CC BY
22
УДК 618.14-002.2
ЭФФЕКТИВНОСТЬ ОЗОНО-БАКТЕРИОФАГОТЕРАПИИ В КОРРЕКЦИИ ОКСИДАТИВНОГО СТРЕССА У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ЭНДОМЕТРИТОМ
'Ходосова Т.Г., 2ГречканевГ.О., 2Качалина Т.С., 3Клементе АпумайтаХ.М., 2Сошников А.В., 2ГагаеваЮ.А., Мухина Е.С., 2Щербак Е.В., 2Курмангулова И.М., 2Гулян Ж.И., 2Кокова Р.Р., 2Минкоилов З.А.
ТАУ КО Региональный перинатальный центр, Калининград, Россия (236023, г. Калининград, Каштановая аллея, д. 14), e-mail: [email protected]
2ФГБОУ ВО «Приволжский исследовательский медицинский университет» Минздрава России, Нижний Новгород, Россия (603995, г. Нижний Новгород, пл. Минина и Пожарского, д. 10/1) 3ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России, Москва, Россия (119991, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2)
Цель исследования: установить воздействие озоно-бактериофаготерапии на перекисное окисление ли-пидов (ПОЛ) и антиоксидантную систему защиты (АОСЗ), а также рецептивность эндометрия у больных хроническим эндометритом.
Обследовано 100 пациенток в возрасте от 22 до 42 лет с гистологически подтвержденным хроническим эндометритом и различными нарушениями репродуктивной функции в анамнезе. 50 пациенткам проводилась озонотерапия в виде внутриматочных орошений озонированным физиологическим раствором с последующим введением в полость матки препарата комплексного пиобактериофага курсом 5 процедур через день и внутривенных капельных инфузий озонированного физиологического раствора. Группа сравнения (50 пациенток) получала традиционное лечение. Оценка влияния различных вариантов лечения на систему ПОЛ-АОСЗ проводилась нами методом биохемилюминометрии по показателям Imax, S, tg2â. Исследовались также уровни продуктов ПОЛ - диеновых конъюгатов (ДК), триеновых конъюгатов (ТК) и оснований Шиффа. Оценка АОСЗ проводилась на основе анализа активности анти-оксидантных ферментов каталазы (Кат) и супероксиддисмутазы (СОД). Данные исследования проводились до начала лечения и через 1 месяц после его завершения.
Оценка влияния различных вариантов лечения на рецепторные свойства эндометрия, полученного путем пайпель-биопсии в «окно имплантации», проводилась гистологическими и иммуногистохимиче-скими методами до лечения и через 2 месяца после его окончания.
Было установлено, что исходные значения изучаемых показателей отличались от нормальных - имели место усиление липопероксидации и сниженный уровень антиоксидантных ферментов. Под влиянием озоно-бактериофаготерапии произошло снижение Imax на 50,1%, S на 33,9%, tg2â на 45%. Молекулярные продукты ПОЛ также уменьшились: ДК на 35,9%, ТК на 32,7%, ОШ на 45%. При этом активность Кат повысилась на 27%, а СОД - на 32%, что имеет важное патогенетическое значение для успеха лечения хронического эндометрита. Традиционное лечение такого эффекта не имело. Исходно у всех пациенток уровень экспрессии рецепторов половых стероидов (эстрогенов и прогестерона) был снижен как в железах эндометрия, так и в строме. Под влиянием озоно-бактериофаготерапии произошло восстановление экспрессии рецепторов к эстрогенам и прогестерону у большинства больных. Во II группе позитивные изменения имели значительно менее выраженный характер.
При использовании озоно-бактериофаготерапии в комплексном лечении хронического эндометрита достигается выраженный эффект стимуляции активности антиоксидантных ферментов Кат и СОД, что имеет следствием подавление синтеза свободных радикалов. Кроме того, у больных достигается улучшение морфофункциональных параметров эндометрия и, в частности, восстановление его рецептивных свойств.
Ключевые слова: хронический эндометрит, перекисное окисление липидов, антиоксидантная система защиты, рецептивность эндометрия.
EFFECTIVENESS OF OZONE-BACTERIOPHAGE THERAPY IN THE CORRECTION OF OXIDATIVE STRESS IN PATIENTS WITH CHRONIC ENDOMETRITIS
'Hodosova T.G.,2Grechkanev G.O., 2Kachalina T.S., 3Klemente Apumajta H.M., 2Soshnikov A.V., 2Gagaeva Yu.A., 2Muhina E.S., 2Sherbak E.V, 2Kurmangulova I.M., 2Gulyan Zh.I., 2Kokova R.R., 2Minkoilov Z.A.
