CC BY
51
УДК: 616.98:579.842.14:615.28:575
ФЕНОТИПИЧЕСКИЕ И ГЕНОТИПИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ РЕЗИСТЕНТНОСТИ К АНТИМИКРОБНЫМ ПРЕПАРАТАМ У ШТАММОВ SALMONELLA TYPHIMURIUM
Г.К. АБДУХАЛИЛОВА, Х.Д.ТУХТАМУРОДОВ, А.А. ИБРАГИМОВ, И.Ф.АХМЕДОВ, Н.Г. ГУЛЯМОВ
PHENOTYPIC AND GENOTYPIC RESISTANCE INDICES ТО ANTIMICROBIAL DRUGS IN SALMONELLA TYPHIMURIUM STRAINS
G.K. ABDUKHALILOVAKH.D. TUKHTAMURODOV2, A.A. IBRAGIMOV1,1.F. AKHMEDOV1, N.G.GULYAMOV1
Научно-исследовательский институт эпидемиологии, микробиологии и инфекционных заболеваний1, Ташкентская медицинская академия2
На 39 штаммах Salmonella typhimurium, выделенных в 2012-2013 гг. от больных, бактериологическими и молекулярно-генетическими методами изучены их чувствительность к антимикробным препаратам. Выявлена чрезвычайно высокая доля штаммов, устойчивых к АМП, в том числе критически важным для медицины р-лактамам (84,6%) и фторхинолонам (92,3%). Штаммы S. typhimurium характеризуются множественной резистентностью к различным классам АМП. Около половины штаммов (43,6%) имеют одинаковый фенотип резистентности A-AC-T-C-CO-CTX-CA-NA-CPM, что может свидетельствовать о клональном распространении возбудителя. Устойчивость штаммов S. typhimurium к Р-лактамам (включая цефалоспорины 3-4-го поколения) обусловлена продукцией р-лактамаз генетических семейств ТЕМ и СТХ-М, причем 66,7% штаммов характеризуются одинаковым генотипом резистентности и обладают генами четырех р-лактамаз: ТЕМ, СТХ-М1, СТХ-М2 и СТХ-М25, что также может свидетельствовать о клональном распространении возбудителя.
Ключевые слова: антимикробные препараты, резистентность, ген, фенотип, генотип, S. typhimurium.
Оп 39 Salmonella typhimurium strainsseparated from patients in 2012-2013their sensitivity to antimicrobial drugs(AMD) have been studied by bacteriologic and molecular-genetic methods. Extremely high level of strains stable to AMD has been revealed including critically important for medicine p-lactams (84,6%) and fluoroquinolones (92,3%). S. Typhimurium strains are characterized by multiple resistance to different classes of AMD. About half of strains (43,6%) have the same phenotype of resistance A-AC-T-C-CO-CTX-CA-NA-CPM which can testifies about clonal extension of the agent. Resistance of S. Typhimurium starins to p-lactams (including cephalosporins of the 3rd -4th generation) is depended on p-lactams production of ТЕМ and CTX-M genetic families and 66,7% of strains are chracterized by the same resistance genotype and have the genes offour p-lactams: ТЕМ, CTX-M1, CTX-M2 and CTX-M25 which can also testifies about clonal extension ofthe agent.
Key-words: antimicrobialdrugs, resistance,gene,genotype, S. typhimurium.
Устойчивость к противомикробным препаратам (АМП) (термины «антибиотик» и «антимикробные препараты» в данном документе взаимозаменяемы) - это устойчивость микроорганизма к действию противоми-кробного вещества, к которому микроорганизм был чувствителен ранее. Резистентность не является новым феноменом, она изучается уже на протяжении последних 50-60 лет. Стремительное развитие фармакологической индустрии в 1970-1980 гг. первоначально создало впечатление о возможном уничтожении болезнетворных микробов, однако микроорганизмы оказались очень изменчивыми, и их устойчивость возрастает с каждым днем. Ключом к решению этой проблемы является рациональное использование противомикробных средств. На сегодняшний день резистентность признана серьезной проблемой здравоохранения во всем мире. Всемирная ассамблея здравоохранения в 1998 г. приняла первую резолюцию, направленную на рациональное и эффективное использование противомикробных средств. В 2001 г. была опубликована Стратегия ВОЗ по сдерживанию антимикробной резистентности [1,15]. В
2011 г. ВОЗ посвятил Всемирный день здоровья проблеме противомикробной резистентности.
