CC BY
11
5. Рабинович С. А. Анатомо-топографические аспекты местного обезболивания в стоматологии: монограф. [для врачей-стоматологов] / С. А. Рабинович, Ю.Л. Васильев // - М.: ГУП «ИПК» ЧУВАШИЯ», - 2011. - 144 с. Два автора.
6. Uchida Y. Measurement of anterior loop length for the mandibular canal and diameter of the mandibular incisive canal to avoid nerve damage when installing andosseous implants in the interforaminal region / Y. Uchida, Y. Yamashita, M. Goto [et al.] // J. Oral Maxillofac Surg. - 2007. - Sep., Vol. 65(9), P. 1772- 1779.
ВАР1АБЕЛЬН1СТЬ ОТВОР1В НА ВЕРХН1Х I НИЖН1Й ЩЕЛЕПАХ В ЗАЛЕЖНОСТ1 В1Д ФОРМИ ЧЕРЕПУ
Дубровша Е.В., Шерстюк О.О., Пронина О.М., Тарасенко Я.А., Половик О.Ю.
Наявшсть додаткових (подвоених) отворiв на верхшх i нижнш щелепах впливае на яюсть мюцево'' анестезп. Варiабельнiсть кшькосп, форми i локалiзацii подвоених отворiв, виявленi нами в 3-х формах черепа, склала 50% вщ загального числа i не мала прямiй залежностi вщ антропометричних показникiв черепа. Однак варiативнiсть iх кiлькостi та локалiзацii домшуе в брахiцефалiческого формi черепа. Подвоет отвори в 3-х формах черепа на верхшх щелепах зустрiчаються часпше (60% випадкiв), нiж на нижнш щелет (40% випадкiв). 1х наявшсть впливае на топографш судинно-нервового пучка, розширюе зони iннервацii кiстки i навколишнiх м'яких тканин.
Ключовi слова: варiабельнiсть отворiв, отвори верхнiх та нижньо'' щелеп, подвоеннi отвори, мюцева анестезiя.
Стаття надiйшла 1.03.2016 р.
VARIABILITY HOLES ON THE UPPER AND LOWER JAWS DEPENDING ON THE SKULL SHAPE
Dubrovina E. V. Sherstuk O. O., Pronina O. M., Tarasenko J. A., Rug O. J.
The presence of additional (Double) holes on the upper and lower jaws affect the quality of local anesthesia. Variability number, shape and location of doubling holes we found in 3 forms the skull, was 50% of the total and was not directly related to the anthropometric indices skull. However, the variation in the quantity and location dominates the brahitsefalicheskoho shape of the skull. Dual holes in 3 forms the upper jaw of the skull are more common (60% of cases) than in the mandible (40%). Their presence affects the topography of neurovascular bundle, expanding the zone of innervation of the bone and surrounding soft tissues.
Key words: variability of holes, the holes of the upper and lower jaws, doubling holes local anesthesia.
Рецензент Ляховський B.I.
УДК 616.12-089.844:615.477.2
ФАКТОРЫ КЛЕТОЧНОГО РОСТА В ТКАНЯХ ГЛАЗА ПОСЛЕ АНТИГЛАУКОМАТОЗНОЙ ОПЕРАЦИИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ КРИОКОНСЕРВИРОВАННОЙ АМНИОТИЧЕСКОЙ ОБОЛОЧКИ ЧЕЛОВЕКА
Исследовали способ применения криоконсервированной амниотической оболочки плаценты человека, измеряя в различных тканях органа зрения факторы роста клеток ВБ№ и 1Ь-ТОБ в различные сроки наблюдения. Криоконсервированную амниотическую оболочку человека использовали в качестве покрытия после антиглаукоматозной операции. Измерено содержание биологически активных веществ в тканях органа зрения после антиглуакоматозной операции, показано, что существует качественная и количественная зависимость накопления факторов роста клеток ВБ№ и 1Ь-ТОБ от вида ткани глаза в соответствии с тропностью фактора клеточного роста.
