CC BY
33
ров - абсолютно необходимый элемент сигнальной стельных коров способствует стимуляции у них специ-
функции в клетках всех типов, в том числе лейкоци- фического клеточного и гуморального иммунитета. Вы-
тах. Снижение его уровня нарушает эффекты нейт- явленная активность препарата может быть обуслов-
рофилов и лимфоцитов, что проявляется в повыше- лена непосредственным воздействием на иммуноком-
нии риска развития маститов у коров с гипокальцие- петентные клетки, а также результатом стресс-регу-
мией в 5-9 раз [10]. Мы установили, что применение лирующего эффекта и влияния на обмен кальция. Им-
Гумитона предотвращает гипокальциемию у коров в муномодулирующая активность добавки служит одним
периодах глубокой стельности и лактации [4]. из механизмов снижения частоты патологий отелов у
Выводы. Применение добавки Гумитон у глубоко- коров и развития у них маститов и эндометритов.
Литература.
1. Sordillo L.M. Current concepts on Immunity and mastitis // WCDS Advances in Dairy Technology. 2009. - V. 21. - P. 111-119.
2. Филов В.А., Беркович А.М. Гуминовые вещества: возможности использования их биологических эффектов // Ветеринария. - 2007. - № 8. - С. 14-16.
3. Islam R.M.S., Schumacher A, Gropp J.M. Humic acid substances in animal agriculture // Pakistan J Nutrition, 2005. - V. 4 (3). - P. 126-134.
4. Кравецкий П.А., Удинцев С.Н., Жилякова Т.П. Влияние препарата на основе торфа гумитон на повышение естественной резистентности и снижение частоты патологических отелов у коров // Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. - 2008. - №. 3.- С. 84-88.
5. Удинцев С.Н., Жилякова Т.П. Коррекция нарушений функции печени глубокостельных и лактирующих коров препаратом гумитон // Сиб. вестн. с.-х. науки. - 2009. - № 12. - С. 67-73.
6. Ohtsuka H., Kohiruimaki M., Hayashi T. et al. Relation between leucocytes population and nutritive conditions in dairy herds
with frequently appearing mastitis // J Vet Med Sci. - 2006. - V.68 (2). - P.113-118.
7. Meirom R., Samina I., Brenner J. Changes in the cellular subpopulations of peripheral blood leucocytes during the
reproductive cycle of dairy cows // Israel J Veterin. Med. - 1999. - V. 54. - № 4. - P. 50-55.
8. Yang T.J., Jantzen-Abo P.A., Williams L.F. Depression of B-lymphocyte levels in the peripheral blood of cows with mastitis // Infection & Immunity. - 1980. - V.27 (1). - P. 90-93.
9. Дерхо М.А., Ткаченко А.В. Использование лигфола в комплексной терапии хронического стронгилоидоза лошадей // В кн. «Итоги и перспективы применения гуминовых препаратов в продуктивном животноводстве, коневодстве и птицеводстве». Материалы конференции. М., 2006. С. 17-24.
10. Kimura K., Reinhardt T.A., Goff J.P. Parturition and hypocalcemia blunts calcium signals in immune cells of dairy cattle / / J Dairy Sci. - 2006. - V. 89. - P. 2588-2595.
THE EFFECT OF FEED ADDITIVE HUMITON TO SOME INDEXES OF SPECIFIC IMMUNITY OF COWS WITH PATHOLOGY OF CALVING, ENDOMETRITIS AND MASTITIS S.N.Udintsev, N.M. Belousov, T.P. Zhilyakova, P.A. Kravetskyi
Summary. The peat-based feed additive Humiton was shown to promote the stimulation of specific humoral and cellular immunity, decreasing of calving pathology frequency, mastitis and endometritis.
Key words. feed supplement Humiton, calving pathology, endometritis, mastitis, T-lymphocytes populations, immunoglobulins.
