УДК / UDC 639.31:597.423:591.111
ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ ОСЕТРОВЫХ РЫБ, ВЫРАЩЕННЫХ В
УСЛОВИЯХ АКВАКУЛЬТУРЫ
HEMATOLOGICAL PARAMETERS OF STURGEON FISH GROWN IN THE
AQUACULTURE CONDITIONS
Ладыш И.А., доктор c/x наук, зав. кафедрой экологии и природопользования Ladysh I.A., Doctor of Agricultural Sciences, Head of the Department of Ecology and
Environmental Management Кравченко A.C., магистр по направлению подготовки «Технология производства и переработки продукции животноводства» Kravchenko A.S., Master's degree in the field of training "Technology of production
and processing of livestock products" Бублик B.H., кандидат биологических наук, зав. кафедрой физиологии и
микробиологии
Bublik V.N., Candidate of Biological Sciences, Head of the Department of Physiology
and Microbiology
ФГБОУ ВО «Луганский государственный аграрный университет имени К.Е. Ворошилова», Луганск, Россия
Federal State Budgetary Educational Establishment of Higher Education «Lugansk State Agrarian University named after K.E. Voroshilov», Lugansk, Russia
Аннотация. В статье представлены морфологические, биохимические показатели крови и посчитаны - эритроцитарный и индекс Кребса рыб семейства осетровых - стерляди и бестера, выращенных в условиях аквакультуры. По морфологическому составу установлены достоверные различия только по количеству эритроцитов. У представителей стерляди их было на 39 % больше в сравнении с бестером. Средняя концентрация гемоглобина в одном эритроците была большей у стерляди почти в 2 раза. Достоверных отличий по количеству в крови осетровых лейкоцитов не установлено, кроме эозинофилов. Из всех лейкоцитов самыми многочисленными были лимфоциты (60,9 и 68,93), что свидетельствует о лимфоцитарном профиле крови у осетровых. Индекс Кребса, который отражает дисбаланс между различными звеньями иммунитета, у представителей стерляди был в 1,5 раза выше в сравнении со сверстниками бестера. Анализ показал, что морфологические показатели крови у стерляди и бестера были в пределах физиологической нормы. По биохимическим показателям достоверные различия регистрировались по содержанию альбуминов и следует отметить, что их количество было небольшим, в сравнении с литературными данными. Коэффициент де Ритиса был также у нижней границы нормы. Таким образом, морфологические и биохимические показатели у представителей осетровых находились в границах референтных значений, что указывает на хорошие адаптационные способности рыбы, выращенной в условиях аквакультуры. Следует отметить, что у представителей стерляди количество эритроцитов, средняя концентрация гемоглобина в одном эритроците были более высокими в сравнении с бестером, что на наш взгляд свидетельствует о разной адаптивной способности рыбы к условиям содержания в воде с низким насыщением кислорода.
Ключевые слова: стерлядь, бестер, кровь, гемоглобин, эритроциты, лейкоциты, тромбоциты, общий белок
The article presents morphological and biochemical blood parameters and calculates the erythrocyte and Krebs index of sturgeon family fish - sterlet and bester, grown in the aquaculture conditions. According to the morphological composition, significant differences were found only in the number of red blood cells. Sterlet representatives had 39% more of them compared to bester. The average concentration of hemoglobin in one erythrocyte was almost 2 times higher in sterlet. There are no significant differences in the number of sturgeon leukocytes in the blood, except for eosinophils. Of all the leukocytes, lymphocytes were the most numerous (60.9 and 68.93), which indicates the lymphocytic profile of the blood in sturgeons. The Krebs index, which reflects the imbalance between different levels of immunity, was 1.5 times higher in sterlet representatives compared to Bester's peers. The analysis
showed that the morphological blood parameters of sterlet and bester were within the physiological norm. According to the biochemical parameters, significant differences were recorded in the content of albumins and it should be noted that their number was small in comparison with the literature data. The de Ritis coefficient was also at the lower limit of the norm. Thus, morphological and biochemical parameters of sturgeon representatives were within the limits of reference values, which indicates good adaptive abilities of fish grown in the aquaculture conditions. It should be noted that representatives of sterlet had a higher number of red blood cells and an average concentration of hemoglobin in one red blood cell compared to bester, which in our opinion indicates a different adaptive ability of fish to conditions in water with low oxygen saturation.