Ключевые слова: амниотическая оболочка человека, криоконсервирование, факторы роста клеток, антиглаукоматозная операция.
Известно, что имеются существенные иммунологические и биохимические предпосылки использования амниотической оболочки плаценты человека при хирургических операциях на органе зрения с целью коррекции глаукоматозных состояний. Так как клетки эпителия на поверхности клеток не имеют маркеров ИЬЛ 1 типа и ИЬЛ-БЯ 2 типа, то возникает минимальная иммуногенность амниотической мембраны плаценты человека (АМЧ); известен антимикробный эффект за счет присутствия в ткани АМЧ лизоцима, трансферина, лактоферрина [8]. Выраженное анти-воспалительное действие связано с отсутствием инфильтрации гранулоцитами окружающих послеоперационный шов тканей за счет наличия в клетках АМ цитокинов - ингибиторов воспаления (ИЛ-6, -8 ) и ингибиторов тканевых протеаз (Т1МР - 1, 2, 3, 4) [6]. Таким образом, в эпителиальных клетках АМЧ присутствует выраженное антиапоптозное действие за счет комплекса биологически активных веществ. Доказано, что комплекс этих веществ в большой степени сохраняется в криоконсервированной АМЧ (крио-АМЧ), которую можно длительно сохранять в жидком азоте до момента использования [3]. В качестве покровного материала в послеоперационный период крио-АМЧ применяют после хирургической коррекции глаукомы.
Однако до сих пор, остается неизученным механизм действия на ткани глаза крио-АМЧ, в частности, содержащихся в ее ткани клеточных регуляторов, особенно нейротрофина ВБКБ и
фактора роста клеток TGFlb. Является недоказанным поступление из крио-АМЧ биологически активных факторов роста клеток в ткани глаза, также нет данных сохраняются ли в тканях глаза эти регуляторы в динамике в различные сроки после АГО до 21 суток.
Целью работы было определить наличие факторов роста в тканях глаза после использования крио-АМЧ в качестве покровного материала в процессе проведенной антиглаукоматозной операции (АГО).
Материал и методы исследования. Препарат амниотической оболочки плаценты человека изготавливали по технологии медицинского иммуно-биологического препарата «Платекс-амниотическая оболочка» для офтальмологии (Зарегистрировано в МОЗУ как лекарственное средство «Регистрационное свидетельство №734/08 - 300200000 до 09.07.2013 р.»). Программа криоконсервирования использовалась 2-х этапная: охлаждение со скоростью от 3 до 50С в мин, далее погружение в жидкий азот (температура минус 1960С) в криопротекторе 10% ДМСО.
В качестве модели глаукомы в органе зрения была реализована обработка глаза адреналином, которая продолжалась в течение 2 месяцев у лабораторных животных (кроли), как описано в [1]. Все животные содержались в стандартных условиях вивария при соответствующем освещении и стандартном рационе питания. Исследования проводили в соответствии с «Общепринятыми этическими принципами экспериментов на животных», которые соответствуют положениям «Европейской конвенции по защите позвоночных животных, которых используют для экспериментальных и других научных целей». Затем проводили операцию коррекции глаукомы, в послеоперационный период использовали криоконсервированную АМЧ. Антиглаукоматозную операцию (АГО) на глазу кроля и аппликацию АМЧ проводили сразу после размораживания в соответствии с описанием [2].
Приготовление гомогената, обедненного в отношении клеточного дебриса, из ткани нативной и замороженной АМЧ и различных тканей глаза лабораторных животных проводили следующим образом. Для получения гомогената брали 100 мг ткани АМЧ или глаза, измельчали в пробирке «Эппендорф» объёмом 1,5 мл с помощью микро-гомогенизатора Поттера в физиологическом растворе на фосфатном буфере рН 7,4 с добавлением 1 мМоля ингибитора протеаз фенилметилсульфонилфлуорида. Соотношение ткань - раствор составляло 1:9 (разведение в 10 раз), после получения гомогенат осветляли от дебриса разрушенных клеток центрифугированием при 1000 g в течение 10 минут. Надосадок собирали в отдельную пробирку для дальнейшего измерения в нем факторов роста клеток и нейротрофинов.
