CC BY
80
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2013 УДК 616.66-007.26-089.844-07
А.С. Марченко1, Л.Е. Жесус2, С.Н. Зоркин1, Ж.Л. Пиппи-Салле3, А.В. Апакина1, А.А. Суходольский4, Д.С. Шахновский1
факторы, определяющие механические свойства уретры после проведения уретропластики на модели гипоспадии
1ФГБУ Научный центр здоровья детей Российской академии медицинских наук, Москва, Россия; 2Университетская клиника Антонио Педро, Рио-де-Жанейро, Бразилия; 3Университетская клиника Сик Кидс, Торонто, Канада; 4МУЗ Люберецкая детская городская больница Минздравсоцразвития РФ, Люберцы, Московская область
A.S. Marchenko, L.E. Zhesus, S.N. Zorkin, Zh.L. Pippi-Salle, A.V. Apakina, A.A Sukhodol'sky., D.S. Shakhnovsky
factors determining mechanical properties of the urethra after urethroplasty on a hypospadias model
Известно, что данные урофлуометрии после проведения оперативного лечения гипоспадий методом иссечения уретральной пластинки с последующей тубуляризацией (TIP) значительно отличаются от таковых в норме. Подобные нарушения могут быть связаны с регенеративным процессом иссеченной области, в частности с особенностью состояния коллагеновых волокон. Пересадка имплантата слизистой крайней плоти в месте рассечения уретральной пластинки может увеличить податливость оперированной уретры и снизить частоту постоперационных нарушений мочеиспускания. Поскольку различные типы коллагена экстрацелюлярного матрикса отвечают не только за эластичность, но и за немеханические свойства тканей, они могут влиять и на динамику потока.
Цель работы: изучить типы и количественную экспрессию коллагена в неоперированной уретре в сравнении с уретрой, оперированной по принципу TIP и TIP с использованием имплантата.
Материалы и методы. Нами была создана модель TIP и TIP с использованием имплантата на лабораторных кроликах. Стандартизованные уретральные сегменты (уретра и кавернозные тела) были получены после проведения оперативного вмешательства. Тканевую концентрацию коллагена I, III, IV, VII и XIII типов измеряли методом полимеразной цепной реакции в трех группах животных: 6 нед после проведения операции TIP и TIP + имплантат, а также у неоперированных животных.
Результаты. Уровень экспрессии матричной РНК (м-РНК) наиболее структурных коллагенов I и III типов статистически не различался между группами оперированных животных и в контроле. Концентрация коллагена VI и VIII типов оказалась более низкой в оперированных группах по сравнению с таковой в группе контроля, а концентрация коллагена IVтипа - более высокой. Причем выявлены статистически значимые различия для коллагена VIII типа (р < 0,05). Концентрация коллагена XIII типа была выше в контрольной группе, чем в группе оперированных животных (p < 0,01), но количественно не различалась между таковой в группах с проведенной уретропластикой.
Заключение. Выявлены различия экспрессии м-РНК коллагена уретры после проведения двух самых распространенных методов оперативного вмешательства при гипоспадии. Податливость уретры может быть обусловлена различной степенью экспрессии основных типов коллагена, что определяет биофизические свойства тканей. Ключевые слова: гипоспадия, уретра, растяжимость, эластичность, экспериментальная модель
Results of uroflowmetry after treatment of hypospadias by dissecting the urethral plate with subsequent tubulization (TIP) are significantly different from normal values probably due to compromised regeneration of the affected region and changes of collagen fibers. Transplantation of preputial mucosa into the site of dissection may increase urethral compliance and decrease the frequency of postoperative complications of urination. Different types of collagen of extracellular matrix are responsible for elasticity and non-mechanical properties of tissues and thereby affect dynamics of urine passage. This study was aimed at studying the types and quantitative expression of collagen in intact urethra and the one operated by TIP or TIP plus implant technologies. We developed a TIP and TIP plus implant rabbit models. Standardized urethral segments (urethra and cavernous bodies) were obtained surgically. Tissue levels of collagen I, III, IV, VII, XIII were measured by PCR in control animals and those undergoing TIP and TIP plus implant surgery. There were no significant intergroup differences in expression of matrix RNA of collagens I and III while that of collagens VI and VIII decreased and collagen IV increased after surgery. Expression of collagen VIII was significantly different between the groups (p<0.05). Collagen XIII levels were higher in controls than in operated animals (p<0.0l) in which they were not significantly different. Thus, two most common methods of surgical treatment of urethra had different effects on collagen\matrix RNA expression that may be responsible for biophysical properties of the tissue and urethral compliance. Key words: urethral compliance/elasticity, experimental model
