CC BY
27
Генетические аспекты панникулитов в российской популяции (пилотное исследование)
Крылов М.Ю., Егорова О.Н., Белов Б.С.
ФГБНУ Научно-исследовательский институт ревматологии им. В.А. Насоновой, Москва, Россия 115522 Москва, Каширское шоссе, 34А
V.A. Nasonova Research Institute of
Rheumatology, Moscow, Russia
34A, Kashirskoe Shosse, Moscow 115522
Контакты: Михаил Юрьевич Крылов; [email protected]
Contact:
Mikhail Krylov; [email protected]
Многочисленные клинические наблюдения показывают, что генетический фон человека играет важную роль в предрасположенности ко многим заболеваниям.
Цель исследования — изучить возможную связь полиморфизмов 19А^ гена лептина (ЬЕР), УОТЯ гена антагониста рецептора интерлейкина 1 (ИЛ1РА) и -174G/C гена интерлейкина 6 (ИЛ6) с риском развития клинических фенотипов панникулита (Пн) и клинико-лабораторными показателями.
Материал и методы. В исследование включены 54 пациента (48 женщин и 6 мужчин в возрасте от 15 до 76 лет) с достоверным диагнозом Пн, находившихся на лечении в ФГБНУ НИИР им. В.А. Насоновой. Для генетического исследования сформированы две группы: 46 пациентов с узловатой эритемой (УЭ) и 8 — с паннику-литом Вебера—Крисчена (ПВК). В качестве контроля использованы данные, полученные при генотипирова-нии 197 здоровых неродственных индивидуумов. Для генотипирования полиморфизма 19А^ гена ЬЕР кли-нико-лабораторная информация была доступна от 39 пациентов, для полиморфизма -174G/C гена ИЛ6 — от 43, для УЫТК. (вариабельное число тандемных повторов) гена ИЛ1РА — от 46. Генотипирование выполнено методом полимеразной цепной реакции с последующим анализом полиморфизма длин рестрикционных фрагментов (ПЦР-ПДРФ).
Результаты и обсуждение. Частота генотипа 19GG и аллели G гена ЬЕР в группах пациентов с УЭ и ПВК была достоверно выше, чем в контроле (48,7 и 18,2%, р=0,0004; 50,0 и 18,2%, р=0,053; 70,5 и 45,4%, р=0,0002 соответственно). Частота генотипа А1А1 и аллели А1 полиморфизма УЫТК. гена ИЛ1РА при УЭ была достоверно выше, чем в контроле (67,4 и 44,2%, р=0,011; 80,4 и 61,6%, р=0,002 соответственно). Частота -174GC полиморфизма гена ИЛ6в группе УЭ также была выше, чем в контроле (58,1 и 34,7%, р=0,008). Полиморфизм (-174G/C) показал достоверную ассоциацию с локализацией эритемы (р=0,028). Упациентов с единичной эритемой на теле частота генотипа (-174) GC была достоверно выше, чем у пациентов с множественными очагами эритемы (72,0 и 31,2% соответственно, р=0,025). В группе больных с ПВК дисперсионный анализ показал ассоциацию полиморфизма УЫТК. гена ИЛ1РА с интенсивностью боли по визуальной аналоговой шкале. У носителей генотипа А1А1 была более сильная боль, чем у носителей генотипа А1А2 (83,3+11,5 и 20,0+18,2 мм соответственно, р=0,008).
Заключение. Полученные результаты позволяют говорить о возможности использования генетического тестирования для прогнозирования клинического течения Пн.
Ключевые слова: панникулиты; узловатая эритема; полиморфизмы; ген лептина; ген антагониста рецептора интерлейкина 1; ген антагониста рецептора интерлейкина 6.
Для ссылки: Крылов МЮ, Егорова ОН, Белов БС. Генетические аспекты панникулитов в российской популяции (пилотное исследование). Научно-практическая ревматология. 2016;54(5):553-556.
GENETIC ASPECTS OF PANNICULITIS IN A RUSSIAN POPULATION: A PILOT STUDY Krylov M.Yu., Egorova O.N., Belov B.S.
Numerous clinical observations show that the human genetic background plays an important role in predisposition to many diseases.
