CC BY
29
А.Н. Захватов, С.И. Кузнецов
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ОБОСНОВАНИЕ ЦЕЛЕСООБРАЗНОСТИ ВНУТРИСУСТАВНОЙ ОЗОНОТЕРАПИИ В КОМПЛЕКСНОМ ЛЕЧЕНИИ ПОСТТРАВМАТИЧЕСКОГО СИНОВИТА КОЛЕННОГО СУСТАВА
ФГБОУ ВПО «Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарёва», Саранск, Россия
В эксперименте на 95 белых нелинейных крысах изучалось влияние внутрисуставной озонотерапии на качественный состав синовиальной жидкости травмированного сустава. Установлено, что внутрисуставная озонотерапия как и перорально вводимый нимесулид оказывает выраженный противовоспалительный эффект. Наибольший эффект достигается при комплексном применении НПВС и внутрисуставной озонотерапии.
Ключевые слова: внутрисуставная озонотерапия, посттравматический синовит
In the experiment on 95 white nonlinear rats studied the effect of intra-articular ozone therapy on the qualitative composition of the synovial fluid of the injured joint. Intraarticular ozone therapy has anti-inflammatory effect as nimesulide. The greatest effect is obtained when used in conjunction nimesulide and intraarticular ozone therapy.
Key words: intraarticular ozone therapy, posttraumatic synovitis
Введение. Дегенеративно-дистрофические заболевания крупных суставов нередко имеют травматическую этиологию. Ведущая роль в структуре травм суставов всех локализаций принадлежит повреждениям коленного сустава. Одним из важных факторов, усугубляющим деструкцию хрящевой ткани, является посттравматический синовит [3]. Широкое использование нестероидных противовоспалительных препаратов и глюкокортикостероидов при лечении данной патологии в ряде случаев сопряжено с высоким риском развития гастропатии, что вынуждает искать альтернативные методы воздействия на патогенез заболевания. В связи с этим большой интерес представляет внутрисуставная озонотерапия, обладающая выраженным противовоспалительным и анальгетическим эффектом [1].
Цель исследования состояла в оценке влияния внутрисуставной озонотерапии на цитологический состав синовиальной жидкости крыс на фоне экспериментальной травмы коленного сустава.
Материалы и методы. Эксперименты проведены на 71 белых нелинейных крысах обоего пола массой 180-200 г., содержавшихся в стандартных условиях вивария ФГБОУ ВПО «МГУ им. Н.П. Огарева». Животные были разделены на 4 серии. Первую серию составили интактные животные в количестве 12 особей. Во второй (20 крыс), третьей (19 крыс) и четвертой (20 крыс) сериях производилось моделирование травмы коленного сустава механическим путем по методике Г.М. Дубровина [2]. Во второй (контрольной) серии лечение не проводилось. Животные третьей опытной серии получали нимесулид перорально через зонд в среднетерапевтической дозе 2 мг/кг ежедневно в течение 10 дней. В четвертой серии производилось внутрисуставное введение 0,5 мл озоно-кислородной смеси в концентрации 15 мг/л через день в сочетании пероральным введением нимесулида дозе 2 мг/кг. Продолжительность курса лечения составляла 10 дней. Исследования проводили на 3 и 28 сутки лечения. Животных выводили из эксперимента в соответствии с Конвенцией по защите животных, используемых в эксперименте и других научных целях, принятой Советом Европы в 1986 г. Синовиальную жидкость после артротомии коленного сустава переносили на предметное стекло и распределяли по нему тонким слоем. Полученные таким образом мазки окрашивали по Романовскому-Гимзе. Подсчет клеток проводился в 100 непересекающихся
полях зрения. Статистическая обработка результатов исследований проведена с помощью ^ критерия Стьюдента. Изменения считали достоверными при р < 0,05; 0,01; 0,001.
Результаты и обсуждение. Большую часть клеток синовиальной жидкости интактных животных составляли лимфоциты (66,78%) и синовиоциты (11,19%). Значительно реже в мазках встречались нейтрофилы (5,52%), моноциты (4,92%) и макрофаги (8,21%). Также обнаруживались клетки с явлениями апоптоза, не поддающиеся идентификации (5,38%).
