CC BY
21
2012, Т. 2, № 1-2
Перспективы развития вакцинологии
ПЕРСПЕКТИВЫ ПРИМЕНЕНИЯ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД НА ОСНОВЕ ДРОЖЖЕВОГО АВТОЛИЗАТА ПЕКАРСКИХ ДРОЖЖЕЙ В ПРОИЗВОДСТВЕ ВАКЦИНЫ ХОЛЕРНОЙ БИВАЛЕНТНОЙ ХИМИЧЕСКОЙ ТАБЛЕТИРОВАННОЙ Г.В. Базлов, Н.Г. Авдеева, А.К. Никифоров, С.А. Еремин, О.А. Волох, Ю.И. Самохвалова, М.В. Антонычева, А.Д. Белоусов, А.В. Комиссаров ФКУЗ РосНИИПЧИ «Микроб», г. Саратов
Целями данной работы являлись конструирование питательных сред (ПС) на основе дрожжевого автолизата (ДА) пекарских дрожжей для культивирования Vibrio cholerae М-41 Огава и V. cholerae 569В Инаба и экспериментальная оценка возможности получения основных протективных антигенов, являющихся компонентами вакцины холерной бивалентной химической таблетированной.
В результате ряда экспериментов был установлен окончательный вариант среды для культивирования холерных вибрионов на плотных и жидких ПС. Он был следующий: аминный азот 8,0±0,5 мг%, NaCl — 0,5%, рН 7,6±0,2. Производственные штаммы холерного вибриона холерного вибриона при посеве 0,1 мл микробной взвеси из разведения 10—6 через 18—24 ч инкубации при температуре (37±1)°С формировали типичные гладкие, округлые, прозрачные, голубоватые в проходящем свете колонии диаметром не менее 1 мм. На экспериментальной жидкой среде образовывали отчетливо видимый рост (равномерное помутнение среды с нежной пленкой на поверхности) при посеве микробной взвеси 100 микробных клеток (м.кл.) в 1 мл не позднее чем через 18—24 ч инкубации при 37°С. Эффективность плотной и жидкой ПС, приготовленной с использованием ДА, для холерного вибриона составляла 1,5 х 108 м.к./мл. Аналогичная картина наблюдалась и на средах Хоттингера с содержанием аминного азота 100 мг%.
Также исследовали возможность использования ПС на основе ДА для получения основных компонентов холерной вакцины — О-антигенов V. cholerae 569В Инаба и V. cholerae М-41 Огава, а также холерогена-анатоксина V. cholerae 569В Инаба. Показано, что добавление ДА в качестве основы, в среду культивирования до концентрации аминного азота 30 мг% является достаточной для накопления биомассы производственных штаммов холерного вибриона и синтеза основных антигенов.
Таким образом, в результате проведенных исследований получены данные, свидетельствующие о перспективности использования ПС приготовленных на основе автолизата пекарских дрожжей для культивирования штаммов холерного вибриона при производстве холерной химической вакцины.
ОПЫТ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ПОСТЭКСПОЗИЦИОННОЙ ПРОФИЛАКТИКИ ВЕТРЯНОЙ ОСПЫ С ЦЕЛЬЮ КУПИРОВАНИЯ ВСПЫШЕК В ОРГАНИЗОВАННЫХ КОЛЛЕКТИВАХ г. КРАСНОЯРСКА КРАСНОЯРСКОГО КРАЯ
Н.В. Бахарева1, Н.П. Парфенова2, О.В. Эдомская1, С.В. Евреимова1
Главное управление здравоохранения администрации г. Красноярска, г. Красноярск; 2Управление Роспотребнадзора по Красноярскому краю, г. Красноярск
Под наблюдением находилось 125 детей из 3-х коррекционных школ гг. Красноярска, Ачинска
и Канска Красноярского края, оздоравливавшихся в оздоровительном лагере «Огонек» г. Красноярска, в том числе 62 ребенка, бывших в контакте с больными и привитых против ветряной оспы с целью оценки эффективности постэкпозиционной профилактики в очаге.
Заболеваемость ветряной оспой состоялась вследствие заноса инфекции в учреждение на 15 день от момента заезда предполагаемого источника инфекции. Всего заболело 9 детей в возрасте от 8 до 16 лет, 8 детей были изолированы в условиях инфекционного стационара.
