CC BY
0
ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Динамика уровней Т-рецепторных и каппа-делеционных рекомбинационных эксцизионных колец как показателей состоятельности иммунной системы у новорожденных различного гестационного возраста: влияние материнских факторов
Волкова E.H.1, Ипполитова Л.И.2_
1 Бюджетное учреждение здравоохранения Воронежской области «Воронежская областная клиническая больница № 1», 394066, г. Воронеж, Российская Федерация
2 Федеральное государственное бюджетное общеобразовательное учреждение высшего образования «Воронежский государственный медицинский университет имени Н.Н. Бурденко» Министерства здравоохранения Российской Федерации, 394036, г. Воронеж, Российская Федерация
Резюме
В настоящее время существует достаточное количество исследований динамики уровней TREC (Т-ре-цепторных эксцизионных колец) и ККЕС (каппа-делеционных рекомбинационных эксцизионных колец) как у доношенных новорожденных, так и у детей более старшего возраста. Однако по недоношенным детям имеющиеся данные ограничены и противоречивы. Это требует дальнейших исследований для лучшего понимания динамики данных маркеров в исследуемой подгруппе.
Цель - оценка динамики уровней Т1}ЕС и ККЕС у новорожденных, родившихся на разных сроках беременности, а также выявление и изоляция значимых материнских факторов риска, воздействующих на данные показатели.
Материал и методы. В поперечное (одномоментное) исследование включили 203 новорожденных со сроком гестации 22-41 нед, рожденных на базе перинатального центра БУЗ ВО ВОКБ № 1 в 2023-2024 гг. Проведена оценка динамики показателей Т1}ЕС и К1}ЕС в зависимости от срока гестации. Рассмотрено влияние материнских факторов на показатели TREC и ^ЕС. Материалом для исследования были сухие пятна крови, нанесенные на карты Гатри и взятые в рамках неонатального скрининга.
Результаты. С увеличением срока гестации отмечается постепенный прирост уровня ^ЕС и TREC. Наиболее интенсивно данный процесс происходит на 28-30-й неделе, после чего расчетные значения достигают плато. При оценке данных материнского анамнеза было установлено, что статистически значимое снижение уровня TREC наблюдается у новорожденных от женщин, имеющих в анамнезе сведения о самопроизвольных выкидышах (р=0,002), медицинских абортах (р=0,021), врожденных пороках почек (р=0,010). Статистически значимое снижение уровня ^ЕС наблюдается при наличии в анамнезе данных, подтверждающих хронический сальпингит и оофорит (р=0,030), хронический пиелонефрит (р=0,031).
Заключение. Отмечена тесная связь между уровнями KREC/TREC и гестационным возрастом. Выявлены статистически значимые материнские факторы, воздействующие на оцениваемые показатели. Остается открытым вопрос о степени их влияния на значения TREC и ^ЕС.
Ключевые слова:
новорожденный; первичные ошибки иммунитета; Т-рецепторное эксцизионное кольцо; каппа-делеционное рекомбинацион-ное эксцизионное кольцо; недоношенность
Волкова Е.Н., Ипполитова Л.И.
динамика уровней т-рецепторных и каппа-делеционных рекомбинационных экСцизионных колец как показателей состоятельности иммунной системы у новорожденных различного гестационного возраста: влияние материнских факторов
Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки. Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Вклад авторов. Сбор информации, разработка статистической модели, обработка данных - Волкова Е.Н.; общее руководство, обработка данных - Ипполитова Л.И.
Благодарность. Авторы выражают благодарность коллективу отделения реанимации и интенсивной терапии № 5 и клинико-диагностической лаборатории БУЗ ВО ВОКБ № 1.
Для цитирования: Волкова Е.Н., Ипполитова Л.И. Динамика уровней Т-рецепторных и каппа-делеционных рекомбинационных эксцизионных колец как показателей состоятельности иммунной системы у новорожденных различного гестационного возраста: влияние материнских факторов // Неонатология: новости, мнения, обучение. 2024. Т. 12, № 3. С. 14-22. DOI: https://doi. org/10.33029/2308-2402-2024-12-3-14-22
Статья поступила в редакцию 21.05.2024. Принята в печать 01.08.2024.
Dynamics of T-receptor and kappa-deletion recombination excision ring levels as indicators of immune system integrity in newborns of different gestational ages: influence of maternal factors
Volkova E.N.1, Ippolitova L.I.2
1 Voronezh Regional Clinical Hospital No. 1, 394066, Voronezh, Russian Federation
2 Voronezh Burdenko State Medical University, Ministry of Health of the Russian Federation, 394036, Voronezh, Russian Federation
Abstract
The sufficient number of studies on the dynamics of TREC (T-cell receptor excision circle) and KREC (kappa-deleting recombination excision circle) levels in both preterm infants and older children. The data are limited and contradictory for preterm babies. Therefore, is required further research to better understand the dynamics of markers in the research group.
Objective. Assessment of the dynamics of TREC and KREC levels in newborns with different gestational ages. Study significant maternal risk factors affecting the interested criteria.
Material and methods. The cross-sectional (simultaneous) study included 203 newborns with a gestation period of 22-41 weeks, born in 2023-2024. The dynamics of TREC and KREC were evaluated. The influence of maternal factors on TREC and KREC indicators was considered. The material for the study - dried blood stains drawn on Guthrie cards and taken as part of neonatal screening.
Results. A gradual increase in the levels of KREC and TREC due to gestational age was evaluated. Mostly intensive, the process takes part in a 28-30 week group of patients. Afterward, the interesting for us values reach a plateau. It was found that there was a statistically significant decrease in TREC levels in newborns from women with a history of spontaneous miscarriages (p=0.002); medical abortions (p=0.021) and congenital kidney malformations (p=0.01). The level of CREC was statistically significantly decreased in the group of newborns with a mother's history of chronic salpingitis and oophoritis (p=0.03), chronic pyelonephritis (p=0.031)
Conclusion. The strong correlation between KREC/TREC levels and gestational age was noted. Statistically significant maternal factors influencing the assessed parameters have been identified. The question remains open as to the degree of their influence on TREC and KREC values.
