CC BY
16
e
Фитокоррекция структурных изменений желудочно-кишечного тракта, вызванных применением 6-меркаптопурина
Я. Г. РАЗУВАЕВА, С. М. НИКОЛАЕВ, А. О. ЗАНДАНОВ, Ю. Н. САНДАНОВА, Л. Б. БУРАЕВА
Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, Улан-Удэ Бурятский государственный университет МОиН РФ, Улан-Удэ Иркутский государственный институт усовершенствования врачей, Иркутск
Phytocorrection of Gastrointestinal Tract Structural Changes Caused by the Use of 6-Mercaptopurine
YA. G. RAZUVAEVA, S. М. NIKOLAEV, A. O. ZANDANOV, YU. N. SANDANOVA, L. B. BURAEVA
Institute of General and Experimental Biology, Siberian Branch of the Russian Academy of Sciences, Ulan-Ude Buryat State University, Ulan-Ude
Irkutsk State Institute of Postgraduate Medical Education, Irkutsk
Установлено, что курсовое введение комплексного растительного средства Вентрофита нормализует структурно-функциональную целостность слизистой оболочки желудка и тонкого кишечника на фоне повреждения их 6-меркаптопурином.
Ключевые слова: комплексное растительное средство Вентрофит, 6-меркаптопурин.
It was shown that the course use of Ventrofit, a complex plant remedy, normalized the structural and functional integrity of the stomach and thin intestine mucous membranes damaged by the use of 6-mercaptopurine.
Key words: complex plant remedy Ventrofit, 6-mercaptopurine.
Введение
Цитостатическая химиотерапия является одним из основных методов лечения злокачественных новообразований. При этом применение химиопрепаратов часто вызывает миелотоксические, иммунотоксические, а также гастротоксические эффекты. В связи с этим перспективным направлением в плане повышения эффективности и оптимизации химиотерапии опухолевых заболеваний является поиск и изучение средств, способных повышать резистентность организма к повреждающему действию цитостатиков [1—3]. Перспективными для разработки методов фармакологической коррекции побочного действия цитостатиков являются средства растительного происхождения, отличающиеся, как правило, способностью подавлять отрицательные эффекты химиопрепаратов, широтой терапевтического действия, малой токсичностью и связанной с этим возможностью длительного применения без риска возникновения побочных реакций [4, 5].
Разработанное комплексное растительное средство, названное Вентрофитом, представляет собой смесь экстрактивных веществ из 9 видов
© Коллектив авторов, 2009
Адрес для корреспонденции: 670047 Улан-Удэ, ул. М. Сахьяновой, 6. Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН (ИОЭБ СО РАН)
растительного сырья: соцветия календулы лекарственной Calendula officinalis L. (25 ч), листья подорожника большого Plantago major L. (10 ч), трава сушеницы топяной Gnaphalium uliginosum L. (5 ч), корни солодки уральской Clycyrrhiza uralensis Fish. (10 ч) и девясила высокого Inula helenium L. (5 ч), плоды боярышника кроваво-красного Crataegus sanguinea Pall. (15 ч), шиповника Rosa L. (20 ч), Coriandrum sativum L. (5 ч) и облепиха крушиновидная Hippophae rhamnoides L. (5 ч) [6]. Ранее в экспериментах на животных установлено, что Вентрофит обладает выраженной гастропро-тективной активностью при «рефлюкс-гастрите» и нейрогенной язве [7].
Цель исследования — определить фармакоте-рапевтическую эффективность комплексного растительного средства Вентрофит при повреждении желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) 6-меркаптопурином.
Материал и методы
Экспериментальная работа выполнена на 50 белых кры-сах-самцах линии Wistar с исходной массой 160—190 г. Животные находились в стандартных условиях содержания и кормления в виварии (Приказ М3 № 1179 от 10.10.83 г.). Эксперименты на животных проводили в соответствии с правилами Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и иных научных целей.
