CC BY
67
ствия. Этот эффект возможен в связи с наличием у фитомеланинов свойств внутри клетки нейтрализовать токсические продукты обмена и свободные радикалы, а также собственных свойств нейропрепарата и антидепрессанта. Особого внимания заслуживает гастропротективный эффект фитомеланина, который обеспечил в данном исследовании быстрый регресс диспептических симптомов у пациентов, получавших НПВС.
□ДАД
□сад
Рис.3. Динамика САД и ДАД
60%
50%
40%
30%
20%
10%
0%
48%
30%
16.00%
6.0%
1 1 ■
до 7 дней до 14 дней более 14дней более 21 дня
Рис. 4. Оценка длительности аналитического эффекта
Представляется перспективным дальнейшее изучение и применение свойств фитомеланинов в клинической практике восстановительной медицины в связи с отсутствием нежелательных эффектов и высокой безопасностью биофармпрепаратов на его основе.
Важнейшим компонентом предложенной технологии анал-гезии является противовоспалительное воздействие низкоэнергетического лазера. В отдаленный период после перенесенных вертебральных переломов на фоне ОП отмечается прогрессирование дегенеративных процессов в местах повреждения. Прогрессирует повреждение межпозвонковых дисков, связочного аппарата, капсулы сустава. Механические повреждения приводят к возникновению локального воспаления, сопровождающегося гиперпродукцией провоспалительных цитокинов. Это приводит к выработке биологически активных веществ и свободных радикалов, обладающих альгогенным действием и способных раздражать болевые рецепторы. В связи с этим подавление локального воспаления имеет важнейшее значение в устранении болевого синдрома. Преимущество лазерного воздействия перед применением НПВС заключается в отсутствии нежелательных явлений, типичных для нестероидных препаратов и узкий спектр противопоказаний во всех возрастных группах.
Возобновление курсов лазерофореза фитомеланина с предварительной ионизацией и электромиостимуляцией в месте аппликации с интервалом в 3-4 недели при наличии потребности в анал-гезии после перенесенных остеопоротических вертебральных переломов может служить методом альтернативного безопасного обезболивания с воздействием на широкий спектр механизмов возникновения боли у пациентов геронтологической группы.
Литература
1. Е.А. Беляева, А.А. Хадарцев. Системный подход к реабилитации пациентов с остеопорозом // Системный анализ и управление в биомедицинских системах. 2010. Т. 9. №1. С. 13-17.
2. Л.И. Беневоленская. Руководство по остеопорозу. // медицина. 2003. С. 23-28.
3. Медицинская реабилитация / Под ред. В.А. Епифанова. М.: 2008. 352 с.
4. А. А. Хадарцев, В А. Тутельян и др. Теория и практика восстановительной медицины. Тула - Москва, 2004. 248 с.
5. Неблагоприятные побочные реакции лекарственных средств / Под ред. Д.В. Рейнхарта. М.: «Литтерра», 2007. Т. I. 256 с.
6. А.С. Сазонов, М.С. Найок, С.Ю. Федоров, В.Г. Купеев, А. А. Хадарцев. Низкоинтенсивная биорезонансная терапия / под
ред. А. А. Яшина. Тула: «Тульский полиграфист», 2000. 136 с.
7. Руководство по геронтологии / Под ред. В.Н. Шабалина. М.: 2005. 800 с.
8. А.А. Хадарцев, В.Г. Купеев, В.Г. Зилов и соавт. Фитолазе-рофорез в лечении заболеваний внутренних органов: пособие для врачей. Тула, 2001. 25 с.
9. С.П.Лях. Астромеланин: природное лечебное средство для меланотерапии / Материалы шестого международного научно-практического конгресса «Человек в экстремальных условиях: человеческий фактор и профессиональное здоровье». Москва, 2008. С. 367-368.
10. А А. Хадарцев, А. С. Сазонов. Аппарат лазерного ионо-фореза и электромиостимуляции «МАГИСТР». Методичесие рекомендации. 39 с.