Метод иссечения уретральной пластинки с последующей тубуляризацией (TIP) является наиболее используемым методом оперативной коррекции гипоспадии [1]. Несмотря на отличные косметические результаты, данные урофлуометрии после проведения оперативного лечения значительно отличаются от таковых в
Шахновский Дмитрий Сергеевич (Shakhnovskiy Dmitry Ser-geevich), e-mail: [email protected]
норме. Однако изменение диаметра уретры и анатомического стеноза при этом не наблюдается. Операция влечет за собой изменение податливости уретры, что, возможно, связано со снижением концентрации эла-стиновых волокон или снижением концентрации, нарушением архитектоники и распределения различных типов коллагена. Согласно закону Пуазейля, сопротивление потоку в трубе с вязко-эластическими специфическими свойствами жидкостей прямо пропорционально радиусу (Д) в четвертой степени и изменению
давления (AP) и обратно пропорционально вязкости жидкости (ц) (моча в нашем случае) и длине (L) трубки (Q = nR4Ap/8 цЬ). Таким образом, в менее податливой трубке сопротивление к потоку будет возрастать пропорционально уменьшению функционального радиуса в ответ на прохождение жидкости при одинаковом давлении [2]. Данное наблюдение снижения потока в экспериментальной модели уретры с нестенотичным неподатливым сегментом было подтверждено работой T. Idzenda и соавт. [3].
В литературе опубликованы данные о наличии нормальной концентрации общего коллагена в неоуретрах после оперативного вмешательства методом TIP [4]. Также существуют публикации о нарушениях распределения коллагена I, III и IV типов в оперированных уретрах [5]. Возможно, нарушение биофизических свойств оперированной уретры продиктовано количеством и особенностями распределения основных типов коллагена. Кроме того, область продольного иссечения уретры методом TIP может регенерировать в результате вторичного натяжения и фибро-зирования, что приводит к нарушению податливости. Добавление импланта слизистой крайней плоти в месте рассечения уретры (TIPG), возможно, снижает количество рубцовой ткани, что приводит к увеличению податливости уретры.
Цель данной работы - изучение распределения коллагена в нормальной и оперированной уретре методом TIP и TIP с применением импланта на экспериментальной модели гипоспадии.
Материалы и методы
Протокол исследования был одобрен Комитетом по защите животных (Animal Care Committee) REB 1000007883.
27 зрелых самцов новозеландских кроликов массой 3-3,5 кг содержались в индивидуальных клетках, получая стандартный рацион и воду. Преанестезию проводили с использованием кетамина и ацепромазина. Анестезию проводили с использованием галотана, оксида азота и кислорода через маску. Для местной анестезии использовали 2% лидокаин. Животных разделили на 3 группы:
1) контрольная группа (G1) (n = 9): нормальные неопери-рованые взрослые самцы кроликов;
2) TIP-модель (G2) (n = 9): животные, подвергавшиеся TIP; после обширной сегментарной резекции вентральной уретры (полная резекция вентролатеральной части стенки уретры, не граничащей с пещеристым телом) надсечение сегмента дорсальной уретры с сохранением как минимум половины окружности уретры после проведения тубуляризации по методике TIP; использовали непрерывный однослойный
шов ро^юхапопе 6.0 над ШF-катетером, который удалили сразу после завершения операции; оперированная уретра состояла из сегмента размером 2,5 см на расстоянии 1 см проксимально от головки;
3) TIPG-модель ^3) (п = 9): животные, прооперированные по той же методике, как в G2, за исключением подшивания импланта крайней плоти с тем, чтобы покрыть дефект между двумя половинами дорсальной части надсеченной уретральной пластинки; проводили удаление жировой ткани с импланта с последующей его фиксацией по краям иссеченного дорсального участка уретры и подшиванием его к белочной оболочке посредством непрерывного шва 7.0 ро^1асйп .