Objective: to investigate a possible relationship of the polymorphisms in 19 A/G leptin (LEP) gene, in the interleukin (IL)-1 receptor antagonist (IL-1RA) gene VNTR (variable number of tandem repeats), and in the -174G/C IL-6gene to the risk of developing the clinical phenotypes of panniculitis (PN), clinical and laboratory parameters. Subjects and methods. The study enrolled 54 patients (48 women and 6 men) aged 15 to 76 years with a documented diagnosis of PN who had been treated at the V.A. Nasonova Research Institute of Rheumatology. Group 1 of 46 patients with erythema nodosum (EN) and Group 2 of 8 with Weber-Christian panniculitis (WCP) were formed for genetic study. The genotyping data on 197 healthy unrelated individuals were used as a control. Clinical and laboratory information was available from 39 patients for genotyping 19A/G LEP gene polymorphism, that from 43 patients for -174G/C IL-6 gene polymorphism, and that from 46 patients for IL-1RA polymorphism. Genotyping was performed by a polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) analysis.
Results and discussion. The frequencies of the LEP 19 GG genotype and the LEP G allele in patients with EN and WCP were significantly higher than those in the controls (48.7 and 18.2%, p = 0.0004; 50.0 and 18.2%, p = 0.053; and 70.5 and 45.4%, p = 0.0002, respectively). The frequencies of the A1A1 genotype and A1 allele of IL-1RA gene VNTR polymorphism in EN group were significantly higher than those in the controls (67.4 and 44.2%, p=0.011; 80.4 and 61.6%, p = 0.002, respectively). The frequency of IL-6-174GC polymorphism was also higher in the EN group than that in the controls (58.1 and 34.7%, p = 0.008).
The -174G/C polymorphism showed a significant association with the site of erythema (p = 0.028). In patients with a single lesion of erythema on the body, the frequency of the -174 GC genotype was significantly higher than that in those with multiple foci of erythema (72.0 and 31.2%, respectively; p = 0.025). In the WCP group, analysis of variance showed an association of IL-1RA gene VNTR polymorphism with the intensity of pain, assessed by the visual analogue scale. The carriers of the A1A1 genotype had more severe pain than those of the A1A2 genotype (83.3+11.5 and 20.0+18.2 mm, respectively; p = 0.008).
Conclusion. The findings suggest that genetic testing can be used to predict the clinical course of PN.
Key words: panniculitis; erythema nodosum; polymorphisms; leptin gene; interleukin-1 receptor antagonist gene; interleukin-6 receptor antagonist gene. For reference: Krylov MYu, Egorova ON, Belov BS. Genetic aspects of panniculitis in a Russian population: A pilot study. Nauchno-Prakticheskaya Revmatologiya = Rheumatology Science and Practice. 2016;54(5):553-556 (In Russ.). doi: http://dx.doi.org/10.14412/1995-4484-2016-553-556
Панникулиты (Пн) представляют собой группу гетерогенных воспалительных заболеваний, протекающих с поражением подкожной жировой клетчатки (ПЖК). Наиболее часто врачи встречаются с клиническим вариантом Пн в виде узловатой эритемы (УЭ). Остальные клинические формы, включая панникулит Вебера—Крисчена (ПВК), диагностируются значительно реже. УЭ представляет собой септальный Пн и характеризуется единичными или множественными узловатыми высыпаниями с преимущественной их локализацией на нижних конечностях. Эритема может быть идиопатической или ассоциированной с инфекциями, лекарственными препаратами и системными заболеваниями [1]. Генетические факторы риска при УЭ изучены в ряде исследований. В работе М. ЛтоИ и соавт. [2] исследовалась ассоциация между полиморфизмом гена ICAM1, кодирующего белок межклеточной адгезии, и УЭ, подтвержденной биопсией. Молекула адгезии является членом суперсемейства иммуноглобулинов и играет важную роль во взаимодействии «клетка—лейкоцит» при воспалении [3]. Авторы показали отсутствие повышенного риска УЭ в зависимости от полиморфизма ICAM1 у северных испанцев. Интерлейкин 1 (ИЛ1) относится к семейству белков, играющих главную роль при иммунном ответе. Антагонист рецептора ИЛ1 (ИЛ1РА) является антивоспалительным агентом, который связывается с рецептором ИЛ1 и таким образом конкурирует за связывание с ИЛ1а и ИЛ1|3 [4]. Изучение гена ИЛ1РА при УЭ не выявило достоверных различий в частоте генотипов и аллелей между больными и контролем [5]. Исследование полиморфизмов генов лимфотоксина а и фактора некроза опухоли а (ФНОа) показало связь гена ФНОа с УЭ среди кав-казоидных больных с саркоидозом [6].