Keywords: sterlet, bester, blood, hemoglobin, erythrocytes, leukocytes, platelets, total protein
Введение. В настоящее время количество работ, посвященных изучению физиологического состояния осетровых, выращенных в искусственных условиях значительно возросло [1, 2]. Ученые отмечают, что в период выращивания рыбы необходимо проведение систематических морфологических, физиологических и биохимических исследований [3], которые позволят контролировать показатели крови в пределах нормы [4]; изучают особенности роста различных гибридных форм осетровых видов рыб [5]; рассматривают перспективы искусственного выращивания гибридных форм [6], а также определяют гематологические показатели осетровых рыб с нормальной и пониженной массой тел [7] и отмечают, что определение интегральных лейкоцитарных индексов может быть альтернативой сложным иммунологическим и биохимическим исследованиям [8].
Цель исследований - изучить гематологические показатели представителей осетровых - стерляди и бестера, выращенных в установках замкнутого водоснабжения.
Условия, материалы и методы. Исследования проведены на осетровых рыбах в возрасте 1,5 лет, выращенных в установках замкнутого водоснабжения на базе лаборатории кафедры экологии и безопасности жизнедеятельности ФГБОУ ВО ДонГТУ (г. Алчевск). Отбор образцов крови проводили прижизненно. Провели морфологический анализ крови, в ходе которого определили содержание гемоглобина, а также количество эритроцитов и их специфические показатели (MCV, MCHC), лейкоцитов и их разновидностей в процентном соотношении, а также и количество тромбоцитов, и величину гематокрита. Биохимический анализ крови включал следующие показатели: количество общего белка, альбуминов, глобулинов, мочевины, креатинина, AST, ALT, глюкозы, кальция и фосфора. Был определен Индекс Кребса, который рассчитывали по формуле: Индекс Кребса = нейтрофилы /лимфоциты. Гематологические исследования были проведены на базе ветеринарной клиники «Поливет» (клинический анализатор Mindray BC-2800vet и биохимический -Mindray BA-88A). Статистическая обработка полученных результатов осуществлялась с применением лицензионной программы StatSoft Statistica v. 6.0. Достоверность различий оценивали при помощи t-критерия Стьюдента с вероятностью ошибки р<0,05.
Результаты и обсуждение. Общее количество крови у рыб варьирует от 1,1 до 7,3 %. Она имеет ярко-красный цвет, специфический запах рыбьего жира, маслянистую консистенцию, солоноватый вкус. Основная функция крови -транспортная, которая включает доставку кислорода, питательных веществ и отработанных шлаков, а также гормонов [9]. Кровь рыб делится на циркулирующую, протекающую по сосудам, и депонируемую, исключенную из кругооборота [10].
Морфологические показатели крови рыбы, семейства осетровых (стерлядь, бестер) представлены в таблице 1.
Таблица 1 - Морфологические показатели крови рыбы семейства осетровых
Вид Гемоглобин, г/л Эритроциты 1012/л Лейкоциты, 109 /л Гематокрит, %
Стерлядь 58,67±9,43 0,36±0,02* 55,53±6,86 3,5±0,67
Бестер 39,33±2,69 0,26 ± 0,08 76,83±10,80 4,8± 0,55
Анализ данных, приведенных в таблице 1 показал, что достоверные различия установлены только по количеству эритроцитов. Так у стерляди их было на 39 % больше в сравнении с бестером. Как отмечает Е.В. Сухаренко, у разных видов рыб имеются сильно выраженные различия в морфологии клеток крови и содержится много молодых форм клеток. У взрослых рыб форма эритроцитов эллиптическая, у молоди - округлая и присутствует полиморфизм (рис.1) [10].
