CC BY
33
31/2002 ЯШ
Вестник Ставропольского государственного университета ШИВ]
ЬШОНЧЕШЕ шн
ЭПИФИЗ И ДЕЙСТВИЕ ГИДАЗЕПАМА НА УРОВЕНЬ ТРЕВОЖНОСТИ У ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ В УСЛОВИЯХ МНОГОПАРАМЕТРИЧЕСКОГО ТЕСТИРОВАНИЯ
Э.А. Манвелян, В.А. Батурин
EPIPHYSIS AND HYDAZEPAM EFFECT UPON ANXIETY LEVEL OF LABORATORY ANIMALS UNDER MULTI-PARAMETRICAL TESTING
Manvelian E.A., Baturin V.A.
it is determined that hydazepam at dose 0,4mg/kg in the morning decreases emotional reactivity of animals reducing the reaction upon the complex of test-stimuli -"an alive object". In the evening hydazepam was less effective and its activating effect prevailed. At great dose (2 mg/kgj in the morning it suppressed the anxiety of rats effecting all the indices on multi-parametrical testing. However, in the evening its activating effect was also revealed, which was expressed by speeding up the reaction of animals to the stimuli.
Установлено, что гидазепам в дозе 0,4 мг/нг снимает в утренние часы эмоциональную реактивность животных, ослабляя ответы/ на комплекс тест-стимулов - «живой объект». В вечерние часы/ препарат был менее эффективен и преобладало его активирующее действие. В большей дозе (2 мг/кг) гидазепам утром подавлял тревожность крыс, воздействуя на все показатели многопараметрического тестирования. Вечером, однако, также вы/являлось активирующее влияние, что выражалось в ускорении ответов животных на предъявленны/е стимулы/.
УДК 612.843.367:616.89-008.447
В последние годы физиологическая роль пинеальной железы изучается все более детально. Установлено ее непосредственное участие в регуляции биологических ритмов
[1]. С другой стороны, обнаружено, что эпи-физарный гормон мелатонин обладает определенной психотропной активностью
[2], в частности, может оказывать общеугнетающее действие [3]. Интересно, что в эпифизе обнаружены участки специфического связывания бензодиазепиновых транквилизаторов - бензодиазепиновые рецепторы [6]. При этом оценка действия диазепама на поведение интактных крыс в конфликтной ситуации выявила различную чувствительность к препарату в разное время суток [4]. Все это дает основания предполагать, что эпифиз, видимо, вовлечен в механизмы реализации специфической активности бензодиазепиновых транквилизаторов.
В связи с этим представлялось интересным изучить влияние нового отечественного транквилизатора гидазепама на поведение интактных крыс в условиях многопараметрического тестирования с предъявлением этологически адекватных стимулов, позволяющих определить уровень тревожности животных.
Организация и методы исследования
Опыты были выполнены на 24 белых нелинейных крысах-самцах, массой тела 180-220 г. Поведение животных оценивали по методике, предложенной Родиной В.И. с соавторами [5], позволяющей характеризо-
Манвелян Э.А., Батурин В.А.
«Эпифиз и действие гидазепама на уровень тревожности у лабораторных животных...»
вать индивидуальный тревожно-фобический уровень крыс по ранжированной шкале. В частности, определяли латентный период спуска с высоты (1, на рисунке); время, затрачиваемое на переход из одной части двухкамерного бокса в другую (2); длительность пребывания в освещенном «домике» (3); латентность выхода из центра «открытого поля» (4). Определяли также интенсивность реакций затаивания (7), вокализации (8), прижимания ушей (9) и пячения в ответ на приближение руки экспериментатора (5) и поглаживание (6). Подсчитывали интегральный показатель, характеризующий тре-вожно-фобический статус животных (ИПТ).
Поведенческие реакции гидазепама, вводимого внутрибрюшинно в дозах 0,1 и 1 мг/кг за 30 минут до тестирования, оценивали в утренние и вечерние (8-10 и 18-20) часы. В контрольных опытах крысам инъецировали физиологический раствор.
Результаты опытов подвергались статистическому анализу с использованием критерия Вилкоксона - Манна - Уитни.
Результаты исследований
Выполненные эксперименты показали, что при многопараметрической оценке поведения крыс обнаруживается различный уровень тревожности в утренние и вечерние часы суток. Значимо больший тревожно-фобический статус регистрируется при тестировании вечером. В это время суток наблюдаются большие значения латентности выхода из центра «открытого поля», перехода из одной части двухкамерного бокса в другую. Вечером гораздо чаще регистрировали реакции затаивания, повышалась интенсивность вокализации.
Гидазепам однонаправленно снижал уровень тревожности интактных крыс по сравнению с контролем, которым служила группа животных, получавших физиологический раствор. В дозе 0,4 мг/кг в утренние часы препарат уменьшал латентный период спуска с высоты, но несколько ограничивал подвижность животных при переходе в двухкамерном боксе и выходе из освещенного «домика» и центра «открытого поля». Вместе с тем, транквилизатор значительно
урежал пячение и вокализацию крыс, уменьшал интенсивность затаивания и прижимания ушей при поглаживании и приближении руки экспериментатора. Величина ИПТ, при этом достоверно снижалась (Р < 0,01).
