CC BY
14
УДК 547.295.96:612.118/.22:578.825.12
DOI: Ш.Ш37/artide_5d0aca989490e3.37697465
ЭЙКОЗАПЕНТАЕНОВАЯ КИСЛОТА В ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ БЕРЕМЕННЫХ ПЕРВОГО ТРИМЕСТРА С ЦИТОМЕГАЛОВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИЕЙ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ СПЕЦИФИЧЕСКОГО ТИТРА АНТИТЕЛ ДО К ЦИТОМЕГАЛОВИРУСУ
Н.А.Ишутина, И.А.Андриевская, И.В.Довжикова, Н.Н.Дорофиенко, И.Н.Гориков
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания», 675000, г. Благовещенск, ул. Калинина, 22
РЕЗЮМЕ
Методом газожидкостной хроматографии произведено изучение содержания ю-3 полиненасыщенной эйкозапентаеновой кислоты в плазме периферической крови беременных первого триместра с цитомегаловирусной (ЦМВ) инфекцией в зависимости от специфического титра антител IgG к ЦМВ. В исследование вошли 135 беременных, которые были распределены по группам. Выделена группа сравнения в количестве 45 здоровых беременных с физиологическим течением первого триместра гестации. Величины изучаемых показателей, полученные в данной группе, были использованы в качестве отправной точки сравнения как физиологически нормальные значения. В состав группы исследования вошли 90 беременных с обострением хронической ЦМВ инфекции в первом триместре, разделенные на две подгруппы, в зависимости от титра антител IgG к ЦМВ: подгруппа А (45 женщин с активной формой ЦМВ инфекции, титр антител IgG к ЦМВ 1:1600); подгруппа Б (45 женщин с латентной формой ЦМВ инфекции, титр антител IgG к ЦМВ 1:800). На основе полученных данных установлено, что реактивация ЦМВ инфекции в первом триместре гестации приводит к снижению в плазме периферической крови женщин концентрации ю-3 полиненасыщенной эйкозапентаеновой кислоты на 30% (p<0,001) в подгруппе А и на 18% (p<0,01) в подгруппе Б, по сравнению с аналогичным показателем контрольной группы. Данная динамика изменений эйкозапентаеновой кислоты в плазме периферической крови беременных с ЦМВ инфекцией зависит от специфического титра антител IgG к ЦМВ и наиболее выражена при активной форме ЦМВ инфекции (титр антител IgG к ЦМВ 1:1600). Дальнейшее исследование уровня свободных полиненасыщенных жирных кислот ю-3 семейства в период беременности может позволить разработать терапию для своевременной коррекции перинатальной патологии, способную предотвращать гибель клеток и улучшать показатели здоровья в последующие периоды жизни новорожденных.
Ключевые слова: беременность, цитомегаловирус-ная инфекция, периферическая кровь, эйкозапентаено-вая кислота.
SUMMARY
EICOSAPENTAENOIC ACID IN THE PERIPHERAL BLOOD OF PREGNANT WOMEN
IN THE FIRST TRIMESTER WITH CYTOMEGALOVIRUS INFECTION DEPENDING ON THE SPECIFIC TITRE OF IgG ANTIBODIES TO CYTOMEGALOVIRUS
N.A.Ishutina, I.A.Andrienskaya, I.V.Dovzhikova, N.N.Dorofienko, I.N.Gorikov
Far Eastern Scientific Center of Physiology and
Pathology of Respiration, 22 Kalinina Str., Blagoveshchensk, 675000, Russian Federation
The gas-liquid chromatography method was used to study the content of ra-3 polyunsaturated eicosapentae-noic acid in peripheral blood plasma of first trimester pregnant women with cytomegalovirus infection, depending on the specific titer of IgG antibodies to cyto-megalovirus. The study included 135 pregnant women who were divided into groups. A comparison group was in the amount of 45 healthy pregnant women with the physiological course of the first trimester of gestation. The values of the indices studied in this group were used as the starting point of comparison as physiologically normal values. The study group included 90 pregnant women with exacerbation of chronic cytomegalovirus infection in the first trimester, divided into two subgroups, depending on the titer of IgG antibodies to cytomegalovirus: subgroup A (45 women with active cytomegalovirus infection, IgG antibody titer to cytomegalovirus 1:1600); subgroup B (45 women with latent form of cytomegalovirus infection, antibody IgG titer to cytomegalovirus 1:800). Based on the data obtained, it was found out that reactivation of cytomega-lovirus infection in the first trimester of gestation leads to the decrease in the concentration of ra-3 polyunsat-urated eicosapentaenoic acid in women with peripheral blood plasma by 30% (p<0.001) in subgroup A and by 18% (p<0.01) in subgroup B, in comparison with the similar index of the control group. This dynamics of changes in eicosapentaenoic acid in plasma of peripheral blood of pregnant women with cytomegalovirus infection depends on the specific titer of IgG antibodies to cytomegalovirus and is most pronounced with the active form of cytomegalovirus infection (IgG antibody titer to cytomegalovirus 1:1600). A further study of the level of free polyunsaturated fatty acids of the ro-3 family during pregnancy can allow the development of therapy for the timely correction of perinatal pathology, preventing cell death and improving health outcomes in subsequent life periods of newborns.
