CC BY
17
14
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ПРЕПАРА ТОВ
ВЛИЯНИЕ АПЕТИЛАПЕТОНАТНЫХ КОМПЛЕКСОВ С АМИНАМИ НА ГЕНЕТИКУ ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК И ВНУТРИКЛЕТОЧНЫЕ ПРОЦЕССЫ
Ю.Ю. Aceccopoea, O.A. Бескина, A.A. Абдувалиев, A.A. Юсупова, В.П. Татарский НАЕМ А TO-basics, Biotechnologiepark TGZ - III, Germany, Luckenwalde Онкологический научный центр М3 РУ, Ташкент
Целью работы явилось изучение влияния комплексов ацетилацетоната меди с аналогами природных аминов -мелфаланом (МОС*М), фторафуром (MOC*Tf) и леакади-ном (MOC*L) на внутриклеточные процессы, которые в совокупности приводят в действие тригерные механизмы гибели патологических клеток.
В модельных системах была установлена способность комплексов стимулировать аэробное клеточное дыхание, увеличивать скорость потребления кислорода и, при этом, вызывать разобщение окислительного фосфорилирования.
В экспериментах на тимоцитах крыс и культуре клеток нейронов гиппокампа показано, что комплексы в зависимости от концентрации вызывают гиперполяризацию клеточных мембран и деполяризацию митохондриальных мем-бран. Было установлено, что комплексы (МОС*М,
MOC*Tf) оказывают влияние на циклоспорин А-чувстви-тельпые поры, увеличивая проницаемость митохондриальных мембран гепатоцитЬв крыс.
В экспериментах in vivo и in vitro установлено, что комплексы изменяют состояние ионов Са2+. Непосредственно
после воздействия на клетки нейронов или гепатоцитов, препараты увеличивали концентрацию цитозольного кальция, которая со временем необратимо снижалась. Методом атомно-абсорбционного анализа показано, что МОС*М и MOC*Tf почти в 10 раз снижают содержание кальция в ткани аденокарциномы тонкого кишечника (АКАТОН), практически не изменяя его концентрацию в нормальных тканях (кишечник, печень, селезенка).
Электрофоретическими и спектрофотометрическими методами показано, что исследуемые комплексы оказывают влияние на генетику опухолевых клеток: снижают количество ДНК (меланома В16, саркома S180) и вызывают гиперэкспрессию одних и гипоэкспрессию других полипептидов (саркома S45, АКАТОН). При этом отмечается специфичность действия препаратов на различные типы тканей.
Снижение в 5 - 7 раз пролиферативной актиности опухолевых клеток меланомы В16, оцененное по митотическому индексу, свидетельствует о высокой противоопухолевой активности новых комплексных соединений.
FAS-ДЕФИЦИТНАЯ ЛИНИЯ КЛЕТОК JURCAT/A4, РЕЗИСТЕНТНАЯ К ИНДУКТОРАМ И ЛИГАНДАМ ПРОГРАММИРОВАННОЙ ГИБЕЛИ КЛЕТОК
Д.Ю. Блохин, A.A. Соколовская, A.A. Московцев Российский онкологический научный центр им. H.H.Блохина РАМН
Программированную гибель клеток (апоптоз) индуцируют различные сигналы экзо- и эндогенной природы -факторы роста, гормоны, тепловой шок, радиация, внутриклеточные медиаторы трасдукции сигнала, а также белки суперсемейства TMF-подобных лигандов к рецепторам гибели клеток (TMFR-1, FasR, DR4, DR5 и др.). Рецептор-но-лигандная система является важным компонентом лекарственно-индуцированного апоптоза и полихимиорезистентность опухолевых клеток может быть связана с их неспособностью к Fas-опосредованному апоптозу.
Исследования выполнены на клетках Т-лимфобласт-ной линии человека Jurcat. В условиях культивирования с апоптоз-индуцирующими моноклональными антителами (МКА) к антигену Fas/APO-l/CD95 (клон IPO-4) из родительской линии Jurcat дикого типа (Jurcat/wt) получен Fas-дефицитный вариант (Jurcat/A4). Клеточная линия Jurcat/ А4, в отличие от родительской, имеет Fas-негативный фенотип, при этом клетки обеих линий экспрессируют рецепторы гибели АРО-2 (DR4 и DR5) и ТНРК1. Однако линия Jurcat/A4 оказалась резистентной к воздействию как анти-Fas МКА (IPO-4), так и TRAIL, и aTNF. Клетки линии Jurcat/А4 также резистентны к противоопухолевым цитос-
татикам разных классов (доксорубицин, этопозид, циспла-тин, циклоплатам), Н203, рентгеновскому и УФ-облучению, ингибитору протеинкиназ - стауроспорину, тогда как все эти агенты в тех же условиях эксперимента эффективно индуцируют апоптоз клеток Jurcat/wt.
Таким образом, используя длительную стимуляцию Рав-рецепторов эффекторными анти-Раэ МКА (1РО-4), получена мультирезистентная линия 1игса1/А4. Причина резистентности к противоопухолевым агентам клеток Jurcat/A4 связана не только с отсутствием Рав-рецепто-ров апоптоза, но и с дефектами других молекулярных мишеней, вовлеченных в каскады трансдукции сигнала апоптоза или выполнения его терминальных стадий. Данная модель может отражать реальную клиническую ситуацию, когда под давлением иммунной системы селекция клеток и/или индукция их неспособности к апоптозу приводит к появлению мультирезистентных злокачественных опухолей. Понимание природы сигнальных путей в ле-карственно-индуцированном апоптозе в перспективе позволит управлять этим процессом для повышения эффективности лекарственных методов лечения злокачественных опухолей.
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
№1/том1/2003
