УДК 619:615.324+619:615:373+612.1:636.2
Ключевые слова: иммунопрофилактика, респираторные заболевания, местные штаммы возбудителей заболеваний, ронколейкин, иммунизация, титры антител, колостральный иммунитет, гипериммунная сыворотка
Key words: immunoprophylaxis, respiratory diseases, local pathogen strains, roncoleukin, immunization, antibody titers, colostral immunity, hyperimmune serum
Некрасов А. А., Попов Н. А., Моисеев А. Н., Некрасова Н. А., Муравьев В. Н.
эффективность ПРИМЕНЕНИЯ РОНКОЛЕйКИНА ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ ВИРУСНЫХ (РЕСПИРАТОРНЫХ) ЗАБОЛЕВАНИй КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
THE EFFECTIVENESS OF RONCOLEUKIN FOR PROPHYLAXIS OF VIRAL (RESPIRATORY) DISEASES OF CATTLE
'ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт животноводства Россельхозакадемии» Адрес: 142132, Московская область, Подольский район, пос. Дубровицы. E-mail: [email protected]
1All-Russian Institute of Animal of Russian Academy of Agricultural Sciences Address: 142132, Russia, Moscow region, Podolsk district, pos. Dubrovitsy 2ООО «Биотех». Адрес: 197198, Санкт-Петербург, ул. Большая Пушкарская, 20. E-mail: [email protected]
2LLC «Biotech». Address: 197198, Russia, Saint-Petersburg, Bolshaya Pushkarskaya str., 20 3ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К. И. Скрябина»
Адрес: 109472, Москва, ул. Академика Скрябина, 23 3Moscow State Academy of Veterinary Medicine and Biotechnology named after K. I. Scriabin Address: 109472, Russia, Moscow, Akademik Skryabin str., 23
Некрасов Александр Александрович, к. с/х. н., вед. науч. сотрудник1
Nekrasov Aleksandr A., Ph.D. in Agricultural Science, Leading Researcher1 Попов Николай Александрович, д. б. н., проф., зав. лабораторией, гл. науч. сотрудник1 Popov Nikolay A., Doctor of Biology Science, Professor, Laboratory Chief, Chief Researcher1 Моисеев Андрей Николаевич, к. в. н., ветеринарный врач-консультант2
Moiseev Andrey N., Ph.D. in Veterinary Science, Veterinary Consultant2 Некрасова Нина Алексеевна, ветеринарный врач, научный сотрудник1 Nekrasova Nina A., Veterinarian, Researcher1 Муравьев Владимир Николаевич, к. в. н., зав. лабораторией вирусологии3 Muravjov Vladimir N., Ph.D. in Veterinary Science, Chief of Virology Laboratory3
Аннотация. В статье изложены результаты исследований по испытанию иммуномодулятора ронколейкина в качестве адъюванта вакцин с целью повышения иммунного ответа у коров-доноров при получении гипериммунных сывороток, используемых для профилактики и лечения вирусных респираторных заболеваний, а также при вакцинации глубокостельных коров и нетелей для насыщения молозива антителами.
Summary. The article presents research results on the test of the Roncoleukin immunomodulator in adjuvant vaccine to improve immune response in donor cows when receiving the hyperimmune sera used for the prevention and treatment of viral respiratory diseases, as well as vaccination ofpregnant cows for the saturation of colostrum antibodies.
Введение
Респираторные и желудочно-кишечные заболевания телят в ранний постнатальный период имеют широкое распространение и наносят значительный экономический урон молочному скотоводству. Этиопатогенез этих заболеваний еще не полностью изучен и представляет собой научную проблему.
Об активно приобретенном иммунитете можно судить не ранее, чем на второй неделе после рождения, поэтому иммунопрофилактика инфекционных заболеваний, которые возникают в первый месяц жизни телят, мо-
жет осуществляться комплексно по двум вариантам: 1) иммунизацией нетелей и глубокостельных коров (при этом обеспечивается пассивное поступление материнских антител в организм телят); 2) непосредственно введением телятам гипериммунных сывороток, полученных в результате иммунизации доноров [2, 3].
В целом давно замечено, что при одинаковой схеме иммунизации интенсивность выработки антител у животных различается. Активность иммунного ответа повышается при использовании иммуномодуляторов, ко-
торые обеспечивают физиологические параметры гомеостаза организма животного.
В настоящее время получают распространение эндогенные иммуномодуляторы, которые могут быть использованы для профилактики и лечения встречающихся дефектов иммунной системы крупного рогатого скота. Одним из препаратов, обладающим значительным иммунокорректирующим действием, является ронколейкин - аналог эндогенного интерлейкина-2, ключевого компонента цитокиновой сети, определяющего оптимальное функционирование всей системы иммунореактивности [1].
