ЛЕОНОВ Олег Владимирович, доктор медицинских наук, заместитель главного врача по научной работе КОД.
САВОСТЬЯНОВ Денис Васильевич, врач анестезиолог-реаниматолог отделения анестезиологии и реанимации КОД.
КАЧУР Светлана Владимировна, аспирантка кафедры патофизиологии с курсом клинической пато-
физиологии ОмГМУ, врач анестезиолог-реаниматолог отделения анестезиологии и реанимации КОД.
Адрес для переписки: 644043, г. Омск, ул. Ленина, 12.
Статья поступила в редакцию 10.06.2015 г. © А. О. Соловьев, О. В. Леонов, Д. В. Савостьянов, С. В. Качур
УДК 616.89-008.441.13-053.7:612.017.11
Е. Л. ЩЕГЛОВА
Омский государственный медицинский университет
ФАКТОРЫ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ ЗАЩИТЫ У ПОДРОСТКОВ, ЗЛОУПОТРЕБЛЯЮЩИХ АЛКОГОЛЕМ
Исследованы факторы врожденного иммунитета подростков, поступивших в наркологический стационар с диагнозом «злоупотребление алкоголем». Выявлено увеличение количества активных фагоцитов при одновременном снижении их поглотительной способности, но сохраненной способности к завершенному фагоцитозу.
Ключевые слова: подростки, алкоголь, фагоцитоз.
Пик приобщения к алкоголю как у мальчиков, так и у девочек приходится на возраст в 13—14 лет [1]. С различной частотой алкогольные напитки употребляют около 72 % подростков. Наиболее любимым молодежью алкогольным напитком является пиво: его предпочитает 51 % подростков [2].
Установлено, что употребление алкоголя в течение трех суток у взрослых приводит к нарушению функций врожденного иммунитета, усилению кислородзависимой активности фагоцитирующих клеток и снижению их поглотительной и переваривающей способности [3].
Метаболизм этанола в печени активизирует им-мунокомпетентные клетки, которые, в свою очередь, запускают воспалительные процессы, что может приводить к некрозу и апоптозу гепатоцитов [4, 5]. Хроническая алкогольная интоксикация нарушает функции иммунной системы, что в конечном итоге приводит к вторичному иммунодефициту.
Процесс созревания иммунной системы занимает все детство и заканчивается к 13—15 годам. В возрасте 12— 15 лет происходит половое созревание, при котором активная секреция половых гормонов, прежде всего андрогенов, ведет к подавлению клеточного иммунитета и стимуляции гуморального звена. Этот возрастной период характеризуется напряженностью врожденного иммунитета [6].
Цель исследования — оценка влияния этанола на фагоцитарную активность нейтрофилов у подростков.
Материал и методы исследования. Обследовано 30 подростков в возрасте 15—17 лет (основная группа), поступивших в Омский областной наркологический диспансер с диагнозом «злоупотребление алкоголем» (Б10.1 по МКБ-10). Контрольные точки обследования — 1-, 3-, 5-, 7- и 10-е сутки после последнего приема алкоголя. Группу сравнения составили подростки аналогичного возраста, прохо-
дившие диспансеризацию в Городской детской клинической больнице № 2 им. В. П. Бисяриной. Материалом для исследования фагоцитоза служила венозная кровь, взятая в пробирку Vacutainer с гепарином. Использовали микроскопический метод оценки завершенности фагоцитоза по проценту фагоцитоза и фагоцитарному индексу (по Гамбургеру), интегрально характеризующему стадии фагоцитоза, такие как адгезия, поглощение, переваривание. Принцип метода основан на способности нейтрофильных лейкоцитов поглощать и переваривать микроорганизмы. В норме через 30 минут начинается переваривание микробов в клетках крови, а через 2 часа оно должно закончиться. Полинук-леарные клетки разрушаются после завершения фагоцитоза. Мононуклеарные клетки сохраняются, но свободны от микробов, если фагоцитоз в них завершен.
Оценивали процент фагоцитоза (ФА) — число клеток из 100 нейтрофилов, вступивших в фагоцитоз; фагоцитарное число Райта (ФЧ) — среднее число захваченных микробов одним нейтрофилом; индекс завершенности фагоцитоза (ИЗФ). Фагоцитоз считается завершенным, если ИЗФ>1. В качестве фагоцитируемых частиц использовали культуру клеток Staphylococcus aureus. Фагоцитоз оценивали в соответствии с его фазами — через 30 и 120 минут.
