CC BY
9
быть причиной развития не только сложных патологических состояний в нем, но и влиять на пищеварительную функцию всего желудочно-кишечного тракта.
Ключевые слова: хронический гастрит, желудочная секреция, гепатобилиарная система, пищеварительная функция.
Стаття надшшла 2.09.2015 р.
only complex pathological conditions, but also influence the digestive function of the alimentary tract as a whole.
Key words: chronic gastritis, gastric secretion, hepatobiliary system, digestive function.
Рецензент Кущ О.Г.
УДК 616-006.328.03-091.8-07:577.112
ЕКСПРЕС1Я CD4+, CD8+ T -Л1МФОЦИТ1В В ДОБРОЯК1СНИХ МЕН1НГИОМАХ
У po6oTÍ вивчена виражешсть експресп пухлина-шфшьтруючих CD4 +, CD8 + Т^мфоциив в доброяюсних меншпоми, видалених тд час нейрохiрургiчних операцш. Виявлено, що доброяюсш меншпоми (меншготелюматозние, перехщш i фiбрознi) характеризуються рiвномiрним розподшом пухлина-iнфiльтруючих CD4 + i CD8 + Т^мфоциив в полi зору, 3i збiльшенням щiльностi !х розташування навколо мiкросудин. Кiлькiсть CD8 + Т^мфоциив в 2,81 - 3,21 рази перевищуе кiлькiсть CD4 + Т^мфоциив. Спiввiдношення CD4 + / CD8 + Т^мфоциив становить 0,3-0,35. Поряд з вираженою експресieю CD4 + i CD8 + Т^мфоциив в меншпоми рееструеться слабка експреая CD4 i CD8, що може проявлятися в нормi на моноцитах, тканинних макрофагах i Ж.-кл™нах, що тдтверджуе бiльш широке представництво iмунниx клiтин в менiнгiоми i вимагае подальшого вивчення.
Kjiiohobí слова: CD4 +, CD8 + Т -л1мфоцити, доброяюсш меншгюми.
Робота е фрагментом НДР «Hoei технологи ранньоХ дiагностики онклогiчних, нейро-ендокринних, сердцево-судинних, церебро-васкулярних, аутоiмунних i шфекцштх захворювань» (№ держ. реестраци 0106U003709).
В наш час на кттинному i молекулярному р1вш широко вивчаються ¡мунш реакцн при пухлинному росл [1, 2, 4]. Це дае можливютъ бшьш точно встановити взаемовщносини м1ж 1мунною системою i пухлиною, що представляе теоретичний i практичний штерес в плаш розробки ефективних метод1в 1мунотерапп. Поряд з цим при пухлинах ЦНС немае однозначного уявлення про виражешсть 1мунних реакцш в умовах зростання пухлини. Частково це пов'язано з 1мунною 1зольовашстю головного мозку, а також з отриманими даними про те, що цший ряд 1мунних функцш виконують не 1мунокомпетентш, а резидентш кл1тини головного мозку -нейрони, астрогл1я, м1крогл1я, ендотелш мозкових капшяр1в, паравентрикулярш макрофаги [3, 9].
Дослщженнями показано, що при меншгюмах головного мозку, як е найбшьш розповсюдженими негаальними пухлинами ЦНС, що складають до 26% первинних штракрашальних пухлин, спостериаеться комбшована 1мунна недостатшсть в основ1 яко! лежить переважне пригшчення гуморального 1муштету, а також неспециф1чних фактор1в захисту, що пов'язане з дисбалансом регулюючих прозапальних цитоюшв [5]. М1ж тим великий штерес останшм часом викликае вивчення фенотитчних характеристик та протипухлинних властивостей пухлин-шфшьтруючих л1мфоципв (TIL). При цьому даш про виражешсть 1ммунокл1тинно! шфшьтрацн в меншгюмах представлен лише в одиничних роботах [6], що спонукало проведення даного дослщження.
Метою роботи було вивчення вираженют 1ммунокл1тинно! шфшьтрацн (CD4 +, CD8 + Т-л1мфоципв) та И розподш в пухлиннш тканиш при р1зних вар1антах доброяюсних меншгюм.
