CC BY
48
УДК 615.282.576.5
ДОСЛ1ДЖЕННЯ ДН ДЕКАМЕТОКСИНУ ТА ИОГО Л1КАРСЬКИХ ФОРМ НА АДГЕЗ1Ю
БАКТЕР1Й
В poöoTi наведенi HOBi даш щодо ди лiкарських антисептичних препараив декаметоксину® аурщексану, горостену®, декасану® на адгезивш властивостi штамiв стафiлококiв i ешерихiй. Встановлено, що на адгезш S. aureus та E. coli суттево впливали вiдповiднi мiнiмальнi бактерюстатичш та бактерициднi концентрацп декаметоксину ® (0,481,90 мкг/мл; 1,90-15,20 мкг/мл); аурщексану та горостену® (0,96-7,60 мкг/мл; 3,80-15,20 мкг/мл); декасану® (1,90-3,80 мкг/мл; 3,80-15,20 мкг/мл), яю можуть забезпечити надшний профшактичний та лiкувальний ефект.
Ключовi слова: адгезiя, стафiлококи, ешерихп, декаметоксин®, аурiдексан, горостен®, декасан®.
1нфекцшш захворювання розглядають як результат взаемодп збудниюв з кттинами оргашзму хазя!на. Вщомо, що одшею з раншх стадш шфекцшного процесу е адгез1я збудника в тканинах. Адгез1я та колошзащя служать пусковими мехашзмами шфекцшного процесу. Мшрооргашзми, активно долаючи природш захисш бар'ери макрооргашзму, прикршлюються до поверхш клиин шюри, слизових оболонок за допомогою адгезишв, що взаемоддать з кттинами макрооргашзму. Специф1чна адгез1я вщбуваеться внаслщок молекулярно! взаемодп м1ж адгезинами мшробно! клиини та рецепторами кл1тии господаря (лпанд-рецепторна взаемод1я). Адгезини належать до поверхневих структур мшробних клиин, до складу яких входять макромолекули лектишв, проте!шв i здатш зв'язувати карбопдрати. Рецептори адгезишв знаходяться на поверхш клиин у вигляд1 бшкових фрагменпв [4].
У грамнегативних мшрооргашзм1в адгезини входять до складу ворсинок, ф1мбрш, тлей. 1х називають ф1мбр1альними адгезинами. Грампозитивш бактерп здшснюють адгезда за допомогою аф1мбр1альних адгезишв. Структура аф1мбр1альних адгезишв представлена бшковими молекулами, що тюно зв'язаш з цитоплазматичною мембраною бактер1ально! клиини. Рецепторами для адгезишв грампозитивних бактерш е ф1бронектин, бшки м1жклиинного матриксу. Мшрооргашзми прилипаючи, колошзують ештелш дихальних шлях1в, кишкового тракту, сечовидшьно! системи. В процес шфекцшного ураження адгезини мшрооргашзм1в запускають патолопчний процес, розмноження збудниюв у тканинах [5].
Оскшьки провщна роль в здшсненш взаемодп мшрооргашзм1в 1з мшенями належить процесам м1жмембранно! адгезивно! взаемодп, науковщ зосереджують увагу на вивченш адгезп для вдосконалення нових метод1в д1агностики, лшування, профшактики шфекцшних захворювань. Вщомо, що протимшробш лшарсью засоби д1ють на структуры елементи клиинно! стшки мшрооргашзм1в. 1х називають адгезинами. Доведено, що лшарсью антисептичш препарати локатзують збудники в раш; гальмують !х проникнення в кров i л1мфу; блокують адгез1ю мшрооргашзм1в до клиин ранового ложа; пригшчують патогеннють, гальмують проникнення, розмноження бактерш в тканинах пащенпв. Антисептики можуть блокувати адгезда мшрооргашзм1в i суттево впливати на перебп шфекцшного процесу в оргашзм1 людини. Пошук протимшробних засоб1в, яю суттево впливають на адгезда збудниюв захворювань продовжуеться та залишаеться актуальним i важливим [1, 2, 3].
