CC BY
9
В зависимости от целей анализа определяют пигменты или диспергаторы. В качестве раствора сравнения используют дистилллированную воду.
Количество анализируемого вещества устанавливают по предварительно составленному калибровочному графику. Для этого в ряд мерных пробирок вносят 0,5, 0,75, 1, 1,5, 2 и 2,5 мл стандартного раствора исследуемого вещества, доводят до 5 мл дистиллированной водой, что соответствует 10, 15, 20, 30, 40 и 50 мкг красителя в 1 мл, и измеряют оптическую плотность при длине вол-
УДК 615.9.015.4:616.15/. 14-073.9
ны, указанной в таблице. Расчеты проводят по общепринятой формуле.
Литература. Иванова Т. П., Кузьменко И. М. — В кн.: Всесоюзный симпозиум по клинике, диагностике и лечению заболеваний химической этиологии. 2-й. Тезисы докладов. Киев, 1977, с. 98—99. Кузьменко Н. М. — Гиг. труда, 1978, № 7, с. 7—10. Кузьменко Н. М., Петровская О. Г. — В кн.: Профессиональный рак. М., 1981, вып. 2, с. 89—92. Плисс Г. Б. — В кн.: Некоторые итоги изучения загрязнения внешней среды канцерогенными веществами. М., 1972, с. 49—53.
Поступала 13.06.83
■уп\ла 13.0
С. В. Синицкий
ЭЛЕКТРОФИЗИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД РЕГИСТРАЦИИ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ГЛАДКИХ МЫШЦ СОСУДОВ В ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОМ ЭКСПЕРИМЕНТЕ
Киевский НИИ гигиены труда и профзаболевании
Для экспериментальной и токсикологической оценки действия вредных химических веществ необходимо исследование их влияния на сердечнососудистую систему (И. В. Саноцкий и Н. С. Аба-лина; И. М. Трахтенберг и соавт.).
Химические факторы окружающей и производственной среды нередко оказывают как прямое, так и опосредованное токсическое воздействие на функциональное состояние не только сердца, но и сосудов, изменяя их проницаемость и сократи" тельную способность.
Апробированный нами метод исследования позволяет проводить эксперимент на изолированных органах и изучать проницаемость протоплазмати-ческой мембраны клеток. В основу метода положен способ измерения электрических сигналов, возникающих в мышечных образованиях, а также свойство живой ткани получать положительный потенциал в области вхождения электрического тока и отрицательный потенциал в области его выхода при пропускании через него постоянного электрического тока. Изменение электротонических потенциалов под влиянием различных химических
Рис. 1. Эскиз камеры.
Объяснения в тексте.
Рис. 2. Электрическая схема установки.
1—5 хтсра; КП — катодный повторитель; У Б — усилитель биопотенциалов. Остальные обозначения в тексте.
агентов указывает на нарушение проницаемости мембраны при действии данного фактора и природу изменения мембранного механизма (Д. С. Воронцов и М. Ф. Шуба).
Для изучения проницаемости мембраны глад-комышечных клеток сосудов и одновременного исследования их сократительных свойств нами изготовлена специальная камера, схематически представленная на рис. 1.
Она состоит из 4 основных частей: 2 пластин (а) толщиной около 3 мм и 2 ванночек (б). В корпусе каждой пластины просверлены 3 взаимосвязанных канала. Канал 1 служит для поступления раствора сахарозы к исследуемому объекту, расположенному в канале 2. Канал 3 необходим для оттока сахарозы от объекта. С обеих сторон пластин наклеивается тонкая резина 4, в которой в области третьего канала нагретой иглой прижигается отверстие диаметром чуть меньше исследуемого препарата. Этим устраняется возможность диффузии раствора сахарозы в другие растворы. В корпусе ванночек также имеются каналы для поступления изотонического раствора KCl. Отток его осуществляется через специальные желобки 5. Между двумя «сахарозными» пластинами, отделенными друг от друга не более чем на 2,5 мм, помещается тонкий эластичный капилляр 6. Он служит для подачи исследуемого вещества, растворенного в физиологическом растворе Кребса, к мышечной полоске и соединяется со стеклянным теплообменником, используемым для подогрева раствора до 35—36 °С. Все детали камеры выполнены из органического стекла.
Гладкомышечный объект, выделенный из организма подопытного животного и взятый с двух концов на лигатуру, не менее 30 мин выдержива-
ется в бюксе с физиологическим раствором Кребса, а затем помещается в камеру. Один конец лигатуры с помощью фиксатора жестко закрепляется в одной из ванночек, а другой через блок 7 соединяется с грузом 8, масса которого не более 800 мг.
Таким образом, мышечная полоска, помещенная в камеру, находится в изометрическом режиме и оказывается разделенной на 5 изолированных участков. Первый и пятый участки омываются изотоническим раствором KCl (12), второй и четвертый— изотоническим раствором сахарозы (11) а третий — физиологическим раствором Кребса (10).
Электрические сигналы отводятся посредством неполяризующихся хлорсеребряных электродов 9, расположенных в третьем и пятом участках камеры. Они заключены в стеклянные оболочки, имеющие в своей узкой части отверстия диаметром от 0,3 до 0,5 мм, и заполнены агар-агаром, приготовленным на 3 М растворе KCl. Эти электроды подсоединены к катодному повторителю (рис. 2), который служит для устранения искажений, возникающих при передаче электрических сигналов от отводящих электродов к усилителю биопотенциалов. Катодный повторитель смонтирован на основе электрической схемы, разработанной П. Г. Костюком.