Key words: pregnancy, cytomegalovirus infection, peripheral blood, eicosapentaenoic acid.
Проблема цитомегаловирусной (ЦМВ) инфекции сохраняет актуальность в настоящее время. Необходимость изучения данной патологии обусловлена ее широким распространением и тем, что ЦМВ способен вызывать различные нарушения у развивающегося плода и новорожденных детей, матери которых во время беременности перенесли ЦМВ инфекцию [3]. При наличии последней возможно развитие бессимптомной инфекции без последствий для беременности. Однако в большинстве случаев отмечается задержка внутриутробного созревания, гипотрофия и гипоксия плода [4. 11]. ЦМВ инфекция влияет на критические аспекты функции трофобласта, что объясняет негативное воздействие данного вируса на течение и исход беременности [12].
За последние два десятилетия накоплены данные, указывающие на важную роль полиненасыщенных жирных кислот (ПНЖК) га-3 семейства в нормальном развитии и поддержании баланса между физиологическими и патологическими процессами в организме, в том числе, при беременности. Являясь субстратом для производства цитокинов, некоторых гормонов, га-3 ПНЖК служат сигнальными регуляторными молекулами, участвующими в построении миелиновых оболочек, клеточных мембран, обеспечении их функциональности, регуляции проницаемости, текучести, эластичности, являются активаторами нормального деления клеток, синтеза регуляторных белков, отвечают за когнитивные функции [1]. Эйкозапентае-новая кислота (ЭПК) важна как на перинатальном этапе беременности, так и для обеспечения здоровья плода на протяжении всего цикла. Она относится к ю-3 ПНЖК, из которых образуются защитные противовоспалительные эйкозаноиды, а недостаточное содержание ее в крови матери, может быть причиной различного рода осложнениям гестационного периода.
Целью настоящей работы явилось изучение динамики изменений концентрации ЭПК в сыворотке периферической крови беременных при реактивации хронической ЦМВ инфекции в первом триместре в зависимости от специфического титра антител класса G к ЦМВ.
Материалы и методы исследования
В исследование вошли 135 беременных, которые распределили по группам. Выделена группа сравнения в количестве 45 здоровых беременных с физиологическим течением первого триместра гестации. Величины изучаемых показателей, полученные в данной группе, были использованы в качестве отправной точки сравнения как физиологически нормальные значения. В состав исследуемой группы вошли 90 беременных с обострением хронической ЦМВ инфекции в первом триместре, разделенные на две подгруппы, в зависимости от титра антител к ЦМВ: подгруппа А (45 женщин с активной формой ЦМВ инфекции, титр антител к ЦМВ 1:1600); подгруппа Б (45 женщин с латентной формой ЦМВ инфекции, титр антител к ЦМВ 1:800). По значимым параметрам (возраст, аку-
шерско-гинекологический анамнез, наличие других соматических заболеваний) на момент обследования сравниваемые группы достоверно не отличались.