1 Kaliningrad Region State Autonomic Institution «Regional perinatal center», Kaliningrad, Russia (236023, Kaliningrad, Kashtanovaya Ave, 14), e-mail: [email protected]
2Privolzhsky Research Medical University, Nizhny Novgorod, Russia (603995, Nizhny Novgorod, Minin and Pozharsky Sq., 10/1)
3 I.M. Sechenov First Moscow State Medical University, Moscow, Russia (119991, Moscow, Trubetskaya St., 8/2)
The aim of the study is to establish the effect of ozone-bacteriophage therapy on lipid peroxidation (LPO), antioxidant protection system (AOS) and endometrial receptivity in patients with chronic endometritis. 100 patients aged from 22 to 42 years old with histologically confirmed chronic endometritis and various disorders of the reproductive function in history have been examined. 50 patients (group I) underwent ozone therapy in the form of intrauterine irrigations with ozonated saline solution with subsequent introduction of the drug complex of pyobacteriophage into the uterus and intravenous drop infusion of ozonized physiological solution. 50 patients of group II received traditional treatment. Assessment of the impact of different treatment options on the system of LPO-AOS was carried out with the help of biochemiluminometry according to Imax, S, tg2a indicators. Levels of products of diene conjugates (DC), triene conjugates (TC), and Schiff bases (SHB) were also investigated. AOS was evaluated on the basis of the analysis of the activity of antioxidant enzymes catalase (Cat) and superoxide dismutase (SOD). Evaluation of the effect of different treatment options on the morphological structure and receptor properties of the endometrium obtained by pipel biopsy in the «implantation window» was carried out by histological and immunohistochemical methods before treatment and 2 months after it. It was found that the initial values of the studied parameters differed from the normal ones - there was an increase in lipoperoxidation and a reduced level of antioxidant enzymes. Under the influence of ozone-bacteriophage therapy Imax decreased on 50,1%, S on 33,9%, tg2a on 45%. Molecular peroxidation products also declined: DK on 35,9%, TC on 32,7%, SHB on 45%. At the same time, Cat activity increased by 27%, and SOD - by 32%, which is important for the success of the pathogenetic treatment of chronic endometritis. Traditional treatment had no such effect. Under the influence of ozone-bacteriophage therapy, there was a decrease in the inflammatory reaction of the endometrium and a parallel restoration of receptor expression. In group II, positive changes were much less pronounced.
When using ozone-bacteriophage therapy in complex treatment of chronic endometritis, a pronounced effect of stimulation of the activity of Cat and SOD antioxidant enzymes is achieved, which results in the suppression of the synthesis of free radicals. Also, an improvement in the morpho-functional parameters of the endometrium is achieved in patients with ozone-bacteriophage therapy.
Key words: chronic endometritis, lipid peroxidation, antioxidant protection system, endometrial receptivity.
Введение
Течение воспалительных заболеваний органов малого таза у женщин имеет сегодня ряд отличительных признаков, среди которых склонность к хроническому, латентному течению с вовлечением в патологический процесс различных параметров гомеостаза, в особенности иммунной и эндокринной систем [1, 2]. Среди неопухолевых патологических процессов эндометрия велико значение хронического эндометрита (ХЭ), своеобразного клинико-морфологическо-го синдрома, при котором выраженность альтерации слизистой матки коррелирует со степенью нарушений циклических преобразований и рецептивности эндометрия [3, 4]. Проблема ХЭ почти исключительно актуальна для женщин репродуктивного возраста, клинически она реализуется в виде невынашивания беременности, бесплодия, неудачных попыток экстракорпорального оплодотворения и переноса эмбриона (ЭКО-ПЭ) [5, 6], а его лечение представляет собой важнейшую задачу [7, 8]. Очевидна необходимость наряду с санацией полости матки при ее микробной контаминации и персистирующем воспалительном процессе корригировать антиоксидантную недостаточность и оксидативный стресс, присущие воспалительным заболеваниям гениталий вообще и ХЭ в частности [9-14].
Учитывая ранее полученные экспериментальные данные о возможности сочетанного использования озона и бактериофаготерапии [12, 15] и имеющийся клинический опыт [16], нами было предпринято исследование влияния данного метода лечения на оксидативный статус организма и рецептив-ность эндометрия у данной категории пациенток.
Целью исследования явилось: сопоставить характер воздействия озоно-бактериофаготерапии и традиционного лечения на перекисное окисление липидов (ПОЛ), антиоксидантную систему защиты (АОСЗ) и рецептивность эндометрия у больных хроническим эндометритом.
Материал и методы
В нашем исследовании приняли участие 100 пациенток в возрасте от 22 до 42 лет с гистологически подтвержденным хроническим эндометритом. Нарушения репродуктивной функции, а именно бесплодие, выкидыши, неразвивающиеся беременности и неудачные попытки ЭКО и ПЭ, были отмечены в анамнезе у всех пациенток.