THE NEW TECHNOLOGY OF SAFE ANALGETIC THERAPY AT COMPLICATED OSTEOPOROSIS
E.A.BELYAEVA, V. G. KUPEEV, A.A. KHADARTSEV Tula State University, Medical Institute
The problem of analgesia at patients with chronic painful syndrome owing to vertebral osteoporotic fractures and fractures of proximal segment of hip becomes complicated because of patients' belonging to a senior age group, a wide spectrum of contra-indications to standard anesthetizing preparations caused by polymorbidity and high risk of undesirable phenomena.
Key words: analgesia, chronic painful syndrome, polymorbidity.
УДК(616.36-004+616.36-002.2)-089.843:611-018
ДИНАМИКА СОДЕРЖАНИЯ ПРОДУКТОВ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ ПОСЛЕ ВЛИЯНИЯ ФЕТАЛЬНЫХ КЛЕТОК ПРИ ЛЕЧЕНИИ ЦИРРОЗА ПЕЧЕНИ У КРЫС (ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ)
Э.М. ШЕНДЕР*
Мы изучали экспериментальный цирроз печени на лабораторных животных-крысах. Во всех случаях исследований крысы с моделью цирроза печени имели повышение активности перекисного окисления липидов. Роль продуктов перекисного окисления, безусловно важна в патогенезе регенеративного процесса. Трансплантация фетальных клеток в сочетании с их низкоактивным лазерным излучением способна затормозить окислительный стресс и стимулировать регенерацию клеток печени при моделированном циррозе печени. Ключевые слова: фетальная клеточная трансплантация, модель цирроза печени, активность продуктов перекисного окисления липидов.
Материалы и методы исследования. Циррозы занимают ведущее место среди диффузных хронических заболеваний печени [1,3,13,14,15,17,18,19].
Формы кислорода в активном виде интенсивно усиливают свое токсическое воздействие. При этом происходит активное истощение антиоксидантной системы. [2,4,5,6,7,8].
Надо также отметить, что существует целый ряд научных работ, посвященный роли, перекисного окисления липидов. Однако имеющихся научных работ в этом направлении недостаточно [9].
Вышеизложенное позволяет нам поставить целью изучения динамики содержания продуктов перекисного окисления липидов под воздействием фетальных клеток в процессе эксперимента.
Объектом эксперимента служили 368 половозрелые, беспородные крысы, средней массой 200 г.
Во всех экспериментах соблюдены требования, предъявляемые при проведении экспериментальных работ на животных.
Подопытные крысы были разделены на следующие группы:
1 группа - контрольная;
2 группа - с экспериментальным циррозом печени [13];
3 группа - с экспериментальным циррозом печени, которым проводилась стимуляция регенерации печени с помощью трансплантации суспензии тканей печени, селезенки и тимуса 18- 19дневных плодов крыс [10];
4 группа - с экспериментальным циррозом печени, которым проводилась стимуляция регенерации печени с помощью трансплантации суспензии тканей печени, селезенки и тимуса 18-19дневных плодов крыс после предварительного воздействия на эти
*454000,г. Челябинск, ул. К. Либкнехта, дом 2.НОУ ВПО Уральский институт бизнеса.
мм рт ст
ткани низкоинтенсивного лазерного излучения.
В качестве излучателя использовался гелий-неоновый полупроводниковый аппарат с длиной волны 633 нм. [11].
Цирроз печени воспроизводился путем длительного введения гепатотропного яда - четыреxxлористого углерода.
В течение 3 месяцев (90 суток) под кожу спины крысы вводили 50% масляный раствор четыреxxлористого углерода в дозе
0,4 мл на 100 гр. веса животного 4 раза в неделю [12].
Трансплантат готовился от самок крыс со сроком беременности 18-19 суток. Во всеx группаx животные трансплантация фетальной взвести осуществлялась сразу после создания модели экспериментальным циррозом печени (на 91-е сутки эксперимента).
Беременные самок выводили из эксперимента путем дека-питации.
Использован метод гомогенизации фрагментов фетальные тканей печени, селезенки и тимуса в равные количестваx.
При окраске трипановым синим гомогенат представлял суспензию жизнеспособные ядросодержашда клеток 3-5х105[6]. Трансплантацию осуществляли посредством внутрибрюшинной инъекции 1 мл. приготовленной фетальной суспензии [4,5]. Животные 2-4 групп выводили из эксперимента через 75 суток после введения трансплантата путем декапитации. Активность репара-тивные процессов оценивали с учетом морфофункционального состояния печени.