Иммунизация проведена вакциной Окавакс (дата выпуска 28.04.2010 г., серия СР 11 ОВ, срок годности до 10.06.2012 г., производитель Япония, Бикен, г. Осака, дистрибьютор санофи Пастер Франция), на 4—5 день от момента установления диагноза первому больному: привито 62 ребенка — 100% от подлежащих (не болевших и не привитых против ветряной оспы). Результаты:
— достигнута локализация очага ветряной оспы в течение 15 дней от момента регистрации первого случая заболевания;
— удалось значительно снизить количество детей, вовлеченных в эпидемический процесс ветряной оспы — пораженность детского коллектива составила всего 7,2% (9 случаев из 125 детей);
— достигнуто минимальное развитие ветряной оспы у привитых — зарегистрировано только 2 случая заболевания ветряной оспы — 3,2% от числа привитых;
— предотвращен вынос инфекции в стационар -ные коррекционные школы городов Красноярска, Ачинска и Канска;
— установлены клинические различия в течении заболевания ветряной оспой у привитых и не привитых детей — у привитых заболевание протекало легче и с меньшей длительностью. Таким образом, использование постэкспозиционной профилактики ветряной оспы в оптимальные сроки со 100% охватом прививками не привитых и не болевших позволяет купировать вспышки инфекции в организованных детских коллективах в короткие сроки с минимальной частотой развития ветряной оспы у привитых и рекомендовать целесообразность вакцинации как высоко эффективное мероприятие для купирования вспышек ветряной оспы в организованных детских коллективах.
ДИПЛОИДНЫЕ И ПЕРЕВИВАЕМЫЕ КЛЕТОЧНЫЕ ЛИНИИ ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ
М.Е. Брагина, Л.П. Сухобаевская
ФГУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера, Санкт-Петербург
В 2005 г. Европейский региональный комитет ВОЗ принял резолюцию, в которой были поставлены цели элиминации кори и краснухи и профилактики врожденной краснушной инфекции к 2010 г. Однако, данные цели в целом по региону не были достигнуты, о чем свидетельствуют текущие эпидемиологические данные. В частности, в России причиной этому является несовершенная система профилактики и диагностики краснухи, заболевания, которое на ранней стадии беременности может вызывать тяже-
Материалы X съезда ВНПОЭМП, Москва, 12-13 апреля 2012 г.
Инфекция и иммунитет
лые, а иногда смертельные осложнения для плода. В настоящее время ни одна вакцина против краснухи не производится на территории России, таким образом, вопрос налаживания производства отечественной противокраснушной вакцины очень актуален. Однако, для промышленного производства необходима отработка технологических условий накопления вирусной биомассы.
Целью данной работы является выбор наиболее чувствительной клеточной культуры и определение оптимальных условий культивирования вируса краснухи. Были проведены исследования по культивированию вируса краснухи в следующих культурах клеток: первично трипсинизированной почечной ткани новорожденного кролика (ППК), диплоидных культурах фибробластов легкого эмбриона человека (ФЛЭЧ) и кожно-мышечного лоскута человека (М-22), перевиваемой культуре почки зеленой обезьяны (VERO-В). Наиболее чувствительными, а следовательно, наиболее целесообразными для использования оказались культуры клеток ФЛЭЧ и VERO-В со сходным средним значением инфекционной активности вируса, полученного на этих культурах. При варьировании состава питательных сред, было установлено, что использование смеси сред 199 и Игла с добавлением аргинина увеличивает инфекционную активность вирусных сборов на 2,0—2,5 lg ТЦД50/0,5 мл. Добавление хлористого кальции усиливает накопление вируса в клетках, однако его добавление возможно лишь в случае культивирования вируса для диагностических препаратов. Кроме того, было показано, что инфекционные титры вируса краснухи на 1,0—1,5 lg ТЦД50/0,5 мл больше при роллерных условиях культивирования по сравнению со стационарными.
В настоящее время для производства вакцин разрешены диплоидная клеточная культура М-22 и перевиваемая клеточная культура VERO-В. При этом по таким параметрам как чувствительность к вирусу, коэффициент пролиферации, количество полезных вирусных сборов, пригодность для роллерного культивирования клеточные культуры VERO-В и ФЛЭЧ превосходят разрешенную клеточную культуру M-22. Однако, для культуры ФЛЭЧ пока не создан производственный банк клеток и нет исчерпывающей аттестации клеточной линии в соответствии с требованиями ВОЗ. Поэтому культура VERO-В представляется наиболее перспективной как тканевый субстрат для промышленного производства вакцины против краснухи.
