CC BY
5
| ГЕМАТОЛОГИЯ И ТРАНСФУЗИОЛОГИЯ | RUSSIAN JOURNAL OF HEMATOLOGY AND TRANSFUSIOLOGY (GEMATOLOGIYA I TRANSFUSIOLOGIYA) | 2022; ТОМ 67; №2 |
Трацевская Ж. В., Ковригина А. М., Меликян А. Л.
КЛИНИКО-ПАТОМОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ВАРИАНТОВ НЕКЛАССИЧЕСКОЙ ИСТИННОЙ ПОЛИЦИТЕМИИ
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. Согласно классификации ВОЗ 2017 года в главные критерии диагностики истинной полицитемии (ИП) включено гистологическое исследование трепанобиоптата костного мозга. При неклассической истинной полицитемии (н-ИП) показатели Hb и Ht остаются ниже референсных значений, что обусловливает трудности дифференциальной диагностики с другими нозологиями РК-негативных ЖПН.
Цель работы. Охарактеризовать клинико-лабораторные и пато-морфологические признаки н-ИП.
Материалы и методы. Из группы 52 пациентов с МПН, JAK2+, показателями Hb и Ht, не соответствующими нозологии ИП, отсутствием клинико-лабораторных, анамнестических и морфологических признаков, характерных для других нозологий ЖПН, были выделены группы с двумя формами н-ИП: ранняя стадия и маскированная форма. К ранней стадии н-ИП были отнесены случаи с гистологической картиной в костном мозге, характерной для ИП, но клеточностью, не превышающей +20% от возрастной нормы. К маскированной форме н-ИП были отнесены случаи с гиперклеточным костным мозгом, имеющие гистологические признаки ИП в отсутствие соответствующих референсных значений Hb и Ht.
Результаты и обсуждение. Группа ранней стадии н-ИП включала 28 пациентов, медиана возраста 48,5 года (19—69 лет), соотношение М:Ж — 1:2,1. В OAK отмечался изолированный тромбоцитоз (658,1 (567-730)х109/л; среднее±95%). Сывороточный ЭПО - 3,23 (1,1-8,0) МЕ/мл, mut JAK2V617F - 20,51 (9,0-25)%, медиана 12% (среднее ±95%). Спленомегалия была выявлена у 18/28 (64,3%). Тромбозы вен нижних конечностей были обнаружены у 1/26 (3,85%), тромбозы вен
портальной системы — у 1/26 (3,85%) пациента, без признаков тромбоза собственных вен печени. К маскированной форме н-ИП были отнесены 14 пациентов, медиана возраста 38 лет (22—68 лет), соотношение Ж:_Ж — 1:13. В OAK также отмечался изолированный тромбоцитоз (632 (502—813)х109/л; среднее ±95%). Сывороточный ЭПО — 7,17 (2,3-16,6) МЕ/мл, mut JAK2V617F - 20,19 (9,95-25)%, медиана 11,25% (среднее ±95%). Спленомегалия наблюдалась у 9/14 (64,3%), тромбозы вен портальной системы — в 4/14 (29%) случаях, у 2/14 (14%) пациентов выявлены признаки тромбоза собственных вен печени. Статистически достоверные различия при сравнении данных групп были обнаружены только по показателям Hb (р=0,0015) и Ht (р=0,0094) (146,2 (143-155) г/л и 44,2 (42-47)% при ранней стадии н-ИП против 131,5 (122—142) г/л и 40,7 (42—47)% при маскированной форме н-ИП). При сопоставлении гистологических, гистохимических, иммуногистохимических параметров костного мозга пациентов данных групп статистически достоверных различий не было обнаружено (р>0,05), как и при сопоставлении с контрольной группой пациентов с развернутой (классической) ИП.
Заключение. Группа н-ИП включает в себя раннюю стадию и мае -кированную форму, характеризующиеся сходными патоморфологи-ческими признаками. При маскированной форме у пациентов чаще отмечаются тромбозы вен портальной системы и собственных вен печени, что обусловливает разницу показателей Hb и Ht. Медиана возраста в группе маскированной формы на 10,5 года меньше, чем в группе с ранней стадией, при этом в обеих группах медиана возраста составляет менее 50 лет. Таким образом, н-ИП более характерна для пациентов молодого возраста.
Туполева Т. А., Гуляева А. А., Абакаров Р. Р., Гапонова Т. В.
