CC BY
10
echo-doppler-cardiography, ultrasound scan of the liver, identification of serum cytokine concentrations: TNFa, IL-6 and IL-10 by enzyme-immunoassay and polymerase chain reaction to determine the expression of kappa-B-inhibitor alpha gene. Using the method of flow cytoflowmetry, we established the number of circulating endothelial CD32 and CD40 microparticles. Patients of the study group were prescribed to take betar-gin and quercetin along with the standard therapy, and the patients of the comparison group continued to receive the baseline therapy. The treatment results were evaluated in 2 months. Improvement of the general condition and clinical course of this comorbidity has been found out that is confirmed by the reduced endothelial dysfunction indices of circulating endothelial CD32 CD40 microparticles, reduced blood flow rate in the portal and hepatic veins and enhanced central hemodynamic parameters, thus proving the expressed endothelial protective properties of betargin and quercetin treatment complex. Furthermore, the anti-inflammatory effect was observed by lowering the TNFa, IL-6 cytokines and IkBa mRNA expression in mononuclear cells. Conclusions. Thus, the combination of betargin and quercetin during standard protocol therapy in patients with stable coronary heart disease and non-alcoholic fatty liver disease demonstrates a positive impact on the clinical course due to marked endothelial protective and moderate anti-inflammatory effects.
УДК [616.44]-022+616/281]-055
Науменко О.М., Деева Ю.В., Тарасенко М.В.
ДОСЛ1ДЖЕННЯ МЕХАН1ЗМУ РОЗВИТКУ I ВЗАбМОЗВ'ЯЗКУ М1Ж ПОРУШЕННЯМ ФУНКЦП ЗОВН1ШН1Х ВОЛОСКОВИХ КЛ1ТИН ВНУТР1ШНЬОГО ВУХА ЛЮДИНИ ТА АВТО1МУННИМ ТИРЕО1ДИТОМ
Нацюнальний медичний уыверситет iменi О.О. Богомольця, м. Кшв
В представленш робот/ досл'джена поширенсть порушення функцИ структур внутршнього вуха у осб з авто'мунним тиреоУдитом в стан еутиреозу. Досл'джено гормональну функцю та актив-нсть авто'мунного процесу в щитопод1'бн1'й залоз¡. Визначен р1вн1 такого специф1чного для характеристики функцИ внутршнього вуха б'юх'ш'нного показника, як блок престин. Слух досл'джено за допомогою реестрац! отоакустичноТ емюн на частот/ продукт'т спотворення. Подальший бага-тогранний статистичний анал1з виявив достов'рн/ дан про порушення функцИ зовшшшх волоско-вих клтин внутршнього вуха, пдвищення р1вн1в престину у осб з авто 'шунним тиреоУдитом в по-р1внянн1 з! здоровими особами. Кр'м того, отриман1 нами результати дозволяють окреслити основы ланки в механ1зм1 розвитку порушень слуху при авто 'мунному тирео'Удит1, / доводять достов 'р-нсть взаемозв'язку м'ж п/'двищенням авто1мунно'У активност/ в щитопод1'бн1'й залоз/ та зниженням функцИ зовшшшх волоскових кл1тин внутршнього вуха.
Ключов1 слова: автамунний тиреоТдит, отоакустична ем1с1я, престин, антитта до тиреоглобул1ну, антитта до тиреопероксидази, статистичний анал1з.
Робота е фрагментом комплексно!' науково-досл!дно!' роботи кафедри оториноларингологи' ¡мен! О.О. Богомольця "Визна-чення окремих компонент1в патогенезу, розробка метод!в ранньо!' д!агностики, удосконалення метод!в лкування захворю-вань верхн!х дихальних шлях!в, стравоходу, слухового та вестибулярного анал!затор!в на тдстав! використання ендоскоп!-чних метод!в", № державно!'реестрацп 0198и003083.
Вступ
Вплив органоспецифiчного автамунного процесу, такого як автамунний тиреощит (А1Т), на функцш зовышых волоскових кл^ин (ЗВК) внут-ршнього вуха хворих е проблемою, яка доа до-стеменно не вивчена. Дослщники, як вивчали функцш кл^ин внутршнього вуха за допомогою методiв объективно!' аудюметри', лише показува-ли результат впливу, не поглиблюючись до характеристики вщповщних механiзмiв [1,2].
Процес описання характеру будь-якого пато-лопчного процесу треба починати з розумшня фiзiологiчних чинниш, як е так званою основою. Транспортний бток престин, який знаходиться в мембран ЗВК, приймае участь в процес елект-ромотильност [3]. Процес юнного транспорту кл^ини регулюеться багатьма системами, одш-ею з котрих е кальцш-кальмодулшова.