О
е
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
Таблица 1. Влияние Вентрофита на морфометрические показатели слизистой оболочки желудка у белых крыс на фоне введения 6-меркаптопурина
Группа животных Срок наблюдений, сутки Толщина слизистой оболочки желудка, мм Глубина эрозии, мм
Koнтрoльнaя (6-MП+вoдa) 3-и 1,59+0,180 1,08+0,098
14-е 0,63+0,056
21-е 0,20+0,017
Oпытнaя (6-MП+Beнтрoфит) 3-и 0,87+0,076*
14-е 0,34+0,034*
21-и 0
Примечание. Здесь и в табл. 2: * - различия статистически значимы по сравнению с данными у животных контрольной группы при р<0,05.
Таблица 2. Влияние Вентрофита на морфометрические показатели тонкого кишечника у белых крыс на фоне введения 6-меркаптопурина
Группа животных Высота ворсинки, Толщина ворсинки, Глубина крипт, Соотношение высоты
мм мм мм ворсинок к глубине крипт
З-и сутки
Интaктнaя (вoдa) 1,67+0,11 0,16+0,02 0,38+0,02 4,4:1,0
Koнтрoльнaя (6-Mn+H2O) 1,19+0,09 0,32+0,02 0,40+0,02 2,9:1,0
Oпытнaя (6-MП+Beнтрoфит) 1,36+0,05 0,26+0,01* 0,39+0,02 3,5:1,0
14-е сутки
Koнтрoльнaя (6-MП+вoдa) 1,46+0,11 0,22+0,01 0,38+0,03 3,8:1,0
Oпытнaя (6-MП+Beнтрoфит) 1,64+0,09 0,19+0,01 0,38+0,02 4,3:1,0
Для мoдeлирoвaния цитocтaтичecкoй болезни белым кры-caм внутрижєлудочно вводили 6-мeркaптoпyрин (б-Mn) в дозе 20 мг/кг ежедневно в течение 10 дней. Животным опытной группы Ha фоне введения цитocтaтикa c первого дня экстери-мекга внутрижелудочно вводили Beнтрoфит в дозе 50 мг/кг, a зaтeм еще в течение 21 дня посте по^еднего введения 6-Mn. ^bicbi контрольной группы пoлyчaли эквиобъёмное количество воды очищенной по aнaлoгичнoй cxeмe. Животным ин-тaктнoй группы б-Mn не вводили.
Для иccлeдoвaния фaрмaкoтeрaпeвтичecкoй эффективности Beнтрoфитa у бeлыx крьгс проводили пaтoмoрфoлoги-чecкoe иccлeдoвaниe стенки желудга (фyндaльный и гарди-aльный отделы) и тонкого кишeчникa (тoщaя кишкa) Ha 3, 14 и 21 cyrra пocлe пocлeднeгo введения б-Mn. Для проведения racTC^oraqecMx иccлeдoвaний мaтeриaл фикcирoвaли в 10% нeйтрaльнoм фoрмaлинe, oбeзвoживaли в cпиртax вocxoдя-щей кoнцeнтрaции и зaливaли в цeллoидин-пaрaфин. Cрeзы oкрaшивaли гeмaтoкcилин-эозином, aзyр-эoзинoм, по вaн Гизону и cтaвили ШИK-рeaкцию [8]. C помощью компьютерной прoгрaммы «Motic Images 2000» в фуад^^ьном отделе же-лудга определяли толщину cлизиcтoй оболочки желудга (COЖ) и глубину эрозий. B тонком кишечнике определяли вытоту и ширину ворстнок, глубину крипт, вычтеляли отношение глубины крипт к выюоте вoрcинoк.
Знaчимocть рaзличий между yкaзaнными пaрaмeтрaми у опытной и контрольной групп животным: oцeнивaли c помощью нeпaрaмeтричecкoгo критерия MaHHa-Уитии. Paзличия cчитaли cyщecтвeнными при /><0,05 [9].