В этой же дозе в вечерние часы гидазепам уменьшал время спуска с высоты, ускорял переходы в боксе по сравнению с контролем. Крысы, получавшие препарат, быстрее выполняли тесты выхода из освещенного «домика» и центра «открытого поля». В то же время транквилизатор практически не изменял реакции животных на «живую ситуацию».
Таким образом, гидазепам в дозе 0,4 мг/кг снижал тревожно-фобический статус интактных животных наиболее выражено утром.
В дозе 2 мг/кг в утреннее время суток гидазепам еще заметнее уменьшал эмоциональную реактивность животных, влияя практически на все показатели теста. При этом величина ИПТ статистически значимо понижалась (Р < 0,05).
Вечером транквилизатор в большей дозе заметнее всего ускорял переходы животных в двухкамерном боксе. Препарат уменьшал латентный период выхода из «домика» и центра «поля», практически не изменял реакции животных на «живую ситуацию». Величина индекса тревожности значительно понижалась.
Таким образом, в дозе 2 мг/кг препарат уменьшал тревожно-фобический уровень интактных крыс, наиболее выражено утром.
Обсуждение результатов исследования
В условиях эксперимента гидазепам дозозависимо снижал эмоциональную реактивность крыс, наиболее заметно в утренние часы. В это время суток препарат существенно уменьшал уровень тревоги и страха животных, влияя на все показатели поведения. Вечером преобладало активирующее действие транквилизатора.
Суточные колебания чувствительности к гидазепаму, видимо, объясняются изменением сенситивности бензодиазепино-
31/2002 ЯШ
Вестник Ставропольского государственного университета
Рис. 1.
Влияние гидазепама на тревожно-фобический уровень интактных крыс при многопараметрический оценке поведения в утренние (А) и вечерние (Б) часы: I - гидазепам 0,4 мг/кг; II - гидазепам 2,0 мг/кг.
------ контрольный уровень (интактные крысы)
--после введения гидазепама.
Манвелян Э.А., Батурин В.А.
«Эпифиз и действие гидазепама на уровень тревожности у лабораторных животных...»
вых рецепторов. Интересно, что оценка действия классического транквилизатора диазе-пама на поведение интактных крыс в конфликтной ситуации также выявила различную чувствительность к препарату в разное время суток (4). Если учесть, что в эпифизе обнаружена высокая плотность бензодиазе-пиновых рецепторов (6), а также способность пинеального гормона мелатонина вмешиваться в центральную ГАМК-ергическую передачу и функцию бензодиа-зепиновых рецепторов (7), то логично думать, что эпифизарные механизмы могут участвовать в суточных колебаниях эффективности гидазепама.
Результаты исследований позволяют предполагать вероятную заинтересованность эпифизарных механизмов в реализации специфической психотропной активности бен-зодиазепиновых анксиолитиков.
ЛИТЕРАТУРА
1. Арушанян Э.Б. Современные проблемы и перспективы развития хронофармакологии // Фармакология и токсикология. — 1989. — # 5. — С. 10-16.
2. Арушанян Э.Б. Хронофармакология. — Ставрополь, 2000. — С. 77-90.
3. Арушанян Э.Б., Орхий Б.П. Влияние мелатонина и эпифизэктомии на суточные колебания гипногенного эффекта гексенала // Проблемы хронобиологии. — 1990. —#3-4. — С. 144-149.
4. Манвелян Э.А., Батурин В.А. Особенности влияния диазепама на поведение крыс в услдовиях конфликтной ситуации в разное время суток // Тез. I Междунар. конф. «Циклические процессы в природе и обществе». - Ставрополь. - 1993. - С. 248.
5. Родина В.И. и соавт. Многопараметровый метод комплексной оценки тревожно-фобических состояний крыс // Журнал высшей нервной деятельности. - 1993. - Т. 43. - № 5. -С. 1006-1017.
6. Lowenstein P.R., Cardinali D.P. Caracteriza-tion of flunitrazepam and beta-carboline high affinity binding in bovine pineal gland // Neuroendocrine. - 1983. -37.-№2.-P. 151-154.
7. Rosenstein R.E., Cardinali D.P. Melatonin increases in vitro GABA accumulation in rat hypothalamus, cerebellum, cerebellar cortex and pineal gland//Brain. Res. - 1986. 398. -P. 403-406.
Об авторах
Манвелян Элеонора Аслибековна, кандидат фармакологических наук, старший преподаватель кафедры анатомии, физиологии и гигиены человека СГУ. Имеет 14 научных публикаций. Сфера научных интересов - фармакология, физиология эпифиза, фармация. Батурин Владимир Александрович, доктор медицинских наук, профессор. Опубликовал 3 монографии и более 200 научных работ. Область научных интересов - физиология и патология стриатума, хронофармакология и хронопатология поведения, физиология и патология эпифиза.