Келер i ствавтори при дослщженн впливу кальмодулiну (СаМ) на функцш транспортного
бiлку престину виявили, що бток мае внутрн шньо невпорядкованi дiлянки (IDR), на як може впливати СаМ та зв'язаний з ним кальцiй. При безпосередньому зв'язуванш СаМ з IDR дтян-кою вiдбуваеться процес ïï гiперполяризацiï i, як наслiдок, функ^я престину змiнюеться [4].
Томохiро Кога та ствавтори дослiджували роль кальцш-кальмодулш залежно!' протешкша-зи IV (СамК4) в регуляцiï роботи антигенпрезен-туючих i Т-клiтин iмунноï системи людини. Про-водячи огляд лiтературних джерел, дослщники виявили, що саме СаМК4 е одним з ключових чинникв у розвитку аутоагресiï та зм^ функцiï Т-клiтин [5].
Автоiмуннi процеси активують про- та анти-запальн реакцiï за рахунок збiльшення аутоан-титiл, якi е цитотоксичними i модулюють нативну роботу клiтини. В лiтературi описуються дослн дженi факти ототоксичност вiдносно впливу, на-приклад, салщила^в, гiперекспресiя яких спо-стер^аеться при активацiï автоiмунних процесiв
[6,7,8,9].
Важливим е вплив кальцш/кальмодулшово! системи на розвиток автамунного процесу за рахунок регуляцп Т-клiтин. Рiвень Т-клiтин змн нюеться пiд впливом антитiл до тиреоперокси-дази (АТПО) та антитт до тиреоглобулiну (АТТГ), модулюеться експреая кiназних бiлкiв ^eï системи, а саме CaMK4. Саме зв'язування СаМК з кальцiем змiнюе конфiгурацiю престину, збтьшуючи потенцiали пперполяризацп.
На думку авторiв нашого дослiдження, сутте-вим доповненням до вивчення буде описання причини попршення роботи ЗВК внутршнього вуха при А1Т в стан еутиреозу. Ми вирiшили ви-ключити вплив гормонально1 дисфункцГГ щито-подiбноï залози (ЩЗ) для аналiзу саме iмуноло-пчно1 складовоï процесу аутоагресп.
Мета дослiдження
Дослiдити механiзм розвитку порушення фу-нкцiï ЗВК при А1Т у дослiджуваних осiб. Виявити i охарактеризувати взаемозв'язок мiж порушен-ням функцiï ЗВК i автамунною активнiстю в ЩЗ осiб з А1Т.
Матерiали та методи дослщження
Для даного дослiдження було вiдiбрано 59 хворих на А1Т в стаж еутиреозу. Контрольну групу склали здоровi люди (29 оаб), без гостро'1' або хронiчноï патологiï оргашв ендокринноï, се-рцево-судинноï систем та ЛОР-оргашв. Вiк хворих коливався вщ 22 до 48 рош та в середньо-му становив 33,25±6,32 рокiв. Перед дослщжен-ням хворi були обстеженi лкарем-ендокринологом. Для уточнення дiагнозу AlT ко-жнiй особi було проведено визначення рiвнiв ти-реотропного гормону (ТТГ), вiльного тироксину (Т4), вiльного трийодтиронiну (Т3), АТПО, АТТГ. Дiагноз А1Т в станi еутиреозу встановлювався у випадку пщвищення навiть одного з показниш -АТТГ чи АТПО. В контрольну групу увшшли особи, як не мали хрошчно! або гостроï патологiï з боку ендокринноГ, серцево-судинноï та нервовоï систем, а також не мали хрошчно! патологи слу-ховоï системи. Функцш ЗВК внутрiшнього вуха оцiнювали за допомогою реестрацiï ПСОАЕ на апарат для об'ективноï аудiометрiï «Нейро-Аудю».
Стан слуху вивчався в залежност вiд авто-iмунноï активностi, яка була виражена кшькюни-ми значеннями рiвнiв антитiл до тиреоглобулiну i тиреопероксидази. Оцшка функцiонального стану внутршнього вуха проходила по методик, яка описана ранiше, за допомогою реестрацп ПСОАЕ.
Додатково проведено оцiнку функци слуху враховуючи специфiчнi бiохiмiчнi показники, зо-крема бiлку престину.
Оцшивши поширенiсть порушення функцiï ЗВК виявилося, що функ^я внутрiшнього вуха значно частше порушуеться в частотному дiа-
na30Hi 5714 -8000 Гц, тому подальший аналiз даних в нашш po6oTi вирiшено проводити саме на цьому частотному в^зку.