Ростовые клеточные факторы препарата амниотической оболочки (мембраны) плаценты человека, в частности, нейротрофический фактор мозгового происхождения -- BDNF и трансформирующий фактор роста клеток -- TGF-1b измеряли высокочувствительными тест-системами для измерения TGF-1b производства "DRG", США (lot 41K088), с чувствительностью 2 пг/мл, для измерения BDNF "R&D Systems", Quantikine, США (lot 260837), с чувствительностью 20 пг/мл соответственно. При измерении действовали строго по инструкции к тест-системам. Для измерения методом иммуноферментного анализа (ИФА) использовали полуавтоматический спектрофотометр для 96-луночных планшет с вертикальным лучом «StatFax 2400» (США).
Статистическую обработку данных проводили методом Стьюдента, на рисунках представлена средняя М±м.
Результаты исследования и их обсуждение. Криоконсервированная АМЧ и использованная в виде покрытия на роговице глаза по данным других исследователей и нашим наблюдениям за послеоперационным швом в сроки 7, 14, 21 сут способствует сокращению послеоперационного восстановительного периода и формированию более мягкого шва в зоне оперативного вмешательства [2, 5].
Поэтому было важно оценить характер поступления в ткани глаза и распределение факторов клеточного роста в органе зрения после АГО с использованием крио-АМЧ. В качестве послеоперационного покрытия крио-АМЧ должна выполнять свою функцию в течение длительного времени и было проведено измерение BDNF и 1b-TGF в различные сроки до 21 суток после АГО. Для ответа на этот вопрос нами были изучены четыре вида ткани глаза: роговица в месте операционного вмешательства, сетчатка глаза и глазной нерв, а также склера. В этих тканях в разные сроки после АГО были измерены уровни присутствия факторов роста BDNF и 1b-TGF, как мы предполагаем высвобождаемых из нативной АМЧ или крио-АМЧ после 2-х этапного криоконсервирования в 10% ДМСО. Показано (рис.1), что в ткань роговицы на 1 и 3 сутки из крио-АМЧ, в сравнении с нативной, более интенсивно, как можно предположить, поступают
факторы роста, что связано с тем, что из части поврежденных клеток замороженной АМЧ выходит внутриклеточное содержимое и в сравнении с контролем эта величина выше на 60%. В эти сроки, например, в 1 сутки для ВБКБ характерно поступление в ткань сетчатки и глазного нерва в наибольших количествах, превышающих на 100% те количества нейротрофина, которые поступают из нативной АМЧ, в дальнейшем такая же тенденция сохраняется только для глазного нерва, где и на 7 сутки отмечается поступление ВБКБ из крио-АМЧ выше на 30%, чем из нативной АМЧ.
Ткань роговицы
300 с250 ^200
ё150 |Г100
П"
— —
Л 1 й]
1 сут 3 сут 7 сут 14 21 сут сут
время после АГО
Ткань глазного нерва
1000 ц 800
С 600 ц_
2 400
а
со
200 0
иш
1 сут 3 сут 7 сут 14 21
время после АГО сут сут
Ткань сетчатки
1200
11000
^800
и_"600
§400 со
-г
л т
f ± * Й Й
1 сут 3 сут 7 сут 14 21
время после АГО сут сут
Ткань склеры
1000
800 л м
1600 п."
2 400
О
со
200 0
гкгпрп
1 сут 3 сут 7 сут 14 сут
время после АГО
21 сут
Рис.1. Содержание клеточного ростового фактора ВБОТ в различных тканях органа зрения после применения крио-АМЧ в разные сроки после АГО.
0
0
Для таких видов тканей как сетчатка и роговица поступление нейропротектора ВБКБ из крио-АМЧ сравнимо с нативным контролем или в некоторых случаях снижается, соответственно. Для склеры можно отметить недостаточно активное поступление ВБКБ, как можно предположить, из поврежденных клеток крио-АМЧ на начальных сроках и после 7 суток наблюдения.
