Динамика зараженности иксодовых клещей боррелиозом и клещевым энцефалитом в Новосибирском научном центре Сибирского отделения РАН в 2009-2011 гг

Боргояков Вячеслав Юрьевич; Васькова Анна Андреевна; Чикова Елена Дмитриевна; Фоменко Наталия Владимировна

ДИНАМИКА ЗАРАЖЕННОСТИ ИКСОДОВЫХ КЛЕЩЕЙ БОРРЕЛИОЗОМ И КЛЕЩЕВЫМ ЭНЦЕФАЛИТОМ В НОВОСИБИРСКОМ НАУЧНОМ ЦЕНТРЕ СИБИРСКОГО ОТДЕЛЕНИЯ РАН В 2009-2011 ГГ.

Вячеслав Юрьевич Боргояков1, Анна Андреевна Васькова2, Елена Дмитриевна Чикова1, Н

аталия Владимировна Фомено1-3 ('Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, директор - акад. РАН В.В. Власов, лаборатория генной диагностики, зав. - к.м.н. Е.Д. Чикова, лаборатория молекулярной иммунологии и микробиологии, заведующая - д.б.н. Н.В. Тикунова; ^Новосибирский государственный университет, ректор - д.х.н., проф. В.А. Собянин; 3ЗАО «Вектор-Бест», Новосибирск, генеральный директор -М.Д. Хусаинов, лаборатория ПЦР, зав. - к.б.н. М.К. Иванов)

Резюме. В сезоны активности таежных клещей апрель-сентябрь 2009-2011 г.г. клещи, снятые с людей в Новосибирском научном центре СО РАН, проанализированы на наличие боррелий и вируса клещевого энцефалита (ВКЭ). В данном районе было выделено 5 локаций с разным типом растительности. Проанализировано распределение положительных образцов клещей по данным районам в течение всего сезона активности клещей. В результате проделанной работы выяснено, что пик выявления боррелий и ВКЭ приходится на май-июнь каждого сезона. Установлено, что антропогенное воздействие на местность существенно изменяет зараженность клещей ВКЭ и разными видами боррелий.

Ключевые слова: боррелии, Новосибирский научный центр СО РАН, клещи.

VARIATION IN INFECTION OF IXODES TICKS BY BORRELIOSIS AND TICK-BORNE ENCEPHALITIS VIRUS

IN NSC SB RAS DURING 2009-2011

V.Yu. Borgoyakov1, A.A. Vaskova2, E.D. Chikova1, N.V. Fomenko1-3 ('Institute of Chemical Biology and Fundamental Medicine SB RAS; Novosibirsk State University,

3JSC “VECTOR-BEST”)

Summary. In April-September, 2009-2011 the ticks, removed from people in the Novosibirsk Scientific Center of SB RAS were analyzed for the presence of Borrelia and tick-borne encephalitis virus (TBEV). This area was allocated to five locations with different types of vegetation. We analyzed the distribution of positive samples in these areas during the tick season. As a result of this work it has been found that the peak detection of Borrelia and TBEV is in May and June of each season. It was found that the human impact on the area significantly alters tick TBEV infection and tick contamination of various Borrelia species.

Key words: borrelia, NSC SB RAS, ticks.________________________________________________________

Проблема заболеваний, переносимых иксодовыми клещами, в последние годы приобретает все большее значение для многих регионов России. На территории Новосибирской области основное эпидемиологическое значение среди природно-очаговых инфекций, переносимых клещами, имеют клещевой энцефалит и иксодо-вый клещевой боррелиоз [2]. Мониторинг численности возбудителей данных инфекций в течение клещевых сезонов нескольких лет может позволить выявить некоторые закономерности их динамики и выработать практические рекомендации для населения, врачей и производителей диагностических наборов.

Цель работы: Исследование динамики распределения боррелий и ВКЭ в районе ННЦ СО РАН в течение 2009-2011 гг.

Материалы и методы

Таежные клещи, снятые с людей, собраны в пункте вакцинопрофилактики Автономной некоммерческой организации «Центр новых медицинских технологий в Академгородке» (АНО «ЦНМТ в Академгородке») в 2009-2011 гг. За 2009 год было исследовано 747 образцов клещей, за 2010 год - 440 образцов и за 2011год - 581 образец.