Рисунок 1 - Кровь осетровых рыб: 1 - эритроциты, 2 - гранулярный лейкоцит (нейтрофил), 3 - агранулярный лейкоцит (лимфоцит), 4 -гранулярный лейкоцит (нейтрофил)
Лейкоциты крови рыб представляют собой группу клеток с большим разнообразием линейных размеров и различной структурой ядра. Лимфоциты являются самой большой группой лейкоцитов рыб (до 95%) и обеспечивают реакции гуморального и клеточного иммунитета. Также наблюдается большое морфологическое разнообразие и высокая изменчивость тромбоцитов [10].
Одной из особенностей крови рыб является то, что лейкоцитарная формула у них в зависимости от физиологического состояния может меняться, поэтому не всегда в крови обнаруживаются все свойственные данному виду гранулоциты [11].
Лейкоцитарная формула крови рыбы семейства осетровых показана в таблице 2.
Таблица 2 - Лейкоцитарная формула крови рыбы семейства осетровых, %
Вид Нейтрофилы Эозинофилы Моноциты Лимфоциты Тромбоциты
Стерлядь 29,27±4,97 2,23±0,05* 7,60±0,72 60,9±5,41 121,33±21,4
Бестер 21,83± 4,21 0,63± 0,05 8,60±0,38 68,93±4,61 116,0 ±6,02
Анализ данных, приведенных в таблице 2 показал, что достоверных отличий по количеству в крови осетровых лейкоцитов не установлено, кроме эозинофилов. Представители самой малочисленной их группы - базофилы, в мазке крови не определялись. Из всех лейкоцитов самыми многочисленными были лимфоциты, что свидетельствует о лимфоцитарном профиле крови у осетровых. По количеству тромбоцитов разница составила 4 %.
Эритроцитарные индексы, такие как средний объем эритроцита (М^), средняя концентрация гемоглобина в эритроците (МСНС), предложенные в 1929 году М Wintrobe и которые качественно характеризуют клетки, а не их количество, показаны на рисунке 2:
1800 -
1600 -
1400 -
1200 -
1000 800 600 400 200 0
Средний объем эритроцита (МСУ,П)
Средняя концентрация гемоглобина в эритроците (МСНС, Юй/!)
I Стерлядь ■ Бестер
Рисунок 2 - Эритроцитарные индексы рыбы семейства осетровых (МОУ,
Н; МСНС, 10 д/1)
Следуют отметить, что достоверных отличий по такому показателю как средний объем эритроцита у представителей осетровых не установлено. При этом средняя концентрация гемоглобина в одном эритроците была большей у стерляди почти в 2 раза. Снижение данного показателя у бестера, возможно указывает на ответную реакцию рыбы на низкие гидрохимические показатели воды в установке замкнутого водоснабжения.
Индекс Кребса отражает дисбаланс между различными звеньями иммунитета. У представителей стерляди (0,5) данный показатель был в 1,5 раза выше в сравнении со сверстниками бестера (0,3).
Морфологические показатели крови у стерляди и бестера были в пределах физиологической нормы, что согласуется с литературными данными [12, 13].
Биохимический анализ крови семейства осетровых представлен в таблице 3.
Анализ данных, приведенных в таблице 3 показал, что большинство показателей были в границах физиологической нормы. При этом достоверные различия регистрировались по содержанию альбуминов и следует отметить, что их количество было небольшим, в сравнении с литературными данными [4, 14].
Коэффициент де Ритиса был также у нижней границы нормы [15].
Таблиц
а 3 - Биохимический анализ крови рыб семейства осетровых
№ Показатель Стерлядь Бестер
1 Общий белок, г/л 25,73±1,45 22,7±1,84
2 Альбумин, г/л 11 ±0,45* 8,67±0,26
3 Глобулин, г/л 14,73±1,9 14,03±1,78
4 A/G 0,77±0,14 0,60±0,08
5 АЛТ, U/l 97,2±1,83 94,8±2,97
6 ACT, U/l 268,8±20,68 326,57±28,28
7 Мочевина, Ммоль/л 2,9±0,08* 2,63±0,03
8 Креатинин, Мкмоль/л 32,6±2,47 37,95±7,62
9 Глюкоза, Ммоль/л 3,37±1,01 2,45±0,62
10 Кальций, ммоль/л 1,64±0,05 2,1 ±0,11
11 Фосфор, ммоль/л 3,44±0,33 3,39±0,13
Выводы. Морфологические и биохимические показатели у представителей осетровых находились в границах референтных значений, что указывает на хорошие адаптационные способности рыбы, выращенной в условиях аквакультуры. Следует отметить, что у представителей стерляди количество эритроцитов, средняя концентрация гемоглобина в одном эритроците были более высокими в сравнении с бестером, что на наш взгляд свидетельствует о разной адаптивной способности рыбы к условиям содержания в воде с низким насыщением кислорода.