После окончания действия анестезии животные были возвращены в клетки. В постоперационном периоде необходимости в обезболивании не было. 3 животных были исключены из исследования в связи с техническими трудностями получения материала (1 G2, 1 G3) и 1 животное ^3) было исключено по причине смерти в постоперационном периоде. в результате вскрытия животного причину смерти установить не удалось. Микроскопически не выявили изменения в уретре, которая легко катетеризировалась 10F-катетером. Остальных животных наблюдали в течение 6 нед, затем они были усыплены летальной дозой анестетика. После усыпления кожа пениса и бульбоуретральные железы были полностью отсепарированы для мобилизации уретры. Уретра и кавернозные тела затем были лигатурированы с 3/0 шелком на уровне лобковой кости с выделением реконструированного уретрального сегмента. Дистальную треть сегмента использовали для проведения полимеразной цепной реакции (ПЦР). Оставшиеся две трети - для гистопатологических исследований. После получения всех образцов 5 были исключены в связи с техническими трудностями по их хранению и подготовке и 1 G3-образец был исключен из статистического анализа в связи с резко отличающимся уровнем коллагена XIII типа. Таким образом, исследовали по 6 образцов в каждой группе.
Перед проведением ПЦр образец промывали в физиологическом растворе, моментально замораживали с использованием сухого льда и помещали для хранения в морозильную камеру температурой -80С. Затем проводили оценку коллагена I, III, IV, VI, VIII и XIII типов. По каждому из типов коллагена выделяли РНК с использованием oligoDT-праймеров и обратной транскриптазы ([пу^^еп®) (см. таблицу) . Прайме-ры были собраны и оттестированы перед применением. ДНк выделяли с помощью раствора TRIzol®. Стандартизацию результатов использовали для референтных генов Ь-асйп и ИРКГ. Амплификацию проводили методом флюоресценции (SYBRgreen) с 90-110% эффективностью.
сравнительный и дескриптивный анализ осуществляли с использованием статистического программного обеспечения (^ТАТ-РГо® Нью-Йорк, 'Addmsoft", США). Статистический анализ проводили с использованием теста КгшкаП-Walis, и он оказался достоверным со значением р < 0,05.
Праймеры , использованные в ПЦР (отмечены как 5'к 3')
ГЕН FW-праймер RV-праймер Температура отжига (°C)
Col1a2 ATG GAT GAG GAA ACT GGC AAC T GCC ATC GAC AAG AAC AGT GTA AGT 63
Col3 AAG CCC CAG CAG AAA ATT G TGG TGG AAC AGC AAA AAT CA 52
Col4a1 CAA GGC CCC CAA GGC GAC AG CTC CAG GAG GTC CGG GGT CG 68
Col6 CCC CGA CCG ACA TCA CCA TCC TAC CTT GGC GAA GCG CTT CGT GGT GT 68
Col8a1 CCT CTC TGC CCG ACC TTA CGT GC AGG ACC AGT GTC CCT GCT TGT GT 68
Col13 CCC GGG CTG GGA CAG AA TCC CCG GCT CAC CCT TGG AG 60
GAPDH GGA GAA AGC TGC TAA GTA ACG ACC TGG TCC TCG GTG TA 54
ß-Actin CGG CTA CAG CTT CAC CAC CA CGG GCA GCT CGT AGC TCT TC 63
2,5-,
2,0-
1,5-
1,0-
0,5-
Collagen I Collagen III
Control
Collagen IV
Type of collagen
I —
Collagen VI Collagen VIII Collagen XIII
TIP
TIPG
Operated
Средние значения коллагена разных типов в контроле, TIP, TIPG и группе опери рованных животных (TIP и TIPG).
1 - I тип коллагена; 2 - III тип; 3 - IV тип; 4 - VI тип; 5 - VIII тип; 6 - XIII тип.
Результаты и обсуждение
При исследовании в экспериментальных группах получили более низкий уровень экспрессии РНК для коллагена VI, VIII, XIII типов и более высокий уровень для коллагена IV типа в сравнении с таковыми в неоперированной группе. Эти различия в особой степени проявляются в TIPG-группе (p < 0,01). Установили статистически значимое различие по содержанию коллагена VIII типа в оперированных группах по сравнению с таковым в группе контроля (p < 0,05). Особенно это проявлялось в TIPG-группе (p < 0,01). Уровень экспрессии коллагена I и III типов был примерно одинаковым в 3 группах (см. рисунок).