ИЛ6 является провоспалительным цитокином, который вызывает активацию и пролиферацию Т-клеток и способствует образованию гранулемы. Полиморфизм (-174G/C) гена ИЛ6 связан с изменением транскрипционной активности в случае замены основания G на С в положении -174 [7].
Генетические аспекты ПВК практически не изучены. Воспалительная природа Пн определяет актуальность исследования иммунологических механизмов, задействованных при этой патологии.
Цель исследования — изучить взаимосвязь полиморфизмов генов LEP, ИЛ6 и ИЛ1РЛ с предрасположенностью к развитию различных вариантов Пн.
Материал и методы
В исследование включено 54 больных (48 женщин и 6 мужчин в возрасте от 15 до 76 лет, средний возраст 38,9+14,8 года), обратившихся в ФГБНУ НИИР им. В.А. Насоновой с направительным диагнозом УЭ или Пн и наблюдавшихся с 2011 по 2014 г. Для генетического исследования были сформированы две группы больных. В первую вошли 46 пациентов с диагнозом УЭ независимо от этиологического фактора, во вторую — 8 больных с ПВК. Диагноз ПВК во всех случаях был верифицирован при гистоморфологическом исследовании биоптата кожи и ПЖК.
В качестве контроля были использованы данные, полученные ранее, в результате генотипирования 197 здоровых не родственных индивидуумов.
Исследование было одобрено этическим комитетом ФГБНУ НИИР им. В.А. Насоновой. Письменное информированное согласие было получено от всех пациентов.
Генотипирование. У всех исследованных пациентов были взяты образцы крови. ДНК была выделена из свежих или замороженных образцов крови солевым методом [8]. Информация по генотипированию полиморфизма 19A/G гена LEP была доступна от 39 пациентов, (-174 G/C) гена ИЛ6 - от 43, VNTR гена ИЛ1РА - от 46.
В группе ПВК генотипирование проведено по указанным полиморфизмам у всех 8 пациентов. Исследования выполнены с помощью метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) с последующим анализом полиморфизма длин рестриктных фрагментов (ПДРФ) в электрофорезе и визуализацией полученных фрагментов в ультрафиолетовом свете.
Статистический анализ. Различия по частоте генотипов изученных генов между больными и контролем были оценены с использованием четырехпольной таблицы сопряжения. Количественные показатели представлены как средние ± стандартное отклонение (М+S). Дисперсионный анализ проведен с помощью метода ANOVA post hoc с поправкой на множественные сравнения. Уровень р<0,05 был принят за статистически значимый при использовании точного критерия Фишера для малых выборок.
Результаты
В табл. 1 представлены средние значения основных клинико-лабораторных показателей пациентов с УЭ и ПВК.
Анализ демографических показателей показал статистически достоверные различия по возрасту между группами УЭ и ПВК (р=0,004). Длительность заболевания у пациентов с ПВК была достоверно выше по сравнению с группой УЭ (р=0,0003). Не обнаружено различий по характеру течения заболевания, месту локализации эритемы, числу узлов, интенсивности боли по ВАШ, что, вероятно, обусловлено малым количеством больных с ПВК. СОЭ в группе пациентов с ПВК была значимо выше, чем у больных УЭ (р=0,005). У больных ПВК отмечена тенденция к более выраженному повышению уровня СРБ, однако различия не достигали статистической значимости (р=0,080).
Частота генотипов изученных полиморфизмов представлена в табл. 2.
Генотип GG полиморфизма 19A/G гена LEP у пациентов с УЭ и ПВК встречался достоверно чаще, чем в контроле [48,7 и 18,2% соответственно, отношение шансов (ОШ) 4,28 при 95% доверительном интервале (ДИ) 1,8-10,1; р=0,0004 и 50,0 и 18,2% соответственно, 0Ш=4,50; 95% ДИ 0,8-25,9; р=0,053]. Частота объединенного генотипа GG+AG в группе пациентов с УЭ была достоверно выше, чем в контрольной группе (соответственно 92,3 и 66,7%, ОШ=4,5; 95% ДИ 1,3-24,3; р=0,021). Частота аллели G в группе УЭ также была выше, чем в контроле
(70,5 и 45,4% соответственно, ОШ=2,87; 95% ДИ 1,6-5,2; р=0,0002).