Для микроскопического исследования фрагменты печени, тимуса и селезенки фиксировали в 10% растворе формалина, обезвоживали и заливали в парафин.
Гистологические срезы окрашивались гематоксилином и эозином, по Ван Гизону, ШИК-реакцией.
Морфометрическое исследование осуществлялось с помощью компьютерной системы анализа цветового изображения ДиаМорф-Cito (Россия).
На условной единице площади в ткани печени подсчитывались диаметры клеток и иx ядер, а так же митотический индекс гепатоцитов. Проводилось определение Т- и В-лимфоцитов непрямым методом Кунса с помощью МКАТ («Ortho») в 1 мм2 гистологического среза ткани печени и селезенки.
Клетки, вступившие в апоптоз, определяли с помощью спе-цифическ^ антител к нуклеотидам ядерной ДНК («RD systems»).
В качестве вторичные антител использовали антимышиный IgG, меченный флюороxромом изотиоционатом. Индекс апоптоз вычисляли путем определения процентного содержания клеток с позитивной реакцией на 500 клеток.
Для определения содержание продуктов перекисного окисления липидов в сыворотке крови применяли спектрофотометрический метод комплексного определения продуктов перекисного окисления липидов.
Экстракцию липидов из сыворотки крови проводили гептан-изопропанольной смесью в соотношении 1:1 по объему. Оптическую плотность гептановой и изопропанольной фаз измеряли против соответствующего контроля на спектрофотометре СФ-46 при длине волны 220 нм, 232 нм, 278 нм, 400 нм.
При этом экстинкция при длине волн 220 нм отражала содержание изолированные двойные связей в экстрагированные липидаx и использовалась нами для расчета относительного содержания продуктов липидной пероксидации.
Оптическая плотность при 232 нм отражала содержание диеновые конъюгатов.
Поглощение при 278 нм соответствовало концентрации вторичные молекулярные продуктов переокисления (кетодиенов и сопряженные триенов).
Поглощение при длине волны 400 нм отражало количество шиффовые оснований.
Относительное содержание соответствующе продуктов выражали в условные единицаx, расчитывая ж как отношение Е 232/Е 220, Е 278/Е 22, Е 400/Е 220.
Все результаты обрабатывали с помощью EXCEL. Вычислялся t-критерий Стьюдента.
Результаты и их обсуждение. В результате проведенного исследования установлено, что при экспериментальном циррозе печени в гептановой фазе во второй группе наблюдалась активация перекисного окисления липидов, которая сопровождалась достоверным увеличением концентрации первичные (диеновые конъюгат), вторичные (сопряженные кетотриенов) и конечные (шиффовые оснований) продуктов перекисного окисления по сравнению с контролем (табл.1).
В изопропанольной фазе выраженность этих изменений была значительно ниже.
При введении взвеси фетальных тканей крысам регистрировалось снижение у них перекисного окисления липидов в третьей группе эксперимента. Однако, исследуемые показатели не достигли значений у здоровых крыс.
На следующем этапе эксперимента мы предварительно воздействовали на взвесь фетальных тканей низкоинтенсивным лазерным излучением.
В результате облучения низкоинтенсивным лазером в четвертой группе было выявлено снижение концентрации диеновых конъюгатов, сопряженных кетотриенов и шиффовых оснований в обеих фазах (гептановой и изопропанольной) значительно больше по сравнению с третьей группой.
Полученные результаты показали, что введение фетальных клеток, облученных низкоинтенсивным лазерным излучением, наиболее эффективно воздействует на процессы перекисного окисления липидов.
Фетальные клетки оказывают стабилизирующее влияние на мембраны клеток цирротической печени.
Выявленные данные подтверждаются проведенными гистологическими исследованиями.
Так, морфологически во второй группе выявлялись атрофические изменения в тимусе и селезенке (табл.2).