Метою роботи було дослщити вплив декаметоксину®, аурщексану, горостену®, декасану® на адгезивну здатшсть стафшокоюв, ешерихш.
Матер1ал та методи дослщження. В якосп тест-мшрооргашзм1в використовували музейн штами S. aureus АТСС 25923, S. aureus 27; E. coli М-17, E. coli АТСС 25922. Для дослщження застосовували лшарсью антисептичш препарати декаметоксин® (ДКМ®) аурщексан (АД), горостен® (ГС®), декасан® (ДС®). Вплив бактерюстатичних (МБсК) i бактерицидних (мБцК) доз дослщжували у ДКМ®, АД, ГС®, ДС® на адгезда клиин S. aureus АТСС 25923, S. aureus 27, E. coli АТСС 25922, E. coli М-17.
Дослщження адгезивних властивостей м1крооргашзм1в проводили за загальноприйнятою методикою з використанням формалшзованих еритроципв людини О (I) групи Rh (+). Еритроцити застосовували в якосп ушверсально! модель Вони несуть на сво!й поверхш глшофорин - речовину щентичну глшокалшсу ештел1альних клиин. Щд мшроскопом на 100 еритроцитах розраховували 1ндекс адгезивност мшрооргашзм1в (IAM) - кшьюсть адгезованих клиин стафшококу, кишково! палички на одному еритроцип, що приймав участь в адгезп. Суттевими вважали вщмшносп, яю вщр1знялись вщ контролю на 20 %. В контрольних дослщах
BcraHOBneHO ynacTb b agre3ii ернтроцнтiв (100%) O (I) rpynu Rh (+). B gOcnigax bhbh&hh giro MiHiMa^bHHx 6aKrepiocTaTHHHHx KOH^mpa^M; MimMamHHx 6aKTep^HgHHx KOH^mpa^M flKM®, aypigeKcaHy, ropocTeHy®, geKacaHy®. noKa3HHK agre3ii b KOmpOnbrnM CHCTeMi (iHTaKTHi KniTHHu) npHHMa^H 3a 100%. CTyniHb agre3ii b npncyTHOCTi flKM®, Afl, rC®, flC®, CO nigpaxOByBanH BigHOCHO Komponro [1, 2].
Pe3y^bTaTH gocnig^eHHH Ta ix o6roBopeHHH. EaKTepii MO^yTb npuKpinnroBaTHca go KniTHH MaKpoopraHi3My 3aBgaKH HaaBHOcT nineM, neKTHHonogi6HHx CTpyKTyp, BogHeBHx 3BH3KiB, chh BaH-gep-Baarnca, a TaKO^ eneKTpocTaTHHHo! B3aeMogii. HiKapcbKi aHTHcenTHHHi 3aco6n MaroTb BnacTHBicTb iHaKTHByBaTH 6iOxiMinm, $i3ionoriHHi пpoцесн MiKpoopraHi3MiB. AHTHMiKpo6Hi npenapaTH 3garai nopymyBaTH ^HTTegianbrncTb 36ygHHKiB iH^eK^HHHx 3axBOproBaHb 3aBgaKH e^eKTHBHHM MexaHi3MaM BnnHBy. 3oKpeMa, bohh cnpuHMHaroTb nopymeHHa cTpyKTypu KmTHHHOi CTiHKH, цнтoппaзмaтнннol MeM6paHH Ta CTpyKTyp, HKi npuHMaroTb ynacTb b agre3ii MiKpoopraHi3MiB; nopymeHHi CHHTe3y 6inKa b pn6ocoMax; 6noKyBaHHi пpoцесiв MeTa6oni3My b 36ygHHKiB; nopymeHHi penniKa^i, CHHTe3y HyKneiHOBHx khchot b KniTHHax MiKpoopraHi3MiB. Ha nigcraBi pe3ynbTaTiB gocnig^eHb BCTaHOBneHO, ^o flKM®, Afl, rC®, flC® b pi3HHx meck, МEцК cyTTeBO giann Ha agre3HBHy 3gaTHicTb CTa^inoKOKiB, emepuxiH (Ta6n. 1 - 4).