Ронколейкин используется в качестве адъюванта при вакцинации, при этом усиливается иммунный ответ на антигены. В сыворотке крови животных, которым одновременно с вакциной вводили ронколейкин, титры антител были выше в 1,5-3 раза по сравнению с теми, вакцинация которых осуществлялась без ронколейкина. Повышенный иммунный ответ на введение вакцины с ронколейкином наблюдался у 100 % обработанных животных.
Целью и задачами исследования являлось изучение и разработка методики применения ронколейкина при иммунизации глубокостельных коров, нетелей, а также животных-доноров при выработке гипериммунных сывороток. Нами решались следующие задачи: 1) определить уровни иммунного ответа у глубокостельных коров и нетелей при одновременном введении вакцины с ронколейкином и без него; 2) оценить влияние комплексной вакцинации ронколейкином на уровень титра антител при иммунизации коров-доноров.
«Дубровицы» экспериментального хозяйства ФГУП «Кленово-Чегодаево» Россельхозака-демии. На данной ферме были выявлены животные, серопозитивные по инфекционному ринотрахеиту (ИРТ) и парагриппу (ПГ-3).
Вирусологические исследования проводили в Республиканской ветлаборатории и параллельно в лаборатории вирусологии при Московской государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии имени К. И. Скрябина.
Сложившаяся в хозяйстве эпизоотическая ситуация вызвала потребность незамедлительной разработки систем мероприятий по ликвидации респираторных инфекционных заболеваний молодняка. Для профилактики инфекционных заболеваний была разработана схема иммунизации различных групп животных (рис. 1).
По причине того, что имеющиеся в продаже гипериммунные сыворотки изготовлены без учета инфекционного фона местных штаммов возбудителей заболеваний и не отвечали нашим требованиям по терапевтическому эффекту, было принято решение выработать гипериммунные сыворотки от животных собственного стада.
СХЕМА ИММУНИЗАЦИИ ЖИВОТНЫХ
Этап работы с коровами-донорами
Коровы-доноры I группа
I
Иммунизация с использованием ронколейкина
I
Исследование титра антител в гипериммунной сыворотке
I
Взятие крови для получения гипериммунной сыворотки
Получение гипериммунной сыворотки
Коровы-доноры II группа
Иммунизация без ронколейкина
I
Исследование титра антител в гипериммукной сыворотке
Взятие крови для получения гипериммукной сыворотки
Получение гипериммунной сыворотки
Этап работы с глубокостельными коровами и нетелями
Материалы и методы
Для реализации поставленных задач проведен научно-хозяйственный опыт с животными черно-пестрой голштинской породы фермы
Глубокостельные коровы Глубокостельные коровы
и нетели, I группа и нетели, II группа
Двукратная иммунизация с Двукратная иммунизация без
применением ронколеикина ронколеикина
1 1
Исследование титра антител в Исследование титра антител в
сыворотке крови сыворотке крови
Рис. 1. Схема проведения исследований.
В качестве доноров подбирали яловых коров, пригодных по состоянию здоровья. Для их иммунизации использовали вакцины против аденовирусных инфекций и 6-валентную Комбовак. Группе отдельных доноров перед иммунизацией подкожно вводили ронко-лейкин в дозе 1 тыс. МЕ/кг, а другой группе доноров ронколейкин не вводили. Через 2 месяца после начала иммунизации брали небольшой объем крови 6,0 мл для определения титра антител в лаборатории вирусологии МГАВМиБ им. К. И. Скрябина.
От доноров, имеющих высокий титр антител, брали по 3-4 литра крови для изготовления гипериммунной сыворотки, которая использовалась для профилактики вирусных респираторных заболеваний телят.
За 2 месяца до отела всех глубокостельных коров и нетелей двукратно иммунизировали вакциной Комбовак-6 (ИРТ - инфекционный ринотрахеит; ПГ-3 - парагрипп-3; ВД - вирусная диарея, РСВ - респираторно-синицитиальный вирус; КВ - короновирус-ная инфекция, РВ - ротавирусная инфекция), при этом дозы и периодичность введения соответствовали наставлению по применению вакцины. Отобранным для опыта животным вводили ронколейкин в дозе 1 тыс. МЕ/кг
подкожно перед каждой иммунизацией. Остальное поголовье являлось контрольной группой. Титр антител проверяли спустя 2 недели после 2-й иммунизации.