Таблица 1
Изменение активности процессов перекисного окисления липидов в сыворотке крови крыс (относительные единицы экстинкции) при экспериментальном циррозе печени
Группы живaтныx (№) Гептановая фаза Изопропанольная фаза
диеновые конъюгаты (ДК) 232/220 Сопряжен ные кетотрие- ны (СК) 248/220 Шиффовы основания (ШО) 400/220 диеновые конъюгаты (ДК) 232/220 Сопряженные кетотриены (СК) 248/220 Шиффовы основания (Ш О) 400/220
Контроль (1) 0,840 і 0,252 0,297 і 0,091 0,064 і 0,001 0,384 і 0,125 0,286 і 0,094 0,054 і 0,001
ЦП (2) 1,532 і 0,247* 2,274 і 0,161* 2,121 і 0,013* 2,256 і 0,274 * 2,577 і 0,274* 0,315 і 0,034*
ЦП+фет.тк (3) 1,236 і 0,154*,** 1,474 і 0,132*,** 0,444 і 0,003*,** 1,326 і 0,442*,** т ^ 45 0, 0,204 і 0,015*,**
ЦП+ фет. тк+лаз (4) 0,942 і 0,256** 0,360 і 0,088** 0,111 і 0,002** 0,512 і 0,013 ** 0,492 і 0,031** 0,111 і 0,012**
Примечание: * - 1 достоверность между 1 и 2 группами; ** - достоверность между 2 и 4 группами. Р<0,05; ЦП - цирроз печени; ЦП+фет.т. - воздействие на цирроз печени фетальными тканями; ЦП+фет.тк+лаз. - воздействие на цирроз печени фетальными тканями, облученным низкоинтенсивным лазерным излучением.
Таблица 2
Динамика площади фолликулов со светлыми центрами и без них в селезенке крыс (мкм2)
Эксперименталь -ные группы (№) Число животные Площадь фолликулов без светлый центров (M і m) Площадь фолликулов со светлыми центрами (M і m)
1 20 31512 і 6123* 143767 і 42282*
2 100 9840 і 2460*,**,*** 49920 і 1455*,**,***
3 100 20682 і 6894** 95836 і 29038**
4 100 31512 і 9845**,*** 141762 і 44226***
Примечание: *- достоверность различий между группами №1, 2;
**- достоверность различий между группами №2, 3; ***- достоверность различий между группами №2, 4; Р<0,05.
Отмечались нарушения процессов репаративной регенерации в печени, которые выражались, в частности, достоверным уменьшением числа Т-лимфоцитов в указанных органах (рис.1).
В тимусе у крыс 3 и 4 групп опыта отмечалось увеличение числа лимфоцитов в корковом веществе, в селезенке - повышение содержания Т- и В-лимфоцитов, в печени - активация пролиферации гепатоцитов с достоверным возрастанием митотического индекса (рис. 2.) и купферовских клеток в сочетании с увеличением числа Т- и В-лимфоцитов в портальных трактах, а также увеличением числа контактов между гепатоцитами, лимфоцитами и купферовскими клетками (рис.3).
цп+ФТ+НИЛИ цп+ФТ
ЦП
контроль
0 1 2 3 4 5
контроль ЦП ЦП+ФТ ЦП+ФТ+НИЛИ
1,98 0,59 4,37 2,23
Рис.1. Содержание Т-лимфоцитов в ткани печени (р<0,05)
Примечание: ЦП - цирроз печени; ЦП+ФТ - воздействие на цирроз печени фетальными тканями; ЦП+ФТ+НИЛИ - воздействие на цирроз печени фетальными тканями, облученным низкоинтенсивным лазерным излучением.
Рис.2. Динамика митотического индекса в ткани печени (%о), (р<0,05).
Примечание: ЦП - цирроз печени; ЦП+ФТ - воздействие на цирроз печени фетальными тканями; ЦП+ФТ+НИЛИ - воздействие на цирроз печени фетальными тканями, облученным низкоинтенсивным лазерным излучением.
контакты
■ контакты
контроль
ЦП
ЦП+ФТ ЦП+ФТ+НИЛИ
Контакты
контроль ЦП ЦП+ФТ ЦП+ФТ+НИЛИ
5,33 0,45 1,54 5,89
Рис.3 Характеристика клеточных контактов между гепатоцитами, лимфоцитами и купферовскими клеткам. (р<0,05).