разные типы коллагена отвечают за различные биологические функции, связанные со структурой и податливостью тканей, модулированием тканевого метаболизма, реконструкцией, репарацией, процессами ремоделирования и ангиогенеза. Эти функции запрограммированы комплексом взаимодействий с рецепторами клеток и экстрацелюлярным матрик-сом, включая биологический сигналлинг. Твердость и трехмерная пространственная группировка архитектоники коллагена влияют на механические свойства тканей. Изменения в общей концентрации и/или пространственной концентрации различных типов коллагена могут прямым образом влиять на данные свойства.
У млекопитающих присутствует 28 типов коллагена, который подразделяется на восемь семейств (фибриллформирующие, тройные спиралевидные фибриллассоциированные - FACIT, мембранообразу-ющие, микрофибриллярные, якорные фибриллобра-зующие, короткие цепи, трансмембранные коллагены и мультиплексины) [6, 7]. Понимание их функций и взаиморегуляции находится лишь в стадии начального анализа. опубликовано незначительное количество информации о функциональных особенностях различных типов коллагена, а также особенностях их распределения в уретре как в экспериментальных
моделях, так и у человека. Мы близки к изучению структурных коллагенов (фибриллобразующие - I и III типы, микрофибриллярные - VI тип, короткие цепи - VIII тип), базаль-ной мембраны (коллаген IV типа) и трансмембранрегуляторного (коллаген XIII типа). Коллаген I и III типов напрямую влияет на биофизические свойства ткани. коллаген VI и VIII типов выполняет фиброобразующую функцию посредством рекрутмента фибробластов; коллаген IV типа является наиболее важным структурным компонентом базальных мембран; коллаген XIII типа осуществляет регенеративную и регулирующую рост функции [6, 8].
Фибриллформирующие коллагены (I, II, III, V, XI типы) составляют 90% всех коллагенов. Они в основном выполняют структурную функцию, но также участвуют в регуляции экстрацелюлярного матрикса. Коллаген I и III типов доминирует практически во всех тканях, кроме тканей хряща, мозга и глаз. I тип связывают с базальной структурой тканей. III тип в обилии представлен в эластических тканях и висцеральных ретикулярных волокнах и, возможно, связан с эластичностью ткани и организацией эластических волокон [6-10].
Некоторые авторы отмечают, что не наблюдали повышения уровня общего коллагена через 3 нед после операции методом TIP на экспериментальной модели. Эти же авторы обнаружили гистологически подтвержденный фиброз у взрослых особей спустя 3 нед после операции [4]. Нашим исследовательским коллективом были продемонстрированы сходные данные спустя 6 нед после начала заживления. Некоторые авторы считают, что соотношение коллагена I и III типов влияет на начальную стадию регенерации [4]. L. Baskin и соавт. [1] предположили, что нормальная человеческая уретра составлена из 75% коллагена I типа и 25% коллагена III типа в сравнении со стено-зированными уретрами, где 83% составляют коллаген I типа и лишь 16% - коллаген III типа [11]. В нашей модели на животных без сформированного постоперационного анатомического стеноза в поздней стадии регенерации среднее соотношение между коллагеном I и III типов м-РНК составило 1,05 (контрольная группа), 1,21 (TIP) и 0,87 (TIPG). Полученные данные наводят на мысль о том, что в результате TIP, возможно, увеличивается, а после TIP+G снижается пропорциональное соотношение коллагена I и III типов.
Мы установили, что количество коллагена IV типа имеет тенденцию к увеличению в экспериментальных группах животных, преимущественно в TIPG.
Y. Hayashi и соавт. [5] исследовали распределение коллагена IV типа при гипоспадии у детей, анализируя биоптаты, взятые между уретральной пластинкой и адвентицией кавернозых тел. Они предположили, что наличие коллагена IV типа ограничивается капиллярной базальной мембраной. Однако другие авторы описали наличие коллагена IV типа в базальной мем-
бране уротелия и детрузоре [12]. Фокальные потери реактивности коллагена IV типа могут быть связаны с воспалительным процессом, дисплазией и нонин-вазивным раком мочевого пузыря [5]. Данные, полученные У. Иауа8Ы и соавт. [5], также подтверждают мнение о том, что уретральная пластинка не содержит повышенного содержания общего коллагена, однако имеет место наличие коллагена I типа и отсутствие коллагена III типа. В литературе представлены данные, основанные на изучении нормальной человеческой уретры или уретры с приобретенными заболеваниями [4, 11]. Роль эпителиального трансплантата в поддержке базальных мембран может объяснять повышенный уровень экспрессии м-РНК коллагена IV типа в модели ПРО.