Ta6nn^ 1
f1oKa3HHKH gi'i ^KM® Ha agresiro CTafrinoKOKiB, emepuxm_
MiKpO-OpraHi3MH KOHTpOflb ßOcrng (MEcK) ^Ocrng (ME^K)
KiübKicTb 6aKTepiH Ha 100 epHTp. IAM* % flO3a npenapaTy, lI¥r/llTT Kinb-Tb 6aKTepiH Ha 100 epHTp. IAM* % flO3a npenapaTy, MKr/M^ KiübKicTb 6aKTepiH Ha 100 epHTp. IAM* %
S. aureus ATCC 25923 518 5,18 100 0,96 310 3,10 59,84 1,90 136 1,36 26,25
S. aureus 27 517 5,17 100 0,48 298 2,98 57,64 3,80 126 1,26 24,37
E. coli ATCC 25922 524 5,24 100 1,90 358 3,58 68,32 7,60 128 1,28 24,42
E. coli M-17 526 5,26 100 3,80 348 3,48 66,15 15,20 116 1,16 22,05
*- Ki^bKioTb agre3OBaHHX kmthh CTa^i^OKOKy, KHmKOBOi namqKH Ha ogHOMy epнтpoцнтi, hkhh npHHMaB yqaoTb b agre3ii
Ta6nn^ 2
floKasHHKH gi'i aypigeKcaHy Ha agresiro CTafrinoKOKiB, emepuxifi
MiKpO-OpraHi3MH KOHTpOflb ^Ocrng (MEcK) ßOcrng (ME^K)
KiübKicTb 6aKTepiH Ha 100 epHTp. IAM * % flO3a npenapaTy, MKr/MH KiübKicTb 6aKTepiH Ha 100 epHTp. IAM* % flO3a npenapaTy, MKr/M^ KiübKicTb 6aKTepiH Ha 100 epHTp. IAM* %
S. aureus ATCC 25923 520 5,20 100 1,90 295 2,95 56,73 7,60 120 1,20 23,07
S. aureus 27 528 5,28 100 0,96 300 3,0 56,81 7,60 126 1,26 23,86
E. coli ATCC 25922 510 5,10 100 3,80 320 3,20 62,74 15,20 108 1,08 21,17
E. coli M-17 518 5,18 100 3,80 314 3,14 60,61 15,20 110 1,10 21,23
■ Ki^bKiCTb agre3OBaHHX kmthh cTaipmOKOKy, KHmKOBOi namqKH Ha OgHOMy еpнтpoцнтi, hkhh npHHMaB yqacTb b agre3ii
Ta6nn^ 3
MiKpOOpraHi3MH KOHTpOflb .flpcmg (MEcK) ßOcrng (ME^K)
KiübKicTb 6aKTepiH Ha 100 epHTp. IAM * % flO3a npenapaTy, MKr/M^ KiübKicTb 6aKTepiH Ha 100 epHTp. IAM * % flO3a npenapaTy, MKr/M^ KiübKicTb 6aKTepiH Ha 100 epHTp. IAM* %
S. aureus ATCC 25923 510 5,10 100 0,96 280 2,80 54,90 7,60 186 1,86 36,47
S. aureus 27 515 5,15 100 0,96 296 2,96 57,48 7,60 194 1,94 37,66
E. coli ATCC 25922 496 4,96 100 3,80 266 2,66 53,62 15,20 158 1,58 31,85
E. coli M-17 488 4,88 100 3,80 270 2,70 55,32 15,20 164 1,64 33,60
*- KmbKicTb agre3OBaHHX kmthh CTa^mOKOKy, KHmKOBOi namqKH Ha OgHOMy еpнтpoцнтi, hkhh npHHMaB yqacTb b agre3ii
110
*
Таблиця 4
Показники дй' декасану® на адгезто стафшококав, ешерихiй
Мжро-оргашзми Контроль Дослщ (МБсК) Дослщ (МБцК)
Кшьгасть бактерш на 100 еритр. 1АМ* % Доза препарату, мкг/мл Кшьгасть бактерш на 100 еритр. 1АМ * % Доза препарату, мкг/мл Кшьгасть бактерш на 100 еритр. 1АМ * %
S. aureus АТСС 25923 500 5,0 100 1,90 298 2,98 59,60 3,80 114 1,14 22,80