УДК619:615.244
ГЕПАТОПРОТЕКТОРНЫЕ СВОЙСТВА ЛАРИКАРВИТА
С.Б. НОСКОВ, кандидат ветеринарных наук, директор
Белгородская межобластная ветеринарная лаборатория
E-mail: [email protected]
Резюме. Предложен новыйхлорофилло-каротиновый препарат для лечения и профилактики гепатитов. Применение ларикарвита поросятам-отъёмышам способствовало увеличению среднесуточных приростов и существенному увеличению содержания витамина А в сыворотке крови. При исследовании гистоструктуры печени установлено её восстановление, что указывает на гепатопротекторный эффект препарата. Ключевые слова: каротин, гепатит, витамин А, продуктивность, сыворотка крови, поросята, печень, ла-рикарвит.
Достижения науки и техники АПК, №09-2010 __
Проблема гепатитов сегодня занимает ведущее место среди заболеваний животных. Особенно часто поражения печени наблюдаются в крупных свиноводческих и птицеводческих хозяйствах, где из-за высокой концентрации поголовья необходимо постоянное применение антибактериальных препаратов, вакцин и других средств, сдерживающих развитие инфекционных заболеваний.
Как известно, при заболевании печени наблюдаются гиповитаминозы и иммунодефицитные состояния [1], поэтому возникает необходимость создания новых фармакологических средств, коррегирующих биохимическую функцию печени и иммунологическую реактивность организма.
Гепатопротекторный эффект могут оказывать фармакологические средства, улучшающие метаболические процессы в организме, ингибирующие перекис-ное окисление липидов, обладающие антигепоксичес-
-------------------------------------------- 47
кой активностью. Необходимо отметить, что отечественный рынок заполнен импортными препаратами, которые отличаются высокой стоимостью и не всегда имеют хорошее качество. Поэтому создание новых препаратов, которые обладают гепатопротекторны-ми свойствами и высокой биологической доступностью, отвечают современным требованиям и в полной мере могут заменить дорогостоящие импортные аналоги, - одно из главных направлений научных исследований сегодня.
Исходя из этого, мы совместно с учёными-хими-ками ЗАО «Петрохим» разработали новый комплексный препарат, в состав которого входят каротин, хлорофилл, биофлавоноидный комплекс лиственницы, а также витамины А, Д3 и Е, получивший название ла-рикарвит.
При разработке препарата был учтен синергизм бета-каротина, хлорофилла, жирорастворимых витаминов и биофлаваноидов лиственницы, а также их антиоксидантный эффект. Как известно бета-каротин и витамин Е инактивируют на разных уровнях высокотоксичные формы кислорода, непрерывно образующиеся в процессе нормальной жизнедеятельности любой клетки. Биофлаваноиды лиственницы обладают лечебным антиоксидантым действием, реактивирующим сульфгидрильные соединения и витамин С, а также глутатион и токоферолы, предотвращает переход адреналина в токсичный адренохром. Препятствуя повреждающему действию свободных радикалов, тормозят процессы перекисного окисления липидов клеточных мембран и липопротеидов сыворотки крови, улучшает внутритканевое дыхание. Обладают антитоксическим действием, защищая печень от гепатотропных ядов.
Цель нашей работы - изучить фармакологическое действие ларикарвита на организм поросят-отъёмы-шей и определить гепатопротекторные свойства препарата.
Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:
изучить действие ларикарвита на морфологические и биохимические показатели крови поросят;
определить гистохимические изменения в их печени.
Условия, материалы и методы. О характере влияния ларикарвита на организм поросят судили по клиническим показателям, изменениям белкового, углеводного и минерального обмена, общей неспецифической резистентности организма, интенсивности роста и продуктивности животных [2]. Экспериментальные исследования проводили в производственных условиях колхоза им. Фрунзе Белгородского района Белгородской области.
Для оценки фармакологического действия лари-карвита и определения его оптимальных доз по принципу аналогов сформировали 5 групп поросят-отъё-мышей 30-суточного возраста по 30 гол. в каждой. Первая группа была контрольной. Во второй опытной группе дополнительно к рациону в течение 20 суток применяли препарат бетавитон из расчёта 0,2 мл/кг массы тела, третьей, четвёртой и пятой - ларикарвит по 0,5, 1,0 и 2,0 г/кг массы тела, соответственно.
