae 01 в результате утраты СТХф. В то же время, за счет наличия гена tcpA и, вероятно, более высокой способности колонизировать кишечник штаммы (ctxAB-) могут вызывать спорадические случаи и вспышки диарейных заболеваний у людей (Каменск-Шахинский, Ростовская область 2005 г. и Республика Калмыкия, 2011 г.) [1,4,5],
Цель настоящего исследования заключалась в разработке подхода к систематизации фено- и генотипирования атоксигенных штаммов 01 серогруппы с использованием авторской геоинформационной системы (ГИС) «Холера 1989-2014» как инструмента для проведения информационно-аналитических исследований, связанных со штаммами V. cholerae, изолированными из водных объектов окружающей среды.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
В работе использовано 304 атоксигенных штамма холерных вибрионов 01 серогруппы, в том числе с генетической характеристикой ctxA-tcpA+, выделенных с 1991 г. на разных территориях России и отобранных по введенным заданным параметрам для изучения их сходства и различия с помощью ГИС «Холера 1989-2014» [1,2], интегрированной в ГЕО-информационный портал Ростовского-на-Дону противочумного института.
ПЦР-генотипирование исследуемых штаммов проводили по набору следующих генов: все гены коровой области профагов СТХ, рге-СТХ (сер, orfU, асе, zot, ctxAB) и RS-элементов (rstR, rstA, rstB, rstC); сайт интеграции СТХф (attRS); гены острова патогенности VPI — структурной единицы токсин-корегулируемых пилей tcpA и регулятора toxT, гены острова патогенности YPI-2 (int — «верхний краевой» фрагмент острова, ген нейраминидазы папН и «нижний краевой» фрагмент vce); гены цитотоксического кластера RTX (rtxA
— 5'-концевой участок гена высокомолекулярного цитотоксина; последовательность, кодирующая его ACD-домен, продукт которого вызывает деполимеризацию и ковалентное связывание актина в клетках кишечника; rtxC — ген предполагаемого активатора токсина RtxA); ген cef (СНО cell elongating factor)
— цитотонического фактора, вызывающего удлинение клеток СНО аналогично холерному токсину; ген гемагглютинин/протеазы hapA — ключевой про-теазы холерных вибрионов, способной в высоких дозах вызывать увеличение проницаемости кишечной ткани; ген глобального регулятора toxR; ген структурной единицы маннозочувствительных пилей адгезии mshA; кластеры генов контактзависимых систем секреции третьего типа — T3SS (vcsN2, vcsC2, vcsV2, vspD), шестого типа — T6SS (vasA, vasF, vasK, vgrG3), а также ее транслокона hep и ключевого эффектора ACD-VferGl, который является «двойником» и возможным предшественником ACD-RtxA и обладает такой же актин-связывающей активностью; tolQRA — кластер генов, необходимый для проникновения фага СТХф в бактериальную клетку и поддержания целостности клеточной стенки; гены шигаподобного (sltl) и термостабильного (stn/sto) токсинов; гены термостабильного прямого гемолизина (tdh) и родственного ему гемолизина (trh) V.parahaemolyticus; гены wbe и wbf, определяющие принадлежность к 01 и 0139 серогруппам соответственно.
Дискриминационную (разделение по признаку) способность исследуемого набора генов определяли по формуле Симпсона (Struelens М.J. et al., 1996): D=i—[i:N(N—l)]£-nj(nj—1), где D — индекс дискриминирующей силы, N—число штаммов, S — число типов и nj — количество штаммов j типа.
Дендрограмма была построена при помощи кластерного анализа по мето-ду UPGMA.
РЕЗУЛЬТАТЫ
В период с 1989 по 2015 гг., включая работу в рамках Референс-центра по мониторингу холеры (с 2008 г.), в лаборатории микробиологии холеры были идентифицированы 1080 штаммов холерных вибрионов. Из них подавляющее большинство (938) штаммов относились к 01 серогруппе, поэтому в данной
работе именно на представителях данной группы штаммов было сконцентрировано наше внимание. Кроме того, было выделено и идентифицировано 133 штамма V. с1ю1егае РО-вариант, 9 штаммов V. с1ю1егае 0139.
