CC BY
47
УЧЕНЫЕ ЗАПИСКИ СПбГМУ ИМ. АКАД. И. П. ПАВЛОВА • ТОМ XVII • N01 • 2010
РЕЗЮМЕ
О. С. Панкратова, А. Б. Чухловин,
Л. С. Зубаровская, Б. В. Афанасьев
Частота выявления вирусов группы герпеса и риск типичных осложнений при аллогенной трансплантации гемопоэти-ческих стволовых клеток
Обследованы 143 больных с различными онкогематологически-ми заболеваниями, в том числе ОЛЛ (п=51), ОМЛ (п=37), ХМЛ (п=15), лимфомами (п=9), МДС (п=6). Пациентам проводилась аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток (ТГСК). Больным трансплантировали костный мозг (35 %) или периферические стволовые клетки (65 %). Неродственные ТГСК проводились в 64 % случаев. Геноспецифическую ПЦР ДНК цитомегаловируса (ЦМВ), вируса простого герпеса (ВПГ) и вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ) проводили еженедельно до 100 суток после ТГСК. Оценивали выраженность оРТПХ, регистрировали другие осложнения (пневмонии, неврологические нарушения, мукозиты, циститы). ВПГ, ЦМВ и ЭБВ выявлялись в клетках крови после ТГСК соответственно в 51 %, 57 % и 45 % случаев (в 2,3-2,5 раза чаще, чем до пересадки). Вид основного заболевания, пол и тип трансплантата не влияли на эти соотношения. В то же время частота выявления ВПГ и ЦМВ зависела от возраста больных, при минимальной частоте выявления в группе 1-4 года и возрастанием к 10-20 годам. Среди больных молодых возрастов (менее 21 года) была найдена корреляция между неврологическими симптомами и повторным выявлением ВПГ (Р=0,002). Кроме того, тяжесть мукозита была связана с персистенцией ВПГ или ЦМВ (Р=0,02 или 0,008). Риск развития кишечной формы острой РТПХ и частота посттрансплантацонного геморрагического цистита также коррелировали с активацией ВЭБ (Р=0,01). Таким образом, данное исследование предполагает наличие взаимосвязей между частотой выявления ВПГ, ВЭБ и ЦМВ и некоторыми общими осложнениями алло-ТГСК. Значимость герпесвирусных инфекций после ТГСК заслуживает дальнейшего изучения.
Ключевые слова: гепомоэтические стволовые клетки, трансплантация, герпесвирус, осложнения.
S UMMARY
О. S. Pankratova, A. B. Chukhlovin,
L. S. Zoubarovskaya, B. V. Afanasyev
Frequency of herpesvirus detection and risk of typical complications in allogeneic complications in allogeneic transplantation of hematopoietic stem cells
We examined 143 patients with different oncohematological disorders including ALL (n=51 ), AML (n=37), CML (n=15), malignant lymphomas (n=9), MDS (n=6). Allogeneic transplantation of hematopoietic cells (HSCT) was carried out in all patients. Transplanted were either bone marrow (35 %) or peripheral stem cells (65 %). HSCT from unrelated donors were transplanted in 64 per cent of the cases. Cytomegalovirus (CMV), herpes simplex virus (HSV) and Epstein-Barr virus DNA were detected by genospecific PCR weekly up to the 100th post-HSCT day. Dynamics of acute GvHD as well as other important HSCT complications (pneumonia, neurological disorders, mucositis, cystitis) were recorded in the posttransplant period. Results. HSV, CMV and EBV were detectable in blood leukocytes after HSCT, respectively, in 51 %, 57 % and 45 % of all cases (2.3-2.5 times more frequently than before HSCT). The type of the main disorder, the patients' gender, and the type of the transplant did not significantly influence these ratios. Whereas frequencies of HSV and CMV detection depended on the patients' age, with minimal detection rates at the age of 1 to 4 ys and maximal ones by 10 to 20 ys. Among younger subgroup patients (<21 years old), a correlation was found between neurological symptoms and repeated HSV detection (Р=0.002). Moreover, severity of mucositis was associated with HSV and CMV persistence (Р=0.02 или 0.008). Risk of intestinal aGvHD and frequency of posttransplant hemorrhagic cystitis proved to correlate with EBV activation (Р=0.01) as well. Hence the present study suggests certain interrelations between frequencies of HSV EBV and CMV and some common complications in allo-HSCT. Clinical significance of post-HSCT herpesvirus infections deserves further studies.
