CC BY
147
УДК 343.983 ББК 67.52
© 2018 г. В. В. Попов,
старший преподаватель кафедры криминалистики и оперативно-разыскной деятельности Ростовского юридического института МВД России, подполковник полиции Тел. 8 (918) 892-83-84.
В. М. Литвиненко,
курсант 4-го курса Ростовского юридического института МВД России Тел. 8 (918) 522-89-99.
ДВОЙНОЕ ВЫДЕЛИТЕЛЬСТВО: НАУЧНЫЙ ФАКТ ИЛИ ВЫМЫСЕЛ
В статье рассматриваются факты обнаружения у людей феномена двойного или парадоксального выделительства. Объясняются основы постановки серологических реакций, с помощью которых выявляются антигены крови человека. С точки зрения генетики и микробиологии обосновывается невозможность подобного явления у человека.
Ключевые слова: агглютиноген, агглютинин, серология, эпитоп, паратоп, комплиментарность.
V. V. Popov - Senior teacher, Department of Criminalistics and Operational Investigative Activities, Rostov Law Institute of Internal Affairs of the Russian Federation, Lieutenant Colonel the police.
V. M. Litvinenko - Cadet 4-th exchange rate Rostov Law Institute of Internal Affairs of the Russian Federation. DOUBLE SECRETION: SCIENTIFIC FACT OR FICTION
At article deals with the facts of detecting the phenomenon of double or paradoxical secretion in human. Explains the basics of setting serological reactions that detect human blood antigens. In terms of genetics and microbiology impossibility of the similar phenomenon at the person is proved.
Keywords: agglutinogen, agglutinin, serology, epitope, paratop, complementarity.
В 1984 году был задержан убийца Андрей Чикатило. На экспертизу направили образцы его крови и следы спермы, обнаруженные на трупе одной из жертв - Димы Пташникова. В ходе проведения экспертизы эксперты пришли к выводу о несоответствии изъятых с мест убийств следов спермы, которую отнесли к группе АВ (IV), с кровью Чикатило группы А (II) [1]. В связи с этим в скором времени убийца был освобожден. После чего руками Чикатило был убит еще 21 человек.
При расследовании уголовного дела по обвинению воронежского маньяка Маскален-чика, совершившего ряд изнасилований девочек в лифтах и на лестничных клетках, была произведена судебная экспертиза, в рамках которой установлено, что кровь Маскаленчи-ка относится к I группе (0), так же, как и изъятый с лобка потерпевшей единичный мужской волос, а следы спермы, изъятые с одежды потерпевших и с тампонов, имеют антигены А, В и Н [2].
Этот факт полностью исключал причастность Маскаленчика к совершению данных преступлений, однако сам маньяк признавал себя виновным и подробно описывал ход совершения преступления, потерпевшие так-
же опознали его. При повторной экспертизе исследованию подвергались образцы спермы Маскаленчика, в которых были выделены антигены А, В и Н, аналогичные с ранее изученными вещественными доказательствами.
Анализируя подобные факты, ученым сообществом было выдвинуто предположение о двойном выделительстве, то есть о гипотетическом эффекте, при котором выделения организма, содержащие белок и кровь, не совпадают по антигенной системе АВ0.
Последние 60 лет в судебной медицине и криминалистике особую популярность приобретают вопросы двойного или, как его еще называют, парадоксального выделительства. Этому вопросу посвятили свои работы Ю. П. Ду-бягин, М. А. Бронникова, М. С. Свирский, Т. В. Стегнова, Т. Н. Шамонова. Наиболее часто данная категория фигурирует в рамках расследования уголовных дел о насильственных преступлениях (половые преступления и убийства, сопряженные с изнасилованием), где с места происшествия, как правило, изымаются следы человека, в том числе и продукты жизнедеятельности его организма, имеющие биологическую составляющую.
Первым понятие «двойное выделительст-
во» сформулировал в 1958 году итальянский ученый Г. Морганти [3], который обнаружил феномен качественного несовпадения по антигенам АВ0 крови и выделений организма (например, спермы). Он связывал данную особенность либо с генетической обусловленностью организма, либо с болезнью.
Систему «А-Б-ноль» открыл австрийский иммунолог Карл Ландштейнер, который пришел к выводу, что одинаковая на вид кровь различается между собой эритроцитарными свойствами. Согласно его теории, существуют лишь 4 сочетания, при которых встреча однобуквенных антигенов и антител исключается [4]. В основу данного деления легла способность жидкой подвижной соединительной ткани содержать либо не содержать антигены А, В и антитела a, b, что наглядно показано в таблице № 1.