Критерием включения в основную группу являлся лабораторно подтвержденный молекулярно-биологи-ческими и серологическими методами исследования рецидив ЦМВ инфекции в первом триместре гестации, наличие в периферической крови женщины на момент исследования титра антител к ЦМВ 1:800 и 1: 1600, стойкая клиническая ремиссия герпесвирусной инфекции. К критериям исключения относили первичную ЦМВ инфекцию, обострение других воспалительных заболеваний экстрагенитальной патологии и инфекций, передающихся половым путем. Рецидив ЦМВ инфекции устанавливали на основании результатов комплексного исследования периферической крови: при наличии антител класса М или четырехкратного и более нарастания титра антител к ЦМВ в парных сыворотках в динамике через 10 суток; при индексе авидности антител к ЦМВ более 75%, а также в случае выявления ДНК ЦМВ методом ПЦР в крови, моче, в соскобах с буккального эпителия и слизистой оболочки шейки матки.
Материалом для исследований служила плазма периферической крови. У женщин исследуемых групп в сыворотке крови методом газожидкостной хроматографии изучали содержание ЭПК. Метилирование осуществляли по методу J.RCarreau, J.P.Dubacq [10]. Обсчет и идентификацию пиков выполняли с помощью программно-аппаратного комплекса Хроматэк Аналитик 2.5 по временам удерживания с использованием стандартов фирмы <^ире1со» (США). Количественный расчет хроматограмм проводили методом внутренней нормализации путем определения площадей пиков анализируемых компонентов и их доли (в относительных %) в общей сумме площадей пиков метилирова-ных продуктов высших ЖК.
Обследование беременных женщин проводилось с учетом требований Хельсинкской декларации Всемирной ассоциации «Этические принципы проведения научных медицинских исследований с участием человека в качестве субъекта» с поправками 2013 г. и нормативных документов «Правила надлежащей клинической практики в Российской Федерации», утвержденных Приказом №200 от 01.04.2016 МЗ РФ. Исследование одобрено комитетом по биомедицинской этике ДНЦ ФПД и выполнено с согласия пациенток.
Статистическая обработка и анализ данных осуществлялась с использованием стандартного пакета прикладных программ Statistica 6.ж1 Stat-Soft Jnc, США. Анализируемые в работе количественные данные имели нормальное распределение, поэтому рассчитывалась достоверность различий значений по Стьюденту - вычисление средней арифметической (М), средней ошибки (т). Во всех процедурах статистического анализа критический уровень значимости нулевой статистической гипотезы р принимался равным 0,05.
Результаты исследования и их обсуждение
При анализе полученных данных обращало на себя внимание снижение концентрации ЭПК до 0,96±0,03% (р<0,001) в подгруппе А и до 1,18±0,04 (р<0,01) в подгруппе Б, по сравнению с аналогичным показателем контрольной группы (1,32±0,02%). Представленные результаты свидетельствуют о значимых различиях в содержании ЭПК у беременных контрольной группы и групп сравнения. Наиболее выражена динамика изменений концентрации ЭПК у женщин с титром антител ДО к ЦМВ 1:1600.
Снижение концентрации ЭПК у беременных с ЦМВ инфекцией можно объяснить активацией процессов перекисного окисления липидов, которые в данных условиях находятся на достаточно высоком уровне [2] и образующиеся в ходе свободно-радикальных реакций активные формы кислорода разрушают ненасыщенные ЖК с наибольшим числом двойных связей.
Являясь предшественником эйкозаноидов, в том числе простагландинов и лейкотриенов, ЭПК влияет на сопротивляемость организма инфекциям [6]. Из ЭПК образуются продукты, которые оказывают инги-биторное действие на провоспалительные вещества арахидонового каскада [5]. Эйкозаноиды, синтезируемые из ЭПК, обладают антитромботическим действием, способностью регулировать сосудистый тонус. Являясь структурным компонентом биологических мембран клеток ПНЖК ю-3 семейства (ЭПК и докоза-гексаеновая кислота) оказывают непосредственное влияние на текучесть липидного бислоя, проницаемость мембран, мембраносвязанную ферментативную активность, функционирование мембранных рецепторов и распознавание антигенов, электрофизиологические свойства мембран [7].