При микробиологическом исследовании содержимого полости матки были обнаружены ассоциации аэробных условно-патогенных микроорганизмов, характеризующихся низкой чувствительностью к антибактериальным препаратам.
Больные были случайным образом разделены на 2 равные по количеству группы. Основные медико-социальные показатели между ними не отличались.
В I группе (50 пациенток) лечение предусматривало проведение внутриматочных орошений озонированным физиологическим раствором. Количество его в расчете на одну процедуру составляло 400 мл (курс состоял из 5 процедур). Для приготовления озо-нонасыщенного раствора использовалась концентрация 5000 мкг/л как безопасная по отношению к ткани эндометрия. Для усиления терапевтического эффекта после орошения внутриматочно вводился препарат комплексного пиобактериофага, а смоченный им тампон устанавливали во влагалище. В составе данной методики также присутствовали внутривенные капельные инфузии озонированного физиологического раствора. Избранная для них насыщающая концентрация 1200 мкг/л была ранее всесторонне обоснована как эффективная по отношению к воспалительным процессам женской половой сферы [11].
Во II группе (50 пациенток) использовали стандартные подходы, включающие антибактериальную, витаминотерапию, метаболическую коррекцию, физиопроцедуры.
Для характеристики воздействия того или иного метода лечения на перекисный гомеостаз использо-
вали биохемилюминометрические показатели Imax, S и tg2a, дополненные биохимическими параметрами, - оценивали диеновые конъюгаты (ДК), три-еновые конъюгаты (ТК) и основания Шиффа (ОШ). Поскольку антиоксидантный потенциал организма находится в динамическом взаимодействии с окислительным статусом, изучали также активность катала-зы (Кат) и супероксиддисмутазы (СОД).
Рецептивность эндометрия, полученного с помощью пайпель-биопсии в «окно имплантации», определяли иммуногистохимическим (ИГХ) методом с использованием мышиных моноклональных антител к эстрогеновым рецепторам а (клон 1D5 «DAKO») и прогестероновым рецепторам (клон 636 «DAKO»). Коэффициент экспрессии эстрогеновых и прогестероновых рецепторов расценивали: 0-10 баллов - отсутствие экспрессии, 11-100 баллов - слабая экспрессия, 101-200 баллов - умеренная экспрессия, 201-300 баллов - выраженная экспрессия. В работе использованы первичные антитела компании «Spring Bioscience» в разведении «ready to use».
С учетом определенной инертности перечисленных показателей интервал между исследования-
ми составлял 1 месяц (исходно анализы проводились до начала терапии), повторное иммуногистохимиче-ское исследование проводили также в «окно имплантации» через 2 месяца после окончания лечения.
Статистическую обработку материала проводили с помощью пакетов прикладных программ Statistica 6.0, Biostat, Microsoft Exсel.
Исследование получило одобрение локального этического комитета НижГМА в 2015 году.
Результаты и их обсуждение
Клинико-лабораторное исследование показало высокую санирующую активность озоно-бактерио-фаготерапии - через 1 месяц после лечения посевы у 100% пациенток I группы стали стерильными, жалобы на патологические выделения перестали беспокоить. Во II группе у 20% женщин клинические признаки ХЭ сохранялись.
Исследование, проведенное до лечения как методом биохемилюминометрии, так и с помощью биохимических анализов, выявило значительную интенсификацию липопероксидации (табл.1).
Влияние различных методов лечения на показатели биохемилюминомет ии
Группы больных I тах, ту/сек. 8, ту/сек.
Долечения 2,52±0,13 15,32±0,08 0,62±0,03 I группа (п=50) После лечения 1,25±0,04* 10,12±0,04* 0,34±0,01*
Таблица 1
Долечения 2,76±0,07 14,87±0,08 0,58±0,02 II группа (п=50) После лечения 2,52 ±0,09* 14,65±0,07х 0,69±0,03 х
- достоверность различий (р<0,05) показателя по отношению к исходному достоверность различий (р<0,05) показателя II группы по отношению к показателю I группы
Показатель I max составил 2,52±0,13 mv/сек в I группе и 2,76±0,07 во II группе (р>0,05) (норма: 1,33±0,08 mv/сек.). Показатель S в I группе оказался на уровне 15,32±0,08 mv/сек., во II - 14,87±0,08 mv/ сек. (р>0,05) (норма: 13,2±0,7 mv/сек.); tg 2 альфа в
I группе составил 0,62±0,03, во II группе - 0,58±0,02, (р>0,05) (норма: 0,32±0,05).