Каждый человек является обладателем генетически наследуемых параметров, не подвергающихся изменениям при естественных условиях, другими словами, обладателем определенного типа крови. Группа крови - это образованный на поверхностях эритроцитов отличительный признак белков в сочетании с гликопротеинами, углеводами, гликолипи-дами - антигенов, имеющих название «агг-лютиногены». Современная медицина в своей деятельности применяет две основных системы групп крови - Rh и АВ0. Система АВ0 основана на детерминированном генами синтезе ферментов - гликозилтрансфераз, переносящих остатки моносахаридов к агглю-тиногенам организма. В геноме аллели, ответственные за синтез ферментов, кодируются как А, В и 0. Аллели А и В являются доминантными, аллель 0 - рецессивным. А-аллель кодирует гликозилтрансферазу, переносящую на агглютиноген N-ацетилгалактоза-мин, в соответствии с этим получается агг-
лютиноген А. В-аллель кодирует гликозилтрансферазу, переносящую галактозу, и получается агглютиноген В. 0-аллель, содержащий делецию, инактивирует фермент. В гене находится 2 аллеля, соответственно, в первой группе крови сочетание аллелей - 00, во второй возможно два сочетания АА и А0, в третьей - ВВ и В0, в четвертой - АВ. Отсюда и название системы - АВ0.
Основополагающим принципом генетики является то, что в организме могут синтезироваться только строго генерированные генами молекулы веществ. Таким образом, при наличии в хромосомах гена, отвечающего за выработку какого-либо агглютиногена, он будет вырабатываться во всех жидкостях организма без исключения, т.к. генетический набор всех клеток организма идентичен, а синтезируемый агглютиноген будет обнаруживаться везде.
И, наоборот, при отсутствии в геномном наборе гена, отвечающего за выработку агглю-тиногена, он синтезироваться в организме не будет ни при каких условиях.
Таким образом, мы пришли к выводу, что жидкости организма не могут отличаться по системе АВ0, что полностью опровергает наличие двойного выделительства.
Возникает вопрос: в результате чего в сперме и других жидкостях человеческого организма появляются новые антитела?
Антигены - это молекула любого вещества, но обязательно связанная с белком, несущая обусловленную генетически чужеродную информации, а, соответственно, при попадании в организм, вызывающая иммунологический ответ, взаимодействуя с антителами (агглютиногены являются разновидностью антигенов) [5].
Относительно клеточной мембраны антигены бывают:
- К-антигены, или поверхностные, располагающиеся в стенке клетки;
Таблица № 1
Распределение агглютиногенов и агглютининов по группам крови человека
Группа крови Присутствие белков
Агглютоногены Агглютинины
0 (I) Нет a и b
А (II) А b
В (III) В a
АВ (IV) АВ нет
- О-антигены, или соматические, располагающиеся во внутреннем слое клеточной стенки и не разрушающиеся при изменении температуры;
- Н-антигены, или жгутиковые, располагающиеся в движущихся элементах подвижных бактерий и разрушающиеся при температурных колебаниях.
Для определения групп крови в жидкостях организма используют моноклональные антитела против агглютиногенов человека, находящихся в этих жидкостях, т.е. взаимодействие антиген-антитело. При этом антиген и антитело взаимодействуют не всей молекулой сразу, а отдельными участками. В антигене активный участок называется антигенной детер-минантой или эпитоп, в антителе - антиген-связывающий центр или паратоп. Эпитоп и паротоп взаимодействуют на основании пространственного соответствия - комплементар-ности. Взаимодействие активных участков антигенов и антител заключается в установлении межмолекулярных взаимодействий различного типа. Хочется отметить, что, несмотря на высокую специфичность взаимодействия конкретных антител с конкретным антигеном, ни одно из межмолекулярных взаимодействий эпитопа и паротопа не является специфичным для реакции антиген-антитело. Взаимодействие комплементарных участков антигенов и антител подчинено таким же химико-физическим законам, как и взаимодействие любых химических молекул.
Наиболее часто встречающиеся типы взаимодействия антиген-антитело представлены на рисунке № 1.
Взаимодействие антитела с антигеном при проведении серологических реакций делится на фазы:
- фаза взаимодействия или специфическая, которая занимает до нескольких минут. В этой фазе между комплементарными участками антител и антигенов устанавливаются связи, и происходит соединение паратопов антител и эпитопов антигена;
- фаза проявления или неспецифическая, развивающаяся до нескольких часов. В результате образования комплексных иммунных соединений возникают внешние признаки реакции.