S. aureus 27 496 4,96 100 1,90 290 2,90 58,46 3,80 110 1,10 22,17
E. coli АТСС 25922 396 3,96 100 3,80 310 3,10 78,28 15,20 105 1,05 26,51
E. coli М-17 389 3,89 100 3,80 296 2,96 76,09 15,20 103 1,03 26,48
*- кiлькiсть адгезованих клгтин стафiлококу, кишково! палички на одному еритроцип, який приймав участь в адгези
В контрольних дослщах клпини грампозитивних (стафшокок), грамнегативних (ешерихи) бактерш в 100% адгезувались на форматшзованих еритроцитах людини. Доведено, що в присутносп МБсК антисептиюв вщсоток адгезованих бактер1альних кл1тин стафшокоюв зменшився в присутносп ДКМ®(0,48 - 0,96 мкг/мл) на 57,64 - 63,07 % вщповщно; в присутносп аурщексану (0,96 - 1,9 мкг/мл) на 56,73 - 56,87 % вщповщно; в присутносп горостену® (0,96 мкг/мл) на 53,87 - 57,48 % вщповщно, в присутносп декасану® (1,9 мкг/мл) 58,46 - 59,60 % вщповщно. Встановлено, що в присутносп мшмальних бактерюстатичних концентрацш лшарських препарапв вщсоток бактер1альних кл1тин ешерихш, стафшокоюв суттево зменшився у присутносп ДКМ® (3,8 мкг/мл) на 31,68 - 42,36 % вщповщно; аурщексану (3,8 мкг/мл) на 37,26 -43,27 % вщповщно; горостену® (3,8 мкг/мл) на 42,52 - 46,38 % вщповщно; декасану® (3,8 мкг/мл) на 21,72 - 41,54 % вщповщно (табл. 1 - 4).
Доведено, що мшмальш бактерицидш концентрацн лшарських антибактер1альних препарапв значно штенсившше пригшчували адгезивний процес ешерихш в наступних межах. В присутносп ДКМ® (7,5 - 15,2 мкг/мл) пригшчували адгезда ешерихш на 22,05 - 24,42 %), аурщексан 15,2 мкг/мл (21,17 - 21,23 %), горостен® (15,2 мкг/мл) на 31,85 - 33,6 %, декасан® (15,2 мкг/мл) 26,48 - 26,51 % вщповщно. Найнижчий вщсоток адгезованих бактерш визначили в присутносп мшмальних бактерицидних концентрацш аурщексану.
Антисептичний препарат ДКМ®, його лшарсью форми (АД, ГС®, ДС®) ефективно ддать на адгезини стафiлококiв, ешерихш. Доведено, що ДКМ®, АД, ГС®, ДС® в дослщжуваних МБсК (0,48 - 3,8 мкг/мл), МБцК (7,6 - 15,2 мкг/мл) забезпечують потужну дда на адгезини бактерш, що може забезпечити високий профшактичний, лшувальний ефект в процес застосування цих лiкарських протимiркобних засобiв.
1. Жорняк О. I. Вплив антисептичних препаратгв на адгезивш властивостi мiкроорганiзмiв / О. I. Жорняк, О. К. Стукан // Буковинський медичний вюник. - 2010. - Т. 14, № 4. - С. 122-124.