Keywords:
inborn error of immunity; T-cell receptor excision circle; kappa-deleting recombination excision circle; prematurity
Funding. The study had no sponsor support.
Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.
Contribution. Collection of information, development of a statistical model, data processing - Volkova E.N.; general management, data processing - Ippolitova L.I.
Acknowledgement. The authors express their gratitude to the staff of the intensive care unit No. 5 and the clinical diagnostic laboratory of the Voronezh Regional Clinical Hospital No. 1.
For citation: Volkova E.N., Ippolitova L.I. Dynamics of T-receptor and kappa-deletion recombination excision ring levels as indicators of immune system integrity in newborns of different gestational ages: influence of maternal factors. Neonatologiya: novosti, mneniya, obuchenie [Neonatology: News, Opinions, Training]. 2024; 12 (3): 14-22. DOI: https://doi.org/10.33029/2308-2402-2024-12-3-14-22 (in Russian)
Received 21.05.2024. Accepted 01.08.2024.
Врожденные ошибки иммунитета - гетерогенная, генетически детерминированная группа расстройств, связанная с нарушением функционирования иммунной системы и проявляющаяся разнообразной клинической картиной (рецидивирующие инфекции, аутоиммунные заболевания, злокачественные новообразования и др.) [1, 2].
Метод количественного определения уровня TREC (Т-рецеп-торное эксцизионное кольцо, T-cell receptor excision circle) и KREC (каппа-делеционное рекомбинационное эксцизионное кольцо, kappa-deleting recombination excision circle), направленный на подтверждение наличия дефекта в функционировании одного из звеньев иммунной системы (в частности,
Рис. 1. Дизайн исследования
в структуре Т- или В-клеточного звена иммунитета), в настоящее время получил широкое применение [2, 3]. TREC формируются при рекомбинантной перестройке тимиче-ских Т-клеточных рецепторов [4]. Их выработка начинается приблизительно с 13-й недели эмбрионального развития, после чего с увеличением срока гестации происходит их постепенное накопление в периферической крови, что соответствует основным этапам формирования Т-клеточного звена иммунитета [2, 4]. Уровни KREC отражают историю репликации В-клеток (они определяют количество функционально активных В-клеток в периферической крови) [4, 5].
В настоящее время имеется достаточное количество исследований, связанных с динамикой уровня TREC и KREC у доношенных новорожденных, однако в группе недоношенных имеющиеся данные скудны и противоречивы. В ряде исследований было показано, что с увеличением сроков беременности происходит постепенное повышение уровней TREC и KREC [6, 7]. По данным M. Barbaro и соавт. и B. de Felipe и соавт. [8, 9], было установлено, что увеличение значений TREC в зависимости от гестационного возраста происходит постепенно, в среднем на 9,8% за неделю беременности [10]. В отношении показателей KREC данные противоречивы. Ряд исследований сообщает об увеличении уровней TREC с повышением срока гестации [8]. Однако в научной литературе в настоящее время также имеются данные о том, что уровни KREC, независимо от гестационного возраста, относительно стабильны [9, 11]. В настоящее время требуются дополнительная работа для согласования данных о TREC и KREC у недоношенных детей (в частности, у глубоконедоношенных новорожденных) и их дальнейшая тщательная оценка для определения причины получаемых различий и их дальнейших последствий.
Цель - оценка динамики уровней TREC и KREC у новорожденных, родившихся на разных сроках беременности, а также выявление и изоляция значимых материнских факторов риска, воздействующих на данные показатели.
Материал и методы
Исследование проведено на базе кафедры неонатологии и педиатрии ФГБОУ ВО ВГМУ им. Н.Н. Бурденко Минздрава России. В него включены новорожденные со сроком гестации 22-41 нед (n=203), рожденные на базе перинатального центра БУЗ ВО ВОКБ № 1. Проведены оценка уровня TREC и KREC у исследуемых новорожденных, их взаимосвязь со сроком гестации
и значимыми материнскими факторами риска. Материалом для исследования были сухие пятна крови, нанесенные на карты Гатри и взятые в рамках неонатального скрининга. Уровень TREC и KREC определялся методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени с гибридизационно-флюоресцент-ной детекцией продуктов набором реагентов «ИММУНО-БИТ МУЛЬТИ» в лаборатории на базе БУЗ ВО ВОКБ № 1 согласно инструкции производителя.
Дизайн исследования
Поперечное (одномоментное) исследование (рис. 1).
Новорожденные были разделены на 5 групп: 1-я группа - новорожденные в сроке гестации от 22-й до 27-й недели включительно (n=39); 2-я группа - 28-30 нед (n=57); 3-я группа - 31-33 нед (n=48); 4-я группа - 34-36 нед (n=34); 5-я группа - 37-41 нед (n=25).
Критерии включения в основные сравниваемые группы исследования:
■ новорожденные в сроке гестации от 22-й до 41-й недели, рожденные на базе БУЗ ВО ВОКБ № 1 ПЦ;
■ наличие подписанного законными представителями пациента информированного добровольного согласия на обработку данных и их использование в научных целях.
Критерии исключения:
■ неадекватный образец (неспособность выделить достаточное количество ДНК);
■ отказ законных представителей ребенка в использовании данных новорожденного в научных целях.
Этическая экспертиза
Проведение исследования одобрено Этическим комитетом ФГБОУ ВО ВГМУ им. Н.Н. Бурденко Минздрава России (протокол № 1 от 29.02.2024).
Опубликованные исследования соответствуют руководящим принципам исследования человека. Законные представители субъектов исследования дали свое письменное информированное согласие.