В нашем исследовании экспрессия м-РНК коллагена VI типа была снижена в экспериментальных группах. Этот часто встречаемый тип коллагена формирует сетевые структуры, связующие клетки, их базальные мембраны, матрикс. Также формирование осуществляется посредством фибрилл коллагена I и III типов с участием базальных мембран. В человеческом организме они стимулируют пролиферацию фибробластов, активация которых происходит спустя 3 дня после травмы и сохраняется до конца процесса репарации. Коллаген IV типа также снижает активность клеточного апоптоза в различных биологических процессах, являясь эффектором трансформирующего фактора роста Ь. Структура коллагена может быть нарушена при различных наследственных заболеваниях, таких как миопатия Ульриха и Бетлена. При данном заболевании наблюдают высокую степень мышечной аутофагии, которая приводит к контрактурам, мышечному фиброзу и чрезмерно растяжимым суставам [14]. С точки зрения патогенеза подобные изменения выявляют при артрофиброзах [15], фиброзах легких, сердечных и печеночных фиброзах, а также в жировой ткани при метаболическом синдроме. Отсутствие коллагена VI типа снижает тканевый фиброгенез в экспериментальной модели, что наблюдается при аневризмах аорты и указывает на непосредственную роль коллагена VI типа в процессе фиброгенеза. Снижение экспрессии коллагена VI типа в экспериментальных группах может быть связано со снижением необходимости апоптоза в связи с повышенной пролиферацией клеток во время процесса заживления.
Коллаген VIII типа формирует гексагональные сети и может быть связан со стабилизацией экстрацелюляр-ного матрикса, активным ремоделированием [16], индукцией миграции миоцитов и их дифференцировки в фибробласты [17, 18]. Данные литературы указывают на то, что коллаген VIII типа активно секретируется миоцитами в процессе ремоделирования в биологических трубчатых структурах в ответ на частые механические воздействия, в том числе травматического характера (сосуды и бронхи) [18, 19]. Мы не предполагали, что количество данного коллагена окажется сниженным в экспериментальных группах и, более того в ПРО-модели, с учетом и роли импланта в ремоделиро-вании и активации фибробластов. Не исключено, что, с одной стороны, наша модель связана с более низким уровнем синтеза коллагена VIII типа, а с другой - с более низким количеством миоцитов (ответственных за
синтез коллагена VIII типа), которые могут модифицировать ремоделирование ткани после травмы. Кроме того, возможно, что в определенный момент при регенерации ткани в нашей системе наблюдалось преобладание немиоцитарных популяций мезенхимальных клеток, которые не транскрибировали коллаген VIII типа. Оценка транскрипции коллагена в работе, отличающейся от нашего исследования по времени, при изучении идентичных гистологических популяций клеток может помочь решить данный вопрос.
Коллаген XIII типа экспрессируется в основном в растущих, незрелых тканях. Недавние публикации указывают на его причастность к росту, дифференциров-ке, созреванию и сохранению целостности мышечно-скелетной ткани и сосудов [8]. Коллаген XIII типа активирует почечный фиброз при синдроме Альпорта (в эксперементальной модели на крысах). Блокировка коллагена XIII типа при синдроме Альпорта защищает от процесса фиброзирования и участвует в противоопухолевом иммунитете [20]. В нашем исследовании наблюдали тенденцию к снижению уровня данного типа коллагена у оперированных животных.
Более низкий уровень коллагенов VI, VIII и XIII типов м-РНК в нашей модели объясняется низким уровнем фиброзирования ткани после проведения операции TIP, как уже отмечалось ранее [4]. Представляют интерес данные, полученные A. Haddad и соавт. [21], в культурах крайней плоти после добавления тестостерона, в результате чего активируется рекрутмент фи-бробластов, однако замедляется заживление ткани без изменений уровня коллагена I, II и III типов м-РНК [21]. Это может указывать на более важные и более сложные тканевые специфические механизмы уретрального заживления, чем банальный фиброгенез, а также на то, что данные механизмы могут зависеть от уникальных биологических регуляторных особенностей, связанных с паракринными элементами, которые включают различные типы коллагена и матрикриптины.