Результаты и обсуждение
Результаты пaтoмoрфoлoгичecкиx иccлeдoвa-ний пoкaзaпи, что куртовое введение белым кры-caм 6-Mn вызывaeт cтрyктyрныe изменения в ОДЖ, xaрaктeрныe для гacтритa. Ta^ Ha 3-cyтки нaблюдeний в COЖ живoтныx контрольной группы выявлялиcь диcтрoфичecкиe и некроти-чecкиe прoцeccы так в покровно-ямочном, тaк и железистом эпителии, a также нaблюдaлacь во^
палительная инфильтрация в базальных отделах СОЖ и подслизистой основе. На фоне выраженных дистрофических изменений в СОЖ отмечали значительное количество поверхностных и глубоких эрозий, локализованных в кардиальном и фундальном отделах желудка. Глубокие эрозии проникали вглубь СОЖ, повреждая собственную пластинку. Средняя глубина таких эрозий достигала 1,08+0,098 мм, что составляло 68% толщины слизистой оболочки у контрольных животных (табл. 1).
В тонком кишечнике контрольных животных на 3-и сутки после прекращения введения 6-МП отмечали выраженные органические изменения с преимущественным поражением ворсинок, характеризующиеся отёком и обильной клеточной инфильтрацией собственной пластинки, в результате чего ворсинки становились широкими и укорачивались (табл. 2). Апикальная часть ворсинок подвергалась некрозу и десквамировалась в просвет кишечника. Эпителий сохранившихся ворсинок большей частью был дистрофически изменен. Слой крипт был затронут в меньшей степени, тем не менее в его строме отмечали усиление клеточной инфильтрации. В результате соотношение высоты ворсинок к глубине крипт было в 1,5 раза меньше такового у животных интактной группы.
На 14-е сутки наблюдений у животных контрольной группы сохранялись все признаки эрозивного гастрита: нарушения микроциркуляции, клеточная инфильтрация СОЖ, наличие эрозий, проникающих вглубь слизистой оболочки желудка на 1/3 (см. табл. 1). В тонком кишечнике у живот-
О
ных контрольной группы в эти сроки наблюдений выявляли отёк и клеточную инфильтрацию стромы ворсинок, в результате чего они имели нехарактерную для них листовидную и грибовидную формы, а также дистрофические изменения клеток каёмчатого эпителия: вакуолизацию цитоплазмы, пикноз и лизис ядер, отсутствие щёточной каймы.
На 21-е сутки наблюдений у животных контрольной группы дистрофическим процессам был подвержен лишь покровно-ямочный эпителий желудка, клетки которого имели нечёткие границы, их ядра утрачивали базальное расположение. В тонком кишечнике у животных контрольной группы сохранялся незначительный отёк собственной пластинки ворсинок. Дистрофическим процессам были подвержены единичные энтероциты, расположенные в апикальной части ворсинок, они характеризовались в основном потерей или истончением щёточной каймы.
У животных, получавших Вентрофит в дозе 50 мг/кг на фоне введения цитостатика, структурные изменения ЖКТ во все сроки эксперимента были менее выражены по сравнению с контролем. Так, на 3-и сутки наблюдений у животных опытной группы отмечали все признаки глубокого гастрита: дистрофические изменения клеток покровно-ямочного и железистого эпителия, интенсивную клеточную инфильтрацию СОЖ, нарушения микроциркуляции. На фоне дистрофических процессов выявляли значительное количество поверхностных эрозий, характеризующихся отторжением клеток поверхностно-ямочного эпителия и единично глубокие эрозии. Средняя глубина эрозий в СОЖ у белых крыс, получавших Вентрофит, была на 19% меньше таковой у животных контрольной группы. В тонком кишечнике у животных опытной группы на 3-и сутки после последнего введения цитостатика структурные изменения выявлялись только в ворсинках: отек и инфильтрация стромы, дистрофические изменения эпителия. Каёмчатый эпителий апикальной части ворсинок подвергался некротическим изменениям и десквамировался в просвет кишечника. Результаты морфометрических исследований показа-ЛИТЕРАТУРА
1. Ажунова Т. А., Лубсандоржиева П. Б., Шайтанова Л. Н., Николаев С. М. и др. Противоязвенная активность фитопрепарата «вентрофит». Раст ресурсы 2007; 43: 2: 69—75.