Кровь для биохимических исследований брали из краниальной полой вены. Гематологические показатели определяли общепринятыми методами [3,4]. Количество общего белка определяли с помощью рефрактометра ИРФ-22, витамина А - спектрофотомет-
рически, иммуноглобулинов - цинксульфатным тестом, общего кальция и неорганического фосфора -унифицированным колориметрически методом с помощью набора реагентов «Ольвекс диагностикум», активность трансаминаз (АлАТ - аланинаминотранс-фераза и АсАТ - аспартатаминотрансфераза) - унифицированным методом Райтмана Френкеля [2].
Гистологическую оценку тканей проводили после убоя поросят. При этом отбирали по три пробы печени от животных контрольной и четвёртой опытной группы, где поросятам, как было установлено в ходе исследования, получали оптимальную дозу ларикарви-та. Материалы фиксировали в 10 %-ном растворе нейтрального формалина с последующим изготовлением парафиновых срезов толщиной до 8 мкм и окраской их гематоксилином и эозином. Микроскопические исследования осуществляли с помощью программы «Видео-Тест-Мастер-морфология».
Цифровой материал подвергали математической обработке в описании Н. А. Плохинского [4] с вычислением средних арифметических (М), их среднестатистических ошибок (m) и критерия достоверности (р). Различия считали достоверными при р<0,05.
Результаты и обсуждение. Наибольший фармакологический эффект установлен при использовании ларикарвита в дозах 1,0 и 2,0 г/кг живой массы. В этих вариантах у животных наблюдались самые высокие среднесуточные приросты (на 51,5 и 52,0 % больше контроля). Уменьшение дозы препарата до 0,5 г/кг сопровождалось выраженным отставанием животных в росте. При этом оптимальной следует считать дозу 1,0 г/кг, так как её увеличение в 2 раза обеспечило незначительную прибавку массы поросят.
Уровень витамина А в сыворотке крови животных после применения бетавитона и максимальных доз ларикарвита более чем в 3 раза превышал контрольные показатели. Количество альбуминов в сыворотке крови поросят III, IV и V опытных групп, по сравнению с контролем, увеличилось на 19,8, 21,1 и 24,9 % соответственно (р<0,05...0,01). Эти изменения можно связать с наличием в препарате витамина А. Наши данные совпадают с результатами исследований [6], которые доказали, что витамин А усиливает в пределах физиологической нормы синтез сывороточных белков.
Полученные результаты изменения биохимических показателей крови свидетельствуют о высокой биологической доступности действующих веществ лари-карвита и прежде всего каротина, который под действием хлорофилла максимально преобразуется в витамин А в организме животных. Фармакокинетика препаратов характеризуется быстрым усвоением р-ка-ротина и трансформацией необходимой его части в витамин А, в зависимости от фонового содержания последнего в печени.
При микроскопическом изучении срезов печени поросят контрольной группы установлено типичное строение органа (см. рисунок, а).
Продолжается формирование междольковых прослоек соединительной ткани. По углам многогранных долек обнаруживаются триады (междоль-ковая артерия, вена и желчный проток). На серединном срезе дольки в центре ее находится центральная вена, сообщающаяся с внутридольковыми синусоидами в виде щелей между неправильными радиальными лучами из печеночных клеток (гепа-тоцитов). В стенке синусоидов хорошо контурируют __ Достижения науки и техники АПК, №09-2010
трольная группа; б - IV опытная группа; 1 - триада (меж-дольковая артерия, вена и желчный проток); 2 - светлые гепатоциты; 3 - гепатоциты с двумя ядрами; 4 - серые ге-патоциты; 5 - темные гепатоциты; 6. явление кариолиза.
удлиненно-овальные гиперхромные ядра куперовых клеток (макрофагов).
Паренхима печени представлена гепатоцитами полигональной формы с шаровидным ядром, чаще одним. Иногда встречаются более крупные гепатоциты с двумя ядрами. Цитоплазма большинства гепатоци-тов имеет сетчатый вид с крупными пустотами, которые образовались в результате растворения жировых включений (светлые гепатоциты). Таких клеток значительно больше на периферии долек. В зоне центральных вен чаще встречаются темные гепатоциты, цитоплазма которых более равномерно окрашивается эозином в розовый цвет, с мелкокапельной жировой инфильтрацией. Ядра темных гепатоцитов отличаются меньшим диаметром и компактностью (атрофический гиперхроматоз). Часть гепатоцитов содержат пик-нотически измененные ядра. В некоторых гепатоци-тах, особенно светлых, обнаруживаются кариолиз и исчезновение клеточных границ. Местами выявляются микроочаги деструктивно и дегенеративно измененных гепатоцитов с признаками зернистой дистрофии и некробиоза. При этом не обнаружено лимфоидной инфильтрации паренхимы и стормы органа.