В литературных источниках опубликованы данные о коллагеновом составе полового члена человека и изменениях, связанных с его возрастными особенностями [22], но данные об экспрессии коллагенов уретры в литературе не представлены. Возможно, некоторые наши результаты будут отличаться у незрелых животных особенно в том, что касается коллагена XIII типа, который экспрессируется в большом количестве в незрелых растущих тканях [8]. Большие значения сред-неквадратических отклонений в нашем исследовании свидетельствуют о том, что наличие данных, полученных от большего количества животных, привело бы к более статистически значимым результатам. Наше исследование было направлено на количественное изучение экспрессии РНК, что может отличаться от экспрессии белка [23, 24]. Кроме того, наши выводы основаны на данных экспериментальной модели, что вряд ли может точно отражать процессы, происходящие в уретре человека при гипоспадии, так как существуют анатомические, гистологические и физиологические различия между уретрой кролика и уретрой человека. Использованная нами модель кролика является наилучшей и наиболее используемой экспериментальной моделью для изучения процессов при ги-поспадии, однако смоделированная нами уретральная
пластинка не может напрямую сравниваться с тканью уретральной пластинки при гипоспадии.
Концентрация уретральной м-РНК для коллагена I и III типов в группах TIP и TIPG идентична таковой в контрольной группе. Уретральная концентрация м-РНК более низкая для коллагена VI, VIII и XIII типов и более высокая для коллагена IV типа в экспериментальных группах. Различия были более выражены у TIPG животных, за исключением содержания коллагена XIII типа. Существуют различия концентрации м-РНК разных типов коллагена при сравнении ее у оперированных групп (TIP и TIPG) с таковой в группе контроля. Эти различия могут быть связаны со специфическими биологическими и биофизическими свойствами тканей.
REFERENCES
1. Snodgrass W. Tubularized incised plate for distal hypospadias. J. Urol. 1994; 151 (2): 464-5.
2. Braga L.H., Pippi-Salle J.L., Lorenzo A.J. et al. Comparative analysis of tabularized incised plate versus island flap urethroplasty for penoscrotal hypospadias. J. Urol. 2007; 178 (4, pt 1): 1451-7.
3. Idzenga T., Kok D.K., Pel J.M. et al. Is the impaired flow after hypospadias correction due to increased urethral stiffness? J. Pediatr. Urol. 2006; 2: 299-303.
4. Taneli F., Ulman C., Genc A. et al. Biochemical analysis of urethral collagen after tubularized incised plate urethroplasty: an experimental study in rabbits. Urol. Res. 2004; 32: 219-22.
5. Hayashi Y., Mizuno K., Kojuma Y. et al. Characterization of the urethral plate and the underlying tissue defined by expression of collagen subtypes and microarchitecture in hypospadias. Int. J. Urol. 2011; 18 (4): 217-22.
6. Gel.se K., Poschl E., Aigner T. Collagens: structure, function and biosynthesis. Adv. Drug Delivery Ver. 2003; 55: 1531-46.
7. Gordon M.K., Hahn R.A. Collagens. Cell Tissue Res. 2010; 339: 247-57.
8. Hiekkinen A., Tu H., Pihlajaniemi T. Collagen XIII: a type II transmembrane protein with relevance to musculoskeletal tissues, microvessels and inflammation. Int. J. Biochem. Cell Biol. 2012; 44: 714-7.
9. Ramirez F., Boast S. D'Alessio M. et al. Molecular pathobiology of human collagens. Connect. Tissue Res. 1989; 21 (1-4): 79-89.
10. Von derMarkK. Localization of collagen types in tissues. Tissue Res. 1981; 9: 265-34.
11. Baskin L.S., Constantinescu S.C., Howard O.S. et al. Biochemical characterization and quantitation of the collagenous components of urethral stricture tissue. J. Urol. 1993; 150: 642-7.