Статистический анализ
Статистическая обработка полученных данных проводилась с использованием программы StatTech v. 4.1.4 (разработчик - ООО «Статтех», Россия). Для определения нормальности распределения использовались критерии Колмогорова-Уилка и Шапиро-Уилка. Количественные
Волкова Е.Н., Ипполитова Л.И.
динамика уровней т-рецепторных и каппа-делеционных рекомбинационных эксцизионных колец как показателей состоятельности иммунной системы у новорожденных различного гестационного возраста: влияние материнских факторов
Таблица 1. Общая характеристика материнских факторов, категориальные переменные
Количество Показатели Количество
Показатели (акушерско-
(соматический анамнез) абс. % гинекологический анамнез) абс. %
Хронический пиелонефрит (N11) 37 18,2 Дисплазия шейки матки (N87) 43 21,2
Существовавшая ранее артериальная
гипертензия, осложняющая беременность, роды и послеродовой 10 4,9 Самопроизвольный выкидыш в анамнезе (003) 50 24,6
период (010)
Ожирение (Е66) 37 18,2 Оперированная матка в анамнезе 48 23,6
Расстройства вегетативной нервной системы ^90) 58 28,6 Высокий паритет родов 11 5,4
Врожденный гипотиреоз с диффузным зобом/без зоба (Е03) 15 7,4 Внематочная (эктопическая) беременность (000) 10 4,9
Врожденные аномалии [пороки развития] почки ^63) 8 3,9 Лейомиома матки Р25) 12 5,9
Несостоявшийся
Эпилепсия ^40) 4 2,0 выкидыш/ранняя гибель плода с задержкой в матке (002.1) 22 10,8
Инсулинзависимый и инсулиннезависимый сахарный диабет (Е10-Е11) 8 3,9 Сальпингит и оофорит (N70) 5 2,5
Астма с преобладанием аллергического компонента У45) 5 2,5 Женское бесплодие (N97) 12 5,9
Хронические заболевания желудочно- 16 7,9 Медицинский аборт в анамнезе (О04) 29 14,3
кишечного тракта Синдром поликистоза яичников (Е28.2) 17 8,4
Примечание. Частота встречаемости оцениваемых материнских факторов в исследуемых группах превышает 100%, учитывая наличие нескольких признаков у одной женщины.
показатели описывались с применением медианы (Ме) и нижнего/верхнего квартилей ^1^3) (при ненормальном распределении); с применением среднего арифметического значения (М) и сигмальных отклонений (±50) (при нормальном распределении). Исследуемые группы сравнивались друг с другом с применением критериев Краскела-Уоллиса и Манна-Уитни (в зависимости от количества сравниваемых групп). Проводилось построение прогностической модели с использованием метода линейной регрессии (при оценке взаимосвязи между количественными и качественными показателями). Направление и теснота связи определялись путем оценки коэффициента ранговой корреляции Спирмена (при оценке взаимосвязи между количественными показателями). При прогнозировании определенного исхода применялся метод анализа ROC-кривых. Различия считались статистически значимыми при р<0,05.
Результаты
В настоящее время существует ограниченное количество данных, отражающих влияние материнских факторов риска на динамику показателей уровней К1КЕС и Т1КЕС у недоношенных новорожденных. В данном исследовании мы постарались выделить наиболее часто встречаемые соматические заболевания и патологии со стороны репродуктивной системы, способные повлиять на изменения в показателях ТКЕС и ККЕС у новорожденных (вследствие повышения риска развития состояний, связанных с формированием вторичного иммунодефицита и повышения риска раннего инфицирования новорожденных) [12, 13]. В табл. 1 представлена сводная информация по материнским факторам.
При оценке данных материнского анамнеза было установлено, что статистически значимое снижение уровня ТКЕС наблюдается у новорожденных от женщин, имеющих в анамнезе сведения о самопроизвольных выкидышах, медицинских абортах, врожденных
Таблица 2. Анализ показателей КРЕС/ТРЕС в зависимости от статистически значимых материнских факторов
Показатель категория Ме Р1-Р3 п Р
Несостоявшийся выкидыш/ранняя гибель Отсутствие признака 728,00 376,001201,00 153 0,002*
плода с задержкой в матке (002.1) Наличие признака 406,50 246,75756,75 50
Результат Т1РЕС, Медицинские аборты Отсутствие признака 666,00 340,501189,75 174 0,021*
копий на 105/мкл в анамнезе (004) Наличие признака 405,00 224,00970,00 29
Врожденные аномалии [пороки развития] почки №63) Отсутствие признака 659,00 335,501188,50 195 0,010*
Наличие признака 227,50 155,00417,00 8
Сальпингит и оофорит Отсутствие признака 803,00 423,251437,50 198 0,030*
Результат КРЕС, (N70) Наличие признака 320,00 86,00435,00 5
копий на 105/мкл Хронический Отсутствие признака 871,00 440,251483,00 166 0,031*
пиелонефрит (N11) Наличие признака 489,00 312,00971,00 37
Здесь и в табл. 3, 4: * - указанное значение является статистически значимым, поскольку р<0,05.
о 1=1
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
22-27
28-30 31-33 34-36 Срок гестации, нед
Результат КЯЕО, копий на 105/мкл □ <100 □ 100-450 И >450
Рис. 2. Анализ групп сравнения в зависимости от результата КРЕС
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
0-
22-27
-0 — 37-41
28-30 31-33 34-36 Срок гестации, нед
Результат ТЯЕС, копий на 105/мкл □ <100 □ 100-450 И >450
Рис. 3. Анализ групп сравнения в зависимости от результата TREC
пороках почек (р<0,05). Статистически значимое снижение уровня ^ЕС наблюдается при наличии в анамнезе данных за хронический сальпингит и оофорит, хронический пиелонефрит (р<0,05). Данные по проведенному анализу представлены в табл. 2.