2. Жорняк О. I. Дiя антисептичних засобiв на патогенш мехашзми бактерiй] / О. I. Жорняк, О. К. Стукан, В. В. Сухляк // Annals of Mechnikov Institute. - 2010. - № 4. - С. 53 - 58.
3. Ковальчук В. П. Докл^чне вивчення ефективност нових адгезивних лкарських засобiв для протимкробного захисту полiмерних виробiв медичного призначення / В. П. Ковальчук, В. М. Кондратюк, Д. I. Гадлевська // Лжи - людиш : Сучасш проблеми створення, дослщження та апробацп лшарських засобiв : Матерiали XXVI наук.-практ. конф. з ]шжнародною участю, 12 бер. 2009 р. : тези доп. -Х., - 2009. - С. 47.
4. Мавзютов А. Р. Факторы патогенности оппуртунистических энтеробактерий и их роль в развитии диареи / А. Р. Мавзютов, В. М. Бондаренко, Н. Ю. Жеребцова [и др.] // Журнал микробиологии. - 2007. - № 1. - С. 89 - 97.
5. Мироненко Л. Г. Адгезивш властивост ентерокомв, iзольованих вщ хворих на нейрохiрургiчну патолопю / Л. Г. Мироненко, О. Г. Перетятко, I. С. Великий // Вюник проблем бюлогп i медицини. - 2012. - Вип. 4. - Т. 1, № 96. - С. 180 - 183.
ИССЛЕДОВАНИЕ ДЕЙСТВИЯ ДЕКАМЕТОКСИНА И ЕГО ЛЕКАРСТВЕНН1Х ФОРМ НА АДГЕЗИЮ БАКТЕРИЙ
Гончар О. О., Назарчук А. А., Палий Д. В., Коваленко И. В., Яцула О. В., Буркот В. М.
В работе приведены новые данные в отношении действия лекарственных антисептических препаратов декаметоксина® ауридексана, горостена®, декасана® на
THE RESEARCH OF THE ACTIVITY OF DECAMOTHOXIN AND ITS MEDICINAL FORMS ON ADHESSION OF BACTERIA Gonchar O. O., Nazarchuk O. A., Paliy D. V., Kovalenko I. V., Yatsula O. V., Burkot V. M. In the research there were presented the new data of activity of antiseptic remedies decamethoxin®, auridexan, horosten®, decasan® on adhesive qualities of strains of
адгезивные свойства штаммов стафилококков и эшерихий. Установлено, что на адгезию S. aureus и E. coli существенно влияют соотвествующие минимальные бактериостатические и бактерицидные концентрации декаметоксина ® (0,48-1,90 мкг/мл; 1,90-15,20 мкг/мл); ауридексана та горостена® (0,967,60 мкг/мл; 3,80-15,20 мкг/мл); декасана® (1,90-3,80 мкг/мл; 3,80-15,20 мкг/мл), которые могут обеспечить надежный профилактический и лечебный эффект.
Ключевые слова: адгезия, стафилококки, эшерихии, декаметоксин®, ауридексан, горостен®, декасан®.
Стаття надшшла 4.09.2015 р.
Staphylococcus and Escherichia. It was found, that minimal bacterial inhibitory and cidal concentrations of decamethoxin® (0,48-1,90 мкг/мл; 1,90-15,20 мкг/мл); auridexan and horosten® (0,96-7,60 мкг/мл; 3,80-15,20 мкг/мл); decasan® (1,90-3,80 мкг/мл; 3,80-15,20 мкг/мл) influence on adhesion of S. aureus and E. coli, though these medicines can provide reliable prophylactic and therapeutic effect.
Key words: adhesion, Staphylococcus, Escherichia, decamethoxin®, auridexan, horosten®, decasan®.
Рецензент Лобань Г.А.