Приведенная картина гистоструктурной организации паренхимы печени поросят свидетельствует о зна-
чительном жировом перерождении многих гепатоцитов, особенно преферических зон долек. Увеличение количества светлых гепатоцитов может говорить о повышении напряженности детоксикационных процессов в органе в ущерб синтетическим.
При микроскопическом изучении срезов печени поросят четвёртой опытной группы, которым с кормом добавляли ларикарвит из расчёта 1,0 г/кг живой массы, обнаружен ряд гистоструктурных особенностей, по сравнению с контролем (см. рисунок, б).
Состояние стромальных элементов у них практически не различалось. Однако синусоиды в печени особей опытной группы повсеместно отличались более узким просветом, ядра купферовых клеток были четкими, гиперхромными.
Значительно меньше выражена гетерогенность гепатоцитов по всей площади среза долек. Отдельные светлые гепатоциты с крупноячеистой цитоплазмой и двумя ядрами обнаруживаются только на периферии долек. Такие клетки, как правило, крупные, богатые жировыми включениями. Основная масса паренхимы представлена темными гепатоцитами с оксифильной мелкозернистой цитоплазмой. Около трети таких клеток двухядерные, особенно на участках ближе к центральным венам. Ядра, как правило, шаровидные, светлые. Кариопикноза и рексиса не обнаружено. В средней части долек чаще наблюдаются гепатоциты с промежуточными, между светлыми и темными, структурными и тинкториальными характеристиками. Это свидетельствует о том, что темные и светлые гепатоциты, видимо, не морфологические, а функциональные типы клеток печени. Их соотношение, вероятно, зависит от степени токсического воздействия на организм и уровня его естественной резистентности.
Выводы. Таким образом, результаты проведённых исследований свидетельствуют о гепатопротек-торном действии ларикарвита и его влиянии на восстановление функции печени. Оптимальная доза препарата составляет - 1,0 г/кг массы тела. Высокий фармакологический эффект ларикарвита можно объяснить наличием в нём хлорофилла, строение молекул которого, как известно, имеет сходство со строением гемоглобина. Единственное отличие заключается в том, что в центре хелатного комплекса в хлорофилле находится атом магния, а в гемоглобине - железо. Поэтому хлорофилл может оказывать на кровь воздействие, сходное с влиянием гемоглобина: повышать уровень кислорода, ускорять азотистый обмен, способствовать увеличению интенсивности роста и развития животных.
Включение в состав препарата веществ-синерги-стов позволило получить биокоординационный эффект, при котором биологическая доступность р-ка-ротина и трансформация его в витамин А значительно выше, чем при использовании этих компонентов по отдельности.
Таким образом, ларикарвит можно использовать в качестве гепатопротектора, а также для профилактики А-гиповитаминоза поросят. Препарат рекомендуется давать с кормом из расчёта 1,0 г/кг живой массы в течение 20.30 суток.
Литература.
1. Алексеева И.Н., Брызгина Т.М., Павлович С.И. Печень и иммунологическая реактивность. - Киев.: Наукова Думка.
- 1991. - С. 168.
2. Карпуть И.М. Иммунология и иммунопатология болезней молодняка. - Минск: Ураджай, 1993. - 288 с.
3. Кудрявцев А.А., Кудрявцева Л.А. Клиническая гематология животных. - М.: Колос, 1974. - 399 с.
Достижения науки и техники АПК, №09-2010 _____________________________________________________ 49
4. Плохинский Н.А. Биометрия. - М.: Изд. Московского университета, 1987. - 367 с.
5. Симонян Г.А., Хисамутдинов Ф.Ф. Ветеринарная гематология. - М.: Колос, 1995. - 256 с.
6. Kolb E. Thie Bedeutung des Vitamin A fur das Immunsystem: Ubersichtstref. Beri. u. munch, tieraztl. Wschr. - 1995. Bd. 108. 10. - S. 385-390.