PiBeHb бтка престину в сироватцi перифе-ршноТ кровi обстежених пацieнтiв та здорових оаб визначався методом iмуноферментного аналiзу (1ФА) за допомогою набору реагенпв Human Prestin (SLC26A5) ELISA Kit (MyBioSource, California, San Diego, USA, Cat No: MBS282125). Оптична щтьнють у лунках мiкро-планшету вимiрювалась при довжинi хвилi 450 нм на iмуноферментному аналiзаторi SUNRISE RC, Tecan Trading AG, Switzerland. Мануфактур-ний дiапазон чутливостi набору складав 15.6 пг/мл - 1000 пг/мл.
У цьому дослщжены використовуеться сенд-вiчева система ELISA з двома дтянками. Спе-цифiчне антитiло було попередньо нанесено на мiкропланшет. Зразки та стандарти переносили-ся в свердловини. Пюля видалення будь-яких незв'язаних речовин; додавали бютш-кон'юговане антитто. Пiсля промивання додавали стрептавщш-кон'юговану пероксидазу хро-ну. Пiсля промивання, щоб видалити незав'яза-ний реагент авщин-ферменту, додавали суб-стратний розчин i виникало забарвлення.
Статистичну обробку результат дослiджень проводили за допомогою статистичного пакету Statistica 8.0 StatSoft. Inc. 1998-2007 pp. та про-грама Statistical Package for the Social Sciences 17. Проводився дескриптивний аналiз кожноТ вибiрки з розрахунком середнього значення (М) та стандартно!' похибки (m). Порiвняння двох не-залежних сукупностей проводилось за непара-метричним тестом - U-тест Манна-У^ш (U-test Mann-Whitney), при бiльше двох вибiрок - за тестом Крускала Уолюа ANOVA за ранками (Kruskal-Wallis ANOVA by Ranks). Значущими розбiжностi вважались при значеннях коефiцiен-та достовiрностi р<0,05. Розмах нормальних значень у контрольнш групi знаходився у межах (М±1б). Характер зв'язку мiж змiнними показни-кiв визначався шляхом розрахунку коефiцiента кореляцiТ Pearson. Додатково ми визначали ко-ефiцiент внутрiшньокласовоТ кореляцiТ, за його числовим вираженням визначався стушнь симе-тричност процесу.
Результати дослiдження та |'х обговорення
Проведенi дослiдження функцiТ ЩЗ у хворих основноТ i контрольноТ групи показали (табл. 1), що середнiй рiвень ТТГ у хворих основноТ групи складав 2,76±0,12 мкМО/мл, середнiй рiвень Т3 вiльного - 3,34±0,07 пг/мл, середнш рiвень Т4 вн льного - 1,19±0,003 нг/дл, що вщповщало нор-мальним показникам. У оаб контрольноТ групи ТТГ - 2,99±0,14 мкМО/мл, рiвень Т3 дорiвнювaв 3,28±0,009 пг/мл, Т4 - 1,20±0,004 нг/дл.
Таблиця 1
РШ гормошв ЩЗ в oci6 контрольноï та основноГ групи (М±т)
Показник Контрольна група (n=29) Основна група (n=59) р
ТТГ (мкМО/мл) 2,99±0,14 2,76±0,12 0,229
Т3 (пг/мл) 3,28±0,009 3,34±0,007 0,663
Т4(нг/дл) 1,20±0,004 1,19±0,003 0,909
Таблиця 2
Розподл дослiджуваних за рiвнем АТТГ(М±т)
Показник Контрольна група (n=29) Основна група (n=59) р
АТТГ (мкМО/мл) 76,21±5,04 207,83±10,04 <0,001
Таблиця 3
Розподл дослiджуваних за рiвнем АТПО(М±т)
Показник Контрольна група (n=29) Основна група (n=59) р
АТПО (МО/мл) 14,83±1,39 72,19±6,89 <0,001
Середнш вмют АТТГ у oci6 основно''' групи становив 207,83±10,04 мкМО/мл, в контрольна rpyni - 76,21±5,04 мкМО/мл (табл. 2).
Показники АТПО в основнш rpyni в серед-ньому були на piвнi 72,19±6,89 МО/мл, в контрольнш гpyпi - 14,83±1,39 МО/мл (табл. 3).
Отже, дан свщчать про достовipне пiдвищення показникiв автамунно' активностi в основнiй гpyпi дослщження поpiвняно з контрольною групою i но-рмальну фyнкцiю ЩЗ у вах дослщжуваних.