Таблица 1
Серии Нейтро- Лимфо- Моноци- Макрофаги Синовио- Недиф-
исследования филы циты ты циты фер-е
клетки
Интактные 5,52±0,23 66,78±1,14 4,92±0,29 8,21±0,43 11,19±0,58 3,38±0,33
животные (п=12)
Конт- 3 48,94±1,56 22,02±1,12 2,43±0,27 4,57±0,62 18,74±0,82 3,30±0,41
рольная сутки Р<0,001 Р<0,001 Р<0,05 Р<0,001 Р<0,001 Р<0,001
серия (п=10)
(п=20) 28 24,33±0,98 27,17±1,06 1,24±0,16 20,30±1,39 24,96±0,98 2,42±0,21
сутки (п=10) р<0,001 р<0,001 р<0,001 р<0,001 р<0,001 р<0,001
Ниме- 3 43,25±1,26 27,35±1,01 2,13±0,42 5,87±0,42 19,40±0,84 2,01±0,28
сулид per.cs сутки (п=9) р<0,001 Р1<0,05 р<0,001 Р1<0,05 р<0,05 Р1>0,05 р<0,001 Р1>0,05 р<0,001 Р1>0,05 р<0,001 Р1>0,05
(п =19) 28 14,32±0,73 38,19±1,33 2,95±0,31 17,76±0,51 23,23±0,58 3,55±0,41
сутки (п=10) р<0,001 Р1<0,001 р<0,001 Р1<0,05 р<0,001 Р1>0,05 р<0,001 Р1>0,05 р<0,001 Р1>0,05 р<0,01 Р1>0,05
Ним- 3 40,58±1,37 27,67±0,74 2,52±0,34 7,61±0,47 19,12±0,66 1,55±0,31
есулид per.cs +в/с озон сутки (п=10) р<0,001 Р1<0,01 Р2>0,05 р<0,001 Р1<0,05 Р2>0,05 р<0,001 Р1<0,05 Р2>0,05 р<0,001 Р1<0,01 Р2>0,05 р<0,001 Р1>0,05 Р2>0,05 р<0,001 Р1<0,05 Р2>0,05
(п =20) 28 10,21±0,78 58,03±1,19 2,75±0,32 11,36±0,59 14,42±0,46 2,69±0,27
сутки (п=10) р<0,01 Р1<0,001 р2<0,01 р>0,05 Р1<0,001 Р2<0,001 р>0,05 Р1<0,001 Р2<0,01 р>0,05 Р1<0,001 Р2<0,01 р>0,05 Р1<0,001 Р2<0,001 р>0,05 Р1<0,001 Р2<0,001
Примечание. р - достоверность отличий к данным интактных животных; р1- к данным контрольной серии; р2 - к данным при введении нимесулида; р3 -к данным при в/с введении озона
Анализ синовиоцитограммы животных контрольной серии на 3 сутки с момента травмы показал, что соотношение клеток сместилось в сторону увеличения числа гематогенных клеточных элементов: количество нейтрофилов возросло до 48,94%. Также в мазках возросла доля синовиоцитов до 18,74%. Количество лимфоцитов снизилось до 22,02%, а число макрофагов и моноцитов изменилось незначительно. При микроскопии во всех полях зрения в большом количестве присутствовали эритроциты, нити фибрина. Полученные результаты синовиоцитограммы на 3 сутки во всех опытных сериях достоверно не отличались от аналогичных показателей контрольной серии (табл. 1).
Через 28 суток доля нейтрофилов в синовиоцитограмме контрольной серии снизилась до 24,33%, тогда как макрофаги и синовиоциты составляли 20,30% и 24,96% соответственно от общего числа клеток. Ввиду этого наблюдалось относительное снижение лимфоцитов и моноцитов в мазках (27,17% и 1,24% соответственно). Данная картина соответствует литературным данным, согласно которым, острый воспалительный процесс в суставе постепенно сменяется прогрессирующими дегенеративно-дистрофическими расстройствами. К 28 суткам соотношение клеточных элементов синовиальной жидкости животных, которым
перорально вводился нимесулид, изменилось в сторону уменьшения нейтрофильных лейкоцитов до 14,32% и роста макрофагов до 17,76%. Содержание синовиоцитов за прошедший период времени практически не изменилось и составляло 23,23%. Относительно результатов контрольной серии количество клеток гематогенного происхождения у животных получавших нимесулид было ниже, тогда как существенных различий в отношении тканевых клеточных элементов не выявлено. Состав синовиальной жидкости крыс получавших комбинацию нимесулида per os и озона внутрисуставно на 28 сутки претерпел выраженные изменения. В синовиоцитограмме животных число нейтрофилов уменьшилось до 10,21%, свидетельствуя о снижении активности воспали-тельного процесса, содержание макрофагов и синовиоцитов практически не отличалось от аналогичных показателей интактных животных (11,36% и 14,42% соответственно).
Заключение. Таким образом, экспериментальная травма коленного сустава сопровождается изменением клеточного состава синовиальной жидкости воспалительного характера, проявляющиеся увеличением гематогенных клеточных элементов, которые постепенно замещаются клетками тканевого происхождения, свидетельствующими о дегенеративных изменениях синовиальной среды сустава. Нимесулид в среднетерапевтической дозе способствует уменьшению доли гематогенных клеточных элементов, купируя тем самым явления посттравматического синовита, но не оказывает влияния на продолжающиеся деструктивные процессы. Внутрисуставная озонотерапия оказывает выраженный противовоспалительный эффект, сравнимый с нимесулидом. Кроме того, положительное влияние озона на клеточный состав синовиальной жидкости проявляется ограничением роста числа синовиальных клеток, ответственных за прогрессирование деструкции в суставе. Наибольший эффект достигается при комбинированном применении нимесулида и озона, что, по-видимому, обусловлено их воздействием на разные звенья патогенеза воспалительного процесса.
Список литературы:
1. Алехина С.П., Щербатюк Т.Г. Озонотерапия: клинические и экспериментальные аспекты. Н.Новгород: «Литера», 2003. 240 с.
2. Дубровин Г.М., Блинков Ю.А., Нетяга С.В., Нетяга А.А. Обоснование применения миелопида для профилактики посттравматического остеоартроза (экспериментальное исследование) // Вестник травматологии и ортопедии им. Н.Н. Приорова. 2005. № 2. С. 60-62.
3. Синаченко О.В. Современные аспекты анализа синовиальной жидкости // Украинский ревматологический журнал. 2008. Том 32. № 2. С. 30-37.