С помощью ГИС была проведена информационно-аналитическая разработка в аспекте анализа многолетних данных о циркуляции в водных объектах окружающей среды штаммов V. сЬо1егае 01. Так, в 2015 г. нами было изучено 118 штаммов холерных вибрионов 01 Эль Тор, которые были выделены из объектов окружающей среды на 6 административных территориях (Ростовская, Иркутская, Челябинская области, Забайкальский, Краснодарский край, Республика Калмыкия). Наибольшее количество культур* поступивших в референс-центр, было изолировано на территории Краснодарского края из реки Агура —< 98 штаммов (83%). В 1990 г. в воде открытых водоемов было обнаружено 32 штамма холерных вибрионов 01 на 6 административных территориях. В 1998 г. было выделено 44 штамма на 18 территориях, в 2002 г. — 44 штамма в 17 субъектах, в 2003 г. — 49 штаммов на 11 административных территориях. Следует отметить, что за исследуемый период пики наибольшего выделения штаммов холерных вибрионов 01 серо-группы приходились на 2011 г. — 96 штаммов (10 территорий) и на 2015 г. — 118 штаммов. - - ' ■ ' ■" ' """
При анализе распределения выделенных штаммов по субъектам Российской Федерации за последние 25 лет было установлено, что наибольшее количество штаммов V. с1ю1егае 01 было изолировано на территории Республики Калмыкия — 314 штаммов (33,5%), Ростовской области — 140 штаммов (14,9%) и Краснодарского края — 113 штаммов (12%). На территориях остальных субъектов — от нескольких десятков до единичных штаммов (Республика Бурятия, Астраханская, Курганская, Нижегородская, Пензенская, Псковская, Тульская, Челябинская, Ярославская области).
Все изолированные штаммы V. сЬо1егае 01 были типичны по культурально-морфологическим, биохимическим и серологическим свойствам. Как уже упоминалось, подавляющее большинство выделенных культур (938) относились к биовару Эль Тор. Из них к серовару Огава принадлежали 566 штаммов (60,4% от общего количества), к серовару Инаба — 364 (38,8%), к серовару Шкошима — 8 (0,8%). ■
Штаммы холерных вибрионов 01 серогруппы с генетической характеристикой с1хА-1срА+ выделяли на территориях Ростовской области (с 2002 по 2015 гг. — 18 штаммов), Республики Калмыкия (с 2003 по 2015 гг. — 38 штаммов) и Хабаровского края (в 2013 г. — 2 штамма).
При проведении ПЦР-генотипирования штаммов холерных вибрйонов по 39 нуклеотидным последовательностям, связанным с факторами патогенности, установлено, что гены аиЯБ, се£ ИарА, Ш^ЯА, \уЬе, ЮхЯ, Ьср присутствовали у всех штаммов и характерны для всех холерных вибрионов 01 серогруппы. В то же время, установлено отсутствие генов геШ, вШ, 1ёЬ, иЬ, сер, огШ, асе, гоХ, ЯхАВ. Гены ге!А, гйВ, г&С, 1срА, гохТ, ¡Ш, папН, усе, ПхА, ПхС, п^ЬА, ТЗББ (усвШ, уЫЛ, \csV2, УврБ), ТбББ (узбА, уавД уавК, увЮЗ), АСО-\^Ю1, АСО-ЬФсА, йп/йо были выявлены в различных сочетаниях.
Нами была разработана экспериментальная программа с использованием формулы Симпсона, определяющая целесообразность определения наличия/ отсутствия различных генов и их комбинаций для генотипирования, что позволило выделить штаммы с разными генотипами среди одинаковых по фе-нотипическому признаку.
В результате установлено, что при исследовании 304 штаммов по 39 генам
было выявлено 66 генотипов с дискриминационной силой (В)=0,965, а по 14 генам — 64 генотипа с Б=0,964.
Таким образом, при проведении сравнительного анализа свойств штаммов V. с1ю1егае 01 Е1 Тог с разным набором генетических детерминант дополнительных факторов патогенности по 14 генам (геЬА, ЛхС, АСЭ-ЛхА, УР1 0:срА), УР1-2 (ий, папН, усе), гтМ, вШ^Ю, ТЗББ (усвШ, уэрБ), ТбББ (уаэК, убгШ, у§тОгЗ) позволило разделить 304 штамма на 64 генотипа, объединенные в 10 кластеров (А—I): V. сЬо1егае 01 с1хАЧсрА+ (58 штаммов) — генотипы А1-А8, В1-В6, С1, И, Б1, Р7-Р10; V. с1ю1егае 01 с1хА-1срА- (246 штаммов) — генотипы А9, С2-С9, Б1-04, Е1, Л-13, Н1-НЗ, 01-012, Р2-Р6, Р11-Р15.