Аналiз частоти порушення функци
Поширенють порушення функци ЗВК на час-TOTi 1000 Гц праворуч склала 6,8% в основнш rpyni та 3,4% в груш контролю, статистична до-стовipнiсть вщсутня (р=0,465) (таблиця 4). Ре-зультати дослщження з лiвого боку були схож1, статистично! достовipностi теж не знайдено. При цьому, аналiз одномоментного ураження правого i лiвого вуха коефiцieнт 1СС склав 1,00 що ха-рактеризуе високу симетричнють процесу.
Таблиця 4
' зовшшшх волоскових клтин за даними ПСОАЕ (абс., %) (М±т)
Частотнi вiдpiзки та сторона дослщження при реестрацп ПСОАЕ Групи обстежених
Основна група (n=59) Контрольна група (n=29)
Абс. % Абс. %
R1000 4 6,8 1 3,4
L1000 4 6,8 1 3,4
R1429 5 8,5 2 6,9
L1429 4 6,8 2 6,9
R2000 3 5,1 1 3,4
L2000 3 5,1 1 3,4
R2857 3 5,1 1 3,4
L2857 3 5,1 1 3,4
R4000 2 3,4 0 0
L4000 2 3,4 0 0
R5714 7 11,9 2 6,9
L5714 8 13,6 2 6,9
R8000 20 33,9* 4 13,8*
L8000 18 30,5* 3 10,3*
Прим1тка: * — статистично значущ1 в1дм1нност1 при р < 0,05;
При проведены аналiзy отриманих даних на частой 1429 Гц виявилося, що частота порушення функци ЗВК внутршнього вуха у оаб хво-рих на А1Т в стан еутиреозу з правого боку склала 8,5%, в оаб контрольно! групи - 6,9%, р=0,580. З лiвого боку частота порушення функци ЗВК склала 6,8%, функ^я ЗВК в контрольнш груш порушувалась з частотою 6,9%, статично! достовipностi не знайдено (р=0,649). При цьому, аналiз одномоментного ураження правого i лiво-го вуха коефiцieнт 1СС склав 0,937 (95 Д1 -0,894-0,965, р<0,001), що характеризуе високу симетpичнiсть процесу.
Порушення функци ЗВК на частой 2000 Гц в основнш груш праворуч в^^чалося у 5,1%, в контрольнш груш даний показник склав 3,4%, дат не е статистично достовipними (р=0,599).
— р < 0,01; *** — р < 0,001.
1дентичн даы, без статистично' достовipностi отримано i з лiвого боку на частой 2000 Гц. При цьому, аналiз одномоментного ураження правого i лiвого вуха коефiцieнт 1СС склав 1,00, що характеризуе високу симетричнють процесу. Фу-нк^я ЗВК на частой 2857 Гц з правого боку порушувалась у 5,1% вщсотка оаб, хворих на А1Т, в оаб контрольно' групи у 3,4%, статистична до-стовipнiсть вiдсyтня (р=0,599). Данi, отpиманi на частотi 2857 Гц з лiвого боку, мають iдентичнi числовi показники i не мають статистично' до-стовipностi (р=0,599). При цьому, аналiз одномоментного ураження правого i лiвого вуха кое-фiцiент 1СС склав 1,00, що характеризуе високу симетричнють процесу.
Даш, отримаш при аналiзi результат ПСОАЕ на частотi 4000 Гц, з правого боку гово-
рять про вщсутнють порушення функци ЗВК в oci6 контрольно1 групи з правого i лiвого боку, поширенiсть ПФЗВК у хворих на А1Т праворуч склала 3,4%, лiворуч - 3,4%. Статистично1 до-стовiрностi не знайдено (р=0,477). При цьому коефiцieнт 1СС склав 1,00, що характеризуе про-цес порушення як високо симетричний.
Аналiз порушення слуху на частой 5714 Гц виявив вщсутнють статистично достовГрно1 рГз-ницi у порушены функци ЗВК у хворих на AlT, у порiвняннi з контрольною групою. Якщо проана-лiзувати данi в таблицi 4.1, вщсоток вiдсутностi iнтервалу (>6 Дб) мiж кривими продуктiв спотво-рення i шумом на частой 5714 Гц в груш хворих з AIT, праворуч склав 11,9%, в контрольнш груш - 6,9% i е статистично недостовiрним результатом (р=0,470). Вщсоток порушення функци ЗВК лiворуч в груш хворих з AIT складав 13,6%, в контрольна груш - 6,9% i теж е статистично недо-стовiрним (р=0,355). При цьому, аналiз одномоментного ураження правого i лiвого вуха коефн цiент 1СС склав 0,961 (95 Д1 - 0,935-0,977, р<0,001), що характеризуе високу симетричнiсть процесу. Тобто на частой 5714 Гц у обстежува-них нами па^етчв не було визначено порушення слухово'1' функцiï у хворих з AIT у стаж еути-реозу. Слухова функ^я у цих па^етчв не вщрн знялась вiд показникв у здорових осiб контрольно'' групи.