ДИНАМИКА ВЫЯВЛЕНИЯ СЛУЧАЕВ ВИЧ-ИНФЕКЦИИ СРЕДИ ДОНОРОВ И ПАЦИЕНТОВ ФГБУ «НМИЦ ГЕМАТОЛОГИИ»
МИНЗДРАВА РОССИИ
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. Инфекция, вызванная вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), является социально значимым заболеванием, ежегодный экономический ущерб от которой составляет более сотни миллиардов рублей. Болезнь и бессимптомный инфекционный статус, вызванные ВИЧ, в 2020 г. располагались на 4-м месте по экономической значимости инфекционных заболеваний в Российской Федерации, уступая только острым инфекциям верхних дыхательных путей, туберкулезу и ветряной оспе. В настоящее время в России наблюдается тенденция уменьшения доли новых случаев заражения ВИЧ, особенно среди лиц моложе 30 лет. Сегодня ВИЧ-инфекция вышла за рамки групп риска, попав в общую популяцию, которая является источником донорских кадров.
Цель работы. Оценить динамику выявления новых случаев ВИЧ-инфекции среди доноров и пациентов ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России с 2013 по 2020 г.
Материалы и методы. Проанализированы результаты иммунологического обследования на наличие антиген/антител к ВИЧ пациентов (п=27679) и доноров крови и ее компонентов (п=36099) НМИЦ гематологии в период с 2013 по 2020 г. Образцы крови доноров были исследованы на наличие антиген/антител к ВИЧ при каждой дона-ции, а пациентов центра — при первичном амбулаторном приеме или при поступлении в стационар.
Результаты и обсуждение. Показано снижение доли ВИЧ-инфицированных доноров крови и ее компонентов с 0,2% до 0,03% (рис. 1). Частота выявления маркеров ВИЧ в образцах крови пациентов центра за исследуемый период колебалась от 0,11 до 0,44%, и коррелировала с эпидемической ситуацией по ВИЧ-инфекции в Российской Федерации. В 2013—2014 гг. (рис. 1) доли ВИЧ-инфицированных лиц среди доноров и пациентов центра были сопоставимы (0,20— 0,24%). С 2015 г. частота выявления ВИЧ-инфекции у доноров
ПРИЛОЖЕНИЕ 1
снизилась с 0,24 до 0,05%, что совпало с переходом на 100%-е безвозмездное донорство и введением рутинного тестирования на наличие антител к ядерному антигену вируса гепатита В, обладающего аналогичным путем передачи. Кроме того, в 2016 г. началась приоритетная заготовка компонентов крови от повторных доноров, ранее обследованных на наличие инфекционных маркеров (рис. 2). Так, с 2017 г. число повторных доноров стало в два раза больше по сравнению с впервые зарегистрированными донорами.
Заключение. Распространенность ВИЧ-инфекции среди пациентов НМИЦ гематологии сопоставима с аналогичным показателем в среднем в популяции жителей Российской Федерации. Отмечено значительное снижение частоты выявления маркеров ВИЧ среди доноров с 2015 г., что, очевидно, связано с переходом на безвозмездное донорство, исключением из когорты доноров, инфицированных вирусом гепатита В, и приоритетной заготовкой крови от повторных доноров, ранее обследованных на наличие инфекционных маркеров.
Украинская В. М.1, Рубцов Ю. П.1, Масчан М. А.2, Степанов А. В.1 ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ ОПУХОЛЕВОГО МИКРООКРУЖЕНИЯ НА ПРОТИВООПУХОЛЕВУЮ АКТИВНОСТЬ САЯ-Т КЛЕТОК
1ФГБУН «Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова» Российской академии наук, 2ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии имени Дмитрия Рогачева» Минздрава России
Введение. Использование Т-клеток, модифицированных химерным антигенным рецептором (CAR-T), доказало свою эффективность при терапии рака. Так, иммунотерапия CAR-T, направленная на антиген CD 19, вызывает выраженные клинические ответы у пациентов с лейкемией и лимфомой, включая высокую долю устойчивых полных ремиссий. Несмотря на успех CAR-T-терапии при гематологическом раке, на сегодня она гораздо менее эффективна при солидных опухолях, Часть пациентов остаются резистентны к данному лечению, что, согласно нашей гипотезе, может объясняться опухолевым микроокружением, а именно опухолевыми везикулами либо нейтрофилами, которые играют не последнюю роль в супрессии противоопухолевого иммунного ответа. Несмотря на то что уже изучено множество различных путей влияния везикул на иммунные клетки, все еще остаются открытыми вопросы гетерогенности везикул и их содержимого, путей слияния/поглощения везикул клетками иммунной системы, роли мРНК в трансформации Т-клеток и другие фундаментальные аспекты везикулярной коммуникации между клетками. Поиск подходов для повышения эффективности терапии в этой ситуации, несомненно, является приоритетным направлением в области иммунотерапии.
Цель работы. Изучение влияния факторов опухолевого микроокружения, включая внеклеточные везикулы, на Т-клетки, модифицированные химерными антигенными рецепторами (CAR-T), и выяснение возможности применения искусственных антигенных везикул (AV) для специфической стимуляции и получения в культуре CAR Т-клеток.