Примечание: ЦП - цирроз печени; ЦП+ФТ - воздействие на цирроз печени фетальными тканями; ЦП+ФТ+НИЛИ - воздействие на цирроз печени фетальными тканями, облученным низкоинтенсивным лазерным излучением.
Выводы.
1. Повышение активности перекисного окисления липидов у крыс с моделью экспериментального цирроза печени играет
важную роль в процессах регенерации, стимуляции иммунной системы.
2.Фетальные ткани, облученные низкоинтенсивным лазерным излучением, ингибируют окислительный стресс и стимулируют процессы восстановления печени.
3.Содержание продуктов перекисного окисления липидов после влияния на экспериментальных животных с моделью цир-
роза печени прогрессивно снижается, вследствие восстановительных процессов в ткани печени.
Литературы
1. Абдурахманов Д. Т. Алкогольная болезнь печени // РЖГГК. 2007. Т.17. №6. С. 4-9.
2. Баранская Е.К., Юрьева ЕЮ., Лемина Т.Л., Ивашкин В.Т. Диагностика и возможности коррекции функциональной патологии билиарного тракта // Клинические перспективы гастроэнтерологии гепатологии.2007. №2. С.7-12.
3. Белякин С.А., Бобров А.Н., Плюснин С.В. Уровень потребления алкоголя населением и смертность, обусловленная циррозами печени. Как они связаны? // Клинические перспективы гастроэнтерологии гепатологии, 2009.№5. С. 2-6.
4. Владимиров ЮА., Арчаков ИМ. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М.: Наука, 1972. С. 193-202.
5. Волчегорский И.А., Шапошник И.И., Алексеев Е.Н., Хар-ченкова Н.В. Показатели системы «Перекисное окисление липидов - антиоксидантная защита» как маркеры хронической сердечной недостаточности при кардиомиопатиях // Клин. Медицина. 2003. Т. 81. № 8. С. 26-28.
6. Д.В. Гарбузенко. Механизмы компенсации структуры и функции печени при ее повреждении и их практическое значение // РЖГГК.2008. Т.18. №6.С. 14-22.
7. Гейвандова Н.И, Ягода А.В. Гудзовская
Д. А. Сывороточные фосфолипиды, показатели перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты как дополнительные неинвазивные маркеры активности хронического вирусного гепатита // РЖГГК. 2008. Т.18. №6. С.38-43.
8. Дубинина Е.Е. Роль активных форм кислорода в качестве сигнальных молекул в метаболизме тканей при состояниях окислительного стресса // Вопр. мед. химии. 2001. Т.47. №6. С. 561-580.
9. Корой П.В., Ягода А.В.Регуляторы соединительнотканного гомеостаза и гистологическая картина печени при хроническом вирусном гепатите и циррозе // РЖГГК. 2007. Т.17. №17. С. 35^1.
10. Курбатова Г.Р., Гиниатуллин Р.У., Козель А.И., Игнатьева Е.Н. Способ приготовления суспензии фетальных клеток, предназначенных для трансплантации при хронических заболеваниях печени: Патент РФ на изобретение № 2203072 от
27.04.03 г.
11. Курбатова Г.Р., Гиниатуллин Р.У., Козель А.И., Игнатьева Е.Н. Способ патогенетической терапии хронических заболеваний печени: Патент РФ на изобретение № 2203675 от
10.05.03 г. Курбатова Г.Р., Гиниатуллин Р.У., Козель А.И., Игнатьева Е.Н. Способ патогенетического лечения хронических заболеваний печени в эксперименте // Патент РФ на изобретение № 2204399 от 20.05.03.03 г.
12. Саркисов Д.С., Рубецкой Л.С. Пути восстановления цирротических изменений печени. М.: 1965. С.26-36.
13. Хазанов А.И., Плюснин С.В., Васильев А.П., Павлов А.И.,Пехташев С.Г., Скворцов С.В., Бобров А.Н., Онуфриевич А. Д. Алкогольные и вирусные циррозы печени у стационарных больных (1996-2005 гг.): распространенность и исходы. РЖГГК. 2007, Т17, №2, С.19-28.