От усилителя электрический сигнал направляется к двум синхронно работающим осциллографам типа С1-18, один из которых используется для визуального контроля, а другой вместе с фоторегистратором ФОР-2 — для фотографирования этих сигналов. Для записи медленных электрических процессов, в частности уровня мембранного потенциала, применяется катодный самописец КСП-4, который также подсоединен к усилителю биопотенциалов. Раздражение исследуемого объекта осуществляется через электроды той же конструкции, что и отводящие, которые располагаются в первом и третьем участках камеры и подсоединены к электронному стимулятору типа ЭСУ-2. Для регистрации механической активности гладких мышц, сосудов используется электронная лампа — меха-нотрон (типа 6MXIC), которая преобразовывает механическую энергию в электрическую. Участок мышечной полоски, находящийся в третьем участке камеры, с помощью очень тонкой шелковой нити подсоединяется к этой лампе, которая в свою очередь подключается через мостовую схему Уин-стона к осциллографам. Следовательно, представляется возможность одновременного изучения механической и электрической активности различных гладкомышечных органов.
Использование в токсикологии описанного электрофизиологического метода регистрации функциональной активности гладких мышц сосудов целесообразно, поскольку он весьма информативен.
Литература. Воронцов Д. С., Шуба М. Ф. Физический электротон нервов и мышц. Киев, 1965, с. 3—38,
152—161.
Костюк П. Г. Микроэлектродная техника. Киев, 1960, с. 29—46.
Саноцкий И. В., Абалина Н. С. — В кн.: Вопросы гигиенического нормирования при изучении отдаленных
последствий воздействия промышленных веществ. М., 1972, с. 180—183. Трахтенберг И. М., Саноцкий И. В., Тычинин В. А. и др. — Гиг. и сан., 1978, № 9, с. 62—66.
Поступила 13.04.83
Обзоры
УДК 614.7:Гяе.095.7+66«.«18.6741-074:543.544.»
М. Т. Дмитриев, М. Я- Быховский, А. Ю. Брауде
ХРОМАТО-АТОМНО-АБСОРБЦИОННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ТОКСИЧНЫХ МЕТАЛЛООРГАНИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ В ГИГИЕНИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЯХ
НИИ общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Сысина АМН СССР, Москва
Проблема загрязнения окружающей среды тяжелыми металлами приобретает все большую гигиеническую значимость (Г. И. Сидоренко и М. Т. Дмитриев). Вместе с тем методы их определения разработаны недостаточно. Кроме того, установлено, что токсичные металлы после поступления в окружающую среду сравнительно быстро переходят в различные металлоорганические соединения, которые и представляют наибольшую опасность. Это выдвигает новые требования к методам определения тяжелых металлов в окружающей среде и биоматериалах.
Ранее для определения металлоорганических веществ (например, тетраэтилсвинца) широко использовались хроматографические методы (М. Т. Дмитриев и соавт.). Однако при наличии сложных смесей органических веществ, что характерно для окружающей среды, обычные хроматографические методы недостаточно эффективны вследствие мешающего действия большого количества сопутствующих веществ. В этом случае вполне достоверные результаты анализа могут быть получены при использовании высокочувствительного селективного детектирования, позволяющего целенаправленно выделять лишь определяемые соединения (М. Т. Дмитриев и соавт., 1981). Что касается высокотоксичных металлоорганических веществ, то их надежное детектирование после хроматографического разделения может быть осуществлено с помощью атомной абсорбции (АА).
Высокая селективность АА позволяет определить интересующий элемент в смеси, состоящей из большого числа различных элементов. Однако при обычном применении АА можно определить общее ко-• лнчество интересующего элемента, но нельзя установить, в какие соединения он входит. При использовании АА в качестве селективного детектора для хроматографии появляется возможность не только измерить общее содержание элемента, но и коли-
чественно определить включающие его соединения. При этом отпадает необходимость полного разделения исследуемых смесей, поскольку компоненты, не содержащие элемент (регистрируемый АА), не будут давать хроматографических пиков.
В последние годы АА использовали в сочетании как с газовой, так и с жидкостной хроматографией. В тех случаях, когда исследуемые вещества обладают достаточной термической устойчивостью и летучестью, целесообразно сочетание АА с газовой хроматографией, что позволяет определять 0,1—1 нг анализируемого вещества. При анализе нелетучих соединений можно использовать АА с жидкостной хроматографией, обладающей несколько меньшей чувствительностью вследствие большего размывания пробы в хроматографической колонке. При газовой хроматографии выход из хроматографической колонки подсоединяют к атомизатору с помощью обогреваемой металлической трубки. Ато-мизацию пробы производят как в пламени горелки, так и в непламенных электротермических атомизаторах. Наибольшее распространение получили электротермические атомизаторы, позволяющие достигнуть большей чувствительности. Непламенную атомизацию обычно проводят в стандартных графитовых атомизаторах, которые эксплуатируются в непрерывном режиме при 1600—2000 °С.
При работе с непламенным атомизатором часть определяемого элемента оседает на его стенках, что может приводить к появлению ложных пиков при взаимодействии с органическими веществами. Добавление водорода к газу-носителю устраняет этот эффект и увеличивает чувствительность опре> деления (Рагпв и соавт.). Водород разрушает поверхностные соединения и нейтрализует органические радикалы, препятствующие атомизации металла. Для элементов, обладающих высокой летучестью, успешно применяются кварцевые атомизаторы, обогреваемые нихромовой спиралью. Квар-