При анализе частоты генотипов УЫТЯ гена ИЛ1РЛ было обнаружено, что генотип Л1Л1 значительно чаще встречался среди пациентов с УЭ, чем в контроле (соответственно 67,4 и 44,2%, ОШ=2,61; 95% ДИ 1,2-5,7; р=0,011). Частота аллели А1 при УЭ также была выше, чем в контроле (80,4 и 61,6% соответственно; р=0,002).
Анализ полиморфизма (-174) G/C гена ИЛ6 показал достоверно более высокую частоту генотипа GC у пациентов с УЭ по сравнению с контролем (58,1 и 34,7% соответ-
Таблица 1 Основные клинико-лабораторные параметры больных УЭ и ПВК
Характеристики УЭ (n=46) ПВК (n=8) р
Возраст, годы, М±й 36,5±13,7 52,6±14,2 0,004
Длительность заболевания, мес, М±й 14,5±28,1 181,8±255,8 0,0003
Пол, м/ж 5/41 1/7 >0,05
Течение заболевания, п (%):
острое/подострое 21 (47,7) 3 (37,5) >0,05
хроническое 23 (52,3) 5 (62,5) >0,05
Эритема, п (%):
единичная 27 (62,8) 3 (37,5) >0,05
множественные 16 (37,2) 5 (62,5) >0,05
Число узлов, п (%):
от 1 до 5 24 (55,8) 7 (87,5) >0,05
>5 16 (44,2) 1 (12,5) >0,05
Интенсивность боли 47,5±32,3 43,7±35,4 >0,05
по ВАШ, мм, М±й
СОЭ, мм/ч, М±й 16,6±14,3 32,1±9,8 0,005
СРБ, мг/л, М±й 13,4±25,2 32,9±42,1 0,080
Примечание. ВАШ - визуальная аналоговая шкала, СРБ - С-реактивный белок.
Таблица 2 Распределение частот генотипов
полиморфизмов генов LEP, ИЛ1РА, ИЛ6 среди больных УЭ, ПВК и в контрольной группе
Генотип Контроль УЭ р ПВК
LEP 110 39 8
AA, n (%) 30 (27,3) 3 (7,7) 1 (12,5)
AG, n (%) 60 (54,5) 17 (43,6) 3 (37,5)
GG, n (%) 20 (18,2) 19 (48,7)* 0,0002 4 (50,0)**
Аллель 2n: 20 78 16
A, n (%) 120 (54,6) 23 (29,5) 5 (31,3)
G, n (%) 100 (45,4) 55 (70,5)* 0,0002 11 (68,7)
ИЛ1РА: 129 46 8
A1A1, n (%) 57 (44,2) 31 (67,4)* 0,011 3 (37,5)
A1A1, n (%) 45 (34,9) 12 (26,1) 4 (50,0)
A2A2, n (%) 27 (20,9) 3 (6,5) 1 (12,5)
Аллель 2n: 258 92 16
A1, n (%) 159 (61,6) 74 (80,4)* 0,002 10 (62,5)
A2, n (%) 99 (38,4) 18 (19,6) 6 (37,5)
ИЛ6: n=187 n=43 n=8
GG, n (%) 89 (47,6) 12 (27,9) 2 (25,0)
GC, n (%) 65 (34,7) 25 (58,1)* 0,008 5 (62,5)
CC, n (%) 33 (17,6) 6 (13,9) 1 (12,5)
Аллель 2n: 374 86 16
G, n (%) 243 (65,0) 40 (57,0) 9 (56,2)
C, n (%) 131 (35,0) 37 (43,0) 7 (43,8)
р
0,053
ственно; ОШ=2,61; 95% ДИ 1,3-5,5; р=0,008). Частота объединенного генотипа GC+CC в группе пациентов с УЭ также была выше, чем в контроле (соответственно 72,0 и 34,7%; ОШ=2,35; 95% ДИ 1,1-5,3; р=0,032). Не выявлено различий частоты изучавшихся генотипов и аллелей между группой с ПВК и контролем.