Свободная ЭПК модифицирует - ингибирует функции трансмембранных ионных каналов всех органов и тканей, усиливает эффективность антиоксидантных систем организма, нормализует процессы транспорта липидов в кровяном русле, репарацию клеточных мембран, активацию иммунокомпетентных клеток, способствует улучшению всасывания жиров в желудочно-кишечном тракте [8]. При дефиците в клетках ю-3 ПНЖК меняется синтез и биологическая активность эйкозаноидов, которые изменяют секрецию одновалентных катионов в канальцах почек, активируют агрегацию тромбоцитов и воспаление [9].
Следовательно, достаточное поступление ЭПК во время беременности и в ранний неонатальный период принципиально важно для последующего функционирования организма ребенка. Недостаток ЭПК может привести к неблагоприятным последствиям для плода и новорожденного ребенка.
Таким образом, реактивация ЦМВ инфекции в первом триместре гестации приводит к снижению в плазме периферической крови женщин концентрации ЭПК, из которой синтезируются простаноиды, способствующие уменьшению противовоспалительных эйко-заноидов. Данная динамика изменений ЭПК в плазме периферической крови беременных с ЦМВ инфекцией
зависит от специфического титра антител IgG к ЦМВ и наиболее выражена при активной форме ЦМВ инфекции (титр антител IgG к ЦМВ 1:1600). Дальнейшее исследование уровня свободных ПНЖК ш-3 семейства в период беременности может позволить разработать терапию для своевременной коррекции перинатальной патологии, способную предотвращать гибель клеток и улучшать показатели здоровья в последующие периоды жизни новорожденных.
ЛИТЕРАТУРА
1. Давидян О.В., Ворслов Л.О. Омега-3 полиненасыщенные жирные кислоты как источники долголетия // Вопросы диетологии. 2017. Т.7, №1. С.36-41.
2. Ишутина Н.А., Дорофиенко Н.Н. Пероксидация липидов при беременности, осложненной цитомегало-вирусной инфекцией // Бюллетень физиологии и патологии дыхания. 2014. Вып.54. С.66-69.
3. Короткова Н.А., Прилепская В.Н. Цитомегалови-русная инфекция и беременность (прегравидарная подготовка и терапия) // Эффективная фармакология. 2016. №22. С.28-32.
4. Луценко М.Т., Андриевская И.А., Ишутина Н.А., Мироненко А.Г. Механизмы формирования гипоксии в период беременности и нарушение кровоснабжения плода при цитомегаловирусной инфекции // Вестник Российской Академии Медицинских Наук. 2015. T.70, №1. С. 106—112. doi: 10.15690/vramn.v70i1
5. Назаров П.Е., Мягкова Г.И., Гроза Н.В. Полиненасыщенные жирные кислоты как универсальные эндогенные биорегуляторы // Вестник МИТХТ. 2009. Т.4, №5. С.3-19.
6. Софронов В.В., Агафонова Е.А., Шарипова О.В., Шегурова Д.И., Бабинцева А.А., Абрамзон Н.А. Характеристика длинноцепочечных полиненасыщенных жирных кислот у новорожденных группы риска и их матерей // Вестник современной клинической медицины. 2013. Т.6, приложение 2. С.27-31.
7. Тапильская Н.И., Гайдуков С.Н. Оценка значимости восполнения дефицитов фолатов и полиненасыщенных жирных кислот во время беременности и лактации: данные доказательной медицины // Эффективная фармакотерапия. 2013. №36. С.12-22.
8. Титов В.Н. Нарушение транспорта в клетки насыщенных жирных кислот в патогенезе эссенциаль-ной гипертонии (обзор литературы) // Клиническая лабораторная диагностика. 1999. №2. С.3-9.
9. Шилина Н.М., Конь И.Я. Современные представления о физиологических и метаболических функциях полиненасыщенных жирных кислот // Вопросы детской диетологии. 2004. Т.2, №6. С.25-30.