УДК 547.495.9: 615.225: 661.982
ПОКАЗАТЕЛИ ТИОЛ-ДИСУЛЬФИДНОИ СИСТЕМЫ И НИТРОЗАТИВНОГО СТРЕССА
В НЕЙРОНАХ В УСЛОВИЯХ МОДЕЛИРОВАНИЯ ГЛУТАМАТНОЙ ЭКСАЙТОТОКСИЧНОСТИ IN VITRO И НА ФОНЕ ПРИМЕНЕНИЯ ИНИГИБИТОРОВ
NOS РАЗЛИЧНОЙ СЕЛЕКТИВНОСТИ
Анализ результатов показал наличие слабо выраженного эффекта в отношении ограничения NO-зависимых механизмов нейродеструкции у используемых ингибиторов NO-синтазы, который проявлялся только на начальных этапах развития глутаматной эксайтотоксичности. Внесение в инкубационную среду N-пропил-Ь-аргинина вызывало существенное снижение проявлений нитрозативного стресса и его эффект был более продолжительным. Полученные данные указывают на ограниченное значение нейрональной изоформы NO-синтазы в реакциях глутамат-кальциевого каскада. Более существенная роль в патобиохимических реакциях в данных условиях принадлежит индуцибельному изоферменту, ингибиторы которого целесообразно применять в восстановительном периоде церебральной ишемии.
Ключевые слова: ингибиторы NO-синтазы, тиол-дисульфидная система, нитрозативный стресс, глутаматная эксайтотоксичность
Работа является фрагментом НИР «Молекулярно-биохимические механизмы формирования митохондриальной дисфункции нейронов головного мозга в условиях острой церебральной ишемии: новые мишени для нейропротекции» (№ гос. регистрации 0113, шифр U000797).
Последствия циркуляторной ишемии мозга, степень ее повреждающего действия зависят от степени тяжести и длительности снижения церебральной гемодинамики. Основным патобиохимическим процессом, который разворачивается на фоне гипоксии ткани головного мозга, является глутамат-кальциевый каскад, разворачивающийся в первые минуты и часы сосудистого инцидента. Активные формы кислорода (АФК) образуются на всех этапах глутамат-кальциевого каскада, но большинство исследователей ведущую роль в индукции АФК при ишемии мозга отводят глутамат- и аспартатергическим системам. Так, активация NMDA-рецепторов на постсинаптической мембране глутаматергического синапса приводит к увеличению внутриклеточного Ca2+ и продукции АФК (супероксидрадикала, гидроксилрадикала, NO-радикала). В этих нейронах происходит активация Са-зависимой нейрональной NO-синтазы, что приводит, во-первых, к гиперпродукции NO, а во-вторых, в условиях дефицита субстрата NO-синтазы - L-аргинина - к образованию супероксид-радикала и гидроксил-радикала. При взаимодействии супероксид-радикала и NO образуется более агрессивная молекула -пероксинитрит (ONOO-), который вызывает повреждение макромолекул [2].
Более существенная роль в образовании NO и ONOO- в условиях нейродеструкции принадлежит индуцибельной NO-синтазе, которая менее зависима от Са2+ и экспрессируется в глиальных клетках под действием различных цитокинов (IL-ip, TNF-a, HIF-1) и регулируется факторами транскрипции (NFkB, JNK). Усиление образования АФК в ишемизированном мозге происходит при снижении функциональной активности антиоксидантной системы нейрона [12]. Наибольшее значение в защите нейрона в условиях ишемии имеет супероксиддисмутаза (СОД), каталаза, глутатионредуктаза, соединения, которые содержат тиольные группы (цистеин, метионин и цистин), а также гистидиносодержащие дипептиды (карнозин, анзерин, гомокарнозин) [3]. Наиболее легко окисляются АФК сульфгидрильные группы в цистеине и метионине с образованием сульфоновых и дисульфидных групп. Этот вид модификации является обратимым и его обращение зависит от энергетического потенциала клетки и наличия в ней восстановленных