Антибиотики применяются в животноводстве, мясомолочной и пищевой промышленности не только для лечения болезней животных, но и с целью профилактики и для стимулирования роста. Чрезмерное применение антибиотиков у сельскохозяйственных животных имеет серьезные последствия для общественного здравоохранения, так как способствует появлению устойчивых к антибиотикам бактерий и генов резистентности, которые могут быть переданы людям [6,7]. Резистентность связанных с пищевыми инфекциями зоонозных бактерий родов Salmonella, несомненно, связана с применением антибиотиков у сельскохозяйственных животных; пищевые инфекции, вызванные такими резистентными бактериями, многократно документированы у людей. Особую тревогу вызывает устойчивость к так называемым «критически важным антибиотикам», используемым в медицине. Например, применение фтор-хинолонов у сельскохозяйственных животных привело к появлению соответствующей устойчивости к антибиоти-
кам у сальмонелл, которые вызывают инфекционные заболевания у людей. При заболеваниях, обусловленных полирезистентными штаммами Salmonella typhimurium определенного фаготипа (DT)104 с устойчивостью к хи-нолонам, наблюдали неудачи лечения, более высокую частоту госпитализации и более высокий риск смертельного исхода [5,9].
Цель исследования: изучение чувствительности к антибиотикам штаммов Salmonella typhimurium, выделенных от больных с острыми кишечными инфекциями в г. Ташкенте в 2012-2013 гг.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
В исследование включили 39 штаммов Salmonella typhimurium, выделенных в 2012-2013 гг. от больных с ОКИ в бактериологической лаборатории НИИЭМИЗ МЗ РУз г. Ташкента и переданных для дальнейшего изучения в «Национальную коллекцию микроорганизмов инфекций человека» НИИЭМИз МЗ РУз. Чувствительность штаммов к антимикробным препаратам изучали в лаборатории «Национальной коллекции» бактериологическими и молекулярно-генетическими методами.
Изучение морфологических, тинкториальных и биохимических свойств штаммов Salmonella spp. проводили согласно протоколам ВОЗ [8], определение чувствительности к антимикробным препаратам - диско-диффузионным методом и методом серийных разведений согласно рекомендациям CLSI М02-А11 и М07-А10 [10,11]. Полученные результаты интерпретировали согласно рекомендациям CLSI M100-S22 [12]. В работе использовали агар Мюллера -Хинтон и диски с антибиотиками производства HIMEDIA (Индия), а также субстанции химически
Таблица 1. Праймеры, использованные в работе
чистых антимикробных препаратов (HIMEDIA, Индия). Изучали чувствительность сальмонелл к следующим АМП: ß-лактамам (ампициллин, амоксициллин/клаву-лановая кислота, цефотаксим, цефотаксим/клавулано-вая кислота, цефтазидим, цефтазидим/клавулановая кислота, цефепим, имипенем, меропенем), хинолонам (налидиксовая кислота, ципрофлоксацин, офлаксацин), аминогликозидам (гентамицин) и препаратам других групп (тетрациклин, хлорамфеникол, триметоприм-сульфаметоксазол). Для внутреннего контроля качества проводимых исследований использовали контрольные штаммы Е. coli АТСС 25922 и Kl. pneumoniae АТСС 700603.
Механизмы резистентности штаммов к ß-лактамным АМП изучали молекулярно-генетическими методами: ПЦР с электрофоретической детекцией и ПЦР в режиме реального времени. Проводили детекцию генов, кодирующих продукцию ß-лактамаз широкого и расширенного спектра генетических семейств SHV, ТЕМ, СТХ-М (генетических групп СТХ-М1, СТХ-М9, СТХ-М8/25, СТХ-М2), а также различных карбапенемаз - ОХА-48, КРС и металло^-лактамаз NDM, VIM, IMP. Олигонукле-отидные последовательности использованных в работе праймеров приведены в таблице 1.