Матерiал та методи дослщження. Проведено комплексне пстолопчне, 1мунопстох1м1чне (1ГХ) i морфометричне дослщження операцшного матер1алу - вилучених тд час нейрох1рурпчних операцш меншгюм головного мозку у 20 хворих, у вщ1 вщ 38 до 65 роюв. У вщповщност до пстолопчно! класифшацн (ВООЗ, 2007), були видшеш вар1анти доброяюсних меншгюм, що зустр1чаються найбшьш часто у хворих: меншготелюматозний вар1ант меншпоми (n=9), перехщний (n=6), ф1брозний (n=5). Для мшроскошчного i 1ГХ дослщження пухлинну тканину фшсували в нейтральному забуференному 10% форматш, шсля вщповщно! обробки заливали в парафш i виготовляли сершш зр1зи товщиною 4 мкм. У вщповщносп з1 стандартизованими протоколами в парафшових зр1зах тсля температурного демаскування антигешв шляхом нагр1вання на водянш баш в Трю-ЕДТА буфер1 (рН=9,0) i пригшчення активност ендогенно! пероксидази 3% розчином перекису водню проводили 1ГХ дослщження з використанням моноклональних антитш до CD4 i CD8 рецептор1в i системи в1зуатзацн EnVision + («DAKO», -Дашя) з д1амшобензидшом. Антитша застосовували в розведенш 1:50 i 1:100. Результати кожно! 1ГХ реакцн оцшювали юльюсним методом шляхом шдрахунку позитивно забарвлених кттин в
полi зору мкроскопа Axioplan 2 («Carl Zeiss», Шмеччина) при збшьшенш в 600 pa3iB. Також враховували особливостi розподшу iмуноцитiв в пухлиннiй тканинi. Юлькюш данi обробляли з визначенням значення середньо1 арифметично1 вибipки (М), та розрахунку помилки (±m) для середшх величин.
Результати дослщження та Тх обговорення. Менiнготелiоматознi менiнгiоми характеризувалися овальною або округлою формою кл^ин з видовженими ядрами i piзною щшьнютю pозподiлу 1х в полi зору мшроскопу. Дiлянки пухлинно1 тканини як правило були обмежеш незначною кшькютю колагенових волокон. У дiлянках щшьного розташування пухлинних клiтин спостеpiгалося формування характерних концентричних структур. У дшянках бшьш пухкого розташування пухлинних кл^ин зустpiчалася помipна кiлькiсть мiкpосудин зi склерозованими, мiсцями гiалiнiзованими стiнками i дpiбнi лiмфоцитоподiбнi клiтини. При 1ГХ-дослiдженнi визначалось незначне i piвномipне pозподiлення CD4+ лiмфоцитiв в полi зору (рис. 1А), зi збшьшенням щiльностi 1х розташування навколо мшросудин. Середня кiлькiсть CD4+ лiмфоцитiв склала 5,7 ± 1,2 в полi зору. CD8 + лiмфоцити вiдpiзнялися бiльш щiльним розташуванням в полi зору (рис. 1Б).
Рiвномipне '!х розташування чергувалося зi збiльшенням (в 1,6-1,8 pазiв) 1х кiлькiстi в дшянках зi значною кiлькiстю мшросудин (рис. 1В). CD8+ лiмфоцити в 3-3,5 рази перевищували вмiст CD4+ лiмфоцитiв, 1х кiлькiсть становила в середньому 17,85±5,26 клiтин. На вщмшу вiд CD4+ лiмфоцитiв, CD8+ Т^мфоцити неpiдко формували скупчення у виглядi вузликiв з 22-26 клiтин, як розташовувалися в дiлянках бiльш щшьного розташування пухлинних клггин (рис. 1Г). Спiввiдношення CD4+/CD8+ лiмфоцитiв становило - 0,3. Поряд з вираженою мембранною експреЫею CD4 i CD8 у вЫх дослiджуваних препаратах рееструвалася piвномipна слабка мембранная експpесiя в окремих клггинах, дифузно розташованих в полi зору.
У пеpехiдних менiнгiомах чергувалися дiлянки менiнготелiоматозного, синцитiального типу, та з переважанням фiбpобластичного дифеpенцiювання. Пстоархггектошка пухлин характеризувалася бiльш вираженим полiмоpфiзмом в поpiвняннi з мiнiнготелiоматозним ваpiантом. Клiтини пухлини pозpiзнялися за pозмipами, повсюдно зустpiчалися концентpичнi структури, в дшянках бшьш пухко1 кл^инноТ будови з переважанням колагенових волокон рееструвалася велика кшькють мжросудин, навколо яких визначалась збiльшена щiльнiсть CD4+ i CD8+ лiмфоцитiв. Розподiл CD4+ i CD8+ лiмфоцитiв рееструвався аналогiчно меншготелюматозному ваpiанту пухлини. Середня кiлькiсть CD4+ i CD8+ лiмфоцитiв склала вщповщно 6,1±1,4 i 17,2±4,1 в полi зору. Спiввiдношення CD4+ /CD8+ лiмфоцитiв становило -0,35.