У всех оцениваемых новорожденных количественные данные, определяющие уровни ККЕС и TREC, были разделены на несколько групп: нормативные референсные значения ^ЕС и TREC (ШС >250 копий на 105/мкл, TREC >450 копий на 105/мкл), новорожденные из «серой зоны» (^ЕС от 100 от 250 копий на
105/мкл; TREC от 100 до 450 копий на 105/мкл), новорожденные с критическим снижением уровня ^ЕС и TREC (значения <100 копий на 105/мкл) [14]. Данные представлены на рис. 2, 3.
Для оценки динамики уровня ^ЕС и TREC в зависимости от срока гестации были выбраны условно здоровые новорожденные (исключены новорожденные с критическими значениями TREC/ ^ЕС и дети из «серой зоны»). Данные представлены в табл. 3.
Оценивая динамику показателей ^ЕС у условно здоровых новорожденных, установили, что с увеличением срока геста-
Волкова Е.Н., Ипполитова Л.И.
ДИНАМИКА УРОВНЕЙ Т-РЕЦЕПТОРНЫХ И КАППА-ДЕЛЕЦИОННЫХ РЕКОМБИНАЦИОННЫХ ЭКСЦИЗИОННЫХ КОЛЕЦ КАК ПОКАЗАТЕЛЕЙ СОСТОЯТЕЛЬНОСТИ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ У НОВОРОЖДЕННЫХ РАЗЛИЧНОГО ГЕСТАЦИОННОГО ВОЗРАСТА: ВЛИЯНИЕ МАТЕРИНСКИХ ФАКТОРОВ
Таблица 3. Зависимость показателей TREC и KREC от срока гестации
Показатель Срок гестации, нед
22-27 28-30 31-33 34-36 37-41
Результат KREC, копий на 105/мкл Me (Q1-Q3)
Результат TREC, копий на 105/мкл Me (Q1-Q3)
673,00 (434,75; 867,00)
678,50 (577,75; 918,25)
1048,00 (728,00; 1480,00)
1117,00 (547,50; 2007,00)
1013,00 (671,00; 2176,00)
995,50 (482,25; 2351,50)
0,002*
р28-30-я неделя - 22-27-я неделя = 0,010 р31-33-я неделя - 22-27-я неделя = 0,020 р34-36-я неделя - 22-27-я неделя = 0,003 р37-41-я неделя - 22-27-я неделя = 0,049
1154,00 (876,00; 1329,50)
1174,00 (662,00; 1477,00)
1146,00 (841,00; 1411,00)
1122,50 (706,50; 1604,50)
0,002*
р28-30-я неделя - 22-27-я неделя = 0,004* р31-33-я неделя - 22-27-я неделя = 0,011* р34-36-я неделя - 22-27-я неделя = 0,005* р37-41-я неделя - 22-27-я неделя = 0,014*
3500-|
о" с к 3000
ш ОС 2500
^ т 2000
а ь а н 1500-
Б
^ со е и ^ 1000-
о_ о к 500
т
X
X X
1
22-27 28-30 31-33 34-36 Срок гестации, нед
37-41
Рис. 4. Динамика показателей ^ЕС в зависимости от срока гестации
Здесь и на рис. 6: «Бокс» отражает межквартильный размах (нижняя граница - 25-й процентиль, верхняя - 75-й процен-тиль). Верхний ус - максимальное значение в исследуемой подгруппе, не являющееся выбросом (оценка 95% включенных данных). Нижний ус - минимальное значение в исследуемой подгруппе, не являющееся выбросом (оценка 95% включенных данных). Линия посередине «бокса» отражает медиану. «Крестик» в каждом боксе - среднее арифметическое значение по каждой исследуемой подгруппе. Точка - «выбросы», выбивающиеся значения.
ции отмечается постепенный прирост уровня ККЕС, причем наибольшая интенсификация прироста наблюдается между 27-й и 30-й неделями, когда медиана числа копий К1КЕС увеличивается на 155%. С 31-й недели и до достижения возраста доношенного новорожденного (37-41-я неделя) отмечается формирование относительного плато в уровнях К1КЕС (данные представлены на рис. 4), что может свидетельствовать о том, что уже с достижения данного возраста иммунный ответ новорожденного готов к полноценному функционированию во внеутробных условиях.
Нами был проведен корреляционный анализ взаимосвязи срока гестации и результата К1КЕС (р<0,001; гху=0,273), данные представлены на рис. 5А. При оценке выявлена слабой тесноты статистически значимая прямая связь. Было установлено,
что при увеличении срока гестации на 1 нед следует ожидать увеличение результата ККЕС на 44,61 копий на 105/мкл.
Оценивая динамику показателей Т1КЕС у условно здоровых новорожденных, можно наблюдать постепенное повышение уровня TREC с увеличением срока гестации. Максимальный прирост значений отмечается в промежутке между 28-й и 30-й неделями, когда медиана числа копий Т1КЕС увеличивается на 170% в течение 3 нед. На 31-33-й неделе отмечается формирование некоего плато, после чего с увеличением гестацион-ного срока и при достижении возраста доношенности (37 нед и более) медиана Т1КЕС остается на относительно стабильном уровне (рис. 6). Полученные данные согласуются с ранее проведенными исследованиями, которые указали, что количество копий Т1КЕС значительно увеличивается в течение 2-недельного периода между 28-й и 30-й неделей беременности [10].
Выполнен корреляционный анализ взаимосвязи срока гестации и показателей Т1КЕС (р=0,009; ^=0,183), по результатам которого установлена слабой тесноты прямая связь (рис. 5Б), согласно которой при увеличении срока гестации на 1 нед следует ожидать увеличение результата Т1КЕС на 22,085 копий на 105/мкл.