ДК, являющиеся первичными продуктами ПОЛ, в I группе были 0,39±0,01 ед.опт.пл./мг ОЛ, во
II - 0,41±0,03 ед.опт.пл./мг ОЛ (р>0,05) (нормативные значения 0,22±0,02 ед.опт.пл./мг общ. липидов). ТК, соответственно, составили 0,049±0,003 ед.опт. пл./мг ОЛ и 0,052±0,004 ед.опт.пл./мг ОЛ (р>0,05) (норма: 0,027±0,002 ед.опт.пл./мг общ. липидов). Содержание наиболее опасных для мембран клеток конечных продуктов липопероксидации оказалось: в I группе 20,47±0,12 усл.ед./мг ОЛ, во II - 22,32±0,11 усл.ед./мг ОЛ (р>0,05) (норма: 15,3±0,12 отн. ед./мг общ. липидов).
Вполне ожидаемыми оказались данные о состоянии антирадикальной защиты у больных хроническим эндометритом, который, как и большинство затяжных воспалительных процессов, характеризуется снижением антиоксидантного потенциала.
Действительно, оба фермента, составляющие в норме львиную долю АОСЗ, были снижены. Кат (норма: 508,0±18,6) в I группе была 412,0±5,7 Ед/г Нв в мин., во II - 403,4±6,3 Ед/г Нв в мин. (р>0,05).
СОД (норма: 586,0±22,4 Ед/г Нв в мин.) в I группе составила 392,2±5,7 Ед/г Нв в мин., во II - 386,5±9,1 Ед/г Нв в мин. (р>0,05). Уменьшение активности данного фермента было установлено, соответственно, у 38 (95%) и 40 (87,5%) женщин.
В совокупности эти данные свидетельствуют об ослаблении антиокислительного потенциала организма и усилении липопероксидации на фоне даже латентно протекающего воспалительного процесса, что может служить почвой для клинической манифестации, спровоцированной какими-либо внешними факторами [1, 5, 14, 16].
Принципиальными оказались эффекты сравниваемых методов лечения на исследуемые показатели. В I группе I max уменьшился до 1,25±0,04 mv/ сек. (р<0,05), т.е. на 50,1%, S снизился до 10,12±0,04 mv/сек., т.е. на 33,9% (p<0,05), tg2a сократился до 0,34±0,01, т.е. на 45% (p<0,05).
У пациенток II группы существенной динамики в показателях биохемилюминометрии не наблюдалось, что позволяет говорить о преимуществах озо-но-бактериофаготерапии уже на основании данных этого скринингового исследования.
Полученная картина приобрела более развернутый характер при сопоставлении исходных и после лечения значений молекулярных продуктов ПОЛ (табл. 2). Выяснилось, что содержание в крови ДК в I группе понизилось на 35,9% до 0,25±0,02 ед.опт.пл./ мг ОЛ (р<0,05).
Таблица 2
Влияние различных методов лечения на молекулярные продукты ПОЛ
Группы больных ДК, ТК, ОШ,
ед.опт.пл./мг ОЛ ед.опт.пл./мг ОЛ усл.ед./мг ОЛ
До лечения 0,39±0,01
I группа (п=50) После лечения 0,25±0,02*
Долечения 0,41±0,03
II группа (п=50) После лечения 0,39±0,05х
* - достоверность различий (р<0,05) показателя по отношению к исходному х - достоверность различий (р<0,05) показателя II группы по отношению к показателю I группы
0,049±0,003 0,033±0,002* 0,052=1=0,004 0,051±0,005х
20,47^0,12 11,16±0,08* 22,32±0,11 20,78±0,14х
ТК в I группе стали меньше на 32,7% (р<0,05) и достигли уровня 0,033±0,002 ед.опт.пл./мг ОЛ. Наиболее позитивным для характеристики данного аспекта терапии явилось снижение в I группе ОШ на 45% до 11,16±0,08 усл.ед./мг ОЛ (рис.1).
усл.ед./мг ОЛ 25
До лечения После лечения
ВI группа
НН группа
Рис.1. Влияние различных методов лечения на уровень ОШ в крови больных (х - достоверность различий (р<0,05) показателя II группы по отношению к показателю I группы)
Во II группе больных динамика изучаемых показателей была минимальной.
Поскольку I группа пациенток в составе терапии не получала экзогенных антиоксидантов, эффект подавления активности липопероксидации может быть связан только с усилением эндогенной АОСЗ. Как показало сопоставление изучаемых параметров до и через 1 месяц после лечения в I группе, Кат повысилась на 27% до 524,5±9,6 Ед/г Нв в мин. (р<0,05), а СОД - на 32% до 517,44±12,0 Ед/г Нв в мин. (р<0,05) (рис. 2, 3).
Ед/г НЬ/мин. 600
500
400
300
До лечения
После лечения
-■♦--I группа
■ II группа
Рис.2. Влияние различных методов лечения на уровень Кат в крови больных (х - достоверность различий (р<0,05) показателя II группы по отношению к показателю I группы)
Ед/г НЬ/мин. 600
500
400
300
До лечения После дечения
-■♦--I группа —К— II группа
Рис. 3. Влияние различных методов лечения на уровень СОД в крови больных (х - достоверность различий (р<0,05) показателя II группы по отношению к показателю I группы)
Во II группе, несмотря на антиоксидантную фармакологическую поддержку, антиоксидантные ферменты не меняли свою активность.