При анализе географического распределения мест, в которых произошло присасывание таежного клеща, выявлено, что большинство клещей были сняты с людей в районе ННЦ СО РАН и его окрестностей. В данном районе были выделены следующие территориальные единицы (ТЕ):1 - ЦСБС СО РАН, пос. Новый и пос. Геологов и их окрестности, 2 - Верхняя зона Академгородка и микрорайон «Щ», 3 - Нижняя Ельцовка и ее окрестности, 4 - пос. Ключи и ближайшие дачи и леса, 5 - нетронутые территории леса между населенными пунктами. Территориальная единица 1 представлена мелколи-

ственными осиново-березовыми лесами и смешанными березово-сосновыми лесами, 2 - лесом, кустами и газонами жилой зоны, а единицы 3 и 4 - мелколиственными осиново-березовыми лесами, полями и перелесками, 5

- смешанными березово-сосновыми лесами (табл. 1).

Выделение суммарной ДНК от клещей проведено с применением коммерческих наборов «Рибо-Преп» (AmpliSens, Москва) и «Экстракция 100» (Вектор-Бест, Новосибирск).

Выявление ДНК боррелий и РНК ВКЭ проведено с применением коммерческих тест-систем «АмплиСенс® Borrelia burgdorferi sensu lato-FL», «АмплиСенс® TBE-FL», «РеалБест РНК ВКЭ» и «РеалБест ДНК Borrelia burgdorferi s. l.». Учет результатов проводили по наличию флуоресцентного сигнала на анализаторах фирмы Corbett Research «Rotor-Gene 3000» и фирмы Biorad «CFX-96» с использованием наборов фирмы AmpliSens и Вектор-Бест соответственно.

Для проверки достоверности полученных данных был использован критерий Стьюдента для больших выборок образцов (более 50 образцов) и критерием Фишера

- для маленьких (менее 50 образцов). Также была посчитана ошибка среднеквадратического отклонения (Mp) для всех данных, приведенных в таблице [5].

Результаты и обсуждение

В Лаборатории генной диагностики на базе АНО «ЦНМТ в Академгородке», проведено широкомасштабное исследование клещей снятых с людей, обратившихся за помощью в пункт вакцинопрофилактики АНО «ЦНМТ в Академгородке» в 2009-2011 г.г. Основная часть людей, обратившихся за помощью, пострадала от присасывания таежных клещей на территории ННЦ СО РАН. Методом ПЦР с детекцией продуктов в режиме реального времени проанализировано 1769 клещей.

изменений в зараженности клещей борре-лиями. Однако можно сказать, что в жилых зонах с лесом, кустами и газонами зараженность боррелиями достаточно высока во

Таблица 1

Распределение процента положительных образцов клещей в течение клещевых сезонов 2009-2011 г.г. по территориальным единицам ННЦ СО РАН

Год Зона Возбудитель (в %±Mp)