Результаты исследований
В процессе проведенных экспериментов установили, что применение ронколейкина в качестве адъюванта привело к значительному увеличению у доноров титра антител к вирусам (табл. 1).
Как следует из данных таблицы 1, в сыворотке крови у коров-доноров титр противовирусных антител при применении имму-номодулятора ронколейкина оказался выше в 2-4 раза.
При определении титра антител у глубокостельных коров и нетелей установили, что у животных опытной группы он оказался значительно выше. Иммунный ответ на введение вакцины с ронколейкином выявлялся у всех доноров, тогда как в группе контроля он был значительно ниже или не наблюдался вовсе (табл. 2).
Вакцинация глубокостельных коров и нетелей направлена, прежде всего, на создание колострального иммунитета у потомства. Весьма важно определить иммунный ответ
Таблица 1.
Титры антител в сыворотке крови коров-доноров при их гипериммунизации с ронколейкином
Группа Число доноров Титры антител на введение вакцины
ИРТ* ПГ-3** ВД*** Аденовирусные инфекции
Опытная 4 1 : 2048 - 1 : 4096 1 : 1024 - 1 : 2048 1 : 128 - 1 : 512 1 : 1024 - 1 : 4096
Контрольная 4 1 : 512 - 1 : 1024 1 : 512 - 1 : 1024 1 : 64 - 1 : 256 1 : 256 - 1 : 1024
Примечание: * - инфекционный ринотрахеит; ** - парагрипп-3; *** - вирусная диарея.
Таблица 2.
Титры антител в сыворотке крови глубокостельных коров и нетелей при их иммунизации с ронколейкином
Группа Число стельных Титры антител на введение вакцины
коров и нетелей ИРТ* ПГ-3** ВД*** РВ****
Опытная 4 1 : 512 - 1 : 4096 1 : 256 - 1 : 1024 1 : 32 - 1 : 128 1 : 64 - 1 : 128
Контрольная 8 1 : 8 - 1 : 512 1 : 32 - 1 : 256 1 : 2 - 1 : 64 1 : 2 - 1 : 32
Примечание: * - инфекционный ринотрахеит; ** - парагрипп-3; *** - вирусная диарея; **** - ротавирусная инфекция.
Таблица 3.
Титры колостральных антител в сыворотке крови телят на 10-14 день жизни
Группы коров-матерей Число телят-потомков Титры антител на введение вакцины
ИРТ* ПГ-3** ВД*** рв****
Опытная, с ронколейкином 4 1 : 128 - 1 : 2048 1 : 128 - 1 : 512 1 : 32 - 1 : 64 1 : 32 - 1 : 64
Контрольная, без ронколейкина 8 1 : 4 - 1 : 256 1 : 16 - 1 : 128 1:2 - 1 : 32 1 : 2 - 1 : 16
Примечание: * инфекционный ринотрахеит; ** - парагрипп-3; *** - вирусная диарея; **** - ротавирусная инфекция.
не только у вакцинированных матерей, но и уровень колостральных антител у новорожденных телят. Защитный эффект от атакующей микрофлоры зависит, главным образом, от величины титра антител в молозиве их матерей и объема его потребления телятами, а также абсорбции колостральных антител в желудочно-кишечном тракте приплода. В этой связи особое значение следует придавать своевременной выпойке молозива телятам, т. е. не позднее 2 часов после рождения.
Колостральный иммунитет оценивали по величине титров специфических вирусней-трализующих антител в сыворотке крови телят на 10-14 день их жизни. Контролем являлся молодняк, получавший молозиво от матерей, вакцинированных без ронколейкина. Сравнение титров колостральных антител в сыворотке крови телят, получавших молозиво от матерей, вакцинированных с ронколейки-ном и без него, выявило существенные различия. Титр специфических вируснейтрализу-ющих антител у телят, получавших молозиво от коров, иммунизированных с применением ронколейкина, оказался выше по сравнению со сверстниками, которым выпаивали молозиво от матерей, подвергнутых той же вакцинации, но без ронколейкина (табл. 3).
Для поддержания пассивного иммунитета телятам на 10-й и 20-й дни жизни вводили гипериммунную сыворотку в расчете по 20-30 мл на голову.
После окончания действия колостраль-ного и пассивного иммунитета телят с возраста 1,5-2 мес. трижды при интервале 20-25 дней вакцинировали препаратом Комбовак-Р (ИРТ - инфекционный ринотрахеит, П-3 - парагрипп-3, ВД - вирусная диарея, П - пастереллез).