Поскольку при всей значимости нормализации баланса ПОЛ-АОСЗ ключевым моментом патогенеза хронического эндометрита является нарушение рецептивное™, этому уделяли особое внимание.
Исходно нами было установлено, что у абсолютного большинства больных обеих групп в железах и в строме эндометрия имела место сниженная экспрессия к половым стероидам. В I группе доля пациенток с низкой экспрессией к эстрогенам в железах эндометрия составила 42 (84%), во II - 40 (80%) (р>0,05), женщин с низкой экспрессией к прогестерону оказалось, соответственно, 39 (78%) и 36 (72%) (р>0,05) пациенток. Умеренная экспрессия к эстрогенам в I группе больных была у 8 (16%), во II - у 10 (20%) (р>0,05), умеренная экспрессия к прогестерону, соответственно, была выявлена у 11 (22%) и 14 (28%) женщин (р>0,05). Пациенток с выраженной экспрессией к эстрогенам и прогестерону не было.
Аналогичная картина наблюдалась и в стро-ме эндометрия. Так, в I группе было выявлено 38 (76%) пациенток с низкой экспрессией к эстрогенам, во II группе их было 39 (78%) (р>0,05). Количество больных с низкой экспрессией к прогестерону оказалось также сопоставимым - 35 (70%) и 36 (72%) (р>0,05) пациенток. Умеренной в строме была экспрессия к эстрогенам в I группе у 12 (24%) больных, во II группе - у 14 (28%) (р>0,05), умеренная экспрессия к прогестерону определялась, соответственно, у 15 (26%) и 14 (28%) женщин (р>0,05). Как и при исследовании желез, в строме выраженной экспрессии к эстрогенам и прогестерону обнаружено не было.
Таким образом, в обеих группах больных ключевым нарушением, типичным для пациенток с хроническим эндометритом, было нарушение рецептив-ности эндометрия к главным стероидным гормонам яичников, отвечающих за циклическую трансформацию эндометрия и его готовность к адекватной имплантации бластоцисты. Достоверные различия в этом аспекте между ними отсутствовали.
Исследование, проведенное через 2 месяца после завершения лечения, показало отличия во всех исследуемых показателях в зависимости от проведенной терапии. В результате озоно-бактериофаго-терапии у 25 (50%) пациенток в железах отмечалась умеренная экспрессия к эстрогенам и у 27 (54%) к прогестерону. У 11 (22%) пациенток в железах наблюдалась высокая экспрессия к эстрогенам и у 10 (20%) к прогестерону. Низкая экспрессия в железах сохранялась у 14 (28%) к эстрогенам и у 13 (26%) к прогестерону.
Аналогичными, хотя и несколько менее выраженными, были изменения в строме эндометрия -высокая экспрессия была отмечена к эстрогенам в 12 (24%) и прогестерону в 9 (18%) случаях. Умеренная экспрессия к эстрогенам в строме наблюдалась после озоно-бактериофаготерапии у 24 (48%) пациенток, к прогестерону - у 23 (46%) женщин. Доля пациенток с низкой экспрессией к эстрогенам сократилась в I группе до 17 (34%), к прогестерону - до 18 (36%).
Таким образом, наибольшей по количеству в результате комплексной озоно-бактериофаготерапии оказалась когорта женщин с умеренной экспрессией к эстрогенам и прогестерону, причем как в железах, так и в строме эндометрия. Анализ индивидуальных данных показал, что ожидаемо происходило перераспределение из когорты пациенток с низкой экспрессией к половым стероидам в когорту с умеренной экспрессией, а из когорты с умеренной экспрессией в когорту с высокой. Объединив когорты женщин с умеренной и высокой экспрессией как прогностически благоприятные в аспекте восстановления функциональности эндометрия, мы получили отчетливую тенденцию к позитивному результату лечения в
1 группе. Во II группе больных динамика исследуемых показателей была слабой.
Расширение когорты пациенток с умеренной экспрессией к эстрогенам в железах во II группе больных было менее значительным - до 15 (30%), к прогестерону - до 18 (36%) женщин. Пациенток с выраженной экспрессией к эстрогенам и прогестерону в железах стало, соответственно, 5 (10%) и 4 (8%). Низкая экспрессия рецепторов эстрогенов имела место у 30 (60%) женщин, прогестерона - у 4 (8%) больных.