Дендрограмма до результатам кластерного анализа, отражающая генетическую близость штаммов, представлена на рис., на котором штаммы с генетической характеристикой с1хА-1срА+ выделены черным цветом, а наибольшая часть атоксигенных штаммов (ЛхА-^рА-) вошла в кластер, обозначенный темно-серым цветом.
При анализе распределения ПЦР-генотипов холерных вибрионов 01 по административным территориям Российской Федерации установлено, что наиболее часто встречались представители кластера Ь (31 штамм на 23 административных территориях). В кластер Р вошел 161 штамм с 13 территорий России. Холерные вибрионы кластеров I и Е обнаруживались только на территории Республики Калмыкия и Ростовской области (по одному штамму соответственно). Кластер I, состоящий из 15 штаммов, выявлен на территориях Республики Калмыкия и Тюменской области, кластер Н (3 штамма) — на территориях Амурской, Ленинградской и Ростовской областей. Кластер А включал в себя наибольшую часть штаммов с генетической характеристикой с1хА-1срА+ и был выявлен на территориях Республики Калмыкия, Ростовской области и Хабаровского края. На территориях Ростовской области и Республики Калмыкия выделялись штаммы со схожими генотипами А5 и А6.
На территории Республики Калмыкия было выделено 56 атоксигенных штаммов холерных вибрионов 01, которые были отнесены к 36 генотипам. Стоит отметить, что штаммы, входящие в генотип в9, были выделены в 2012 г. — 2 штамма из водоемов: р. Элистинка и пруд Колонский; в 2014 г. — 1 штамм из пруда Заячий и в 2015 г. — 3 штамма в этом же водоеме. С генотипом Ё14 всего на данной территории изолировано 12 штаммов: в 2012 г. из пруда Колонский — 4, из р. Эле-стинка — 7 штаммов и в 2013 г. — 1 штамм из
пруда Колонский. На Дендрограмма ПЦР-генотипов штаммов холерных вибрионов территории Ростов- 01 серогруппы, выделенных из объектов окружающей среды ской области выделе- на территории Российской Федерации с 1991 по 2015 гг.
но 34 атоксигенных штамма, которые были отнесены к 19 генотипам, однако представители одного генотипа встречались на данной территории не более одного года.
ОБСУЖДЕНИЕ
Использование ГИС в качестве информационно-аналитического инструмента позволило наглядно проследить пространственную и временную динамику выделения изучаемых штаммов холерных вибрионов на всех административных территориях страны. Вместе с тем, мы полагаем, что необходимо наличие географических координат стационарных точек отбора проб в паспортах на изолированные штаммы (для большей точности полученных данных).
Полученные данные дали нам возможность ориентировочно предполагать, что атоксигенные штаммы холерных вибрионов с1хА-1срА- могут переживать в пресноводных водоемах на определенных территориях в течение определенного времени (от одного года до двух лет). Генетическую неоднородность популяции V. сЬо1егае 01 Эль Тор можно объяснить необходимостью приспособления к условиям окружающей среды, в процессе которой не исключается смена генотипа (утрата/приобретение генов патогенности, персистенции и др.).
Для отработки подходов к систематизации генотипов атоксигенных штаммов холерных вибрионов 01 возможно использовать ориентировочное гено-типирование по 14 генам, оптимально достаточным для выявления различий между штаммами, с последующим сравнением со штаммами, ранее выделенными в данном регионе, а также в целом по стране.
Исходя из данных, представленных на дендрограмме ПЦР-генотипов штаммов холерных вибрионов 01 серогруппы, выделенных из объектов окру-| жающей среды на территории Российской Федерации с 1991 по 2015 гг., можно предположить общность происхождения штаммов холерных вибрионов 01 серогруппы с генетической характеристикой с1хА-1срА+ и йхАЧсрА-, входящих в кластеры А и С. В то же время, в кластеры В и I вошли только культуры с1хА-1срА+, которые, скорее всего, имеют завозное происхождение.