Установлены статистически значимые корреляционные связи между значениями ТКЕС/К1КЕС и показателями роста, массы тела, окружности головы и окружности грудной клетки у условно здоровых новорожденных. Данные корреляционного анализа представлены в табл. 4.
Обсуждение
Наше исследование показало, что с увеличением срока гестации происходит постепенное повышение уровней ККЕС и Т1КЕС. Было установлено, что пик прироста оцениваемых значений приходится на промежуток между 27-30-й неделями, после чего они выходят на относительно стабильный уровень. Согласно данным современной литературы, описываемую тен-
0
3000,0
3000,0 £3 1 1500,0
I- сэ Ü « 1000,0
S I
8 g 500,0
25,0 30,0 35,0
Срок гестации, нед
25,0
30,0 35,0
Срок гестации, нед
40,0
— Линия регрессии # Наблюдения Рис. 5. График регрессионной функции, характеризующий зависимость результата КРЕС (А) и ТРЕС (Б) от срока гестации
40,0
денцию можно объяснить тем, что онтогенетически процесс созревания В-лимфоцитов опережает развитие Т-лимфоци-тов. В-клетки впервые регистрируются начиная с 8-й недели внутриутробного развития, постепенно увеличиваясь вплоть до конца II триместра беременности. С 27-28-й недели количество В-лимфоцитов остается на относительно стабильном уровне, однако за неделю до предварительной даты родов искомые показатели могут несколько снижаться, что связано с процессом перераспределения В-клеток в организме ребенка, -они необходимы для запуска каскада адаптационных реакций, направленных на поддержание гомеостаза при переходе из внутриутробных условий во внеутробные [15-17]. Т-клетки впервые регистрируются на сроке 12,5 нед беременности, после чего с увеличением срока гестации происходит постепенное повышение их уровня (повышение уровней Т-лимфоцитов на протяжении II и III триместра беременности значительно отстает от уже относительно стабилизировавшихся к данному времени значений В-лимфоцитов) [17, 18].
Полученные нами результаты в отношении динамики уровней TREC согласуются с данными литературы: M. Gizewska и соавт. было отмечено, что новорожденные, родившиеся в сроке гестации менее 28 нед, имели самые низкие значения TREC, однако с повышением гестационного возраста наблюдалась отчетливая тенденция к их повышению [2, 7]. В недавнем исследовании с участием американских младенцев также было установлено, что уровни TREC и KREC снижались с уменьшением срока беременности, причем самые низкие значения наблюдались у новорожденных, родившихся на сроке менее 28 нед (медианное значение - 42 копии в 1 мкл) [8]. В исследовании M. Barbaro и соавт. было отмечено, что наибольший прирост в значениях TREC наблюдается в промежутке между 28-30-й неделями беременности. B. De Felipe и соавт. описывают аналогичный «всплеск» у новорожденных, рожденных на 29-31-й и 32-36-й неделе беременности [7, 9]. E. Rechavi и соавт. обнаружили, что за каждую неделю беременности уровень TREC увеличивается в среднем на 9,8% [19].
В отношении KREC имеющиеся данные противоречивы. Ряд авторов утверждают о постепенном повышении уровней KREC с увеличением срока гестации [7, 8]. Так, в исследовании, включавшем 44 287 образцов крови, было установлено, что самые низкие уровни KREC были у детей, родившихся в сроке менее 28 нед, причем с повышением срока гестации отмечалась отчетливая тенденция к повышению оцениваемых показателей
2500
о § 2000 ш Е
i—'о 1500
<л
cd
1000 500 0
X
х
X
37-41
22-27 28-30 31-33 34-36 Срок гестации, нед
Рис. 6. Динамика показателей ТРЕС в зависимости от срока гестации у новорожденных
Таблица 4. Результаты корреляционного анализа взаимосвязи антропометрических данных и уровней ТРЕС/КРЕС у условно здоровых новорожденных
Показатель Масса тела,г рост, см окружность грудной клетки, см окружность головы, см
Результат rxy=0,214 rxy=0,225 rxy=0,258 rxy=0,307
TREC p=0,015* р=0,010* р=0,003* р<0,001*
Результат rxy=0,208 rxy=0,256 KREC
Ч=0,177
р=0,006* р<0,001* р=0,021*
r =0,181
xy
р=0,018*
(р<0,05) [7]. Об аналогичных выводах сообщается и в нескольких других исследованиях [9, 11]. Однако в научной литературе также имеются данные и о том, что уровни ^ЕС, начиная с 28-й недели гестации, относительно стабильны и последующее повышение оцениваемых показателей слабо выражено [2, 4, 10], что согласуется с данными нашего исследования.
Нами проведен корреляционный анализ взаимосвязи антропометрических данных и уровней TREC/KREC у условно здоровых новорожденных, по результатам которого установлены статистически значимые положительные корреляционные связи. Наличие данных взаимосвязей объясняется тем, что с каждой неделей внутриутробного развития происходят естественный рост плода и, соответственно, постепенное увеличение основных антропометрических показателей (в том числе повышение объема иммунокомпетентных органов и систем, обогащенных предшественниками лимфоцитов) [7-9, 20]. В настоящее время опубликовано достаточное количество данных, отражающих
Б
А
Волкова Е.Н., Ипполитова Л.И.