Еще менее выраженной была динамика в строме эндометрия - умеренная экспрессия по окончании лечения была зафиксирована к эстрогенам во II группе у 15 (30%), к прогестерону - у 13 (26%) женщин. Наиболее редко отмечалась высокая экспрессия к эстрогенам - в 4 (8%) и к прогестерону - в 3 (6%) случаях. Наиболее часто фиксировалась сниженная экспрессия рецепторов эстрогенов - 31 (62%) случай и прогестерона - 34 (68%). Объединение этих результатов позволило говорить об удовлетворительной экспрессии после традиционного лечения к рецепторам эстрогенов и прогестерона в железах менее чем у 1/2, а в строме - лишь у 1/3 пациенток.
В I группе коэффициент экспрессии к рецепторам эстрогенов в железах эндометрия (рис. 4) увеличился с 85,3±9,6 до 170,3±13,7 балла, т.е. в
2 раза (р<0,05), к прогестерону (рис. 5) с 101,3±8,5 до 189,7±14,4 балла, т.е. в 1,87 раза (р<0,05). При индивидуальном анализе оказалось, что рост экспрессии как к эстрогеновым, так и прогестероно-вым рецепторам имел место только у пациенток с исходно низкой или умеренной экспрессией. Во II группе больных динамика коэффициента экспрессии к рецепторам эстрогенов в железах эндометрия была однонаправленной, но значительно менее выраженной - увеличение произошло с 95,2±7,4 до 115,8±7,0 балла, т.е. на 21% (р<0,05) (рис. 4, 5). В результате коэффициент экспрессии к рецепторам эстрогенов в железах эндометрия в I группе оказался выше того же показателя во II группе в 1,48 раза (р<0,05). Во II группе изменения коэффициента экспрессии к прогестерону в железах также оказались не столь выражены - с исходных 105,4±6,2 до 122,0±9,3, т.е. на 21,5% (р<0,05), в результате чего данный показатель в I группе оказался выше, чем во II, в 1,55 раза (р<0,05).
До лечения После лечения
□ I группа □ II группа
Рис. 4. Влияние различных методов лечения на коэффициент экспрессии к эстрогенам в железах эндометрия у пациенток с хроническим эндометритом (* - достоверность различий (р<0,05) показателя I группы по отношению к показателю II группы)
До лечения После лечения
в| группа nil группа
Рис. 5. Влияние различных методов лечения на коэффициент экспрессии к прогестерону в железах эндометрия у пациенток с хроническим эндометритом (* - достоверность различий (р<0,05) показателя I группы по отношению к показателю II группы)
Изменения коэффициента экспрессии к стероидным гормонам яичников в строме эндометрия были аналогичными. После лечения с использованием озоно-бактериофаготерапии коэффициент экспрессии к рецепторам эстрогенов в I группе увеличился с 96,5±10,2 до 178,2±9,9, т.е. на 85,4% (р<0,05), к прогестерону - с 104,2±5,7 до 185,3±8,6, т.е. на 77,9% (р<0,05). Анализ индивидуальных показателей выявил, что наибольшая динамика увеличения коэффициента экспрессии рецепторов как эстрогенов, так и прогестерона наблюдалась у больных с низкими исходными значениями.
Во II группе при сходной тенденции изменения коэффициента экспрессии эстрогеновых и проге-стероновых рецепторов в строме данные изменения были значительно менее выражены. Так, коэффициент экспрессии к рецепторам эстрогенов во II группе увеличился с 92,1±6,0 до 134,5±7,2, т.е. на 45,7% (р<0,05), что в 1,32 раза ниже результата, достигнутого в I группе пациенток.
Коэффициент экспрессии к рецепторам прогестерона в строме во II группе увеличился, к прогестерону с 111,3±2,5 до 125,6±3,4, т.е. на 12,6% (р<0,05). Данный показатель оказался в итоге ниже, чем в I группе, в 1,48 раза (р<0,05).
Таким образом, на основе сравнительного анализа эффективности озоно-бактериофаготерапии традиционного лечения в отношении восстановления структуры и функциональных свойств эндометрия у пациенток с хроническим эндометритом можно сделать вывод о преимуществах первой. Каждый из компонентов предлагаемой нами методики является ее неотъемлемой частью [15] - озон (как за счет внутри-маточного применения, так и внутривенных инфузий) оказывает прямое антимикробное действие [11], снижает перекисный стресс и улучшает кровообращение в бассейне маточных артерий [16], способствуя тем самым обеспечению эндометрия пластическим материалом и его полноценной регенерации и функционированию, включая улучшение рецептивности. Учитывая относительно невысокие концентрации озона, используемые для приготовления физраствора с целью внутриматочных орошений, бактериофаг, по нашему мнению, необходим для максимальной реализации саногенного эффекта проводимого лечения. Достижение описанных эффектов является чрезвычайно значимым с точки зрения этиопатогенеза ХЭ, восстановления рецептивности эндометрия [17, 18] и в конечном счете нормализации репродуктивной функции женщины.