Проведений порiвняльний аналiз виявив, що ктькють пацiентiв з порушенням функцiï ЗВК, про що свщчила вiдсутнiсть рiзницi (>6 Дб) мiж кривими емiсiï i шуму на частой 8000 Гц DP-грам в груш хворих з AIT, праворуч склала 33,9%, що значно бтьше в порiвняннi з даними, отримани-
ми вщ обстеження контрольноï групи (13,8%), i е статистично достовiрним результатом (р=0,047). Вiдсоток порушення функци ЗВК лiворуч в групi хворих з AlT складав 30,5%, що теж е значно бь льшим показником щодо результату в контроль-нш групi (10,3%) i е статистично достовiрним (р=0,037). При аналiзi одномоментного ураження правого i лiвого вуха коефiцiент внутршньокла-совоï кореляци (1СС) склав 0,917 (95 Д1 - 0,8610,951, р<0,001). Це говорить про досить високий показник симетричност порушення на частой 8000 Гц, що вказуе на переважно дво6Гчний характер ураження, в той час як сенсоневральна приглухуватють викликана шшими чинниками (судинним, шфекцшним, травматичним) е переважно одно6Гчним процесом.
При дослщженш особливостей ураження функци ЗВК нами отримано дат, як свщчать про переважання порушень звукосприйняття на 6Гльш високих частотах. Отже, ми виршили об'еднати частоти i частотнi дiапазони, на яких був виявлений бтьший вщсоток порушень функци ЗВК (5714 Гц i 8000 Гц) i менший вщсоток (1000 Гц, 1429 Гц, 2857 Гц та 4000 Гц) i додатко-во проаналТзували поширенють порушення функци ЗВК внутршнього вуха дослщжуваних осГ6.
УзагальнюючТ показники частоти порушення функцiï ЗВК в частотному дТапазош вГд 1000 Гц до 4000 Гц, було виявлено, що в оаб основноГ групи з правого боку даний показник складае 25,4%, з лТвого боку 23,7%. В оаб контрольно! групи даний показник склав 13,8% з обох сторш. Статистична достовГрнють отриманих результа-тГв вГдсутня (праворуч р=0,166, лТворуч р=0,213) (рис. 1).
Рис. 1. Анал'з частоти порушення функци 3oeHiiMHix волоскових клтин за даними ПСОАЕ, в д'апазош частот 1000Гц - 4000 Гц, у apyni хворих з А1Т та контрольнiй apyni праворуч (rightjow frequency diapasone) та лiворуч (left low frequency diapasone)
Рис. 2. Анал'з частоти порушення функцП' зовн1шн1х волоскових кл1тин за даними ПСОАЕ, в диапазон частот 5714Гц - 8000 Гц, у apyniхворих з А1Т та контрольн1й apyni праворуч (Right_High frequency diapasone)
та лiворуч (Left_High frequency diapasone)
Як видно з рисунку 2, вщсоток порушення функцп' ЗВК в частотному дiапазонi 5714 Гц -8000 Гц, в груш хворих з А1Т, праворуч склала 40,7%, в контрольнш груш частота порушення функцп ЗВК праворуч склала 13,8%, що е стати-стично достовiрним результатом (р=0,011). По-ширенють порушення функцп ЗВК лiворуч в груш хворих з А1Т склала 37,3%, що майже в три рази перевищуе результати контрольно!' групи (13,8%) i е статистично достовiрним результатом (р=0,02з). При аналiзi одномоментного ураження правого i лiвого вуха отримано наступний результат - коефiцiент 1СС склав 0,925 (95 Д1 -0,874-0,955, р<0,001). Це характеризуе процес як симетричний.
Таким чином, при дослщжены частоти вра-ження ЗВК у дiапазонi частот 5714-8000 Гц нами виявлено, що вщсоток порушення функци ЗВК праворуч складае 40,7%, лiворуч 37,3%, що зна-чно перевищуе показники контрольно! групи (13,8%) i е статистично достовiрним результатом.
На рисунку 3 видно, що середнш рiвень пре-стину в периферiйнiй кровi оаб основно! групи дорiвнюе 170,26±12,39 пг/мл, що майже в два рази перевищуе показники в оаб контрольно! групи, де рiвень бтку становив 96,02±3,31 пг/мл. Отримаш данi мають статистично достовiрне значення (р<0,0001).
