CC BY
19
«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017
Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
Результаты. Установлено, что иммунотерапия ауто-логичными ДК, нагруженными рекомбинантными вирусными антигенами, характеризуется хорошей переносимостью, не вызывает тяжелых поствакцинальных реакций. Вакцинотерапия сопровождается возрастанием пролиферативного ответа мононуклеарных клеток на вирусные антигены, в большей степени на Core, индукцией антиген-специфических TM-клеток (с пиком ответа после 2-го курса вакцинаций), и не приводит к генерации регуляторных СD4+СD25+СD127- Т-клеток. Несмотря на отсутствие устойчивого вирусологического ответа, было показано, что пролиферативный ответ МНК на вирусные антигены после 1-го курса вакцинотерапии обратно коррелирует с вирусной нагрузкой. Полученные данные свидетельствуют о том, что ДК, нагруженные НСV Core (1-120) и NS3 (1192-1457) рекомбинантными белками, способны стимулировать антигенспецифический Т-клеточный ответ и могут рассматриваться в качестве адьювантной иммунотерапии в комбинированном лечении больных хроническим гепатитом С.
Заключение. Полученные данные свидетельствуют о безопасности иммунотерапии IFN-ДК, нагруженными рекомбинантными вирусными антигенами, и позволяют рассматривать данный подход в качестве дополнения к терапии пегилированными интерферонами и рибави-рином для улучшения результатов лечения.
ГЕНОТИПИРОВАНИЕ ОККУЛЬТНОГО ГЕПАТИТА В У ВИЧ-ИНФИЦИРОВАНЫХ ПАЦИЕНТОВ
Останкова Ю.В.1, Семенов А.В.1, 2, Тотолян Арег А.1, 2
1ФБУН«Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Пастера», Санкт-Петербург, Россия
2 ГБОУ ВПО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова» Министерства здравоохранения РФ, Санкт-Петербург, Россия
Введение. По данным ООН количество инфицированных вирусом иммунодефицита человека типа 1 (ВИЧ) в мире составляет свыше 35 миллионов человек, количество инфицированных вирусом гепатита С (ВГС) составляет почти 3% от населения земного шара, у 70-80% которых развивается хронический вирусный гепатит С, вирусом гепатита В (ВГВ) заражены почти 2 млрд человек, из которых у 240 млн развивается хроническая форма. Общность механизмов заражения ВГВ, ВГС и ВИЧ-инфекцией способствует повышению вероятности сочетания этих инфекций у пациентов, а чем больше группа людей подвержена действию основных факторов риска в отношении ВГВ и других парентеральных инфекций, тем более высокий уровень носительства HBsAg она будет демонстрировать. Исходя из вышесказанного, логично было бы предполагать высокую частоту встречаемости ВГВ у ВИЧ-инфицированных пациентов. Однако ХВГВ выявляют примерно у 10%, а ХВГС у 25% ВИЧ-инфицированных. Такое противоречие ожидаемого и диагностируемого уровней распространенности ВГВ у ВИЧ-инфицированных пациентов может объясняться использованием для диагностики ВГВ преимущественно серологических методов (главным образом HBsAg), в то время как известно, что ВИЧ способен подавлять репликацию ВГВ, что приводит к распространенности оккульт-
ной формы ХВГВ (окГВ), а иммуносупрессия, вызванная ВИЧ-инфекцией, может приводить к низкой реакции антител на HBsAg, а также реактивации ВГВ.
Цель. Проанализировать распространенность генотипов оккультного гепатита В у HBsAg-негативных ВИЧ-инфицированных лиц с вирусологически неэффективной антиретровирусной терапией (АРВТ).
Материалы и методы. В работе использованы образцы плазмы крови 264 HBsAg-негативных ВИЧ-инфицированных пациентов из СЗФО с вирусологической неэффективностью АРВТ (вирусная нагрузка > 50 МЕ/мл после 6 месяцев АРВТ или повышение вирусной нагрузки после первичного подавления репликации вируса). Выявление ДНК ВГВ проводили с помощью разработанного метода «гнездовой» ПЦР с использованием праймеров, фланкирующих рекомендованный для гено- и субтипирования ВГВ регион Pre-S1/Pre-S2/S протяженностью 1169 п.о., и в дальнейшем проводили прямое секвенирование фрагмента. Первичный анализ полученных в ходе секвенирования фрагментов проводили с помощью программы NCBI Blast в сравнении с ну-клеотидными последовательностями, представленными в международной базе данных GenBank. Выравнивание нуклеотидных последовательностей проводили в программе MEGA версия 5, используя алгоритм ClustalW.
Результаты. При использовании предложенного нами метода выявления ДНК ВГВ при низкой вирусной нагрузке ВГВ был обнаружен у 33,7% пациентов. На основании филогенетического анализа 89 изолятов показано, что в обследованной группе представлен преимущественно ВГВ генотипа D и только один пациент с ВГВ генотипа C, преобладает ВГВ субгенотипа D1 (39,3%) по сравнению с субгенотипами D2 (29,2%), D3 (30,4%) и С1 (1,1%). Вну-тригрупповой процент нуклеотидной идентичности среди пациентов с ВГВ субгенотипов D1, D2 и D3 составил 98,6%±0,6%, 98,9%±0,4% и 98,1%±0,4% соответственно. На филогенетическом древе выделяются несколько тесных кластеров, изоляты которых получены преимущественно (83,3%) от мужчин, более чем для половины из которых в анамнестических данных указана принадлежность к активным или бывшим ПИН. Так, среди пациентов с ВГВ D1 выявлен кластер, внутри которого средняя эволюционная р-дистанция составила 0,0025±0,001, среди пациентов с ВГВ D2 кластер со средней р-дистанцией 0,0013±0,0009, среди пациентов с ВГВ D3 кластер со средней р-дистанцией 0,004±0,001, что указывает на единый источник происхождения вирусов в каждом из этих случаев. Таким образом, становится очевидным, что главную роль в кластеризации играет не столько географическая общность, сколько пути передачи инфекции. Дополнительным подтверждением этого предположения является высокая встречаемость в группе ВГВ D3, ассоциированного с парентеральным инфицированием среди ПИН, при этом четко разделяющегося на специфический кластер близкородственных изолятов и последовательности ВГВ, находящиеся на различных филогенетических отростках, не имеющих близкого генетического родства.
Заключение. По всей видимости, среди ВИЧ-инфицированных лиц ВГВ распространяется не за счет значимых эпидемиологических сетей с конкретными единичными прародителями, а преимущественно независимыми путями посредством гетеросексуальных контактов, исключая отдельные случаи, явно связанные с парентеральным инфицированием у ПИН.