HEPATOPROTECTIVE PROPERTIES OF LARIKARVIT
S.B. Noskov
Summary. A new chlorophyl-carotin preparation for treatment and preventive maintenance of hepatitises was offered. The application of larikarvit to weaned pigs promoted increase in daily average increments, essential increase in vitamin A in blood whey. During research of histostructure of the liver we determined its restoration that specified hepatoprotective effect of the preparation.
Key words: Carotin, a hepatitis, vitamin A, efficiency, blood whey, pigs, a liver, larikarvit.
УДК 636.082.12
КРИОСОХРАНЕНИЕ И РАЦИОНАЛЬНОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКИХ РЕСУРСОВ ОВЕЦ И КОЗ*
Ш.Н. НАСИБОВ, кандидат биологических наук, докторант
Б.С. ИОЛЧИЕВ, доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник
П.М. КЛЕНОВИЦКИЙ, доктор биологических наук, главный научный сотрудник
В.А. БАГИРОВ, член-корреспондент РАСХН, зав. лабораторией
В.А. ВОЕВОДИН, аспирант
Н.А. ЗИНОВЬЕВА, член-корреспондент РАСХН, зам. директора
ВНИИ животноводства E-mail: [email protected]
Резюме. На основании использования созданного при ВНИИ животноводства Россельхозакадемии генетического криобанка семени диких видов овец и коз получены гибриды первого поколения сибирского козерога с домашней козой, домашней овцы с архаром и снежным бараном.
Ключевые слова: генетические ресурсы, гибридизация, криобанк, криоконсервация семени, сибирский козерог, архар, снежный баран, эпидидималь-ные сперматозоиды.
Одно из приоритетных направлений развития сельскохозяйственной науки в России - сохранение и рациональное использование генофонда животных с применением новых биотехнологических методов [1-4].
На сегодняшний день по ряду причин наблюдается тенденция сокращения численности и, к сожалению, очень часто исчезновения культурных пород, типов и линий животных. В основном это касается локальных пород, адаптированных к конкретным ареалам, которые не выдерживают конкуренции по продуктивными показателями и вытесняются коммерческими породами. Серьезные опасения вызывает и уменьшение генетического разнообразия.
*Работа выполнена при поддержке РФФИ грант 09-04-13614-офи_ц
Не лучше обстоит дело в дикой фауне, где под воздействием антропогенных факторов численность видов также стремительно сокращается и многие из них находятся на грани исчезновения.
Один из путей рационального развития животноводства связан с вовлечением ресурсов дикой фауны, в том числе путем межвидовой гибридизации. Это эффективный метод, позволяющий обогатить генофонд домашних животных [5-9].
Современные достижения генетики обеспечивают эффективность интродукции высокоценного потенциала дикой фауны в селекционный процесс. Надежный метод сохранения генетических ресурсов животных, а также создания новых селекционных форм - криоконсервация эпидидимального и тестикулярного семени [6-9].
Цель нашей работы - усовершенствование методов сохранения и рационального использования генетических ресурсов для создания новых форм животных с использованием отдаленной гибридизации сельскохозяйственных и диких видов.
Условия, материалы и методы. Работа выполнена во ВНИИ животноводства. Генетический материал собран в ходе экспедиций в Горно-Бадахшанс-кую автономную область Таджикской Республики, п. Кош-агач Республики Алтай, Оймяконский район Республики Саха (Якутия).
Качественные и количественные показатели сперматозоидов определяли по общепринятой методике. После оттаивания визуально оценивали подвижность и жизнеспособность сперматозоидов(при +37 °С каждые 2 ч до полной гибели), используя микроскоп с нагревательным столиком Пакенаса. Криоконсервацию семени проводили на охлажденной в жидком азоте фторопластовой пластине, оттаивание - сухим методом с помощью оттаивателя. Оценку семени осуществляли с использованием видеокамеры и компьютерной программы Image Scope.
Замороженным эпидидимальным семенем диких сородичей осеменяли домашних овец и коз. Для получения межвидовых гибридов применяли метод внутриутробного осеменения. Семенем снежного __ Достижения науки и техники АПК, №09-2010