B. garinii (B.g) B. afzelii (B.a) B. miyamotoi (B.m) B.g+B.m B.g+B.a ВКЭ

2009 1 25,8±4,5 2,1±1,5 2,1±1,5 1,3±1,2 0,8±0,9 9,6±3

2 30,8±3,1 4,1±1,3 1,9±0,9 0,8±0,6 0 9,1±1,9

3 20,8±5,6 1,9±1,9 2,9±2,3 0 0,4±0,9 11,3±4,3

4 17,5±2,6 2,3±1 1,5±0,8 0 0 11,1±2,1

5 25,9±3,4 4,8±1,7 0 0 0 6,0±1,8

Все 24,5±1,6 2,8±0,6 1,6±0,5 1,2±0,4 0,1±0,1 10,0±1,1

2010 1 29,6±4,6 1,0±1,0 3,1±1,7 1,0±1,0 1,0±1,0 3,1±1,7

2 22,5±3,8 0,8±0,8 1,6±1,2 0,8±0,8 0 4,2±1,8

3 13,8±4,3 3,1±2,1 1,5±1,5 1,5±1,5 0 4,6±2,6

4 30,3±8,0 0 0 6,0±4,1 3,0±3,0 15,2±6,3

5 11,4±2,9 0,8±0,8 2,4±1,4 0 0 5,7±2,1

Все 20,0±1,9 1,1±0,5 1,6±0,6 1,6±0,6 0,5±0,3 6,1±1,1

2011 1 25,1±3,1 0,5±0,5 2,1±1,0 1,1±0,8 2,1±1,0 2,1±1,0

2 22±3,5 0 4,3±1,7 0 1,4±1,0 2,1±1,2

3 20,9±5,0 1,5±1,5 4,5±2,5 1,5±1,5 0 3±2,1

4 21,8±5,6 5,5±3,1 7,3±3,5 0 0 0

5 19,7±3,5 0 1,6±1,1 0,8±0,8 0 0,8±0,8

Все 22,4±1,7 1,6±0,5 4,0±0,8 0,9±0,4 1,0±0,4 2,1±0,6

2009-2010 22,7±1,0 2±0,3 2,4±0,4 1,2±0,3 0,5±0,2 6,4±0,6

За все время исследования в образцах клещей, снятых с людей, достоверно чаще (р<0,01) детектирована B. garinii (22,7%). Выявление B. afzelii составляет только 2% образцов, что сопоставимо с выявлением B. miyamotoi (2,4%). Одновременное присутствие B. garinii и B. miyamotoi обнаружено в 1,1% образцов, а B. garinii и B. afzelii - в 0,5% образцов (табл. 1). B. afzelii и B. miyamotoi на территории ННЦ СО РАН совместно не обнаружены. Зараженность клещей ВКЭ составила 6,4%. Из них 2,2% составили клещи, зараженные одновременно ВКЭ и боррелиями. Наиболее часто с ВКЭ обнаруживается B. garinii (1,7%) (р<0,01), вид B. miyamotoi одновременно с ВКЭ не обнаружен. В трех случаях (0,2%) вместе с ВКЭ в клеще обнаружены два вида боррелий.

Проанализировано распределение зараженности клещей ВКЭ и боррелиями в течение эпидемиологических сезонов 2009-2011 гг. по территориальным единицам ННЦ СО РАН с различным типом растительности (табл. 1). Выяснено, что максимум зараженности клещей совпадает с пиком клещевой активности, приходящийся на начало мая - конец июня. Это может объясняться тем, что с увеличением численности переносчиков, пропорционально увеличивается их зараженность [4]. В этой связи в данный период времени необходима усиленная профилактика нападения клещей. Мероприятия по обработке местности акарицидными средствами рекомендуется проводить до начала клещевого сезона, в апреле или начале мая. Отмечается спад числа клещей, зараженных ВКЭ, на территории ННЦ СО РАН, так в 2009 году их зараженность составила 10%, в 2010 - 6,1%, а в 2011 - 2,1%. Это может объясняться межгодовыми колебаниями вирусофорности клещей [2]. Наибольшая зараженность клещей энцефалитом стабильно наблюдается в территориальных единицах 3 и 4. Скорее всего, это связано с типом растительности на этих участках. Преобладающий тип растительности для них - мелколиственные осиново-березовые леса, поля и перелески, в основном не подвергшиеся антропогенному воздействию.

За три года наблюдений не отмечено существенных

ЛИТЕРАТУРА

1. Голубкова А.А., Дорогина Ю.В., Шашина Н.И. Рационализация мероприятий по неспецифической профилактике клещевых инфекций // Журнал инфекционной патологии. - 2010. - Т. 17. №3. - С.47-49.

2. Иерусалимский А.П. Клещевой энцефалит: Рук-во для врачей. - Новосибирск: Гос. мед. акад. МЗ РФ, 2001. - 360 с.