Рис. 1. Метнготелюматозна меншгюма. А - Експрешя CD4+ Т- Рис. 2. Ф1брозна меншгюма. А - щшьний колагеновий
л1мфоциив в пухлит. Б - Експрес1я CD8+ Т-л1мфоциив в пухлит. В матрикс пухлини з формуванням концентричних структур. Б -
- експрешя CD8+ в участках ангюматозу. Г - формування скупчень Експрешя CD4+ Т-л1мфоциив в пухлит. В - експрес1я CD8+ Т-
CD8+ Т-л1мфоциив в пухлит. Метод 1ГХ. Зб. х600. л1мфоциив Метод 1ГХ. Зб. х600.
Гiстоаpхiтектонiка фiбpозних меншгюм була представлена, як правило, значною кшькютю колагенових волокон, що розташовувалися у piзних напрямах i формували концентричш структури (рис. 2А). У щшьнш колагеновiй стpомi розташовувалися остpiвцi фiбpобластоподiбних арахно1дендотелюцтв з витягнутими ядрами, що мютили дpiбнозеpнистий хроматин. Дшянки з переважанням волокнистого матриксу i низькою кл^инноТ щiльнiстю характеризувалися вщсутнютю експреЫТ CD4 i CD8 Т^мфоцилв. У дiлянках пухлини з
переважанням кштинного компонента м1ж волокнами i пухлинними кл1тинами в1дзначалася р1вном1рна в пол1 зору експреая CD4+ i CD8+ Т^мфоципв (рис. 2Б, В).
Кшьюсть CD4+ i CD8+ Т-лiмфоцитiв становила вщповщно 4,7 ± 1,5 i 15,1 ± 2,8 в полi зору. Спiввiдношення CD4+ /CD8+ лiмфоцитiв становило - 0,33. Поряд з вираженою мембранною експресieю CD4 i CD8, у всiх дослiджуваних меншпомах рееструвалася рiвномiрна слабка мембранна експрешя в окремих клiтинах, дифузно розташованих в полi зору. На окремих дiлянках кiлькiсть таких клiтин в 2-2,5 разiв перевищувала кiлькiсть CD4+ i CD8+ Т-лiмфоцитiв.
Отриманим даним, стосовно чисельносп CD4+ i CD8+ Т^мфоципв, складно дати однозначну оцшку, так як взаемодiя пухлини та iмунноl системи е досить складною, i кiнцевий результат ще1 взаемодн не може бути передбачений на пiдставi вираженостi iмунноl шфшьтрацн в пухлиш [7]. Проте важливiсть Т^мфоципв в протипухлинному iмунiтетi безперечна. Так в рядi дослiджень вiдзначено, що зростання первинно! пухлини i метастазiв можуть бути пов'язанi зi зниженням щiльностi внутрiшньопухлинних iмунних Т-клiтин [8], а баланс мiж ефекторними та регуляторними Т-кл^инами може бути важливим фактором у прогнозуванш виживання пащенпв при рiзнiй онкопатологн [10].
Поряд з цим вказуеться, що в рядi солщних пухлин CD8+ Т^мфоцити часто перевищують чисельнiстю популяцiю CD4+ кттин [6]. При менiнгiомах, як вказуе ряд авторiв, кiлькiсть CD8+ також перевищуе кiлькiсть CD4+ Т^мфоципв [7], що отримано i в наших спостереженнях. Також збереження стабшьного спiввiдношення CD4+/CD8+, що вiдзначалося в нашому дослiдженнi, можливо е передумовою встановлення динамiчноl рiвноваги мiж пухлиною i iмунною системами. Така рiвновага може сприяти повiльному зростанню пухлини, характерному для багатьох меншгюм [7].
1. Дослщжуваш доброякiснi меншгюми характеризуються рiвномiрним розподiленням пухлин-шфшьтруючих CD4+ i CD8+ Т-лiмфоцитiв в полi зору, зi збiльшенням щшьносп !х розташування навколо мiкросудин. При меншготелюматозних менiнгiомах зустрiчаються скупчення CD8+ Т-лiмфоцитiв, що не спостерналось при iнших варiантах менiнгiом.
2. Кшьюсть пухлин-шфшьтруючих CD8+ Т-лiмфоцитiв в 2,81 - 3,21 рази перевищуе кшьюсть CD4+ Т^мфоципв. Сшввщношення CD4+ /CD8+ Т-лiмфоцитiв становить 0,3-0,35, що може свщчити про встановлення динамiчноl рiвноваги мiж пухлиною i iмунною системою.