ОСОБЕННОСТИ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩЕГО ВОЗДЕЙСТВИЯ БЕЛКАТЕПЛОВОГО ШОКА НА ФОРМИРОВАНИЕ ИММУНИТЕТА К ИНАКТИВИРОВАННЫМ ПРОТИВОВИРУСНЫМ ВАКЦИНАМ
В.В. Варгин1, Т.К. Дзагурова1, А.М. Сапожников2,
A.П. Иванов1, Н.А. Коротина1, Т.Н. Николаева3,
B.Н. Ляпустин1, М.С. Смирнова1
'ГУ Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П. Чумакова РАМН, Московская область; 2ГУ Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, Москва; 3ГУ Институт эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалея РАМН, Москва
Повышение эффективности вакцинации для значительного числа вирусных инфекций до сих пор остается весьма актуальной. Предпринятые по-
пытки добиться усиления иммуногенности вакцин с использованием концентрированных, либо очищенных, а также гомогенных генно-инженерных продуктов вирусного происхождения, как и известных адъювантов, оказались малоэффективными.
Полученные в последнее время данные указывают на возможность избирательного усиления иммунного ответа к вирусным белкам при использовании в составе вакцин белков теплового шока (БТШ).
В экспериментах на мышах Ва1Ь/с исследована иммуномодулирующая активность БТШ70 в условиях формирования гуморального и клеточного иммунитета к цельновирионным инактивированным вакцинам — против вируса клещевого энцефалита (ВКЭ) и геморрагической лихорадки с почечным синдромом (ВГЛПС), а также белка Е вируса клещевого энцефалита.
В результате трехкратной иммунизации ВКЭ или ВГЛПС имеет место формирование у животных гуморального (вируснейтрализующие антитела) и клеточного (данные реакции бласттрансформации лимфоцитов) компонентов вирусспецифического иммунного ответа. Вместе с тем иммуностимулирующие воздействие БТШ70 в различных условиях эксперимента, где варьировалась в составе комплекса доза БТШ и (или) вакцинного антигена отражалось лишь на усилении клеточного, но не гуморального (противовирусные антитела) компонента иммунитета. Однако при использовании для вакцинации животных комплекса БТШ70-субъединичная ВКЭ (белок Е вируса клещевого энцефалита) наблюдали стимуляцию формирования как клеточного, так и гуморального вирусспецифического иммунитета.
Полученные данные свидетельствуют о неоднозначном характере воздействия БТШ70 на формирование гуморального и клеточного компонентов иммунитета к цельновирионным и субъединичным вирусным вакцинам, что связано, по-видимому, с особенностями функционирования БТШ70 при доставке антигенпредставляющим клеткам цельно-вирионного вакцинного материала, либо гомогенного вирусного белка.
ВЛИЯНИЕ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ НА УРОВЕНЬ ЗАБОЛЕВАЕМОСТИ КЛЕЩЕВЫМ ВИРУСНЫМ ЭНЦЕФАЛИТОМ В РЕСПУБЛИКЕ ХАКАСИЯ
Г.М. Величко, Т.Н. Викторова
Управление Роспотребнадзора по Республике Хакасия, г. Абакан
Республика Хакасия в 2010 г. по уровню заболеваемости клещевым вирусным энцефалитом заняла 4 место в ранговом ряду среди 12 территорий Сибирского федерального округа. Показатель заболеваемости составил 10,9 на 100 тыс. населения при среднем показателе по Сибирскому федеральному округу — 9,28. В 2011 г. зарегистрировано 65 случаев клещевого вирусного энцефалита, показатель заболеваемости составил 12,2 на 100 тыс. населения.
На современном этапе ареал природного очага клещевого вирусного энцефалита охватывает 10 из 13 административных территорий Республики Хакасия. По данным энтомологического мониторинга за природными очагами в течение последних десяти лет вирусофорность клещей составляла от 3 до 17%, в эпидемический сезон 2011 г. — 9,9% против 3,8% в 2010 г.