10. Carreau J.P., Dubacq J.P. Adaptation of a macro-scale method to the micro-scale for fatty acid methyl tran-sesterification of biological lipid extracts // J. Chromatography 1978. Vol.151, №3. Р.384-390. https://doi.org/10.1016/S0021-9673(00)88356-9
11. Emery V.C., Lazzarotto T. Cytomegalovirus in pregnancy and the neonate // F1000Res. 2017. Vol.6. Р.138. doi: 10.12688/f1000research. 10276.1
12. Fisher S., Genbacev O., Maidji E., Pereira L. Human cytomegalovirus infection of placental cytotropho-blasts in vitro and in utero: implications for transmission and pathogenesis // J. Virol. 2000. Vol.74. №15. P. 68086820.
REFERENCES
1. Davidyan O.V., Vorslov L.O. Omega-3 polyunsaturated fatty acids as a source of longevity. Vopr. dietol. (Nutrition) 2017; 7(1): 36-41 (in Russian). doi: 10.20953/2224-5448-2017-1-36-41
2. Ishutina N.A., Dorofienko N.N. Lipid peroxidation in pregnancy complicated by cytomegalovirus infection. Bulleten'fiziologii ipatologii dyhania 2014; 54:66-69 (in Russian).
3. Korotkova N.A., Prilepskaya V.N. Cytomegalovirus infection and pregnancy (pregravid preparation and therapy). Effektivnaya farmakologiya 2016; 22: 28-32 (in Russian).
4. Lutsenko M.T., Andrievskaya I.A., Ishutina N.A., Mironenko A.G. Mechanisms of hypoxia development during pregnancy and the disorder of fetus blood supply at cytomegalovirus infection. Vestnik Rossiyskoy Akademii Meditsinskikh Nauk 2015; 70(1):106-112 (in Russian). doi: 10.15690/vramn.v70i1.1239
5. Nazarov P.E., Miagkova G.I., Groza N.V. Polyunsat-urated fatty acids as universal endogenous bioregulators. Review MITHT 2009; 4(5):3-19 (in Russian).
6. Sofronov V.V., Agafonova E.A., Sharipova O.V.,
Schegurova D.I., Babintseva A.A., Abramzon N.A. Feature long-chain polyunsaturated fatty acids newborn at risk and their mothers. Vestnik sovremennoy klinicheskoy meditsiny 2013; 6(Suppl.2):27-31 (in Russian).
7. Tapil'skaya N.I., Gaydukov S.N. Evaluation of the significance of folate and polyunsaturated fatty acids deficiency during pregnancy and lactation, in consideration of evidence-based medicine. Effektivnaya farmakologiya 2013; 36:12-22 (in Russian).
8. Titov V.N. Disturbance of transport to cells of saturated fatty acids in the pathogenesis of essential hypertension (literature review). Klinicheskaya laboratornaya diagnostika 1999; 2:3-9 (in Russian).
9. Shilina N.M., Kon' I.Ya. Modern ideas about the physiological and metabolic functions of polyunsaturated fatty acids. Voprosy detskoy dietologii 2004; 2(6):25-30 (Russian).
10. Carreau J.P., Dubacq J.P. Adaptation of a macro-scale method to the micro-scale for fatty acid methyl tran-sesterification of biological lipid extracts. J. Chromatography 1978; 151(3):384-390. https://doi.org/10. 1016/S0021-9673(00)88356-9
11. Emery V.C., Lazzarotto T. Cytomegalovirus in pregnancy and the neonate. F1000Res. 2017; 6:138. doi: 10.12688/f1000research. 10276.1
12. Fisher S., Genbacev O., Maidji E., Pereira L. Human cytomegalovirus infection of placental cytotropho-blasts in vitro and in utero: implications for transmission and pathogenesis. J. Virol. 2000; 74(15): 6808-6820.
Поступила 08.05.19
Контактная информация Наталия Александровна Ишутина, доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории механизмов этиопатогенеза и восстановительных процессов дыхательной системы при НЗЛ, Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания,
675000, г. Благовещенск, ул. Калинина, 22.
E-mail: [email protected] Correspondence should be addressed to Nataliа A. Ishutina,
PhD, DSc, Leading staff scientist of Laboratory of Mechanisms of Etiopathogenesis and Recovery
Processes of the Respiratory System at Non-Specific Lung Diseases, Far Eastern Scientific Center of Physiology and Pathology of Respiration, 22 Kalinina Str., Blagoveshchensk, 675000, Russian Federation.
E-mail: [email protected]