В группе больных с УЭ дисперсионный анализ ANOVA показал отсутствие ассоциации полиморфизмов 19A/G и VNTR генов LEP и ИЛ1РА с клиническими симптомами Пн (числом эритематозных узлов, локализацией эритемы, течением, интенсивностью боли по ВАШ, длительностью заболевания, СОЭ и уровнем СРБ). Только полиморфизм (-174G/C) гена ИЛ6 показал достоверную ассоциацию с распространенностью эритемы (р=0,028). Установлено, что у пациентов с единичным очагом эритемы на теле (голень или бедро и т. д., рис. 1), частота генотипа GG была значимо выше, чем у пациентов со множественными очагами эритемы (рис. 2; соответственно 72,0 и 31,2%; ОШ=5,66; 95% ДИ 1,2-28,2; р=0,025).
В группе больных с ПВК дисперсионный анализ показал ассоциацию полиморфизма VNTR гена ИЛ1РА с интенсивностью боли по ВАШ. У носителей генотипа A1A1 боль была значимо более сильной, чем у носителей генотипа А1А2 (соответственно 83,3+11,5 и 20,0±18,2 мм; р=0,008).
Обсуждение
В настоящем пилотном исследовании мы изучили генетическую детерминацию двух клинических форм
Пн - УЭ и ПВК. Мы впервые проанализировали ассоциацию трех полиморфизмов со специфическими клиническими симптомами Пн. Наблюдались достоверные различия таких показателей, как возраст и длительность заболевания.
Рис. 1. Больная О. - единичные эритема-тозные узлы на голенях
Примечание. * - различия между группой больных УЭ и контролем; ** - различия между группой больных ПВК и контролем.
Рис. 2. Больная Г. - множественные распространенные эритема-тозные узлы на голенях, бедрах и предплечьях
Пациенты с УЭ были моложе больных ПВК и имели меньшую длительность заболевания. Не обнаружено значимых различий между этими группами по характеру течения заболевания, локализации эритемы, числу узлов. Вместе с тем выявлены значимые различия СОЭ и тенденция к более высокому уровню СРБ у больных ПВК по сравнению с группой УЭ.
В группах пациентов с УЭ и ПВК нами впервые была выявлена статистически значимо повышенная частота генотипа GG гена LEPпо сравнению с контролем. В доступной литературе нам не встретилось исследований по ассоциации полиморфизма 19A/G гена LEP с УЭ или ПВК, а также с Пн.
Повышенная частота генотипа 19GG гена LEP была обнаружена нами у женщин с постменопаузальным остео-порозом [9]. Пациентки с GG-генотипом имели средний показатель минеральной плотности кости шейки бедра на 4% ниже, чем у носителей генотипа АА. Данный полиморфизм не был связан ни с одним из антропометрических показателей.
Проведенные ранее исследования [10] показали, что аллель G в гомозиготном состоянии (19GG) была ассоциирована с более низкими уровнями лептина по сравнению с генотипами AA и AG.
В настоящем исследовании установлено, что частота генотипа A1A1 полиморфизма VNTR гена ИЛ1РА среди пациентов с УЭ была достоверно выше, чем в контроле. В то же время M. Amoli и соавт. [5] в своей работе подобных ассоциаций не выявили. Эти различия можно объяснить клинической гетерогенностью заболеваний, ассоциирующихся с УЭ.
Анализ полиморфизма (-174) G/C гена ИЛ6 показал достоверно более высокую частоту GC-генотипа у пациентов группы УЭ по сравнению с контролем. В исследовании A. Maver и соавт. [11] изучались полиморфизмы генов каскада ИЛ и их эффект на предрасположенность к саркоидо-зу в Словении, при котором наблюдается вторичная УЭ. Исследование показало, что носители аллели (-174C) гена
ЛИТЕРАТУРА
1. Gonzalez-Gay MA, Garcia-Porrua C, Pujol RM, Salvarani C. Erythema nodosum: a clinical approach. Clin Exp Rheumatol. 2001;19(4):365-8.
2. Amoli MM, Ollier WER, Lueiro M, et al. Lack of association between ICAM-1 gene polymorphisms and biopsy-proven erythema nodosum. J Rheumatol. 2004;31(2):403-5.
3. Springer TA. Traffic signals for lymphocyte recirculation and leukocyte emigration: the multistep paradigm. Cell. 1994;76:301-14. doi: 10.1016/0092-8674(94)90337-9
4. Arend WP. Interleukin 1 receptor antagonist. A new member of the interleukin 1 family. J Clin Invest. 1991;88(5):1445-51.
doi: 10.1172/JCI115453
5. Amoli MM, Miranda-Filloy JA, Vazquez-Rodriguez TR, et al. Interleukin-1 receptor antagonist gene polymorphism in patients with biopsy-proven erythema nodosum. Clin Exp Rheumatol. 2010 Jan-Feb;28(1 Suppl 57):115-6.