2. Алексеева Э. А. Фармакотерапевтическая эффективность розобти-на при повреждении цитостатиками: Автореф. Дис. ... канд. мед.наук. Улан-Удэ, 1998; 26.
3. Амосова Е. Н, Зуева Е. П., Таман А. В. и др. Результаты изыскания препаратов — корректоров цитостатической терапии полученных из растений дальневосточной флоры. Актуальные вопросы современной онкологии. Томск, 1988; 6: 138—142.
4. Тершанович М. Л., Филов В. А., Акимов М. А., Акимов А. А. Введение в фармакотерапию злокачественных опухолей. СПб., 1999; 152.
5. Лубсандоржиева П. Б., Ажунова Т. А., Шайтанова Л. Н. и др. Биологически активные вещества антиязвенного растительного средства «Вентрофит». Химия растительного сырья 2006; 1: 59—64.
ли, что на фоне введения животным Вентрофита длина ворсинок была на 14% больше, а ширина — на 19% меньше таковых показателей у животных контрольной группы.
На 14-е сутки наблюдений у животных опытной группы дистрофическим изменениям подвергался лишь покровно-ямочный эпителий СОЖ. Глубина эрозий была в 1,9 раза меньше таковой у контрольных животных. На 21-е сутки исследования у животных, получавших Вентрофит, СОЖ была интактной.
В тонком кишечнике у животных опытной группы на 14-е сутки эксперимента дистрофическим и некротическим процессам были подвержены единичные энтероциты, в большинстве своём локализованные в апикальной части ворсинок. В данные сроки опыта морфометрические показатели ворсинок в тонком кишечнике у животных, получавших Вентрофит, практически не отличались от таковых у животных интактной группы, и ворсинки имели характерную для них пальцевидную форму (см. табл. 2).
Таким образом, курсовое введение белым крысам Вентрофита в экспериментально-терапевтической дозе 50 мг/кг на фоне повреждений желудочно-кишечного тракта 6-меркаптопури-ном препятствует развитию дистрофических и некротических процессов в слизистой оболочке желудка и тонкого кишечника, и тем самым обеспечивает более выраженную сохранность их функциональных свойств. Фармакотерапевтиче-скую эффективность Вентрофита можно объяснить наличием в его составе комплекса биологически активных веществ: флавоноидов (рутин, гиперозид), дубильных веществ, водорастворимых полисахаридов, каротиноидов и органических кислот [6]. Так, известно, что дубильные вещества оказывают антиоксидантное, вяжущее и противовоспалительное действие; полисахаридные комплексы обусловливают противовоспалительное, ранозаживляющее и обволакивающее действие; гиперозид оказывает гастропротектор-ное влияние; органические кислоты регулируют обменные процессы и ускоряют репарацию повреждённых тканей [10, 11].
6. Микроскопическая техника: Руководство / Под ред. Д. С. Саркисова и Ю. Л. Перова. М.: 1996; 544.
7. Моисеенко В. М. Почему не улучшаются показатели выживаемости больных с диссеминированными солидными опухолями? Вопросы онкологии 2004; 50: 2: 149—155.
8. Переводчикова Н. И. Химиотерапия опухолевых заболеваний. М.: 2000; 391.
9. Сергиенко В. И., Бондарева И. Б. Математическая статистика в клинических исследованиях. М.: 2006; 256.
10. Турова А. Д., Сапожникова Э. Н. Лекарственные средства СССР и их применение. М.: 1982.
11. Яковлева Г. П., Блинова К. Ф. Растения для нас. СПб., 1996.
-е-