3. Коренберег Э.И. Современные черты природной очаго-

время всего сезона, в то время как в дачных или нежилых зонах с мелколиственными осиновоберезовыми лесами, смешанными березовососновыми лесами, полями и перелесками зараженность боррели-ями постепенно падает после пика активности клещей. Во всех территориальных единицах доминирующим видом является B. garinii, зараженность клещами данным видом колеблется из года в год. Наиболее заражены данным видом боррелий клещи, снятые с людей в местности, наиболее подвергшейся антропогенному воздействию (ТЕ 1 и 2). Зараженность клещей B. miyamotoi за три года исследований значительно выросла в основном за счет моноинфекции клещей. Клещи, зараженные данным видом, равномерно распределены по всем ТЕ, вне зависимости от их антропургического статуса. Зараженность клещей B. afzelii претерпевает сезонные колебания. Причем часто в одной ТЕ в разные года, данный вид представлен в виде моноинфекции или смешанной инфекции. Исключение составляет первая ТЕ - на ней этот вид во все года представлен и в виде моноинфекции, и в виде смешанной инфекции. Отдельное внимание следует уделить пятой ТЕ, состоящей из различных участков почти не подвергшегося влиянию людей леса. Зараженность клещей, напавших на людей в данной местности в целом меньше, чем в остальных территориальных единицах. Это наталкивает на мысль, что большое влияние на зараженность клещей имеет состояние местности, в которой они обитают. Влияние человека сказывается на представленности резервуарных хозяев боррелий и ВКЭ, в частности мелких грызунов [3]. В местностях, подвергшихся антропогенному воздействию, они размножаются активней, их численность растет, растет вероятность прокормления клеща на мелких грызунах, и, как следствие, увеличивается зараженность переносчиков [1].

Суммируя все выше сказанное, можно предположить, что один из очагов ИКБ Новосибирской области находится в окрестностях ННЦ СО РАН и по мере удаления от него число зараженных клещей постепенно снижается. Особенность данного очага - в существенном преобладании вида B. garinii над другими видами боррелий и довольно большом проценте клещей, зараженных B. miyamotoi. Также в данной местности высока вероятность зараженности одного клеща двумя видами боррелий или боррелиями и ВКЭ, что следует учитывать при экстренной профилактике клещевых инфекций.

вости клещевого энцефалита: новые или хорошо забытые? // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. -2008. - №3. - С.3-8.

4. Павловский Е.Н. Природная очаговость трансмиссивных болезней в связи с ландшафтной эпидемиологией зооан-тропонозов. - М.; Л., 1964. - 211 с.

5. Плохинский Н.А. Биометрия. - Новосибирск, 1961. -364 с.

Информация об авторах: Боргояков Вячеслав Юрьевич - аспирант, 630190, Новосибирск, пр. Лаврентьева, 8, Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, лаборатория генной диагностики, тел. (383) 3333807, e-mail: [email protected]; Васькова Анна Андреевна - студент; Чикова Елена Дмитриевна - заведующая лабораторией,

к.м.н.; Фоменко Наталия Владимировна - н.с., к.б.н.

ПЕРВЫЙ СЛУЧАЙ ГЕМОРРОГИЧЕСКОЙ ЛИХОРАДКИ КРЫМ-КОНГО НА ТЕРРИТОРИИ КОСОВА

Светомир Самарджич1, Милан Парлич1, Ясмина Стеванович1, Владимир Самарджич2, Бранко Михайлович1,

Татьяна Маринкович3 ('Медицинский факультет, г.Приштина, местонахождение - Косовская Митровица; ^Учреждение здравоохранения им. Доктора Драголюба Вучича;3Высшая школа санитарии и

здравоохранения «Висан»)

Резюме. В биотопе на территории Косова (Республика Сербия) в ходе исследований, проведенных Центром природных очагов инфекции, с 1995 года были зарегистрированы векторы, которые могли повлечь геморрагическую лихорадку. Врачи не были достаточно подготовлены на предмет возможного наличия заболеваний природных очагов инфекции, не было лабораторий, которые бы могли разрешить клинические сомнения о наличии заболевания. Болезнь обычно регистрируется в отдаленных, лесных, горных участках, что способствует запоздалому выявлению болезни, а наряду с этим несвоевременно оказываются меры по лечению и предупреждению населения. Цель данной работы заключается в том, чтобы на примере первого выявленного случая ГЛКК (первый случай) показать сложности, связанные с выявлением болезни, неправильным лечением больного, и последствиями данной ситуации. Применен метод История болезни (Case report). В селе Киево, которое находится на плато Дреница, заболела женщина (45 лет) после работы на ближайшей вишневой плантации. За ней ухаживали 18 медицинских работников в отделениях ОРЛ, заболеваний внутренних органов, инфекционном отделении и отделении гинекологии. Не были предприняты меры безопасности. Был сделан кюретаж, с неправильным диагнозом: беременность на ранних сроках - по прошествии двух дней больная умерла. Лечение вызвало негодование семьи, которая отказалась сотрудничать с эпидемиологической службой. За тот год заболело 46 человек, 16 из которых с летальным исходом, Le 34,78%. Установлено 6 механизмов заражения между людьми. Получены данные о массовых укусах заболевших клещами. В 100% случаях возбудителем был вид Hyaloma plumbeum plumbeum, в телах которых подтверждено наличие вируса. С тех пор болезнь эндемически проявляется на данной территории, с интервалом эпидемии порядка