Рис. 3. Рiвнi блку престину в периферiйнiй кровi у оаб основно)' i контрольноï груп.
Рис. 4. Показники концентрацп блку престину в периферiйнiй кровi в залежной eid пiдвишення pieHie АТПО i АТТГeidHOCHO
нормальноï концентрацп' в пеpифеpiйнiй Kpoei хворих на А1Т.
Дiагноз А1Т може бути виставлений патенту, у якого пщвищений piBeHb антитiл тiльки одного з показникв (АТПО або АТТГ). Тому ми додатко-во роздтили основну групу осiб на пщгрупи в залежностi вiд показникiв антитт - серонегатив-нi та серопозитивш. Рiвнi престину вiдповiдно до концентрацп АТПО i АТТГ представлен на рисунку 4. В оаб контрольно!' групи концентрацiя бт-ку в перифершнш кровi була 96,02±3,31 пг/мл, у серопозитивних пацiентiв за АТПО i АТТГ -216,66±22,28 пг/мл, у серонегативних оаб -135,74±15,54 пг/мл.
Отже, рiвень престину достовiрно вищий майже в два рази в основнш групi дослщжува-
рацп цього бiлка вiдповiдно до рiвнiв АТПО i АТТГ виявилось, що в серопозитивнш пiдгрупi па^етчв з А1Т концентрацiя його значно вища шж в серонегативнiй пщгрупк
З метою доказу наявностi взаемозв'язку мiж порушенням функци' ЗВК i концентра^ею бiлку престину в кровi пацiентiв з А1Т ми провели ко-реляцiйний аналiз (рис. 5). За результатами цього аналiзу виявлено, що коефiцiент кореляци' ni-рсона дорiвнюе -0,3840 (р=0,0027). Сшвставлен-ня даних проводилося при дослщженш ПСОАЕ на частотi 8000 Гц з лiвоï сторони реестрацп. Ц данi свiдчать про те, що кореляцшний зв'язок е зворотнiм та статистично достовiрним.
них. KpiM того, при проведены анал1зу концент-
Scatterpiûi. Pie are. pgflrLvs. Сш_л1ва (600 0 не). a8[Casewlse MD »letton)
со
10 16 И 12
£ 10
О о
Ш 8
m
ш
6 4 2 Ù ■2
Corrélation 1= - 3BdO" гк 0027
ч 0 0, 95 Contint.
о о
е Qfd О а С fj
--- с -__о _ О ■ -___ о о а О
о . ■ —._____
о О 6 о ~~ -
о О 0
о О о ^ ^ с
100
200
300
Prestine, ¡igimL
400
500
еоо
Рис. 5. Кореля^йний зв'язок м'жрвнем престину в пеpифеpiйнiй кровi осб з А1Т та порушенням функцц' ЗВК пацieнтiв при реестрацп' ПСОАЕ на лiвому боц дослiдження (лiве вухо), частота 8000 Гц.
ScattEf р я: FtBslne, p^mLvs. СШ_пра&в (ВООО Hz;., dB {Casewae Ml dEtetion;
Fïestn&, pgrmL
Рис. 6. Кореляц1йний зв'язок м'жр:внем престину в перифер1йн1й кровi осб з А1Т та порушенням функц/ï ЗВК nau,ieHmie при реестрацп ПСОАЕ на правому боц дослiдження (праве вухо), частота 8000 Гц.
Scatterplot: Prestine, pçyrrLvs. АТГО, МО/мп [Casewse H□ deletion) AT ПО, МОУмл =20,312 + ,30463 * Prestine, pgJmL
0 Correlation: г = J5 0.95 СопГ.In 42; р< ,0001 t. a
- ~~ Û __
о о О
û
Q ù - е- ---
о a
0 100 200 300 400 500 600
Prestine, pg^rrL
Рис. 7. Кореляц1йний зв'язок м'жр:внем антитл до тиреопероксидази та бЛком престином в перифер1йн1й кровi оаб основноТ групи.
Scatterplot: Prestine, pg/mL vs. АТТГ, мкМО/ми (Cas е™ se MD deletion) АТТГ, мкМО/мл = 112,63 + ,55917 * Prestine, pgimL
Сог efetion: г = ,39 2° р= ,002
0,95 ConfJnt. о
о a û .- о _____
о
о о о да о О'-'' ' о _ - ^ —о- „ - ' ' " "
гв- О - - - о Û о о О
о о о 0 с Ос
О 100 200 300 400 500 600
Prestine, pg/mL
Рис. 8. Кореляц1йний зв'язок м'жр:внем антитл до тиреоглобул1ну та бЛком престином в перифер1йн1й кровi oci6 основноТ групи.