Для определения наличия агглютиногенов у человека используется реакция агглютинации [5] — несложная по проведению реакция, в ходе которой антитела связывают антигены эритроцитов или других клеток при обязательном наличии электролитов, например 0,9 % раствора №С1. Появление осадка или хлопьев при проведении реакции свидетельствует о протекающем взаимодействии антител с искомым агглютиногеном.
Так как взаимодействие антиген-антитело является неспецифической реакцией, а определяется комплементарностью активных участков, то при наличии чужеродного антигена (явления контаминации), имеющего идентичную структуру эпитопа с эпитопом какого-либо агглютиногена человека, произойдет ложноположительная реакция на соответствующий агглютиноген.
Термин «контаминация» произошел от лат. соПашшайоп, что означает смешение. В словаре С. И. Ожегова данное понятие тракту-
Ионные связи - образуются противоположно заряженными химическими группами, чаще всего карбоксилом (СОО ) и аминогруппой (NH3+). Вариант - полярные взаимодействия за счёт образования диполей (наведённых зарядов). Водородные связи - формируются за счёт образования водородного мостика между двумя химическими группами (обычно гидроксилами).
Гидрофобные взаимодействия формируются гидрофобными группами (СН^ и т.д.), сближающимися вследствие энергетических преимуществ их взаимодействия друг с другом по сравнению с водой. Взаимодействия Ван-дер-Ваалъса основаны на квантово-механической взаимосвязи электронных облаков. Интенсивность взаимодействий 1-2 убывает пропорционально квадрату расстояния между участвующими группами; интенсивность Ван-дер-Ваальсовых взаимосвязей снижается пропорционально седьмой степени расстояния.
СН2—СН2 - R
Рис. 1. Типы взаимодействия антиген-антитело
ется как соединение, возникновение нового слова, выражения, формы при помощи соединения двух сходных чем-либо выражений и форм. В генетике и биологии под контаминацией принято понимать попадание в определенную среду какой-либо примеси - бактерий, химических веществ, чужеродного генетического материала и пр.
Таким образом, при инфицировании организма или при контаминации следа бактериями и проявлении ими серологической активности, в любой жидкости организма могут появиться антигены, имеющие сходную структуру с агглютиногенами человека и возможна ложноположительная реакция при определении группы крови по системе АВ0. Такими антигенами могут являться как стенки клетки или споры бактерий, так и экзотоксины, синтезируемые некоторыми микроорганизмами. Примером ложноположительных реакций могут служить определение агглю-тиногена А в слюне при подселении в-гемо-литического стрептококка при ангине или определение агглютиногена В или Н в сперме при трихомониазе.
Серология (от лат. serum - сыворотка и log-os-наука) - раздел иммунологии, в рамках которого происходит изучение специфики взаимодействия антиген с сывороточными антителами, то есть, это наука, которая изучает реакцию «антиген - антитело» [6].
Основу диагностики образовало установление специфических антител, сформированных в результате реакции организма на его инфицирование определенным антигеном. Антитела (иммуноглобулины) формируются в организме исключительно под воздействием инфекционных агентов - вирусов, бактерий, простейших, поэтому, в зависимости от того, какие именно антитела были обнаружены, решается вопрос о характере инфекции, а количество данных антител свидетельствует о степени активности инфекционного заболевания. Более того, каждая стадия болезни организма характеризуется выработкой своего класса иммуноглобулинов, что помогает специалистам установить давность заражения человека и характер прогрессирования заболевания.
Особенности взаимодействия антиген-антитело рассматриваются как основные положения, применяемые в лабораторных исследованиях диагностических реакций.
С этой целью применяют серологические
методы изучения реакции взаимодействия антигенов с антителами. При выделении микроба от больного производят идентификацию возбудителя при помощи изучения его антигенных свойств с использованием иммунных диагностических сывороток, то есть сывороток крови гиперммунизированных животных, в которых содержатся специфические антитела. То есть, другими словами, происходит серологическая идентификация микроорганизмов.
Серологические реакции разделяются на прямые (двухкомпонентные), например, реакция агглютинации, пассивной гемагглюти-нации, преципитации, и косвенные (трехком-понентные) - это реакция торможения ге-магглютинации, реакция нейтрализации.
При взаимодействии нескольких «простых» серологических реакций образуются «сложные» - реакции связывания комплемента, бактериолиз.
Под серологической активностью бактерий понимают способность бактерий синтезировать антигены, находясь как внутри организма, так и вне его, попав в биологическую среду. Таким образом, любой микроорганизм, попав в соответствующую благоприятную среду, продолжает свою жизнедеятельность и продуцирует антигены, титр (количество) которых нарастает с каждой минутой существования. Соответственно, чем позднее в лабораторию поступает биологический объект, контаминированный бактериями, тем выше вероятность определения антигенов микроорганизмов, что, в свою очередь, повышает вероятность ошибки исследования и определения антигенов, несоответствующих по своему составу организму, от которого происходит биологический объект.