Фактор роста клеток ТОБ-1Ь в первый период нахождения крио-АМЧ в органе зрения (рис.2) поступает в значимых количествах в основном в роговицу, незначительное накопление происходит в глазном нерве, другие ткани сетчатка и склера отличаются небольшими уровнями присутствия ТОБ-1Ь и по сравнению с нативной АМЧ отличий не наблюдается, что хорошо согласуется с данными других авторов [7, 8]. На более поздних сроках наблюдения за концентрацией ТОБ-1Ь в тканях глаза видно, что значимые количества, превышающие контроль имеются только в роговице, нет значимых различий в сетчатке, глазном нерве и склере при использовании крио-АМЧ по сравнению с нативной АМЧ, в случае склеры наблюдается тенденция к уменьшению ТОБ-1Ь в поздние сроки.
Следовательно, спустя 7 суток можно отметить, что скорость поступления ВБКБ и ТОБ-1Ь в роговицу как в нативной АМЧ, так и в крио-АМЧ практически выравнивается, что по-видимому, связано скорее всего с вероятным высвобождением факторов роста уже не из поврежденных замораживанием клеток, а из целых клеток, которые в контроле и крио-АМЧ присутствуют в значимых количествах.
Подобная закономерность также наблюдается при исследовании тканевой тропности поступления фактора роста клеток ВБКБ в сетчатку и глазной нерв, в первые сутки и до 3-х суток нахождения АМЧ в зоне операции диагностируется существенно больший уровень ВБКБ как сетчатке, так и в глазном нерве, которые можно отнести к богатым нервными клетками тканям. В то время как, для ТОБ-1Ь наибольшее количество поступившего этого биорегулятора в эти сроки отмечено для роговичной ткани. Характерным является то, что в таких видах ткани глаза как сетчатка и в глазном нерве концентрируется наибольшее количество нейропротекторного фактора роста - ВБКБ, и степень увеличения его содержания больше, чем в роговице, в среднем на 100 %
больше контроля, чем при использовании нативной АМЧ. В исследуемых сроках от 7 до 21 дня поступление факторов роста в сетчатку и глазной нерв стабилизируется и выравнивается по сравнению с контролем. Возможно, именно поэтому наибольший поток биологически активных веществ (БАВ) направлялся в те клетки, которые при развитии глаукомы получили наибольшие повреждения. Как показывают исследования других авторов, что при глаукоме в первую очередь подвергались гибели и атрофии мелкие и средние ганглиозные клетки сетчатой оболочки, количество крупных клеток также снижалось, но процентное содержание их по отношению к общему числу клеток увеличивалось [4].
Ткань роговицы
400 350 | 300 Ё 250
О 200
¿150 ^ 100
Г+"
_l± - -1 IZjEj 1 rtri
□ нативная АМ
□замораживание АМ в 10% ДМСО
1 сут 3 сут 7 сут 14 сут21 сут
время после АГО
Ткань глазного нерва
300 л250 1 200 О 150 ± 100 50 0
□ нативная АМ
□замораживание АМ в 10% ДМСО
1 сут 3 сут 7 сут 14 сут 21 сут
время после АГО
Ткань сетчатки
л300 ■1 250
Ц- 200
^ 150 i 100 50 0
SZffi
'TiTI
1 сут 3 сут 7 сут 14 сут 21 сут
время после АГО
□ нативная АМ
□замораживание АМ в 10% ДМСО
Ткань склеры
300 250 200 150 100 50 0
__ГЦ__"I Й1 Дгч
□ нативная АМ
Ззамораживание АМ в 10% ДМСО
1 сут 3 сут 7 сут 14 21
время после АсГуОт сут
Рис.2. Содержание клеточного ростового фактора 1Ь-ТОБ в различных тканях органа зрения после применения крио-АМЧ в разные сроки после АГО.