Проаналiзовано дат, що отримано при ре-естрацп на правш сторож дослщження на часто-Ti 8000 Гц (рис. 6). Коефiцieнт ^рсона показав зворотнiй (r=-0,4838) та статистично достовiрний (р=0,002) зв'язок.
Таким чином, можна стверджувати, що при зниженн функци' ЗВК внутрiшнього вуха з обох сторш дослiдження концентрацiя бтку Престину в периферiйнiй кровi па^енпв з А1Т пщвищуеть-ся.
На рисунку 7 представлений результат коре-ляцшного аналiзу, що характеризуе взаемо-зв'язок мiж концентрацiею бiлка Престину i рiв-нем АТПО в перифершнш кровi пацiентiв з А1Т в станi еутиреозу. В результат даного аналiзу ви-явлено, що коефiцiент кореляци' рiвний 0,542 при р<0,0001, що характеризуе зв'язок цих двох показниш як прямий i достовiрний.
Проаналiзувавши взаемозв'язок мiж рiвнями АТТГ i престином ми виявили, що коефiцiент ко-реляцп Прсона дорiвнюе 0,392 i його значення е статистично достовiрним (р=0,002) (рис. 8).
Отже, при пщвищенн автамунно!' активностi ЩЗ, у виглядi збтьшення концентрацп АТПО i АТТГ в кровi пацiентiв збiльшуеться i концентра-цiя бiлку престину.
Обговорення результалв дослiдження
В попереднiх дослiдженнях, якi вивчали дану проблему, автори надавали шформацш, яка тiльки фактично пщтверджувала процес пору-шення функцп ЗВК при А1Т. Вони не поглиблю-вали дослiдження до розумiння конкретного ме-ханiзму, який би давав ч^ке уявлення, яким чином порушуеться слух при А|Т [1,2]. На нашу
думку, пщвищення концентрацп pîbhîb антитiл до продуктiв метаболiзму в ЩЗ впливае не ттьки на функцiю залози, але i на оргашзм в цiлому. Винятком не е i внутршне вухо. Пюля статисти-чного аналiзу отриманих даних пщтверджено не-гативний вплив на функцш ЗВК внутрiшнього вуха. Даний процес е симетричний. Можна зро-бити припущення, що внаслщок дм каспазних 6i-лкiв змшюеться форма i, вiдповiдно, страждае функ^я престину. Його концентрацiя в перифе-ричнiй кровi зростае внаслiдок неможливост його нормального розмiщення в мембран ЗВК. I саме на даному еташ, коли порушення функцп не мае явних проявiв, як турбують пацiента i е доцтьним проведення реестраци' ПСОАЕ i ви-значення рiвнiв престину.
Висновки
У хворих на AIT у фазi еутиреозу мають мiсце порушення функцп ЗВК, про що свщчать отри-манi нами данi ПСОАЕ в дiапазонi частот 57148000 Гц. При цьому частота ураження функцп ЗВК у дiапазонi частот 5714-8000 Гц в оаб, хворих на AIT майже в три рази перевищуе показ-ники в контрольнш груш.
Концентра^я бiлка престину у оаб з AIT зна-чно вища шж в дослщжуваних контрольно!' групи. Крiм того, рiвень даного протешу вищий в оаб з пщвищеною концентрaцiею АТПО i АТТГ в серопозитивнiй шдгруш по вiдношенню до дослщжуваних з низькою концентрaцiею цих пока-зникiв.
Iснуе зворотнiй достовiрний взаемозв'язок мiж порушенням функцп' ЗВК на частой 8000 Гц при реестрацп ПСОАЕ на обох сторонах дослн
дження i рiвнями престину у oci6 з А1Т в CTaHi еутиреозу.
PiBeHb концентрацп престину зростае одно-часно 3i збiльшенням концентрацп АТПО i АТТГ в KpoBi па^енпв.
Перспективи подальших дослiджень
Отриманi нами дан свiдчать про доцiльнiсть дослщження функцп ЗВК методом ПСОАЕ на-BiTb у випадку, коли па^енти з А1Т не висувають скарг на порушення слух. Визначення рiвнiв бт-ку престину в перифершнш кровi методом 1ФА може бути застосоване як метод ранньоТ дiагно-стики порушень слуху, оскiльки це допоможе ви-явити можливi ранн змiни функцГТ слухового рецептору у таких хворих.
References
1. Gawron W, Pospiech L, Noczenski A, Erendors-Raczkowska K. Electrophysiological tests of the hearing organ in Hashimoto's disease. Journal of Pediatric Endocrinology&Metabolism. 2004; 17: 27-32.