Заключение
При использовании озоно-бактериофаготера-пии в комплексном лечении хронического эндометрита достигается выраженный эффект стимуляции активности антиоксидантных ферментов каталазы и супероксиддисмутазы, что имеет следствием подавление синтеза свободных радикалов. Кроме того, у больных достигается улучшение морфофункцио-нальных параметров эндометрия и, в частности, восстановление его рецептивных свойств.
Литература/References
1. Мальцева Л.И., Смолина Г.Р., Шарипова Р.И., Ба-гаева М.И., Петрянина Е.В., Стовбун С.В. Хронический эндометрит в практике акушера-гинеколога. // Российский вестник акушера-гинеколога. 2015. № 15(5). С. 102-105. [Mal'tseva L.I., Smolina G.R., Sharipova R.I., Bagaeva M.I., Petryanina E.V., Stovbun S.V. Hronicheskii endometrit v praktike akushera-ginekologa. Rossiiskii vestnik akushera-ginekologa. 2015; 15(5): 102-105 (In Russ.)].
2. Bartlett E.C., Levison W.B., Munday P.E. Pelvic inflammatory disease. BMJ. 2013. 346.
3. Кузнецова И.В., Землина Н.С., Рашидов Т.Н. Хронический эндометрит как исход инфекционного воспалительного заболевания матки. // Гинекология. 2016. № 18(2). С. 44-50. [Kuznetsova I.V., Zemlina N.S., Rashidov T.N. Hronicheskii endometrit kak ishod infektsionnogo
vospalitel'nogo zabolevaniya matki. Ginekologiya. 2016; 18(2): 44-50 (In Russ.)].
4. Kitaya K., Yasuo T., Tada Y., Hayashi T., Iwaki Y., Karita M., Funabiki M., Taguchi S., Spillers D., Nakamura Y., Yamada H. Unusual inflammation in gynecologic pathology associated with defective endometrial receptivity. Histol Histopathol. 2014; 29(9): 1113-1127.
5. Мотовилова Т.М., Качалина Т.С., Зиновьева О.С., Богатова М.Е., Чикалова К.И., Козлова Н.А. Место эндоме-триопатии в проблеме репродуктивных неудач и варианты ее коррекции. //Медицинский альманах. 2017. № 6. С. 80-83. [Motovilova T.M., Kachalina T.S., Zinov'eva O.S., Bogatova M.E., Chikalova K.I., Kozlova N.A. Mesto endometriopatii v probleme reproduktivnyh neudach i varianty ee korrektsii. Meditsinskii al'manakh. 2017; 6: 80-83 (In Russ.)].
6. Cicinelli E., Matteo M., Tinelli R., Lepera A., Alfonso R., Indraccolo U., Marrocchella S., Greco P., Resta L. Prevalence of chronic endometritis in repeated unexplained implantation failure and the IVF success rate after antibiotic therapy. Hum Reprod. 2015; 30: 323-330.
7. Замыслова В.П., Боровкова Л.В., Мотовилова Т.М. Низкочастотная электромагнитная терапия в комплексном лечении хронического эндометрита, ассоциированного c бактериально-вирусной флорой у пациенток с невынашиванием беременности. // Медицинский альманах. 2017. № 6. С. 32-35. [Zamyslova V.P., Borovkova L.V., Motovilova T.M. Nizkochastotnaya elektromagnitnaya terapiya v kompleksnom lechenii hronicheskogo endometrita, assotsiirovannogo c bakterial'no-virusnoi floroi u patsientok s nevynashivaniem beremennosti. Meditsinskii al'manah. 2017; 6: 32-35 (In Russ.)].
8. Кузнецова И.В., Землина Н.С., Рашидов Т.Н., Коваленко М.А. Проблема тонкого эндометрия и возможные пути ее решения. Эффективная фармакотерапия. // Акушерство и гинекология. 2015. № 5. С. 42-49. [Kuznetsova I.V., Zemlina N.S., Rashidov T.N., Kovalenko M.A. Problema tonkogo endometriya i vozmozhnye puti ee resheniya. Effektivnaya farmakoterapiya. Akusherstvo i ginekologija. 2015; 5: 42-49 (In Russ.)].
9. Виноградова О.П., Кузнецова М.Н. Компоненты антиоксидантной защиты при воспалительных заболеваниях органов малого таза в гинекологии. // Материалы VII Регионального научного форума «Мать и дитя». Геленджик, 2014. С. 192-193. [Vinogradova O.P., Kuznetsova M.N. Komponenty antioksidantnoi zashhity pri vospalitel'nyh zabolevaniyah organov malogo taza v ginekologii. Proceedings of the VII Regional scientific forum «Mat' i ditya». Gelendzhik, 2014:192-193 (In Russ.)].