Выделение ДНИ. Бактериальную ДНК выделяли методом температурного лизиса в ТВЕ-буфере. 3-4 колонии суточной культуры исследуемого микроорганизма, выращенной на агаризованной среде, помещали в центрифужную пробирку с 500 мкл стерильной деионизи-рованной воды, суспензировали с помощью шейкера. Микробные клетки осаждали центрифугированием при 10 тыс. g в течение 1 мин. Супернатант удаляли, осадок ресуспендировали в 100 мкл ТВЕ-буфера. Пробирки ин-
Ген-мишень Название праймера Олигонуклеотидная последовательность t отжига, oC Размер ампликона, пн Источник
blaCTX-M CTX-M-f CTX-M-r CAATGTGCAGCACCAGTAA CGCAATATCATTGGTGGTG 50 540 14
blaCTX-Ml CTX-M-l-f CTX-M-l-r AAAGTGAAAGCGAACCGAATC ATCAGCTTATTCATCGCCACG 50 148 2
ЫаСТХ-М2 CTX-M-2-f CTX-M-2-r TAATGATGACTCAGAGCATTC TGTAGTTAACCAGGTCGCTC 50 307
ЫаСТХ-М8/25 CTX-M-25-f CTX-M-25-r AAAGTGAAACGCAAAAGGGC CGCNCAACTCCCCGAATG 50 100
blaSHV SHV-f SHV-r GTATTATCTCCCTGTTAGCC GCAGCACGGAGCGGATCAACG 60 624
ЫаТЕМ TEM-f TEM-r CCTTGAGAGTTTTCGCCCC CCGCCTCCATCCAGTCTATT 55 453
blaNDM-1 NDM-l-f NDM-l-r ACCGCCTGGACCGATGACCA GCCAAAGTTGGGCGCGGTTG 58 264 6
blaVIM VIM-f VIM-r GTTTGGTCGCATATCGC TCGTCATGAAAGTGCGT 64 196 3
blalMP-1 IMP-l-f IMP-l-r GCTAAAGATACTGAAAAATTAGT TCATTTGTTAATTCAGATGCATA 154
blaOXA-48 OXA-48-f OXA-48-r TTGGTGGCATCGATTATCGG GAGCACTTCTTTTGTGATGGC 61 744 4
blaKPC KPC-f KPC-r ATGTCACTGTATCGCCGTCT TTTTCAGAGCCTTACTGCCC 893
кубировали в твердотельном термостате в течение 20 мин при 99°С, затем центрифугировали при 10 тыс. g в течение 1 мин. Для ПЦР использовали 3 мкл суперна-танта.
Для постановки ПЦР использовали наборы реагентов производства «Евроген» (Москва, Россия). Конечный объем реакционной смеси составлял 25 мкл с учетом добавленной матричной ДНК. Компоненты реакции вносили согласно инструкции производителя. Амплификацию проводили согласно протоколам [2-4,13,16]. Полученные ПЦР-продукты визуализировали методом электрофореза (в 0,5ХТВЕ буфере) в 2% агарозном геле, содержащем бромистый этидий (при напряженности электрического поля 6 В/см в течение 30 мин), с последующим просмотром в УФ-трансиллюминаторе.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Включенные в исследование штаммы Salmonella, выделенные от больных с острыми кишечными инфекциями в г. Ташкенте в 2012- 2013 гг., по морфолого-куль-туральным, биохимическим и антигенным свойствам соответствовали S. typhimurium. Результаты изучения чувствительности выделенных штаммов к вышеуказанному набору АМП и определение МИК50и МИК90 представлены в таблице 2. Все изученные штаммы были устойчивы к 1 и более классам АМП. Согласно полученным данным, в исследованной популяции Salmonella имела место устойчивость практически ко всем изученным АМП. Причем доля штаммов, устойчивых к критически важным для медицины классам АМП (ß-лактамам и фторхинолонам), чрезвычайно высока. Так, устойчивы
к различным ß-лактамным антибиотикам (как незащищенным, так и защищенным клавулановой кислотой) от 84,6% (к цефалоспоринам расширенного спектра) до 89,7% (к ампициллину), причем штаммы характеризовались чрезвычайно высоким уровнем устойчивости -МИК50 и МИК90 ампициллина и цефотаксима составили 512 мкг/мл, цефтазидима соответственно 64 и 128 мкг/ мл. В группе ß-лактамных антибиотиков свою активность в отношении S. typhimurium сохраняли только карбапе-немы (имипенем, меропенем).