2. Arduc A, Isik S, Allusoglu S. Evaluation of hearing function in patients with euthyroid Hashimoto's thyroiditis. Endocrine. 2015. Available from: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25963023.
3. Zheng J, Shen W, He DZ, Long KB, Madison LD, Dallos P. Prestin is the motor protein of cochlear outer hair cells. Nature. 2000 May 11; 405(6783): 149-55.
4. Keller JP, Homma K, Duan C, Zheng J, Cheatham MA, Dallos P. Functional regulation of the SLC26-family protein prestin by cal-cium/calmodulin. The Journal of neuroscience. 2014 Jan 22; 34(4): 1325-32.
5. Koga T, Kawakami A. The role of CaMK4 in immune responses. Modern rheumatology. 2018 Mar; 28(2): 211-4.
6. Zhou Y, Takahashi S, Homma K, Duan C, Zheng J, Cheatham MA, Zheng J. The susceptibility of cochlear outer hair cells to cyclodex-trin is not related to their electromotile activity. Acta Neuropathol Commun. 2018 Sep 24; 6(1): 98.
7. Alvan G, Berninger E, Gustafsson LL, Karlsson KK, Paintaud G, Wakelkamp M. Concentration-Response Relationship of Hearing Impairment Caused by Quinine and Salicylate: Pharmacological Similarities but Different Molecular Mechanisms. Basic Clin Pharmacol Toxicol. 2017 Jan; 120(1): 5-13.
8. Hakizimana P, Fridberger A. Effects of salicylate on sound-evoked outer hair cell stereocilia deflections. Pflugers Arch. 2015 Sep; 467(9): 2021-9.
9. Santos-Sacchi J, Song L. Chloride and salicylate influence prestin-dependent specific membrane capacitance: support for the area motor model. J Biol Chem. 2014 Apr 11; 289(15): 10823-30.
Реферат
ИССЛЕДОВАНИЕ МЕХАНИЗМА РАЗВИТИЯ И ВЗАИМОСВЯЗИ МЕЖДУ НАРУШЕНИЕМ ФУНКЦИИ НАРУЖНЫХ ВОЛОСКОВЫХ КЛЕТОК ВНУТРЕННЕГО УХА ЧЕЛОВЕКА И АУТОИММУННЫМ ТИРЕОИДИТОМ Науменко А.Н., Деева Ю.В., Тарасенко М.В.
Ключевые слова: аутоиммунный тиреоидит, отоакустическая эмиссия, престин, антитела к тиреоглобулину, антитела к тиреопероксидазе, статистический анализ.
В представленной работе исследована распространенность нарушения функции структур внутреннего уха у лиц с аутоиммунным тиреоидитом в состоянии эутиреоза. Исследована гормональная функция и активность аутоиммунного процесса в щитовидной железе. Определены уровни такого специфического для характеристики функции внутреннего уха биохимического показателя, как белок Престин. Слух исследован с помощью регистрации отоакустической эмиссии на частоте продуктов искажения. Последующий многогранный статистический анализ выявил достоверные данные о нарушении функции наружных волосковых клеток внутреннего уха, повышение уровня Престина у лиц с аутоиммунным тиреоидитом по сравнению со здоровыми людьми. Кроме того, полученные нами результаты позволяют определить основные звенья в механизме развития нарушений слуха при аутоиммунном тиреоидите и подтверждают достоверность взаимосвязи между повышением аутоиммунной активности в щитовидной железе и снижением функции наружных волосковых клеток внутреннего уха.
Summary
MECHANISM OF DEVELOPMENT of inner ear EXTERNAL CILLIARY CELL dysfunction AND its correlation with AUTOIMMUNE TYROIDItIS
Naumenko A.N., Deeva Yu.V., Tarasenko M.V.
Key words: autoimmune thyroiditis, otoacoustic emission, Prestin, antibodies to thyroglobulin, thyroid peroxidase antibodies, statistical analysis.
This article focuses on the prevalence of dysfunction of the inner ear structures in individuals with autoimmune thyroiditis in the state of euthyroidism. The hormonal functioning and intensity of autoimmune process in the thyroid gland were investigated. We determined the level of Prestin protein, a specific biochemical parameter for an internal. The hearing was assessed by recording the otoacoustic emission at the distortion products frequency. Subsequent multifaceted statistical analysis revealed reliable data of the function disruption of external cilliary cells of the inner ear, the increasing of Prestin protein levels in autoimmune thyroiditis group compared with healthy individuals. In addition, the results allow us to outline the main links in the mechanism of hearing impairment development in autoimmune thyroiditis and prove the reliability of the relationship between increased autoimmune activity in the thyroid gland and hearing function impairment.