10. Городецкая О.С., Чандра-Д'Мелло Р., Гречканев Г. О. Показатели перекисного окисления липидов и анти-оксидантной системы защиты у пациенток с хроническим неспецифическим эндометритом. // Вятский медицинский вестник. 2010. № 4. С. 27-28. [Gorodetskaya O.S., Chandra-D'Mello R., Grechkanev G.O. Pokazateli perekisnogo okisleniya lipidov i antioksidantnoi sistemy zashhity u patsientok s hronicheskim nespetsificheskim endometritom. Vyatskii meditsinskii vestnik. 2010; 4: 27-28 (In Russ.)].
11. Гречканев Г.О. Технологии озонотерапии в акушерстве и гинекологии. Н. Новгород. Изд-во НижГМА. 2016. 384 с. [Grechkanev G.O. Tehnologii ozonoterapii v
akusherstve i ginekologii. N. Novgorod; NizhGMA. 2016. 384 p. (In Russ.)].
12. Гречканев Г.О., Мотовилова Т.М., Гаревская Ю.А., Чурикова М.С., Бойченко Т.А., Никишов Н.Н. Анти-оксидантная терапия - важнейший компонент патогенетического лечения воспалительных заболеваний. // Врач. 2015. № 3. С. 54-58. [Grechkanev G.O., Motovilova T.M., Garevskaja Yu.A., Churikova M.S., Boichenko T.A., Nikishov N.N. Antioksidantnaya terapiya - vazhneishii komponent patogeneticheskogo lecheniya vospalitel'nyh zabolevanii. Vrach, 2015; 3: 54-58 (In Russ.)].
13. Кузнецова И.В. Роль окислительного стресса и антиоксидантной защиты в репродукции человека. // Акушерство и гинекология. 2016. № 3. С. 116-121. [Kuznetsova I.V. Rol' okislitel'nogo stressa i antioksidantnoi zashhity v reproduktsii cheloveka. Akusherstvo i ginekologiya. 2016;3:116-121 (In Russ.)].
14. Столярова УВ., Рогожина И.Е., Хворостухи-на Н.Ф. Особенности иммунных и оксидантных нарушений у больных с воспалительными заболеваниями органов малого таза. // Материалы V Регионального научного форума «Мать и дитя». Геленджик, 2011. С. 269270. [Stolyarova U.V., Rogozhina I.E., Hvorostuhina N.F. Osobennosti immunnyh i oksidantnyh narushenii u bol'nyh s vospalitel'nymi zabolevaniyami organov malogo taza. Proceedings of the V Regional scientific forum «Mat' i ditya». Gelendzhik, 2011:269-270 (In Russ.)].
15. Гречканев Г. О., Мотовилова Т.М., Горшунова Л.Г., Пономарева И.В., Никишов Н.Н., Котова Т.В., Бойченко Т.А., Грабан И.В., Пшеницына С.М. Сочетанное местное применение медицинского озона и бактериофагов в лечении женщин с воспалительными заболеваниями гениталий (экспериментальное обоснование). // Российский вестник акушера-гинеколога. 2016. № 1. С. 17-20. [Grechkanev G.O., Motovilova T.M., Gorshunova L.G., Ponomareva I.V., Nikishov N.N., Kotova T.V., Boichenko T.A., Graban I.V., Pshenitsyna S.M. Sochetannoe mestnoe primenenie meditsinskogo ozona i bakteriofagov v lechenii zhenshhin s vospalitel'nymi zabolevaniyami genitalii (eksperimental'noe obosnovanie). Rossiiskii vestnik akushera-ginekologa, 2016;1:17-20 (In Russ.)].
16. Ходосова Т.Г., Мотовилова Т.М., Никишов Н.Н., Журина И.Ю., Хамидова А.Р., Гаревская Ю.А. Некоторые патогенетические аспекты хронического эндометрита. Возможности коррекции с использованием озоно-бактериофаготерапии. // Вятский медицинский вестник. 2017. № 4(56). С. 37-41. [Khodosova T.G., Motovilova T.M., Nikishov N.N., Zhurina I.Yu., Hamidova A.R., Garevskaya Yu.A. Nekotorye patogeneticheskie aspekty hronicheskogo endometrita, vozmozhnosti korrektsii s ispol'zovaniem ozono-bakteriofagoterapii. Vyatskii meditsinskii vestnik. 2017; 4(56): 37-41 (In Russ.)].
17. Nayki U., Gunay M., Kulhan M., Qankaya M., Humeyra Taskin Kafa A., Balci G. Oxidative and antioxidative status in the endometrium of patients with benign gynecological disorders. J Gynecol ObstetHum Reprod. 2017; 46(3): 243-247.
18. Grajecki D., Zyriax B-C., Buhling K.J. The effect of micronutrient supplements on female fertility: a systematic review. Archives of Gynecology and Obstetrics. 2012; 285(5): 1463-1471.