Фторхинолоны, как правило, являются препаратами выбора при антибактериальной терапии осложненной сальмонеллезной инфекцией. Ранее эти препараты показывали высокую клиническую эффективность при лечении инфекций, вызванных полирезистентными штаммами Salmonella, включая S. typhi [14]. В настоящее время применение фторхинолонов для лечения сальмонеллезной инфекции ограничено широким распространением штаммов, не чувствительных (устойчивых или умеренно-устойчивых) к этой группе препаратов. Так, 92,3% исследуемых штаммов S. typhimurium были устойчивы к налидиксовой кислоте, при этом МИК50 и МИК90 составили 512 мкг/мл. Нечувствительные к фторхинолонам (ципрофлоксацину) штаммы составили 74,3% (умеренно-устойчивых - 69,2%, устойчивых - 5,1%), чувствительность сохранили 25,7%.
Следует отметить, что диско-диффузионный метод не позволяет достоверно определять чувствительность штаммов Salmonella к ципрофлоксацину. При определении чувствительности к этому препарату необходимо использовать методы определения МИК. Согласно со-
Таблица 2. Чувствительность к АМП штаммов 5. 1урЬ1тиг1ит (п=39), выделенных от больных с ОКИ в г. Ташкенте в 2012-2013 гг.
АМП _Штаммы, п=39, абс. (%)_ МИК50, МИК90,
К I э мкг/мл мкг/мл
ß-лактамы
Ампициллин 35 (89,7) 1 (2,7) 3 (7,6) 512 512
Амоксициллин/клавуланат 36 (92,3) 0 3 (7,7) но но
Цефотаксим 33 (84,6) 0 6 (15,4) 512 512
Цефотаксим/клавуланат 33(84,6) 0 6 (15,4) но но
Цефтазидим 33 (84,6) 0 6 (15,4) 64 128
Цефтазидим/клавуланат 33(84,6) 0 6 (5,4) но но
Цефепим 33(84,6%) 0 6 (5,4) но но
Имипенем 0 0 39 (100) но но
Меропенем 0 0 39 (100) но но
Хинолоны
Налидиксовая кислота 36 (92,3) - 3 (7,7) 512 512
Ципрофлоксацин 2 (5,0) 27 (69,4) 10 (25,6) 1 1
Аминогликозиды
Гентамицин 30 (76,9) 0 9 (23,1) 64 128
Препараты других групп
Тетрациклин 38 (97,4) 1 0,7) 0 128 128
Хлорамфеникол 33 (84,6) 0 6 (15,4) 512 512
Ко-тримоксазол (триметоприм/сульфаметок- 25 (64,1) 0 14 (35,9) 512 512
сазол)
Примечание. 5-чувствительно, I - умеренно-устойчиво, К - устойчиво, но - не определяли.
временным международным рекомендациям, лечение сальмонеллезной инфекции фторхинолонами с высокой вероятностью будет неэффективно, в том случае если МИК ципрофлоксацина для штамма-возбудителя превышает 0,06 мг/л. Наше исследование выявило, что МИК50 и МИК90 ципрофлоксацина составило 1 мкг/мл, что указывает на высокую вероятность клинической неэффективности использования фторхинолонов для лечения сальмонеллезной инфекции у пациентов г. Ташкента.
Втечение нескольких десятилетий при лечении саль-монеллезов препаратом выбора являлся хлорамфени-кол. После появления более безопасных и эффективных АМП это препарат стал рассматриваться как альтернативный или препарат второго ряда. Наше исследование показало, что среди изученных штаммов S. typhimurium 84,6% резистентны к хлорамфениколу, причем МИК50 и МИК90 составили 512 мкг/мл. С высокой частотой выявлялась также устойчивость к антибиотикам тетрацикли-нового ряда (устойчивы 97,4%, МИК50 и МИК90=128 мкг/ мл), гентамицину (76,9%, МИК50=64 мкг/мл, МИК90=128 мкг/мл), ко-тримоксазолу (64,1% штаммов, МИК90=512 мкг/мл).
Исследование показало, что большая часть изученных штаммов характеризовалась сочетанной устойчивостью к нескольким АМП. Выявленные фенотипы сочетанной резистентности представлены в таблице 3.