14. Сторожаков Г.И., Ивкова А.Н. Патогенетические аспекты фиброгенезапри хронических заболеваниях печени. Клинические перспективы гастроэнтерологии и гепатологии. 2009, №2. С.3-11.
15. Шарафисламов И.Ф., Киршин А.П., Давыдов В.Г. Некроз и апоптоз гепатоцитов и оценка некоторых биохимических параметров крови у больных с механической желтухой опухолевой этиологии. // РЖГГК. 2007. Т.17. С.32-33.
16. Yshiko O., Dain . The properties of hydrogen peroxide production // Biochem. J. 2008. 1. 43. P.51-60.
17. Tsukamoto H, Irie A, Senju S, Hatzopoulos AK, Wo-jnowski L, Nishimura Y.
18. B-Raf-mediated signaling pathway regulates T cell devel-opment.Eur J Immunol. 2008 Jan 28;38(2):518-527
19. Steffen Y, Gruber C, Schewe T, Sies H. Mono-O-methylated flavanols another flavonoids as inhibitors of endothelial NADPH oxidase. Arch Biochem Biophys. 2009 Jan 15;470(2):209-
19.Nov 8.
DYNAMICS OF CONCENTRATION LIPID PEROXIDATION PRODUCTS ACTIVITY AFTER FETAL CELLS INFLUENCE TO LIVER CIRRHOSIS OF RATS (EXPERIMENTAL RESEARCH)
E.M. SHENDER
Libknekhta St. 2, the Ural Institute of Business, Non-State Educational Institution of Higher Professional Education, Chelyabinsk, 454000
We studied experimental liver cirrhosis on laboratory animals
- rats. In all cases with model liver cirrhosis our rats have lipid peroxidation products activation in our investigations. The lipid peroxidation products role is significant as pathogenesis regeneration process disturbance fact. Really fetal tissue transplantation with low laser irradiation can to inhibit oxidative stress and to stimulate rat liver regeneration in model liver cirrhosis also.
Key words: fetal tissue transplantation, model liver cirrhosis, lipid peroxidation products activation.
УДК 611.631
ОСОБЕННОСТИ ДЕГРАДАЦИИ РНК ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЕЙ яичников
О.В. ДОЛЖАНСКИЙ*, Р.Ю. ВАСЮТИН**, Р.Ф. САВКОВА***,
Л.Ф. ЮДИНА, А.С. ДЗАСОХОВ
Полученные авторами данные позволили предположить наличие возможности дифференцировать опухолевый процесс по критерию распада ткани, с тем, чтобы достоверно устанавливать силу и глубину воздействия цитостатического воздействия на опухолевую ткань, в частности на её РНК.
Ключевые слова: гинекология, опухоль яичников
Деградация РНК злокачественной ткани представляет собой процесс разрушения РНК, связанный как с естественными причинами, такими как некроз и распад опухолевой ткани, так и с проявлением внешнего воздействия на опухолевую ткань различных химических и физических факторов, таких как ионизирующее излучение и химиопрепараты различных классов.
С 2007 по 2010 гг. на базе Московского областного онкологического диспансера было проведено исследование деградации РНК злокачественных опухолей яичников.
В исследование было включено 58 пациенток 5 онкологического (гинекологического) отделения с опухолевой патологией яичников. В процессе морфологического исследования удалённых опухолей в 11 случаях был установлен доброкачественный характер опухолевого процесса, в связи с этим 11 пациенток были выведены из исследования.
У всех 47 оставшихся был диагностирован серозный рак (цистаденокарцинома) яичников. Высокодифференцированная форма опухоли зарегистрирована в 23 случаях, умереннодифференцированная - в 12 случаях, в 8 - низкодифференцированная, в
4 случаях - недифференцированная форма цистаденокарциномы. У всех больных диагноз был установлен после стандартного обследования и исключения первичной локализации злокачественной опухоли в молочных железах, желудочно-кишечном тракте и щитовидной железе. У всех больных был выявлен генерализованный злокачественный процесс. Рак яичников 111с стадии был диагностирован у 44 больных, у 3 больных был зарегистрирован рак яичников IV стадии (2 случая - цитологически верифицированный метастатический плеврит, в 1 случае - множественные Mts в печень и лёгкие, по данным КТ).