Статистическую обработку результатов проводили с применением методов основных характеристик описательной статистики. Для сравнения распределения показателей использовали критерии нормальности Шапиро —Уилка. При распределении, отличавшемся от нормального, в качестве основных характеристик использовали медиану (Ме), нижний и верхний квартили (P25 — P75). Оценку статистической значимости различий проводили с применением непараметрических критериев Манна —Уитни (U). Критический уровень значимости при проверке
Таблица 1
Показатели фагоцитарной активности нейтрофилов подростков, злоупотребляющих алкоголем, Me (P25-P75)
Показатели Контрольная группа Основная группа, сроки лечения в стационаре (сутки)
1 3 5 7 10
ФА через 30 мин, % 62,8 (56,0- 70,0) 73,0* (65,0- 84,0) 76,0* (62,0- 88,0) 77,0* (73,0- 88,0) 80,0* (69,5- 82,5) 77,5* (60,0- 88,0)
ФЧ через 30 мин, ед. 10,3 (7,9- 13,4) 3,9* (3,4-4,1) 4,1* (2,8-8,4) 5,8* (3,6-7,6) 4,3* (3,8 - 4,7) 5,3* (4,2-7,2)
ФА через 120 мин, % 40,0 (35,0- 40,0) 52,0* (40,0- 67,0) 57,5* (41,0-70,0) 59,0* (50,0- 62,0) 51,0* (46,5- 56,5) 50,0* (37,0- 69,0)
ФЧ через 120 мин, ед. 5,4 (4,8-8,0) 2,9* (2,5-3,3) 2,5* (2,2-3,1) 3,8* (2,5- 4,4) 2,1* (1,7-2,7) 3,5* (2,2-4,0)
ИЗФ 1,75 (1,54- 1,98) 1,54 (1,23- 1,82) 1,65 (1,32- 1,96) 1,72 (1,31- 1,79) 1,71 (1,53- 2,07) 1,73 (1,56-2,01)
Примечания. Ме — медиана, Р25 — нижний квартиль, Р75 — верхний квартиль, * — р<0,05 между группами по критерию и.
нулевых гипотез был принят на уровне р = 0,05. Статистическая обработка полученных данных проводилась с применением пакетов прикладных программ БТАТ^ТЮА 6.0.
Результаты и их обсуждение. Результаты исследования приведены в табл. 1. Продемонстрировано, что у подростков, злоупотреблявших алкоголем, отмечается статистически значимое увеличение количества фагоцитирующих клеток после 30-минутной инкубации с микробной культурой на 16 % в первые сутки после приема алкогольных напитков, в сравнении с группой сравнения. Отмечается постепенное увеличение фагоцитарного индекса к 7-м суткам, что выше на 29 % показателя контрольной группы, к 10-м суткам выше, чем в контроле, на 23 %.
Аналогичные изменения были отмечены и после двухчасовой инкубации. В первые сутки фагоцитарная активность нейтрофилов оказалась увеличенной на 30 %, на 5-е сутки — на 47 % у подростков, злоупотребляющих алкоголем, по сравнении с контролем. На 7- и 10-е сутки фагоцитарный индекс оставался по-прежнему повышенным.
Несмотря на то что количество активных нейтро-филов повышено у подростков, злоупотребляющих алкоголем, поглотительная способность фагоцитов на протяжении всего периода наблюдения оставалась сниженной. Так, фагоцитарное число в первые сутки после последнего приема алкоголя снизилось на 64 %, через 5 суток — на 47 % и к 10-м суткам — на 48 % относительно показателей группы сравнения.
Фагоцитарное число (через 120 минут) у подростков, злоупотреблявших алкоголем, оказалось статистически ниже контрольных значений. Это может свидетельствовать о сохранной переваривающей способности фагоцитов, вероятно, за счет повышенного кислородзависимого механизма, обусловленного системой миелопероксидазы и развитием респираторного взрыва [7]. В подтверждение того, что переваривающая способность фагоцитов сохранена у подростков, злоупотребляющих алкоголем, служит показатель завершенности фагоцитоза. Индекс завершенности фагоцитоза у подростков, злоупотреблявших алкоголем, статистически не отличался от аналогичных показателей группы сравнения.
Заключение. У подростков, злоупотреблявших алкоголем, на протяжении всего периода наблюдения
отмечается снижение захвата патогенного агента, что, в свою очередь, компенсируется повышенной активностью фагоцитов. Длительная напряженность показателей системы врожденного иммунитета, сопровождающаяся функциональными нарушениями фагоцитирующих клеток, может в конечном итоге приводить к истощению резервных возможностей неспецифических факторов защиты и усилению иммунной недостаточности организма, ведущей к снижению резистентности организма.
Библиографический список
1. Скворцова, Е. С. Современные школьники-подростки и употребление алкоголя. Обзор ситуации по данным мониторинга 2010 — 2011 гг. / Е. С. Скворцова, А. Ю. Абрамов // Наркология. - 2014. - Т. 13, № 2 (146). - С. 38-41.
2. Плахов, А. И. Проблема алкогольной аддикции у подростков и пути ее преодоления / А. И. Плахов // Образование и общество. - 2010. - № 6. - С. 75-78.
3. Влияние алкогольной интоксикации на показатели врожденного иммунитета здоровых лиц / Л. И. Ульянова [и др.] // Наркология. - 2014. - Т.13, № 4 (148). - С. 47-51.
4. Leevy, C. B. Immunology of alcoholic liver disease / C. B. Le-evy, H. A. Elbeshbeshy // Clin Liver Dis. - 2005. - Vol. 9, № 1. -P. 55-66.
5. Osna, N. A. Immunological response in alcoholic liver disease / N. A. Osna // World J Gastroenterol. - 2007. - Vol. 13, № 37. -P. 4938-4946.
6. Михайленко, А. А. Руководство по клинической иммунологии, аллергологии, иммуногенетике и иммунофармакологии / А. А. Михайленко, В. И. Коненков, Г. А. Базанов. - М., 2005. - Т. 1. - С. 190-194.
7. Активность ферментов антиоксидантной защиты в крови подростков при острой алкогольной интоксикации / Е. Л. Щеглова [и др.] // Наркология. - 2014. - Т. 13, № 10 (154). -С. 64-67.
ЩЕГЛОВА Елена Леонидовна, аспирантка кафедры клинической лабораторной диагностики. Адрес для переписки: [email protected]
Статья поступила в редакцию 10.06.2015 г. © Е. Л. Щеглова