Поскольку именно в тканях глаза, поврежденных глаукомой, по-видимому, имеются дефектные рецепторные и ганглиозные нервные клетки, из крио-АМЧ поступает в больших количествах ВБКБ, который сам по себе имеет явно выраженное нейропротекторное действие [5]. Можно предположить, что существует качественная и количественная зависимость накопления факторов роста клеток, определяемая видом ткани глаза в соответствии с тропностью фактора роста.
Измерение клеточных факторов роста ВБ№ и ТОПЬ в органе зрения лабораторных животных показало их возрастание в тканях глаза после покрытия крио-АМЧ в месте антиглаукоматозной операции в срок до 7 дней, довольно стабильный высокий уровень этих факторов наблюдался в срок до 21 дня. При использовании крио-АМЧ после АГО в месте послеоперационного дефекта обеспечивается длительное высвобождение факторов роста ВБКБ и ТОПЬ в органе зрения.
1. Липовецкая Е.М. Развитие экспериментальной глаукомы при длительном внутривенном введении адреналина // Офтальмол. журн.-- 1966. -- № 3.-- С. 221-223.
2. Золотарев А. В., Милюдин Е. С. Хирургическое лечение рецидивирующего птеригиума с пластикой силиковысушенной амниотической мембраной// Вестн. офтальмол. — 2007. — № 1. — С. 39—42.
3. Плацента: криоконсервирование, структура, свойства и перспективы клинического применения/ Под ред. В.И.Грищенко, Т.Н.Юрченко.—Харьков, 2011.—292 с.
4. Самусенко И.А., Алексеев В.Н., Абузайед В.Н. Морфологические проявления лечебного патоморфоза глаукоматозной оптической нейропатии при экспериментальной глаукоме // Глаукома. - 2003. -- №4.-- С. 21-32.
5. Mori K., Duh E., Gehlbach P. et al. Pigment epithelium-derived factor inhibits retinal and choroidal neovascularization // J. Cell. Physiol.-- 2002.-- Vol. 188. No.2.-- P. 253-263.
6. Limb G.A., Little B.C., Meager A. et al. Cytokines in proliferative vitreoretinopathy // Eye.-- 1991.-- Vol. 5. No. 6.-- P. 686-693.
0
7. Limb G.A., Chignell A.H., Green W. et al. Distribution of TGF and its reactive vascular adhesion molecules in fibrovascular membranes of proliferative diabetic retinopathy // Br. J. Ophthalmol.-- 1996.-- Vol. 80. No. 2.-- P. 168-173.
8. Yam HF, Pang CP, Fan DS, Fan BJ, Yu EY, Lam DS. Growth factor changes in ex vivo expansion of human limbal epithelial cells on human amniotic membrane// Cornea.—2002.-- Jan;21(1).-- P:101-105.
ФАКТОРИ КЛ1ТИННОГО РОСТУ В ТКАНИНАХ ОКА П1СЛЯ АНТИГЛАУКОМАТОЗНО1 ОПЕРАЦП З ВИКОРИСТАННЯМ КР1ОКОНСЕРВОВАНО1 АМНЮТИЧНО1 ОБОЛОНКИ ЛЮДИНИ Казмiрук 1.Л. Дослщжували споаб застосування крюконсервовано! амнютично! оболонки плаценти людини, вимiрюючи в рiзних тканинах органу зору чинники зростання клiтин ВБ№ i 1Ь-TGF в рiзнi термiни спостереження. Крiоконсервувану АМЧ використовували в якосп покриття пiсля антиглаукоматозно! операци. Ви]шряли змiст бiологiчно активних речовин в тканинах органу зору тсля аниглуакоматозно! операци. Показано, що iснуe яюсна i кiлькiсна залежнiсть накопичення фактс^в росту клiтин BDNF i 1b-TGF вiд виду тканини ока вщповщно до тропнiстю фактора росту клггин.
Ключовi слова: амнiотична оболонка людини, крюконсервування, фактори росту клiтин, антиглаукоматозна операщя.
Стаття надiйшла 15.03.2016 р.