ДИНАМИКА УРОВНЕЙ Т-РЕЦЕПТОРНЫХ И КАППА-ДЕЛЕЦИОННЫХ РЕКОМБИНАЦИОННЫХ ЭКСЦИЗИОННЫХ КОЛЕЦ КАК ПОКАЗАТЕЛЕЙ СОСТОЯТЕЛЬНОСТИ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ У НОВОРОЖДЕННЫХ РАЗЛИЧНОГО ГЕСТАЦИОННОГО ВОЗРАСТА: ВЛИЯНИЕ МАТЕРИНСКИХ ФАКТОРОВ
взаимосвязь между уровнями TREC/KREC и антропометрическими показателями при рождении. Так, Д.А. Черемохин и соавт. [2] установили наличие положительной корреляционной зависимости (р<0,01) между значениями TREC/KREC и массой тела при рождении. Относительно недавно проведенное исследование также выявило статистически значимую взаимосвязь между показателями TREC/KREC, выделенными из пятен сухой крови, и массой тела детей, рожденных раньше срока. Было установлено, что с увеличением массы тела происходит соизмеримое повышение количества молекул TREC [19, 21], причем отмечено, что установленная корреляционная связь была более выраженной у крайне недоношенных новорожденных (rxy=0,309), в отличие от очень недоношенных (rxy=0,147) и поздних недоношенных новорожденных, у которых связь отсутствовала [19].
Нами выявлено, что статистически значимое снижение уровня TREC наблюдается у новорожденных от женщин, имеющих в анамнезе сведения о самопроизвольных выкидышах, медицинских абортах, врожденных пороках почек; статистически значимое снижение уровня KREC - при наличии в анамнезе данных за хронический сальпингит и оофорит, хронический пиелонефрит. Полученные результаты согласуются с имеющимися литературными данными. Так, ряд авторов установили, что при наличии у матери хронических очагов инфекций риск развития тяжелых инфекционных патологий у детей, родившихся раньше срока, повышается, что отражается в статистически значимом снижении уровней TREK и KREC (р<0,005) [22-25]. В исследовании, включавшем 2842 новорожденных, было установлено, что у детей от матерей, имеющих в анамнезе данные за медицинские аборты и мертворождения, частота реализации внутриутробной инфекции была достоверно выше [26, 27], причем уровни TREC и KREC у таких новорожденных также были значительно ниже в сравнении с детьми, не имеющими данного патологического состояния [27].
R. Boato и соавт. установили, что у новорожденных от матерей с врожденными пороками почек достоверно чаще встречались нарушения процесса адаптации мочевыделительной системы. Преждевременное родоразрешение в компиляции с высоким
риском инфицирования и повышенной нагрузкой на органы-мишени, в частности на органы мочевыделительной системы, значительно утяжеляло процесс стабилизации детей, рожденных раньше срока, приводило к более тяжелому течению раннего неонатального периода и к снижению уровней Т1КЕС и К1КЕС [28].
Заключение
Ввиду совершенствования органосохраняющих технологий, направленных на повышение качества выхаживания новорожденных, необходимо внедрение новых методов диагностики, лечения и профилактики заболеваний, связанных с фактом преждевременного рождения. Поскольку уровень Т1КЕС и К1КЕС отражает динамику созревания Т- и В-клеточного звена иммунитета, их детальное изучение в группе детей, рожденных раньше срока, в последующем позволит снизить частоту тяжелых инфекционных осложнений и внести ясность в клиническую интерпретацию атипичного течения различного рода патологий [2]. В настоящем исследовании отмечена тесная связь между уровнями ККЕС/ТКЕС и гестационным возрастом - с увеличением срока гестации отмечается постепенный прирост уровня К1КЕС и Т1КЕС (наиболее выраженный прирост на 27-30-й неделе, с 31-й недели скорость прироста снижается, выходя на своего рода плато). Было установлено, что при повышении срока гестации на 1 нед следует ожидать увеличение результата К1КЕС на 44,61 копий на 105/мкл и увеличение результата Т1КЕС на 22,085 копий на 105/мкл. Установлены статистически значимые корреляционные связи между значениями ТКЕС/ККЕС и показателями роста, массы тела, окружности головы и окружности грудной клетки (с повышением основных антропометрических данных происходит повышение уровней ТКЕС/ККЕС). Обнаружено влияние на уровень ТКЕС таких статистически значимых материнских факторов, как наличие в анамнезе данных о самопроизвольных выкидышах, медицинских абортах, врожденных пороках почек ^<0,05); на уровень К1КЕС - о наличии хронического сальпингита и оофорита, хронического пиелонефрита ^<0,05). Остается открытым вопрос о степени их влияния на исследуемые показатели.
СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ
Волкова Елена Николаевна (Elena N. Volkova)* - врач - анестезиолог-реаниматолог отделения реанимации и интенсивной терапии № 5 БУЗ ВО ВОКБ № 1, Воронеж, Российская Федерация E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0001-8979-3454
Ипполитова Людмила Ивановна (Lyudmila I. Ippolitova) - доктор медицинских наук, заведующий кафедрой неонатологии и педиатрии ФГБОУ ВО ВГМУ им. Н.Н. Бурденко Минздрава России, главный внештатный неонатолог Воронежской области, Воронеж, Российская Федерация E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0001-7076-0484
ЛИТЕРАТУРА
1. Khadzhieva М.В., Kalinina E.V., Larin S.S. et al. TREC/KREC levels in young COVID-19 patients // Diagnostics (Basel). 2021. Vol. 11, N 8. Р. 1489.
2. Черемохин Д.А., Шинвари Х., Дерябина С.С. и др. Анализ уровней
TREC и KREC в образцах сухой крови новорожденных разного гестационного
возраста и веса // Acta Naturae (русскоязычная версия). 2022. Т. 14. № 1.
С. 101-108.
* Автор для корреспонденции.
3. Boyarchuk O., Yarema N., Kravets V. et al. Newborn screening for severe combined immunodeficiency: the results of the first pilot TREC and KREC study in Ukraine with involving of 10,350 neonates // Front. Immunol. 2022. Vol. 13. P. 1-13.
4. Kwok J., Cheung S., Y Ho J. et al. Establishing simultaneous T Cell Receptor Excision Circles (TREC) and K-Deleting Recombination Excision Circles (KREC)
quantification assays and laboratory reference intervals in healthy individuals of different age groups in Hong Kong // Front. Immunol. 2020. Vol. 11. P. 1411.