Key words: hematopoietic stem cells, transplantation, herpes-virus, complications.
© Коллектив авторов, 2010 г. УДК 616.211-005.1-08:612.116.21
С. А. Карпищенко, М. А. Рябова, Н. А. Шумилова, Е. В. Павлова, И. А. Кравцова, С. И. Полькина, О. Г. Кузнецова
ЭФФЕКТИВНОСТЬ КОМПОЗИЦИИ НА ОСНОВЕ КРИОГЕ-ЛЯ В КАЧЕСТВЕ МАТЕРИАЛА ДЛЯ ОСТАНОВКИ НОСОВОГО КРОВОТЕЧЕНИЯ
Клиника оториноларингологии Санкт-Петербургского государственного медицинского университета имени академика И. П. Павлова
В настоящее время, благодаря широкому применению щадящих методик при выполнении оперативных вмешательств в полости носа и околоносовых пазух (ОНП), как
правило, после операции наблюдаются кровотечения небольшой интенсивности. При этом не требуется выполнение классической тампонады полости носа с помощью марлевых турунд. В подобных случаях, с целью гемостаза, широко используются пальчиковые тампоны, представляющие собой резиновую оболочку с перевязочным материалом внутри, тампоны из пористых материалов. Однако использование таких тампонов имеет ряд недостатков: травмирование слизистой оболочки носовой полости и болезненные ощущения при их установке и последующем удалении, блокирование оттока отделяемого из ОНП, необходимость фиксации, отсутствие гигроскопичности и механический характер гемостаза, что вызывает у больных дискомфорт. Использование раздув-ных тампонов при более интенсивных носовых кровотечениях в ряде случаев приводит к развитию местных трофических изменений слизистой оболочки полости носа с последующим некрозом и формированием деэ-пителизированных поверхностей.
В связи с вышесказанным сохраняется актуальность разработки новых щадящих подходов к способам оста-
ОРИГИНАЛЬНЫЕ
РАБОТЫ
новки носовых кровотечений, что имеет особое значение для больных с высоким риском патологического ринобронхиального рефлекса (при сопутствующей бронхиальной астме), патологией свертывающей системы крови и т. д.
Целью работы явилась разработка щадящего и эффективного способа остановки носовых кровотечений.
На кафедре общей и биоорганической химии разработана композиция, представляющая собой мягкий высокопористый гидрофильный адсорбент, получение которого связано с криоструктурированием коллоидного раствора крахмала, в результате чего в клинической практике полученная композиция получила название криоп-реципитата, или криогеля (патент .№1731220 от 11.10.93) [2]. В его состав входит крахмал, физиологический раствор и дистиллированная вода [1]. Полученную композицию нагревают при температуре t= 80 оС и перемешивают до загустения, затем разливают в пробирки для придания образцам определенной формы, удобной для последующего применения, и выдерживают в условиях морозильной камеры при температуре -10 оС в течение 2 суток. После предварительной разморозки дважды с интервалом в 1 сутки производят отжим приготовленных образцов, после чего криогель готов к применению в клинических условиях. Хранение тампонов осуществляется в морозильной камере при t=—10 оС. В ходе микробиологических исследований выявлено, что криогель сохраняет свои асептические свойства в условиях хранения в морозильной камере в течение месяца с момента приготовления [3].
Конечным продуктом биодеструкции криогеля в организме является D-глюкоза, которая способствует восполнению энергетических затрат в клетках травмируемых тканей и, кроме того, создает высокое осмотическое давление в ране, что усиливает дренирующий эффект, благодаря которому удаляются продукты тканевого распада. Криогель оказывает охлаждающее действие, вызывает спазм сосудов, что способствует уменьшению и остановке кровотечения, а также создает неблагоприятные температурные условия для колонизации микроорганизмов. Кроме того, охлаждающее действие способствует дополнительному анальгезирующему эффекту.