Таблица 3. Фенотипы резистентности штаммов S. typhimurium (п=39), выделенных от больных с ОКИ в г. Ташкенте в 2012-2013 гг.
Фенотипы резистентности
Количество штаммов, абс. (%)
Всего чувствительных 0
Всего устойчивых к 2 и более классам АМП, из них:
- к 2 АМП: Т/ЫА 1(2,6) -кЗАМП: всего 5(10,2) из них А/АС/Т 3(7,7) Т/С/ЫА 2 (5,1)
- к 8 АМП: А/АС/СТХ/СА/СРМ/Т/С/ЫА 2 (5,1) -к9 АМП: всего 24(61,5) из них А/АС/СТХ/СА/СРМ/Т/С/СО/ЫА 17 (43,6) А/АС/СТХ/СА/СРМ/Т/С/СМ/ЫА 5 (12,8) А/АС/СТХ/СА/СРМ/Т/СМ/СО/ЫА 2 (5,1) -к 10АМП: всего 6(15,4) из них А/АС/СТХ/СА/СРМ/Т/С/СМ/СО/ЫА 5 (12,8) А/АС/СТХ/СА/СРМ/С/Т/6М/ЫА/С1Р 1 (2,6)
- к 11 АМП: А/АС/СТХ/СА/ СРМ/Т/С/вМ/ 1 (2,6) СО/ЫА/С1Р
Всего 39 (100)
Примечание. Ампициллин (А), ампициллин/клавула-новая кислота (АС), тетрациклин (Т), хлорамфеникол (С), гентамицин (6М), триметоприм-сульфаметоксазол (СО), цефотаксим (СТХ), цефтазидим (СА), налидиксовая кислота (ИА), ципрофлоксацин (С1Р), цефетим (СРМ).
Среди тестированных штаммов сальмонелл преобладали фенотипы с множественной резистентностью к АМП: 79,5% штаммов характеризовались устойчивостью к 8 и более АМП, причем они сочетали устойчивость к Р-лактамам, обусловленную продукцией р-лактамаз расширенного спектра (БЛРС), с устойчивостью к препаратам других групп. Наиболее часто встречался фенотип резистентности к ампициллину, амоксициллину/клаву-лановой кислоте, цефотаксиму, цефтазидиму, цефепи-му, тетрациклину, хлорамфениколу, ко-тримоксазолу, налидиксовой кислоте (А/АС/СТХ/СА/СРМ/Т/С/СО/ЫА), такие штаммы составили 43,6%.
У штаммов 5. 1урЫтипит, устойчивых к Р-лактамам, была проведена детекция генов, ответственных за продукцию р-лактамаз широкого и расширенного спектра различных генетических семейств. Результаты исследования представлены в таблице 4. Таблица 4. Частоты выявления генов, кодирующих продукцию в-лактамаз, у штаммов 5. 1урЬ1тиг1ит (п=39), выделенных от больных с ОКИ в г. Ташкенте в 2012-2013 гг.
Ген
Результат детекции, абс. (%)
отрицательный положительный
blaCTX-M 3 (12,82) 36 (92,3)
blaCTX-M -1 5 (12,82) 34 (87,17)
blaCTX-M -2 9 (23,07) 30 (76,92)
blaCTX-M-25 5 (12,82) 34 (87,17)
blaSHV 39 (100) 0
ЫаТЕМ 1 (2,56) 38 (97,43)
blaVIM 39 (100) 0
blaOXA-48 39 (100) 0
blaKPC 39 (100) 0
blaNDM-1 39 (100) 0
blalMP-l 39 (100) 0
Проведенные исследования не выявили генов, кодирующих продукцию р-лактамаз широкого и расширенного спектра генетического семейства SHV, а также карбапенемаз генетических семейств ОХА-48, КРС, VIM, NDM, IMP. Практически у всех исследованных штаммов S. typhimurium (97,4%) выявлены гены р-лактамаз генетического семейства ТЕМ. Кроме того, более 80,0% штаммов имели гены р-лактамаз генетического семейства СТХ-М (92,3%), относящиеся к генетическим группам СТХ-М 1 (87,2%), СТХ-М 25 (87,2%) и СТХ-М 2 (76,9%). Изученные штаммы характеризовались сочетанием генов р-лактамаз ТЕМ и СТХ-М различных генетических групп (табл. 5).