12. Borza D.B., Bondar O., Ninomiya Y. et al. The NC1 domain of collagen IV encodes a novel network composed of the alpha 1, alpha 2, alpha 5 and alpha 6 chains in smooth muscle asement membranes. J. Biol. Chem. 2001; 276 (30): 28532-40.
13. Deen S., BallR.Y. Basement membrane and extracellular interstitial matrix components in bladder neoplasia - evidence of angiogenesis. Histopathology. 1994; 25 (5): 475-81.
14. Sabatelli P., Palma E., Angelin A. et al. Critical evaluation of the use of cell cultures for inclusion in clinical trials of patients affected by Collagen VI myopathies. J. Cell Physiol. 2012; 227 (7): 2927-35.
15. Zeichen J., Van Griensven M., Albers I. et al. Immunohistochemical localization of collagen VI in arthrofibrosis. Arch. Orthop. Trauma Surg. 1999; 119 (5-6): 325-8.
16. MacBeath J.R., Kielty C.M., Shuttleworth C.A. Type VIII collagen is a product of vascular smooth-muscle cells in development and disease. Biochem. J. 1996; 319 (pt 3): 993-8.
17. Cherepanova O.A., Pidkovka N.A., Sarmento O.F. et al. Oxidized phospholipids induce type VIII collagen expression and vascular smooth cell migration. Circ. Res. 2009; 104 (5): 609-18.
18. Hou G., Mulholland D., Gronska M.A. et al. Type VIII collagen stimulates smooth muscle cell migration and matrix metalloproteinase synthesis after arterial injury. Am. J. Pathol. 2000; 156 (2): 467-76.
19. Hasaneen N.A., Zucker S., Lin R.Z. et al. Angiogenesis is induced by airway smooth muscle strain. Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 2007; 293 (4): L1059-68.
20. Ricard-Blum S. The collagen family. Cold Spring Harb. Perspect. Biol. 2010; doi:10.1101 /cshperspec.a004078. Downloaded from http://cshperspectives.cshlp.org on June 13, 2012.
21. Haddad A., Kirwan T., Aitken K. et al. Establishing biological rationale for preoperative androgensin hypospadias surgery. Dial Pediatr. Urol. 2012; 33 (3): 13.
22. Goldstein A.M., Meehan J.P., Morrow J.W. et al. Ultrastructural changes in impotent penile tissue; comparison of 65 patients. J. Urol. 1991; 145: 749-58.
23. Leslie B., JesusL.E., El-Hout Y. et al. Comparative histological and functional analysis of tabularized incised plate urethroplasty with and without dorsal inlay graft: a preliminary experimental study in rabbits. J. Urol. 2011; 186 (4, suppl.): 1631-7.
24. Somuncu S., Caglayan O., CakmakM. et al. The effect of indwelling catheter on OH-proline in the urethral wound: an experimental study. J. Pediatr. Urol. 2006; 2: 182-4.
Поступила 04.10.12
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ 2013 УДК 616.833-001-091-073.432.1 М.Н. Романова1, Н.Г. Жила1, Е.Н. Мурая2
моделирование морфометрических параметров периферических нервов верхних конечностей у детей при ультразвуковом исследовании
ТБОУ ВПО Дальневосточный государственный медицинский университет Минздравсоцразвития Российской Федерации, 680000, Хабаровск; 2ФГБОУ ВПО Дальневосточный государственный университет путей сообщения, 680021, Хабаровск
M.N. Romanova, N.G. Zhila, E.N. Muraya
modeling morphometric parameters of peripheral nerves of upper extremities in
CHILDREN BASED oN THE RESULTS of AN ULTRASoNIC STUDY
Авторами на основе ультразвукового исследования периферических нервов верхней конечности у детей показана взаимосвязь между площадью поперечного сечении нерва и возрастом ребенка, выраженная математической моделью. Установлено, что при достижении ребенком определенного возраста площадь поперечного сечения нерва также достигает определенной величины. В возрасте 16 лет и старше этот показатель становится постоянной анатомической величиной. Полученные данные целесообразно использовать для уточнения характера повреждения периферического нервного ствола и выбора оптимальной тактики лечения.
Ключевые слова: периферические нервы, срединный нерв, верхняя конечность, возраст ребенка, математическая модель, площадь поперечного сечения нерва, корреляционный анализ