БИБЛИОГРАФИЯ
1. Волкова А.Р. Перспективы рыболовства и аквакультуры в современном мире: оценка и анализ // URL:https://elibrary.ru /download/elibrary_ 50324902_17273995.pdf
2. Буяров B.C., Юшкова Ю.А. Эффективность применения биологически активных добавок в рыбоводстве // Вестник ОрелГАУ, 3(60), Июнь 2016, URL:http://dx.doi.org/10.15217/48484
3. Лапухин Ю.А., Пономарев C.B., Сорокина М.Н. Сравнительная оценка функционального состояния молоди гибрида стерлядь x белуга // Вестник АГТУ. 2008. № 3 (44). С.14-17.
4. Басонов O.A., Судакова A.B. Сравнительная характеристика гематологических показателей осетровых разных генотипов, выращенных в условиях замкнутого водоснабжения // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2022. № 4. (96). С.330-332.
5. Особенности роста различных гибридных форм осетровых видов рыб / E.H. Пономарева, A.B. Ковалева, М.В. Коваленко, К.Д. Матишов, М.В. Яицкая // Наука юга России. 2019. Т. 15. № 3. С. 81-88.
6. Газимагомедова И.К., Маглмаев Ф.М. Перспективы искусственного выращивания гибрида русского и ленского осетров в условиях Дагестана // Вестник Дагестанского государственного университета. Серия 1. Естественные науки. 2022. Том 37. Вып. 2. С.96-101.
7. Конькова A.B., Астафьева С.С., Королев А.О. Сравнение гематологических показателей особей русского осетра с нормальной и пониженной массой тел // URL: https://elibrary.ru/download/elibrary _60224411_78818032.pdf
8. Егорова В.И., Волкова И.В. Динамика интегральных гематологических индексов рыб при хронической интоксикации // Рыбное хозяйство. 2024. № 1. С.81-87 // URL: https://elibrary.ru/download/elibrary _65622739 _42988870.pdf
9. Пищенко Е.В. Гематология пресноводной рыбы: Учебное пособие / Новосиб. гос. аграр. ун-т.-Новосибирск, 2002. 48 с.
10. Сухаренко Е.В., Максимов В.И. Физиология рыб. М.: изд. ООО НПО «Сельскохозяйственные технологии», 2021 год. 156 с.
11. Костоусов В.Г. Ихтиология: пособие. Минск: БГУ. 2018. 183 с.
12. Васильева Т.И. Рыбохозяйственные и экологические аспекты эффективности искусственного воспроизводства осетровых рыб Волго-Каспийского бассейна: автореф. дис. ... канд. биол. наук. Астрахань. 2010. 24 с.
13. Иванов A.A. Оценка физиологического состояния ленского осетра при выращивании в условиях индустриальных хозяйств // Известия TCXA. В..4. 2008. С. 81-85 // URL: https: elib.timacad.ru
14. Максим Е.А., Юрин Д.А. Биохимические показатели крови осетровых рыб при выращивании в различных бассейнах// Сборник научных трудов КНЦЗВ. 2019. Т. 8. № 2. С.202-207.
15. Поддубная И.В., Руднева О.Н., Гуркина О.Н. Биохимические показатели крови гибрида русского и сибирского осетра при использовании комплекса хитозан-р-циклодекстрин с левофлоксацином // Вестник Бурятской государственной сельскохозяйственной академии имени В.Р. Филиппова. 2023. № 1(70). С. 42-50.