Таблица 5. Генотипы резистентности штаммов S. typhimurium (п=39), выделенных от больных с ОКИ в г. Ташкенте в 2012-2013 гг.
Гены р-лактамаз Количество штаммов, абс. (%)
ТЕМ -СТХ-М1
Отсутствуют Ыа
ТЕМ
Ыа„
Ыа. Ыа. Ыа„ Ыа
ТЕМ' -СТХ-М1, - СТХ-М25
ТЕМ' -СТХ-М1, - СТХ-М2
ТЕМ -СТХ-М2, - СТХ-М25
ТЕМ' -СТХ-М1,-СТХ-М2,-СТХ-М25
1 (2,6) 2(5,1) 1 (2,6) 5 (12,8) 1 (2,6) 2(5,1) 27 (69,2)
У 36 (92,3%) из 39 исследованных штаммов одновременно выявлены гены нескольких р-лактамаз. Так, более 60% штаммов характеризовались преимущественно генотипом резистентности, включающем гены четырех Р-лактамаз: ТЕМ, СТХ-М1, СТХ-М2 и СТХ-М25 (27 штаммов, 69,2%). 8 (20,5%) штаммов обладали одновременно генами 3 р-лактамаз в различных сочетаниях, один штамм - генами 2 р-лактамаз (ТЕМ и СТХ-М1). У 2 штаммов выявлен ген одной р-лактамазы (ТЕМ). У одного штамма Б. 1урЫтипит р-лактамазы вышеперечисленных генетических семейств не выявлено.
Таким образом, учитывая широкое распространение в популяции ведущего возбудителя сальмонеллезов Б. 1урЫтипит штаммов, устойчивых к антимикробным препаратам, включая цефалоспорины и фторхинолоны, возможности выбора эффективных антибиотиков для лечения сальмонеллезной инфекции существенно сузились.
Следует отметить, что при определении чувствительности к фтохинолонам необходимо использовать методы определения МИК ципрофлоксацина, поскольку диско-диффузионный метод недостаточно достоверен.
ВЫВОДЫ
1. Популяция штаммов Б. 1урЫтипит, выделенных от больных с ОКИ в г. Ташкенте в 2012-2013 гг., характеризуется чрезвычайно высокой долей штаммов, устойчивых к АМП, в том числе критически важным для медицины - р-лактамам (84,6%) и фторхинолонам (92,3%).
2. Штаммы Б. 1урЫтипит характеризуются множественной резистентностью к различным классам АМП. Около половины штаммов (43,6%) имеют одинаковый фенотип резистентности А-АС-Т-С-СО-СТХ-СА-ЫА-СРМ, что может свидетельствовать о клональном распространении возбудителя.
3. Устойчивость штаммов Б. 1урЫтипит к р-лактамам (включая цефалоспорины 3-4-го поколения) обусловлена продукцией р-лактамаз генетических семейств ТЕМ и СТХ-М, причем 66,7% штаммов характеризуются одинаковым генотипом резистентности и обладают генами четырех Р-лактамаз: ТЕМ, СТХ-М1, СТХ-М2 и СТХ-М25, что также может свидетельствовать о клональном распространении возбудителя.
ЛИТЕРАТУРА
1. Борьба с устойчивостью к антибиотикам с позиций безопасности пищевых продуктов в Европе. Женева ВОЗ 2011.
2. Мудрак Д.Е. Молекулярно-генетические особенности устойчивости к р-лактамным антибиотикам грамотрицательных микроорганизмов - возбудителей нозокомиальных инфекций: Автореф. дис.... д-ра мед. наук. М 2010.
3. Шевченко О.В., Эйдельштейн М.В., Степанова М.Н.
Металло-р-лактомазы: значение и методы выявления у грамотрицательных неферментирующих бактерий. Клин микробиол и антимикроб химиотерапия 2007;9(3):211-18.
4. Egorova S. et al. Prevalence and characterization of extended - spectrum cephalosporin-resistant nonty-phoidal Salmonella isolates in adults in Saint Petersburg, Russia (2002-2005). Micr Drug Resis 2007; 13 (2): 102-7.