6. McDougal KE, Fallin MD, Moller DR, et al. ACCESS Research Group. Variation in the lymphotoxin-a/tumor necrosis factor locus modifies risk of erythema nodosum in sarcoidosis. J Invest Dermatol. 2009 Aug;129(8):1921-6. doi: 10.1038/jid.2008.456
7. Fishman D, Faulds G, Jeffery R, et al. The effect of novel polymorphisms in the interleukin-6 (IL-6) gene on IL-6 transcription and plasma IL-6 levels, and an association with systemic-onset juvenile chronic arthritis. J Clin Invest. 1998;102:1369-76.
doi: 10.1172/JCI2629
ИЛ6 имели повышенный риск развития саркоидоза. В работе К. McDougal и соавт. [6] были изучены 25 полиморфизмов 19 генов 659 пациентов с саркоидозом и аналогичной по численности контрольной группы. Авторы не нашли значимых различий между больными европейцами или афроамериканцами и здоровым контролем. Белок ИЛ6 является провоспалительным цитокином, который вызывает активацию и пролиферацию Т-клеток и принимает участие в образовании гранулемы. Повышенная концентрация этого цитокина обнаружена в образцах легких от пациентов с саркоидозом [12].
Таким образом, в настоящем исследовании впервые в России проведен анализ роли полиморфизмов ряда генов медиаторов воспаления, ассоциированных с предрасположенностью к Пн. К сожалению, в группе больных ПВК статистический анализ был осложнен из-за малого объема выборки. В то же время надо принять во внимание низкую частоту этой нозологии практически во всех популяциях. Необходимы дальнейшие исследования этой малоизученной нозологической формы с использованием увеличенных размеров выборок пациентов и включением других популяционных когорт. Представляется также целесообразным изучение всех функциональных вариантов генов разных локусов одновременно с целью подтверждения полученных результатов. Такой подход поможет уточнить механизмы, лежащие в основе генетической детерминированности Пн разной этиологии.
Прозрачность исследования
Исследование не имело спонсорской поддержки. Исследователи несут полную ответственность за предоставление окончательной версии рукописи в печать.
Декларация о финансовых и других взаимоотношениях
Все авторы принимали участие в разработке концепции и дизайна исследования и написания рукописи. Окончательная версия рукописи была одобрена всеми авторами. Авторы не получали гонорар за исследование.
8. Miller SA, Dykes DD, Polesky HA. A simple salting out procedure for extracting DNA from human nucleated cells. Nucleic Acids Res. 1988;16:12-5. doi: 10.1093/nar/16.3.1215
9. Крылов MЮ, Беневоленская ЛИ, Мякоткин ВА. Полиморфизм A19g гена лептина и полиморфизмы Gln223arg и Lys109arg гена рецептора лептина при постменопаузальном остеопорозе. Научно-практическая ревматология. 2010;48(5):27-31 [Krylov MY, Benevolenskaya LI, Myakotkin VA. Leptin A19G polymorphism and leptin receptor Gln223Arg and Lys109Arg polymorphismsin postmenopausal osteoporosis. Nauchno-Prakticheskaya Revmatologiya = Rheumatology Science and Practice. 2010;48(5):27-31 (In Russ.)]. doi: 10.14412/19954484-2010-727
10. Hager J, Clement K, Francke S, et al. A polymorphism in the 5' untranslated region of the human ob gene is associated with low leptin levels. Int J Obes. 1998;22:200-5.
doi: 10.1038/sj.ijo.0800567
11. Maver A, Medica I, Salobir M, et al. Polymorphisms in genes coding for mediators in the interleukin cascade and their effect on susceptibility to sarcoidosis in the Slovenian population. Intern J Mol Med. 2007;20:385-90. doi: 10.3892/ijmm.20.3.385
12. Minshall EM, Tsicopoulos A, Yasruel Z, et al. Cytokine mRNA gene expression in active and nonactive pulmonary sarcoidosis. Eur Respir J. 1997;10:2034-9.
doi: 10.1183/09031936.97.10092034