3. Поряд з вираженою експрешею CD4+ i CD8+ Т^мфоципв в дослiджуваних менiнгiомах зустрiчалася слабка експрешя CD4, яка може виявлятися в нормi на моноцитах i тканинних макрофагах, а також слабка експрешя CD8, що може в нормi спостерiгатися на NK-клiтинах. Зазначений факт тдтверджуе бiльш широке представництво iмунних клiтин в менiнгiомах, що потребуе подальшого вивчення.
Перспектиеи подальших дослгджень. Враховуючи, що тльтсть i жунофенотип пухлина-шфтьтруючих клтин е найважлившим чинником клШчного натдку захворювання, подальше вивчення взаемодш мiж рiзними iмунними клтинами, що тфтьтрують пухлину, дозволить вiдкрити новi можливостi жунотерапи пухлин.
1. Кузовлев Е. Н. Особенности иммунофенотипа лимфоцитов, выделенных из пораженной опухолью печени у мышей / Е.Н. Кузовлев, О.В. Лебединская, Н.К.Ахматова [и др.] // Современные наукоемкие технологии. - 2005. - № 3. -44 с.
2. Кит О.И. Местный клеточный иммунитет при аденокарциноме и полипах толстой кишки / О.И. Кит, А.В. Шапошников, Е.Ю. Златник, [и др.] // Сибирское медицинское обозрение. - 2012. - № 4. - С 11-16.
3. Мухачева М.В. Баланс цитокинов при церебральных опухолях / М.В. Мухачева // Медицинский альманах. - 2011. - № 5. - С.105-107.
4. Малышев И.Ю. Матричное репрограммирование иммунных клеток и роль его нарушения в патогенезе опухолей / И.Ю. Малышев // Вестник РОНЦ им. Н.Н.Блохина. - 2012.- № 2. - С. 21-33.
5. Селюкова М.В. Особенности иммунного статуса у больных с менингиомами и глиомами полушарий головного мозга: дис. ... канд. мед. наук/ М.В. Селюкова - Пермь, - 2005. - 163 с.
6. Domingues P. H. Immunophenotypic identification and characterization of tumor cells and infiltrating cell populations inmeningiomas / P.H. Domingues, C. Teodosio, J. Ortiz [et al.] // Am J Pathol. - 2012. - №5. - P. 1749-1761
7. Fang L. The immune cell infiltrate populating meningiomas is composed of mature, antigen-experienced T and B cells / L.Fang, D.E. Lowther, M.L. Meizlish [et al.] // Neuro Oncol. - 2013. - Vol.15(11). - P.1479-1490.
8. Mlecnik B. Histopathologic-based prognostic factors of colorectal cancers are associated with the state of the local immune reaction / B. Mlecnik, M. Tosolini, A. Kirilovsky [et al.] // J Clin Oncol. - 2011. - Vol.29(6). - P.610-618.
9. Prosniak M. Glioma grade is associated with the accumulation and activity of cells bearing M2 monocyte markers / M. Prosniak, L.A. Harshyne, D.W. Andrews [et al.] // Clin Cancer Res.- 2013. - 19(14). - Р. 3776-3786.
10. Watanabe Y. Tumor-infiltrating lymphocytes, particularly the balance between CD8(+) T cells and CCR4(+) regulatory T cells, affect the survival of patients with oral squamous cell carcinoma / Y. Watanabe, F. Katou, H. Ohtani [et al.] // Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod. - 2010. - Vol.109(5). - P.744-752.
ЭКСПРЕССИЯ CD4+, CD8+ T -ЛИМФОЦИТОВ В ДОБРОКАЧЕСТВЕННЫХ МЕНИНГИОМАХ Тертышный С. И.
В работе изучена выраженность экспрессии опухоль-инфильтрирующих CD4+, CD8+ T-лимфоцитов в доброкачественных менингиомах, удаленных во время нейрохирургических операций. Выявлено, что доброкачественные менингиомы (менинготелиоматозные, переходные и фиброзные) характеризуются равномерным распределением опухоль-инфильтрирующих CD4+ и CD8+ Т-лимфоцитов в поле зрения, с увеличением плотности их расположения вокруг микрососудов. Количество CD8 + Т-лимфоцитов в 2,81 - 3,21 раза превышает количество CD4+ Т-лимфоцитов. Соотношение CD4+ /CD8+ Т-лимфоцитов составляет 0,3-0,35. Наряду с выраженной экспрессией CD4 + и CD8 + Т-лимфоцитов в менингиомах регистрируется слабая экспрессия CD4 и CD8, что может проявляться в норме на моноцитах, тканевых макрофагах и NK-клетках, что подтверждает более широкое представительство иммунных клеток в менингиомах и требует дальнейшего изучения.