Таким образом, в системе эпидемиологического надзора за холерой важное значение имеет использование ГИС как инструмента информационного анализа (по различным задачам), возможности которой продемонстрированы на примерах анализа данных количественной и временной динамики обнаружения, а также фено- и генотипирования холерных вибрионов 01 серогруппы Эль Тор, изолированных из водных объектов окружающей среды на территории Российской Федерации, что способствует своевременному определению направленности и объема профилактических мероприятий на каждой конкретной административной территории страны. Одним из перспективных направлений совершенствования ГИС является внесение в паспорта выделенных штаммов V. сЬо1егае 01 Е1 Тог географических координат стационарных точек отбора проб из водных объектов для исследования на холеру, что позволит расширить рамки аналитической работы с помощью геоинформационной системы. ,
ЛИТЕРАТУРА
1. Зубкова ДА, Крутиков В.Д., Архангельская И.В., Водопьянов А.С., Непомнящая Н.Б., Водопьянов С.О. Генетические особенности штаммов холерных вибрионов 01 серогруппы с1хА-и:рА+, выделенных из водных объектов Российской Федерации,
охарактеризованные с помощью новой геоинформационной системы. Здоровье населения и среда обитания. 2014,9: 32—34.
2. Зубкова Д.А., Кругликов В.Д., Водопьянов A.C., Непомнящая Н.Б., Шестиалтынова И.С., Архангельская И.В., Ежова М.И., Ускова H.H. Свидетельство о государственной регистрации базы данных № 2014621055. Геоинформационная система. Холера 1989-2014,2014.
3. Монахова Е.В. Факторы патогенности нехолерогенных штаммов холерных вибрионов. Автореф. дис. д-ра биол. наук. Ростов-на-Дону, 2012. - ' ■
4. Онищенко Г.Г., Попова А.Ю., Кутырев В.В, Смирнова Н.И., Щербакова С.А., Москвитина Э.А., Титова C.B. Актуальные проблемы эпидемиологического надзора, лабораторной диагностики и профилактики холеры в Российской Федерации. Журн. микробиол. 2016,1:89-101.
5. Осина H.A., Каляева Т.Б., Бугоркова Т.В., Касьян И.А., Оброткина Н.Ф. Результаты мониторинга холерных вибрионов в водных экосистемах на территории Республики Калмыкия. Здоровье населения и среда обитания. 2013, 2 (239): 28-30.
6. Титова C.B., Москвитина Э.А., Кругликов В.Д., Самородова A.B., Тюленева Е.Г., Монахова Е.В., Писанов Р.В., Водопьянов A.C., Архангельская И.В., Иванова С.М., Ковалева Т.В., Водопьянов С.О. Холера: оценка эпидемиологической обстановки в мире и России в 2006-2015 гг. Прогноз на 2016 г. Пробл. особо опасных инф. 2016, 1: 20-27.
Поступила 10.05.16
Контактная информация: Левченко Дарья Александровна,
344002, Ростов-на-Дону, ул. М. Горького, 117/40, р.т. (863)240-91-33
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2016
И.И.Корсакова, В.А.Антонов, Н.П.Храпова, Т.В.Замарина, Е.В.Пименова, Е.Э.Ким, Л.КМеринова, Т.В.Сенина, Г.А.Ткаченко, С.С.Савченко, Н.П.Агеева, Е.В.Молчанова, ЯА.Лопастейская, Е.В.Прохватилова
ИДЕНТИФИКАЦИЯ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ САПА И МЕЛИОИДОЗА НА ОСНОВЕ ПРИНЦИПОВ ПОЛИФАЗНОГО ТАКСОНОМИЧЕСКОГО ПОДХОДА
Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт
Цель. Определить оптимальный набор наиболее эффективных методов идентификации и внутривидового типирования возбудителей сапа и мелиоидоза. Материалы и методы. Использованы бактериологические, иммунохимические, молекулярно-генетические методы. Результаты. Изучена возможность идентификации коллекционных штаммов патогенных и близкородственных буркхольдерий в полуавтоматических системах. Разработаны способы выявления информативных вариабельных участков геномов указанных микроорганизмов, выбраны методы их генетического типирования. Установлена эффективность применения преципитирующих МКА для дифференциации буркхольдерий. Обобщены данные о диагностических возможностях иммуноглобулинов, флуоресцирующих на основе моноклональных антител различной эпитопной направленности, для обнаружения и идентификации В. mallei и В. pseudomallei. Созданы экспериментальные серии амплификационных тест-систем для идентификации возбудителей сапа и мелиоидоза в формате ПЦР в режиме реального времени. Заключение. Предложен ряд методов идентификации и типирования возбудителей сапа и мелиоидоза.
Журн. микробиол., 2016, № 6, С. 25—34
Ключевые слова: возбудители сапа и мелиоидоза, геномы патогенных буркхольдерий, моноклональные антитела, внутривидовое типирование