REFERENCES
1. Volkova A.R. Perspektivy rybolovstva i akvakultury v sovremennom mire: otsenka i analiz // URL:https://elibrary.ru /download/elibrary_ 50324902_17273995.pdf
2. Buyarov V.S., Yushkova Yu.A. Effektivnost primeneniya biologicheski aktivnykh dobavok v rybovodstve // Vestnik OrelGAU, 3(60), Iyun 2016, URL:http://dx.doi.org/10.15217/48484
3. Lapukhin Yu.A., Ponomarev S.V., Sorokina M.N. Sravnitelnaya otsenka funktsionalnogo sostoyaniya molodi gibrida sterlyad x beluga // Vestnik AGTU. 2008. № 3 (44). S.14-17.
4. Basonov O.A., Sudakova A.V. Sravnitelnaya kharakteristika gematologicheskikh pokazateley osetrovykh raznykh genotipov, vyrashchennykh v usloviyakh zamknutogo vodosnabzheniya // Izvestiya Orenburgskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta. 2022. № 4. (96). S.330-332.
5. Osobennosti rosta razlichnykh gibridnykh form osetrovykh vidov ryb / Ye.N. Ponomareva, A.V. Kovaleva, M.V. Kovalenko, K.D. Matishov, M.V. Yaitskaya // Nauka yuga Rossii. 2019. T. 15. № 3. S. 81-88.
6. Gazimagomedova I.K., Maglmaev F.M. Perspektivy iskusstvennogo vyrashchivaniya gibrida russkogo i lenskogo osetrov v usloviyakh Dagestana // Vestnik Dagestanskogo gosudarstvennogo universiteta. Seriya 1. Yestestvennye nauki. 2022. Tom 37. Vyp. 2. S.96-101.
7. Konkova A.V., Astafeva S.S., Korolev A.O. Sravnenie gematologicheskikh pokazateley osobey russkogo osetra s normalnoy i ponizhennoy massoy tel // URL: https://elibrary.ru/download/elibrary _60224411_78818032.pdf
8. Yegorova V.I., Volkova I.V. Dinamika integralnykh gematologicheskikh indeksov ryb pri khronicheskoy intoksikatsii // Rybnoe khozyaystvo. 2024. № 1. S.81-87 // URL: https://elibrary.ru/download/elibrary _65622739 _42988870.pdf
9. Pishchenko Ye.V. Gematologiya presnovodnoy ryby: Uchebnoe posobie / Novosib. gos. agrar. un-t.- Novosibirsk, 2002. 48 s.
10.Sukharenko Ye.V., Maksimov V.I. Fiziologiya ryb. M.: izd. OOO NPO «Selskokhozyaystvennye tekhnologii», 2021 god. 156 s.
11. Kostousov V.G. Ikhtiologiya: posobie. Minsk: BGU. 2018. 183 s.
12.Vasileva T.I. Rybokhozyaystvennye i ekologicheskie aspekty effektivnosti iskusstvennogo vosproizvodstva osetrovykh ryb Volgo-Kaspiyskogo basseyna: avtoref. dis. ... kand. biol. nauk. Astrakhan. 2010. 24 s.
13. I vanov A.A. Otsenka fiziologicheskogo sostoyaniya lenskogo osetra pri vyrashchivanii v usloviyakh industrialnykh khozyaystv // Izvestiya TSKhA. V..4. 2008. S. 81-85 // URL: https: elib.timacad.ru
14. Maksim Ye.A., Yurin D.A. Biokhimicheskie pokazateli krovi osetrovykh ryb pri vyrashchivanii v razlichnykh basseynakh // Sbornik nauchnykh trudov KNTsZV. 2019. T. 8. № 2. S.202-207.
15. Poddubnaya I.V., Rudneva O.N., Gurkina O.N. Biokhimicheskie pokazateli krovi gibrida russkogo i sibirskogo osetra pri ispolzovanii kompleksa khitozan-ß-tsiklodekstrin s levofloksatsinom // Vestnik Buryatskoy gosudarstvennoy selskokhozyaystvennoy akademii imeni V.R. Filippova. 2023. № 1(70). S. 42-50.