Итак, все вышесказанное позволяет сделать следующие выводы.
Во-первых, никакого двойного или парадоксального выделительства в природе быть не может. Возникновение данного понятия явилось следствием получения некачественных образцов и ошибок эксперта при проведении экспертизы. Само наличие феномена двойного выделительства противоречит законам генетики и уровню биохимии человеческого организма, то есть, тому правилу, что в организме могут синтезироваться только те белки, которые генерируются генами.
Таким образом, необходима тщательная проверка и оценка следователем и судом по-
лученного заключения эксперта, занимавшегося исследованием биологических объектов, поскольку ложные результаты, как правило, образуются в результате нарушения правил изъятия биологических следов, ввиду невнимательности эксперта, производящего экспертизу, а также в результате покрывательст-ва эксперта, получившего ложные результаты, со стороны руководства.
Во-вторых, особого внимания заслуживает явление контаминации, под которым понимается попадание в определенную среду какой-либо примеси - бактерий, химических веществ, чужеродного генетического материала и пр. Несовпадение группы крови и спермы по антигенной системе АВ0 в рассматриваемых нами выше примерах вполне объяснимо с точки зрения контаминации. В случае с Чикатило трудности в исследовании биологического материала возникли в результате загрязнения образцов спермы бактериями, иными биологическими объектами. А Маскаленчик был болен венерическим заболеванием - триппером, который и давал антигены Н.
В-третьих, если же получен ложный результат, согласно которому жидкости одного организма не совпадают по системе АВ0, то необходимо прибегнуть к консультации соответствующих специалистов экспертных учреждений, к назначению повторной экспертизы биологических объектов, с применением не только указанных выше серологических методов, но и таких, как, например, исследование локуса АВ0, то есть ДНК-анализ.
Однако проведение исследования локуса АВ0 при проведении ДНК-анализа в ряде случаев бывает невозможно. Это связано с тем, что не во всех регионах имеются ДНК-лаборатории и даже при их наличии не все эксперты владеют методикой выделения и исследования локусов АВ0, также на это влияют экономические причины, т.е. стоимость самого анализа. Поэтому судебно-био-логические методы исследования следов биологического происхождения, такие, как определение групп крови и резус-фактора, до сих пор остаются востребованными наряду с исследованием ДНК.
Литература
1. Горбулинская И. Н. Особенности назначения и производства судебно-медицинской экспертизы вещественных доказательств биологического происхождения при расследовании серийных убийств. Известия АлтГУ. 2007. № 2.
2. Ибрагимов Р. А. Сексуальное насилие и инфекции, передаваемые половым путём. Вестник дерматовенерологии. 1999. № 3.
3. Шамонова Т. Н. Вновь к вопросу о «парадоксальном выделительстве» в судебно-биологической экспертизе. Вестник криминалистики. 2006. № 2.
4. Рыскина Е. А., Чернов Н. Н., Епифанова А. А., Нефедова Н. С. Полиморфизм и полифункциональность антигенов АВ0 системы крови. Вестник РУДН. 2011. № 4.
5. Антиген, взаимодействие с антителом. URL: http://chem21.info/info/1339109/.
6. Шушкевич Н. И. Учебное пособие по иммунологии. Владимир, 2006.
7. Шамонова Т. Н. О «парадоксальном вы-делительстве» в судебно-биологической экспертизе. Альманах «МОИ». 2007. № 69.
Bibliography
1. Gorbulinskaya I. N. Features of the appointment and production of forensic medical examination of material evidences of biological origin at investigation of serial murders. News of AltSU. 2007. № 2.
2. Ibragimov R. A. Sexual violence and infections, sexually transmitted. Messenger dermatoven-erology. 1999. № 3.
3. Shamonova T. N. Again to a question of «paradoxical secretion» in the forensic biological examination. Bulletin of Forensic Science. 2006. № 2.
4. Rysakina E. A., Chernov N. N., Yepifanova A. A., Nefedova N. S. Polymorphism and poly-functionality of AB0 antigens of a system of blood. Bulletin PFUR. 2011. № 4.
5. Antigen, interaction with a antibody. URL: http:// chem21.info/info/1339109/.
6. Shushkevich N. I. Textbook on immunology. Vladimir, 2006.
7. Shamonova T. N. On the «paradoxical secretion» in the forensic biological examination. Almanac «MOI». 2007. № 69.