Среднесуточный прирост живой массы у телок со дня рождения до 6 месяцев увеличился с 439 до 691 г. Аналогичная тенденция увеличения привесов и относительной живой массы прослеживалась и в последующие возрастные периоды.
Выводы
1. Использование ронколейкина в качестве адъюванта вакцин в системе профилактики вирусных респираторных заболеваний привело к выраженному увеличению титра антител в сыворотке крови испытуемых животных в ответ на введение вакцины, а также способствовало увеличению среднесуточных приростов живой массы телок и росту последующей молочной продуктивности по сравнению с предшествующим периодом.
2. Применение ронколейкина в качестве иммуномодулятора при получении гипериммунных сывороток позволило увеличить титр антител у коров-доноров группы опыта в 2-4 раза по сравнению с контрольной группой (без ронколейкина).
3. Титр противовирусных антител у глубокостельных коров и нетелей, вакцинированных с ронколейкином, оказался значительно выше по сравнению с глубокостельными одностадницами, которым этот препарат не вводился.
4. Введение ронколейкина при получении гипериммунных сывороток и иммунизации глубокостельных коров и нетелей привело к значительному повышению титра вирусней-трализующих антител у их потомства при выпаивании им молозива от матерей по сравнению с молодняком, получавшим молозиво от коров, провакцинированных без ронко-лейкина.
Список литературы
1. Моисеев, А. Н. Иммунокоррекция ронколейки-ном при инфекционных заболеваниях / А. Н. Моисеев, М. Островский // Агрорынок. - 2011. - № 1. - С. 6-8.
2. Некрасов, А. А. Иммунопрофилактика инфекционных заболеваний - один из путей повышения молочной продуктивности коров / А. А. Некрасов, Н. А. Попов, Н. Н. Сулима // Современные проблемы
ветеринарного обеспечения репродуктивного здоровья животных. Материалы международной научно-практ. конф., посвящ. 100-летию со дня рождения проф. В. А. Акатович. - Воронеж, 2009. - С. 286-290.
3. Некрасов, А. А. Здоровье животных - основа высокой продуктивности стада / А. А. Некрасов, Н. А. Попов, В. Т. Самохин, Н. А. Некрасова, Е .Г. Федотова // Главный зоотехник. - 2010. - № 9. - С. 51-58.
АППАРАТ ДЛЯ ИМПУЛьСНОй БИОСИНХРОНИЗИРОВАННОй ЭЛЕКТРОМАГНИТНОй ТЕРАПИИ «УМИ-05»
На протяжении многих лет клиника БНПЦ ЧИН и Институт Ветеринарной Биологии (Санкт-Петербург) использует в своей практике уникальный прибор - генератор низкочастотного магнитного импульсного излучения большой мощности «УМИ-05» (ранее «УИМТ-2», «УИМТ-3»). Данный прибор применяется для моно-или комплексной терапии целого ряда заболеваний, которые ранее считались неизлечимыми или очень тяжело поддавались лечению.
Основные направления применения «УМИ-05»
Заболевания мочевой системы: мочекаменная болезнь, пиелонефрит, поликистоз, цистит. Желчекаменная болезнь. Заболевания опорно-двигательного аппарата: остеохондроз позвоночника, дископатия, артрозо-артриты, бурсит, растяжение связок, ушибы, контрактуры суставов, миозит. Купирование эпилептических приступов и эпилептического статуса. Гипертен-зия. Отит гнойный. Отит аллергический
Стандартный курс лечения
• 10 сеансов по 30-50 импульсов на одну патологическую область. Мощность 50-80 % . Курс можно повторить с перерывом в 10 дней.
• Профилактический курс для животных группы риска (остеохондроз, МКБ и пр.) - 7-10 сеансов с интервалом 6 месяцев.
• Применение прибора не вступает в противоречие с использованием фармакологических и хирургических методов лечения.
• Магнитотерапию не следует проводить на области тела, содержащей металлоконструкции (например, штифты или пластины для остеосинтеза).
Экономика
• Быстрая окупаемость прибора.
• Минимальная затрата рабочего времени: длительность одного сеанса на одну патологическую зону - 2-3 минуты.
• Высокая эффективность лечения, полное излечение или введение животного в стойкую ремиссию по всем перечисленным заболеваниям гарантируют значительное увеличение рейтинга клиники в целом и приток новых клиентов.
Стоимость прибора 17 500 руб. Заказать УМИ-05 для ветеринарии можно по тел./факсу: (812) 232-55-92, 927-55-92; по e-mail: [email protected] Сайт: www.invetbio.spb.ru