6 лет. Ввиду военных событий, социальных обстоятельств, ситуации в здравоохранении и иных причин, масштабы существования ГЛКК до сих пор не установлены.

Ключевые слова: болезни природных очагов инфекции, геморрагическая лихорадка Крым-Конго, клещи рода hyaloma.

INDEX CASE OF CONGO-CRIMEAN HAEMORRHAGIC FEVER IN KOSOVO - A CASE REPORT

S. Samardzic1, M. Parlic1, J. Stefanovic1, V. Samardzic2, B. Mihajlovic1, T. Marinkovic3

('School of Medicine University of Pristina, Kosovska Mitrovica, Kosovo, Serbia; 2Health Clinic “Dr Dragoljub Vucic” Belgrade, Serbia; 3Medical Sanitary School of Applied Sciences “Visan” Belgrade, Serbia)

Summary. Center for natural foci research of Belgrade registered in 1995 the vectors, that could cause a hemorrhagic fever on the territory of Kosovo in Serbia. Prior to this finding, there was no education of physicians on the territory regarding the possible existence of natural foci of disease, and there were no laboratories that could clarify the clinical suspicion of disease. The disease is usually registered in a remote, forested, mountainous areas, where the disease is not recognized and confirmed on time, which also results in delayed treatment and prevention of disease. Here, we are presenting an index CCHF case on the territory of Kosovo and we are pointing out the difficulties in identifying disease, inadequate treatment of a patient, and the consequences, arising from this situation. In the village of Kiev, on a plateau known as the Drenica a 45 years old woman, worker at the plantation of cherry, showed CCHF symptoms. The patient was treated by 18 medical practitioners at ENT, internal diseases, infectious and gynecological departments. The precautions for medical stuff have not been taken. Based on the wrong diagnosis of early pregnancy, patient was subjected to the curettage procedure. After 2 days the patient died. The treatment caused a revolt of relatives who refused further to cooperate with the epidemiological service. During that epidemic 46 people were infected. 16 patients died, Le 34,78%, and 6 inter-human ways of transmission of disease were determined. The data was obtained that people were bitten by ticks. The ticks, identified on the territory, were Hyaloma plumbeum plumbeum in 100% of the cases. In tested ticks the presence of viruses was confirmed. All analyses were performed at Institute Torlak, Belgrade and confirmed by Chumakov in Russia. Since then, the disease occurs endemically on the territory, with the interval of epidemic about 6 years. Because of the war, political, social and other reasons, situation with health care the scale of CCHF on the territory of Kosovo has not been determined yet.

Key words: natural focal diseases, Congo-Crimean hemorrhagic fever, ticks of the genus hyaloma.

Исследователи Центра природных очагов инфекции Республики Сербии (Белград) ранее уже подтвердили существование биотипов, в которых было возможно проявления болезней, связанных с природными очагами инфекции. При сотрудничестве с нашим учреждением был организован Сентинел контроль данной территории. В условиях удаленности территорий от крупных медицинских центров, плохо развитой службы здравоохранения, отсутствия специализированных

лабораторий, плохой подготовки врачей, политических противоречий, оказалось, что выявление этих болезней очень проблематично.

Цель работы: на примере впервые обнаруженного случая геморрогической лихорадки Крым-Конго (ГЛКК) указать на трудности, связанные с распознаванием болезни и определением диагноза, неправильным лечением больного, а также последствиями, в условиях неразвитой службы здравоохранения, отдаленности от

Variation in infection of ixodes ticks by borreliosis and tick-borne encephalitis virus IN NSC SB RAS during 2009-2011123Institute of Chemical Biology and Fundamental Medicine SB RAS JSC "VECTOR-BEST"