5. §entürk G., Ng Y.Y., Eltan S.B. et al. Determining T and B Cell development by TREC/KREC analysis in primary immunodeficiency patients and healthy controls // Scand. J. Immunol. 2021. Vol. 95, N 7. P. e13130.
6. Trück J., Prader S., Natalucci G. et al. Swiss newborn screening for severe T and B cell deficiency with a combined TREC/KREC assay - management recommendations // Swiss Med. Wkly. 2020. Vol. 150. P. w20254.
7. Gizewska M., Durda K., Winter T. et al. Newborn screening for SCID and other severe primary immunodeficiency in the Polish-German transborder area: experience from the first 14 months of collaboration // Front. Immunol. 2020. Vol. 11. P. 1948.
8. Barbaro M., Ohlsson A., Borte S. et al. Newborn screening for severe primary immunodeficiency diseases in Sweden - a 2-year pilot TREC and KREC screening study // J. Clin. Immunol. 2017. Vol. 37. P. 51-60.
9. De Felipe B., Olbrich P., Lucenas J. et al. Prospective neonatal screening for severe T- and B-lymphocyte deficiencies in Seville // Pediatr. Allergy Immunol. 2016. Vol. 27, N 1. P. 70-77.
10. Remaschi G., Ricci S., Cortimiglia M. et al. TREC and KREC in very preterm infants: reference values and effects of maternal and neonatal factors // J. Matern. Fetal Neonatal Med. 2019. Vol. 34, N 23. P. 1-6.
11. Kanegae M., Barreiros L., Sousa J. et al. Newborn screening for severe combined immunodeficiencies using TRECS and KRECS: second pilot study in Brazil // Rev. Paul. Pediatr. 2017. Vol. 35, N 1. P. 25-32.
12. O'Connell A. Primary immunodeficiency in the NICU // Neoreviews. 2019. Vol. 20, N 2. P. e67-e78.
13. Mongkonsritragoon W., Huang J., Fredrickson M. et al. Positive newborn screening for severe combined immunodeficiency: what should the pediatrician do? // Clin. Med. Insights Pediatr. 2023. Vol. 17. P. 1-9.
14. Продеус А.П., Марахонов А.В. Диагностика иммунодефицитных состояний у детей: клинические и лабораторные аспекты // Материалы научно-практической конференции «Орфанетика: Всероссийская мультидисциплинарная конференция с международным участием». Москва, 2024.
15. Zhang J., Quintal L., Atkinson A. et al. Novel RAG1 mutation in a case of severe combined immunodeficiency // Pediatrics. 2015. Vol. 116, N 3. P. 445-449.
16. Holt P.G., Jones C.A. The development of the immune system during pregnancy and early life // Allergy. 2000. Vol. 55, N 8. P. 688-697.
17. Тузанкина И.А. Первичные иммунодефициты (врожденные ошибки иммунитета) в раннем возрасте. Ташкент: Adast-poligraf, 2022. 232 с.
18. Vermijlen D., Prinz I. Ontogeny of innate T lymphocytes - some innate lymphocytes are more innate than others // Front. Immunol. 2014. Vol. 10, N 5. P. 486.
19. Rechavi E., Lev A., Simon A. et al. First year of Israeli newborn screening for severe combined immunodeficiency - clinical achievements and insights // Front. Immunol. 2017. Vol. 8, N 1. P. 1448.
20. Moro-Garcia M.A., Alonso-Arias R., Lopez-Larrea C. Molecular mechanisms involved in the aging of the T-cell immune response // Curr. Genomics. 2012. Vol. 13, N 8. P. 589-602.
21. Ye P., Kirschner D. Measuring emigration of human thymocytes by T-cell receptor excision circles // Crit. Rev. Immunol. 2022. Vol. 22, N 5. P. 483-497.
22. Olbrich P., de Felipe B., Delgado-Pecellin C. et al. A first pilot study on the neonatal screening of primary immunodeficiencies in Spain: TRECS and KRECS identify severe T- and B-cell limphopaenia // Ann. Pediatr. (Barc.). 2014. Vol. 81, N 5. P. 310-317.
23. Левченко Л., Ильина А., Черкасова С. Врожденные пневмонии у новорожденных (обзор литературы) // Медико-социальные проблемы семьи. 2022. Т. 27, № 2. С. 130-135.
24. Шадеева Ю., Гурьева В. Факторы риска внутриутробной инфекции при сверхранних и ранних преждевременных родах, осложненных разрывом околоплодных оболочек // Мать и дитя в Кузбассе. 2019. Т. 4, № 79. С. 33-39.
25. Майден И., Спивак Е. Особенности функционального состояния лимфоцитов у недоношенных новорожденных // Пермский медицинский журнал. 2019. Т. 36, № 6. С. 27-32.
26. Feleke B.E., Feleke T.E. A longitudinal study on the effects of previous stillbirth or abortion on subsequent pregnancies and infants // Eur. J. Public Health. 2021. Vol. 6. P. 1-5.
27. Kashatnikova D.A., Khadzhieva M.B., Kolobkov D.S. et al. Pneumonia and related conditions in critically ill patients - insights from basic and experimental studies // Int. J. Mol. Sci. 2022. Vol. 23, N 17. P. 9896.
28. Boato R., Aguiar M., Mak R. et al. Maternal risk factors for congenital anomalies of the kidney and urinary tract: a case-control study // J. Pediatr. Urol. 2023. Vol. 19, N 2. P. e1-e11.
REFERENCES
1. Khadzhieva M.B., Kalinina E.V., Larin S.S., et al. TREC/KREC levels in young COVID-19 patients. Diagnostics (Basel). 2021; 11 (8): 1489.