На кафедре оториноларингологии СПбГМУ им. акад. И. П. Павлова, а также в СПбГУЗ поликлиника № 110 крио-гель, с согласия пациентов, прошел апробацию в качестве материала для остановки носовых кровотечений (рационализаторское предложение № 1523 от 25.05.09).
Криогель в виде тампонов размерами 1x10 см устанавливался в полость носа (под нижнюю, среднюю, верхнюю носовые раковины, в общий носовой ход) путем проведения в сжатом виде с помощью штыкообразного пинцета между раскрытыми браншами носового зеркала. Материал использовался после предварительной 20-минутной разморозки при комнатной температуре, что обеспечивало дополнительный гемостатический эффект, обусловленный спазмом мелких сосудов слизистой оболочки полости носа в ответ на холодовое воздействие.
Криогель применялся в качестве альтернативы тампонады полости носа при носовых кровотечениях после выполнении эндоскопических операций в полости носа и ОНП у 33 больных (в том числе после полипото-мии, вскрытия ОНП, дакриоцистостомии), после сеп-тум-операций — у 5 больных, после полипоэтмоидото-мии — у 2 больных. В амбулаторных условиях криогель использовался для остановки носовых кровотечений небольшой интенсивности у 6 пациентов с гипертонической болезнью.
Во всех случаях был достигнут адекватный гемостаз с помощью криогеля. Отмечена хорошая индивидуальная переносимость тампонады носа разработанной композицией, отсутствие субъективных ощущений, аллергических реакций и побочных эффектов. Надежный гемостаз наступал в течение 30—60 секунд. Криогель не препятствовал оттоку отделяемого из ОНП, полностью рассасывался в полости носа и самостоятельно удалялся путем отсмаркивания в течение 1—2 суток. Необходимо отметить, что установка криогеля не составляет технической сложности и не требует дополнительных практических навыков у хирурга. Реактивные явления слизистой оболочки носа после установки криогеля были выражены существенно меньше, чем после выполнения обычной тампонады полости носа.
Таким образом, установка криогеля в полости носа обеспечивает надежный гемостаз, что позволяет применять его с целью остановки носовых кровотечениях различной этиологии.
ЛИТЕРАТУРА
1. Макошина, Е. С. Создание антимикробной полимерной композиции на основе криоструктурированного геля для использования в челюстно-лицевой хирургии / Е. С. Макошина, Е. Л. Старостина, А. В. Синицина // Материалы науч.-практ. конф. с между-нар. участием. — 2003. — С. 127.
2. Пат. № 2329800. Фармакологическая композиция, обладающая антибактериальным и фунгицидным действием / Плужников М. С., Павлова Е. В., Кравцова И. А., Кузнецова О. Г., Шустерович Л. Г., Шумилова Н. А. — 11.10.93.
3. Старостина, Е. Л. Создание антимикробной композиции на основе криоструктурированного геля для использования в че-люстно-лицевой хирургии / Е. Л. Старостина, Е. С. Макошина, А. С. Степанова // Сб. тезисов международ. науч.-практ. конф. студентов и молодых ученых. — 2005. — С. 25.
РЕЗЮМЕ
С. А. Кэрпищенко, М. А. Рябова, Н. А. Шумилова,
Е. В. Павлова, И. А. Кравцова, С. И. Пслькина,
О. Г. Кузнецова
Эффективность композиции на основе криогеля в качестве материала для остановки носового кровотечения
На кафедре общей и биоорганической химии разработана композиция, представляющая собой мягкий высокопористый гидрофильный адсорбент. Получение ее связано с криоструктурирова-нием коллоидного раствора крахмала. В клинической практике разработанная композиция получила название криогеля. Криогель прошел апробацию в качестве материала для остановки носовых кровотечений у 46 больных. Криогель применялся в качестве альтернативы тампонады полости носа при носовых кровотечениях
УЧЕНЫЕ ЗАПИСКИ СПбГМУ ИМ. АКАД. И. П. ПАВЛОВА • ТОМ XVII • №1 • 2010
у больных гипертонической болезнью, после выполнении эндоскопических операций со вскрытием околоносовых пазух, сеп-тум-операций, полипотомий носа. Во всех случаях был достигнут адекватный гемостаз с помощью криогеля.