Ключевые слова: CD4+, CD8+ T -лимфоциты, доброкачественные менингиомы.
Стаття надшшла 28.09.2015 р.
EXPRESSION OF CD4+, CD8+ LYMPHOCYTES IN BENIGN MENINGIOMAS Tertishniy S. I.
The extent of CD4+, CD8+ expression in tumor-infiltrating lymphocytes was studied in benign meningiomas, obtained from patients undergoing neurosurgical craniotomies. We elucidated that benign meningiomas (meningothelial, transitional and fibrous subtypes) were characterized by evenly distributed CD4+, CD8+ tumor-infiltrating lymphocytes with increase of their density around microvessels. Quantity of CD8+ lymphocytes exceeded number of CD4+ lymphocytes in 2,81-3,21 times. The ratio of CD4 + / CD8 + T-lymphocytes was 0,3-0,35. Along with extensive CD4+ and CD8+ expression in tumor-infiltrating lymphocytes weak expression of CD4+ and CD8+ was registered, which can normally be found in monocytes, tissue macrophages and NK-cells. This data prove broad distribution of immune cells in meningiomas and needs further investigation.
Key words: CD4+, CD8+ lymphocytes, benign meningiomas.
Рецензент Старченко I.I.
УДК 616.33/.34 - 002 - 08
МОДЕРН1АЦ1Я ТЕРАПН ХВОРИХ З ЗАХВОРЮВАННЯМИ ШЛУНКОВО-КИШКОВОГО ТРАКТУ ШЛЯХОМ ВИКОРИСТАННЯ МАГШеВО-МШЕРАЛЬНОГО КОМПЛЕКСУ
Неалкогольна жирова хвороба печшки (НЖХП) — це полiетiологiчний дифузний дисметаболiчний процес, що тривае понад 6 мюящв та передбачае жирову дистрофто гепатоци™ iз гiстiолiмфоцитарною шфшьтращею печшкових часточок, гiперплазiею перисинусощальних зiрчастих клтн та фiброзом зi збереженням арх^ектошки печшки (E.M. Brunt, 2004). Нашою головною метою постало дослщити ефектившсть i переносимють препарату «Детоксмаг» ("DETOXMAG") в лжуванш хворих неалкогольною жировою хворобою печшки. За отриманими даними зроблеш висновки, що застосування препарату «Детоксмаг» ("DETOXMAG") на основi Бшоф^у Полтавського родовища в терапп НАЖХП з тдвищеним лшдним спектром призводить до полшшення самопочуття пащенив, нормалiзацii бiохiмiчних показниюв, нормалiзуе лшдограму, запобшае прогресуванню хвороби, а все це покращуе яюсть життя пащенив.
Ключовi слова: неалкогольна жирова хвороба печшки, патогенетична тератя, Бшоф^у Полтавського родовища, магшево-мшеральний комплекс.
Робота е фрагментом НДР «Розробка стратеги використання етгенетичних MexaHi3Mie для профшактики та л^вання хвороб, пов'язаних i3 системным запаленням» 0114U000784 2014 - 2016рр.
На сьогодшшнш день дуже багато уваги придшяеться гастроентеролопчним захворюванням, так як прирют даних нозологш стрiмко зростае. На фот стрiмкого росту числа oci6, що страждають вiд ожирiння, цукровий дiабет та з метаболiчним синдромом, все бшьше значення набувають захворювання шлунково-кишкового тракту.
Неалкогольна жирова хвороба печшки (НАЖХП) - це набуте метаболiчне стрес-iндуковане захворювання печшки, асоцшоване з iнсулiнорезистентнiстю i генетичною схильнiстю. НАЖХП являе собою одну з найважливших проблем суспiльноl охорони здоров'я в усьому свт в ХХ1 ст. i також стае все бшьш актуальною проблемою на Укра1ш. Поширенiсть НАЖХП, за даними рiзних дослiдникiв, варiюе на rai пiдвищеного харчування, при 1МТ бшьше 28 кг/м2 становить близько 20%, при ожиршш II-III ступеня - вже 55% [3, 4]. Основна мета терапи НАЖХП - профшактика i лiкування метаболiчного синдрому. Вщповщно до сучасних принципiв лiкування захворювань печiнки програма комплексно! терапп' зазначених захворювань включае два основних напрямки. Перше - етютропна терапiя, спрямована на придушення активностi патологiчного агента-збудника, його елiмiнацiю i санацiю оргашзму. Другий напрямок