CELL GROWTH FACTORS IN TISSUES OF THE EYE AFTER ANTIGLAUCOMA SURGERY USING CRYOPRESERVED HUMAN AMNIOTIC MEMBRANE Kazmiruk I.L.
Studied a method of using cryopreserved human amniotic membrane of the placenta, by measuring in different tissues of body cell growth factors BDNF and 1b-TGF at different observation times. Cryopreserved AMCH used as a coating after antiglaucoma surgery. Measured content of biologically active substances in body tissues antigluakomatoznoy vision after surgery, it is shown that there is a qualitative and quantitative relationship accumulation BDNF and 1b-TGF cell growth factors, the type of eye tissue tropism according to cell growth factor.
Key words: human amniotic membrane, cryopreservation, cell growth factors, antyhlaukomatozna operation.
Рецензент Шеттько B.I.
УДК 616.742
МОРФОЛОГ1ЧН1 ОСОБЛИВОСТ1 РЕЙОНАРНОГО СУДИННОГО РУСЛА ШК1РИ ПРИ ПРОВЕДЕНН1 ЕСТЕТИЧНИХ ОПЕРАЦ1Й В Б1ЧН1Й Д1ЛЯНЦ1 ОБЛИЧЧЯ
Обличчя кожно! людини, е головною характеристикою зовшшносп, вiдрiзняeться власною шдивщуальшстю, тому зрозумшо бажання зберегти щ особливостi протягом життя. При глибоких вжових змiнах найбiльш ефективним залишаеться хiрургiчний метод лiкування. Морфометрична оцшка i рентгенологiчнi дослiдження особливостей кровопостачання поверхневих тканин бiчноi' дшянки обличчя, проводилися на 30 препаратах шюрно-жирових клаптiв. Аналiз результатiв морфометричного дослщження вказуе на те, що в дермi та гшодермшривушно-жувально! дшянки менш виражеш артерiальнi i венозшсудини в порiвняннi зi щiчноюдiлянкою.За допомогою рентгенолопчних та морфометричних дослiджень визначено особливосп ангiоархiтектонiки шкiри i пподерми 61чно! дiлянки обличчя, що виражаються в наявност двох основних джерел кровопостачання (гшки лицево! i поперечно! артерп обличчя).
Ключов! слова: судина, шира, шдтяжка м'яких тканин обличчя.
Робота е фрагментом НДР «Розробка i удосконалення методiв дiагностики, л^вання, реабттащХ i профтактики вроджених i набутих захворювань, дефектiв i деформацш щелепно-лицевоХ дшянки», номер державноХ рееетращХ 01157004081.
Обличчя кожно! людини, е головною характеристикою зовшшносп, в1др1зняеться власною шдивщуальшстю, тому зрозумшо бажання зберегти щ особливосп протягом життя. При глибоких вшових змшах найбшьш ефективним залишаеться х!рурпчний метод лшування.
Проведення естетичних операцш обличчя потребуе значного вщшарування шюрно-жирового клаптя, що може призвести до шемп в дшянках проведеного вщшарування та мобшзацп. Вивченню артер1ального русла шюри { шдшюрно! жирово! кттковини присвячеш фундаментальш роботи в1тчизняних анатом1в та пстолопв Ю.Л. Золотко (1954). Разом з цим анатом1я судин обличчя в них не розглядалася з позици реконструктивно! та пластично! х!рургп, тому в останнш час особливе значення придшяють збереженню власно! судинно! с1тки в видшеному шюрному клапп { шдлеглому операцшному лож!
Метою роботи було визначення особливостей ангюархтоктошки шюри { гшодерми б1чно! д1лянки обличчя.
Матер1ал та методи дослщження. Морфометрична оцшка \ рентгенолопчш дослщження особливостей кровопостачання поверхневих тканин 61чно! д1лянки обличчя, проводилися на 30 препаратах шюрно-жирових клаппв. Для морфометрично! оцшки поверхневих тканин 61чно! дшянки обличчя використовували по 2 шюрно-жирових клаптя, розм!рами 1,0x1,0x0,5см, в межах