5. European Food Safety Authority. The Community summary reporton antimicrobial resistance in zoonotic agents from animals and food in the European Union in 2004-2007. EFSA J 2010; 8 (4): 1309-615 (http:// www.efsa.europa.eu/en/efsajournal/doc/1309.pdf, accessed 7 February 2011).
6. Hammerum A.M. etal. Danish integrated antimicrobial resistance monitoring and research program. Emer Infec. Dis 2007; 13 (11): 1632-39.
7. Impacts of antimicrobial growth promoter termination in Denmark. The WHO international review panel's evaluation of the termination of the use of antimicrobial growth promoters in Denmark. Geneva WHO 2003 (http://www.who.int/gfn/en/Expertsreportgrowthp romoterdenmark.pdf, accessed 20 January 2011).
8. ISO-6579: 2002 (E) 4th Ed. Microbiology- General Guidance on Methods for the detection of Salmonella, International Organisation for Standardization. Geneve (Switzerland).
9. Joint FAO/OIE/WHO Expert Workshop on Non-Human Antimicrobial Usage and Antimicrobial Resistance: scientific assessment: Geneva, 1-5 December 2003. - Geneva, WHO, 2004 (http://www.who.int/ foodsafety/publications/micro/en/amr.pdf, accessed 20 January 2011).
10. M02-A11: Performance Standards for Antimicrobial Disk Susceptibility Tests; Approved Standard -Eleventh Edition.
11. M07-A10: Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria That Grow Aerobically; Approved Standard - Tenth Edition.
12. M100-S22: Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing, 22th Ed.
13. Queenan A.M., Bush K. Carbapenemases: the versatile P-lactamases./ Clin Microbiol Rev 2007; 20 (3): 44058.
14. The Emergence of Multidrug Resistance to Antimicrobial Agents for the Treatment of Typhoid Fever. ASM 104th General Meeting. A - 020. May 23-27. 2004. New Orleans, LA.
15. WHO Global Strategy for Containment of Antimicrobial Resistance. Geneve WHO 2001.
16. Zarfel G. et al. Emergence of New Delhi metallo-p-lactamase,Austria. EmerglnfDis 2011; 17 (1): 129.
SALMONELLA TYPHIMURIUM ШТАММЛАРИНИНГ МИКРОБЛАРГА КДРШИ ПРЕПАРАТЛАРГА ЧИДАМЛИЛИГИНИ ФЕНОТИПИК ВА ГЕНОТИПИК КУРСАТКИЧЛАРИ
Абдухалилова ПК., Тухтамуродов Х.Д., Ибрагимов A.A., Ахмедов И.Ф., Гулямов Н.П Эпидемиология, микробиология ва юкумли касалликлари илмий текшириш институти,
Тошкент тиббиёт академияси
2012-2013 йилларда беморлардан ажратиб олинган Salmonella typhimurium нинг 39 та штаммлари, бактери-ологик ва молекуляр-генетик усуллар билан микробларга царши препаратларга сезгирлиги урганилди.
Штаммларнинг аксарияти микробларга царши препаратларга жумладан, тиббиёт учун ута мух,им булган -ß-лактамларга (84,6%) ва фторхинолонларга (92,3%) х,ам чидамли эканлиги аник;ланди. S.Typhimurium нинг штаммлари микробларга царши препаратларнинг х,ар хил синфларига куп сонли чидамлилиги билан ажралиб туради. Штаммларнинг царийб ярми (43,6%) бир хил A-AC-T-C-CO-CTX-CA-NA-CPM чидамлилик фенотипига эга, ушбу х,олат кузгатувчиларнинг битта клондан тарцалганлигидан далолат бериши мумкин. S.Typhimurium штаммларининг ß-лактамларга чидамлилиги (цефалоспоринларнинг 3-4 авлодлари билан бирга), ТЕМ ва СТХ-М генетик оиласининг ß-лактамазаларнинг ишлаб чицариши билан боглик;, шунингдек 66,7% штаммлар х,ам бир хил чидамлилик генотипи билан ифодаланади ва ß-лактамазанинг 4та ТЕМ, CTX-Ml, СТХ-М2 ва СТХ-М25 генларига эга эканлиги х,ам кузгатувчиларнинг битта клондан тарцалганлигидан далолат бериши мумкин.