2. Cheremokhin D.A., Shinvari X., Deryabina S.S., et al. Analysis of TREK and KREC levels in dry blood samples of newborns of different gestational age and weight. Acta Naturae (Russian version). 2022; (14): 101-8. (in Russian)
3. Boyarchuk O., Yarema N., Kravets V., et al. Newborn screening for severe combined immunodeficiency: the results of the first pilot TREC and KREC study in Ukraine with involving of 10,350 neonates. Front Immunol. 2022; 13: 1-13.
4. Kwok J., Cheung S., Y Ho J., et al. Establishing simultaneous T Cell Receptor Excision Circles (TREC) and K-Deleting Recombination Excision Circles (KREC) quantification assays and laboratory reference intervals in healthy individuals of different age groups in Hong Kong. Front Immunol. 2020; 11: 1411.
5. §entürk G., Ng Y.Y., Eltan S.B., et al. Determining T and B Cell development by TREC/KREC analysis in primary immunodeficiency patients and healthy controls. Scand J Immunol. 2021; 95 (7): e13130.
6. Trück J., Prader S., Natalucci G., et al. Swiss newborn screening for severe T and B cell deficiency with a combined TREC/KREC assay - management recommendations. Swiss Med Wkly. 2020; 150: w20254.
7. Gizewska, M., Durda K., Winter T., et al. Newborn screening for SCID and other severe primary immunodeficiency in the Polish-German transborder area: experience from the first 14 months of collaboration. Front Immunol. 2020; 11: 1948.
8. Barbaro M., Ohlsson A., Borte S., et al. Newborn screening for severe primary immunodeficiency diseases in Sweden - a 2-year pilot TREC and KREC screening study. J Clin Immunol. 2017; 37: 51-60.
9. De Felipe B., Olbrich P., Lucenas J., et al. Prospective neonatal screening for severe T- and B-lymphocyte deficiencies in Seville. Pediatr Allergy Immunol. 2016; 27 (1): 70-7.
10. Remaschi G., Ricci S., Cortimiglia M., et al. TREC and KREC in very preterm infants: reference values and effects of maternal and neonatal factors. J Matern Fetal Neonatal Med. 2019; 34 (23): 1-6.
11. Kanegae M., Barreiros L., Sousa J., et al. Newborn screening for severe combined immunodeficiencies using TRECS and KRECS: second pilot study in Brazil. Rev Paul Pediatr. 2017; 35 (1): 25-32.
12. O'Connell A. Primary immunodeficiency in the NICU. Neoreviews. 2019; 20 (2): e67-78.
13. Mongkonsritragoon W., Huang J., Fredrickson M., et al. Positive newborn screening for severe combined immunodeficiency: what should the pediatrician do? Clin Med Insights Pediatr. 2023; 17: 1-9.
14. Prodeus A.P., Marakhonov A.V. Diagnosis of immunodeficiency conditions in children: clinical and laboratory aspects. In: Proceedings of the Scientific-Practical
Conference «Orphanetics: All-Russian Multidisciplinary Conference with International Participation». Moscow, 2024. (in Russian)
15. Zhang J., Quintal L., Atkinson A., et al. Novel RAG1 mutation in a case of severe combined immunodeficiency. Pediatrics. 2015; 116 (3): 445-9.
16. Holt P.G., Jones C.A. The development of the immune system during pregnancy and early life. Allergy. 2000; 55 (8): 688-97.
17. Tuzankina I.A. Primary immunodeficiency (innate errors of immunity) at an early age. Tashkent: Adast-poligraf, 2022: 232 p. (in Russian)
18. Vermijlen D., Prinz I. Ontogeny of innate T lymphocytes - some innate lymphocytes are more innate than others. Front Immunol. 2014; 10 (5): 486.
19. Rechavi E., Lev A., Simon A., et al. First year of Israeli newborn screening for severe combined immunodeficiency - clinical achievements and insights. Front Immunol. 2017; 8 (1): 1448.
20. Moro-Garcia M.A., Alonso-Arias R., Lopez-Larrea C. Molecular mechanisms involved in the aging of the T-cell immune response. Curr Genomics. 2012; 13 (8): 589-602.
21. Ye P., Kirschner D. Measuring emigration of human thymocytes by T-cell receptor excision circles. Crit Rev Immunol. 2022; 22 (5): 483-97.
22. Olbrich P., de Felipe B., Delgado-Pecellin C., et al. A first pilot study on the neonatal screening of primary immunodeficiencies in Spain: TRECS and KRECS identify severe T- and B- cell limphopaenia. Ann Pediatr (Barc). 2014; 81 (5): 310-7.
23. Levchenko L., Il'ina A., Cherkasova S. Congenital pneumonia in newborns (literature review). Mediko-sotsial'nye problemy sem'i [Medical and Social Problems of the Family]. 2022; 27 (2): 130-5. (in Russian)
24. Shadeeva Yu., Gur'eva V. Risk factors for intrauterine infection in early and early preterm labor complicated by rupture of amniotic membranes. Mat' i ditya v Kuzbasse [Mother and Child in Kuzbass]. 2019; 4 (79): 33-9. (in Russian)
25. Mayden I., Spivak E. Features of the functional state of lymphocytes in premature newborns. Permskiy meditsinskiy zhurnal [Perm Medical Journal]. 2019; 36 (6): 27-32. (in Russian)
26. Feleke B.E., Feleke T.E. A longitudinal study on the effects of previous stillbirth or abortion on subsequent pregnancies and infants. Eur J Public Health. 2021; 6: 1-5.
27. Kashatnikova D.A., Khadzhieva M.B., Kolobkov D.S., et al. Pneumonia and related conditions in critically ill patients - insights from basic and experimental studies. Int J Mol Sci. 2022; 23 (17): 9896.
28. Boato R., Aguiar M., Mak R., et al. Maternal risk factors for congenital anomalies of the kidney and urinary tract: a case-control study. J Pediatr Urol. 2023; 19 (2): e1-11.