Материалы и методы. Исследование включает в себя создание CAR Т-клеток, получение искусственных и внеклеточных везикул,
проведение функциональных экспериментов на CAR Т-клетках in vivo и in vitro, создание конструкции мутантной ДНКазы I, иммуногисто-химический анализ образцов опухолей.
Результаты и обсуждение. В данной работе впервые подробно охарактеризовано взаимодействие опухолевых экзосом, выделенных из клеток лимфом и глиом с CAR Т-клетками, и показано их влияние на активность CAR-T в зависимости от присутствия опухолевого антигена (CD19 или IL13R2a) на поверхности экзосом. Также нами было показано, что опухолевые экзосомы из клеток лимфом могут, в зависимости от концентрации, как активировать, так и подавлять функцию CAR Т-клеток, влияя на секрецию воспалительных цитокинов и изменяя профиль экспрессии генов CAR Т-клеток. Кроме того, нами был создан новый метод получения искусственных антигенных везикул, несущих опухолевый антиген для детекции химерного антигенного рецептора на поверхности Т-клеток. Доказано, что эти везикулы можно с успехом применить для идентификации, активации и экспансии CAR-положительной популяции Т-клеток. Кроме того, исходя из полученных результатов, можно утверждать, что опосредованный AAV перенос гена ДНКазы I позволяет эффективно бороться с NET и, кроме того, может сбалансировать врожденный и адаптивный иммунный ответ в микроокружении опухоли, восстановив иммунный контроль над раковыми клетками.
Заключение. Полученные в данной работе результаты предоставляют новейшие подходы к повышению эффективности CAR-T-терапии и актуальные данные о влиянии опухолевого микроокружения на CAR Т-клетки.
Федорова Д. В., Полетаев А. В., Серегина Е. А., Полохов Д. М., Игнатова А. А., Узуева С. Ш., Жарков П. А.
КАЧЕСТВЕННЫЕ ДЕФЕКТЫ ТРОМБОЦИТОВ, ОБУСЛОВЛЕННЫЕ МУТАЦИЯМИ ГЕНА ЯА80ЯР2
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии имени Дмитрия Рогачева» Минздрава России
Введение. Мутации гена RASGRP2 были впервые идентифицированы как причина наследственного функционального дефекта тромбоцитов в 2014 г. (Canault M и соавт.). Ген RASGRP2 кодирует кальций- и диацилглицерол-регулируемый фактор обмена гуанина 1 (CalDAG-GEFI). Тромбоциты пациентов с мутациями гена RASGRP2 демонстрируют сниженную способность к осуществлению inside-out сигнализации интегрина аПЬ^З.
Цель работы. Продемонстрировать особенности геморрагического фенотипа пациентов с тромбоцитопатией, ассоциированной с мутациями гена RASGRP2, и подчеркнуть важность проведения молекулярно-генетического исследования у пациентов с подозрением наредкие качественные дефекты тромбоцитов.
Материалы и методы. Пациенты были обследованы согласно протоколу, принятому в ФГБУ «НМИЦ ДГОИ им. Д.Рогачева» для детей и подростков с подозрением на качественные дефекты тромбоцитов. Оценка геморрагического фенотипа проводилась с применением шка-лы Pediatric Bleeding Questionnaire (РВО). Лабораторное обследование включало скрининговые тесты для исключения тромбоцитопении и коагулопатии (клинический анализ крови, АЧТВ, ПИ, фибриноген, RCo активность фактора Виллебранда) и последующее исследование функций тромбоцитов (оптическая агрегометрия, проточная цитофлуориметрия с активацией) и молекулярно-генетическое
исследование (таргетная панель высокопроизодительного секвениро-вания «Гемостаз»).
Результаты и обсуждение. Были обследованы трое пациентов с кожным геморрагическим синдромом и рецидивирующими кровотечениями со слизистых (табл. 1). Оценки выраженности геморрагического синдрома по шкале РВО составили 16, 12 и 7 баллов соответственно. При обследовании у пациентов было исключено наличие тромбоцитопении и коагулопатии, однако во всех трех случаях имели место сходные изменения в агрегации тромбоцитов (табл. 2). Проточная цитофлуориметрия тромбоцитов не выявила снижения экспрессии поверхностных гликопротеинов и дефицита/ нарушения секреции гранул тромбоцитов. При проведении высокопроизводительного секвенирования в гене RASGRP2 были обнаружены мутации, охарактеризованные как патогенные (гомозиготная замена с.7420>Ау пациентов 1 и 2, гомозиготная замена с.492С>0 у пациента 5).
Заключение. Качественные дефекты тромбоцитов представляют собой крайне гетерогенную группу заболеваний, наиболее тяжелые из которых могут приводить к физиологически значимым и даже жизнеугрожающим кровотечениям. Доступные в настоящее время функциональные тесты позволяютустанавливать точный диагноз далеко не во всех случаях. Пациенты с выраженной кровоточивостью