Ключевые слова: криогель, носовое кровотечение.
S UMMARY
S. A. Karpischenco, М. A. Ryabova, N. A. Schumi-lova, E. V. Favlova, I. A. Kravtsova, S. I. Folkina, O. G. Kuznetsova
Efficiency of a cryogel composition in nasal bleeding control
The department of general and bioorganic chemistry developed a composition - a soft high-porous hydrophilic adsorbent. This composition was created by cryostructuring of the starch colloidal solution. In the clinical practice it was called cryogel. Cryogel was used for nasal bleeding control in 46 patients. Cryogel is an alternative to tompon plugging in nasal bleeding in patients with high blood-pressure, after endoscopic sinus surgery, removal of nasal polyps, in septoplasty. In all cases cryogel application resulted in adequate hemostasis.
Key words: cryogel, nasal bleeding.
PPT.
l
w< t
О А. Б. Чухловин, 2010 г. УДК 616-076
А. Б. Чухловин
КЛИНИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ МОЛЕКУЛЯРНО-БИОЛОГИ-ЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ
Кафедра клинической лабораторной диагностики с курсом молекулярной медицины Санкт-Петербургского государственного медицинского университета имени академика И. П. Павлова
ВВЕДЕНИЕ
ДНК как химическое вещество была открыта в 1869 г. швейцарцем Ф. Мишером, который начинал свою научную деятельность в швейцарском городе Базеле (рис. 1). Мишер провел первую работу с ДНК в Университете г. Тюбингена (Германия) в лаборатории Хоппе—Зейлера. Сначала он хотел работать с лимфоцитами, но затем ему посоветовали исследовать гнойные выделения с повязок септических больных. Таким образом, лейкоциты гнойного экссудата были первыми клетками, из которых была выделена ДНК, при последовательной кислотной и щелочной обработке [12, 15]. Выделенная вязкая субстанция была названа нуклеином, так как ее выделили из ядерной фракции клеток. Было очевидно, что ДНК содержит кислород, углерод, азот, фосфор в определенных соотношениях, находится в составе ядер, точнее — хромосом, и при размножении клеток она также делиться между клетками. В те же годы Г. Мендель впервые описал количественные закономерности расщепления простых генетических признаков [14]. Однако конкретная роль ДНК в генной активности была не вполне ясной еще 60—70 лет, до тех пор, пока американцы Бидл и Тэйтум не занялись вопросами индукции генных мутаций у Neurosporа crassa. Некоторые из мутаций (повреждение ДНК) приводили к инактивации важных энзимов и наследовались в соответствии с известными генетическими закономерностями [11]. Так появилась знаменитая концепция Бидла—Тэйтума «один ген — один фермент». Аналогичные исследования были проведены также и на бактериях (кишечная палочка, пневмококк и др.), и они подтвердили, что генетические свойства закодирова-
Рис. 1. Фридрих Мишер - открыватель ДНК (1844-1895)
ны в ДНК. Уже давно было известно, что ДНК состоит из пуриновых (аденин, гуанин) и пиримидиновых (цитозин, тимин) оснований. Оставалось лишь выяснить способ кодирования генетической информации в цепях нуклеоти-дов и тип компоновки ДНК.
В 1953 г. Уотсон и Крик, работая в Кембридже, выдвинули предположение о том, что ДНК имеет двунитевую структуру [18]. Такая структура основана на специфических связях между пуриновыми и пиримидиновыми основаниями в антипараллельных нитях полимерной молекулы. Нить ДНК в хромосоме имеет форму двойной спирали, по аналогии со швейной нитью. Она держится за счет связей аденина и тимина, гуанина и цитозина. Эти слабые поперечные связи комплементарных оснований поддерживают обычную спиральную структуру ДНК в живых клетках (рис. 2).
Последовательность из тысяч пар АТ и ГЦ уникальна для каждого гена у каждого организма. Это и обеспечивает высокую специфичность ДНК-диагностики. Эти дискуссии Крик и Уотсон нередко вели в пабе «The Eagle», где сейчас висит мемориальная доска (рис. 3).
Двойная спираль ДНК расплетается (денатурирует) только при ее удвоении (при митозе), транскрипции (син-