Материал набирали интраоперационно при помощи ножевой биопсии вне операционной раны, далее производили замораживание материала в жидком кислороде не позднее 30-40 мин. после удаления опухоли яичника. Для исследования использовались ткани центральных и периферических отделов опухоли с отсутствием некротических элементов, геморрагических, муцинозных и других бесструктурных субстратов опухолевой ткани, а также метастазы опухоли различной интраперитонеальной локализации.
Для сопоставления структуры нормальной и опухолевой ткани у одной и той же больной дополнительно производилась резекционная биопсия либо контралатерального яичника при одностороннем характере поражения, либо маточной трубы или
серозного покрова матки при двустороннем поражении яичников, либо любого свободного от опухолевой ткани участка брюшины при генерализованном опухолевом процессе.
Спектрофотометрическое определение концентрации нуклеиновых кислот проводили на двухлучевом спектрофотометре Beckman (Модель 26) при длине волны 260 нм. Чистота препаратов контролировалась по соотношению оптического поглощения (А) при определенных длинах волн: А260/А280. Присутствие эквимолярных количеств 28S и 18S РНК в геле свидетельствовало об отсутствии деградации в выделенных препаратах РНК. Образцы со слабой полосой 28S РНК относительно 18S РНК характеризовались умеренной степенью деградации РНК. Отсутствие 28S РНК и слабая полоса 18S РНК демонстрировало существенную деградацию, а полное отсутствие 28S и 18S РНК свидетельствовало о полной деградации РНК в выделенных препаратах.
Для характеристики материала были использованы следующие показатели: RNA Area и RNA Concentration, которые косвенно указывали на степень деградации РНК в материале. Чем выше были эти показатели, тем меньше был выражен распад РНК в ткани опухоли. Высокие значения (более 100 ng/ l) свидетельствовали о высоком содержании рибосомальной РНК в ткани опухоли, и соответственно о малой степени выраженности дистрофических изменений.
Крайне низкие значения RNA Area и RNA Concentration (менее 10 ng/ l) были проявлением нарушения кровообращения, некроза и дистрофических изменений. В ряде случаев концентрация РНК в тканях была достаточно высока, однако, при структурном анализе было отмечено преобладание фрагментов РНК с низкой степенью седиментации. Для характеристики степени деградации выделяли фрагменты РНК с различной молекулярной массой: 5S РНК, 28 S РНК и 18 S РНК.
Фрагменты 28 S РНК - с максимальной молекулярной массой. При распаде 28 S РНК образуются более мелкие фрагменты
- 18 S РНК и 5S РНК. Таким образом, чем больше в опухоли 28 S РНК и чем меньше 5S РНК, тем меньше выражены дистрофические изменения.
Графическое отражение результатов исследования представлено на фореграммах.
При анализе полученных в ходе исследования данных было отмечено, что высокие значения RNA Area и RNA Concentration могут свидельствовать об отсутствии распада РНК как в здоровой ткани яичника (рис. 1), так и об отсутствии распада в опухоли (рис. 2). При этом очевидно, что дифференцировать по фореграмме злокачественную и доброкачественную ткань невозможно.
Московский онкологический диспансер №1 ОАО «Линде Газ Рус», г. Балашиха
*** Московский областной онкологический диспансер
Рис. 1. Фореграмма 1
В случае 3 (рис. 3) эти показатели имели крайне низкие значения (6.360 и 6.851 ng/ 1) при этом установлено, что содержание 58 РНК в ткани очень велико (1 пик в левой части диаграммы), а также наблюдается деградация фрагментов РНК с более высоким молекулярным весом. Это же видно и на самой элек-трофореграмме, где 28 8 РНК и 18 8 РНК практически не визуализируются. Вместе с тем хорошо определяется полоса свечения 58 РНК (в нижней части фореграммы).
Первоначально полученные авторами данные позволили предположить наличие возможности дифференцировать опухолевый процесс по критерию распада ткани, с тем, чтобы достоверно устанавливать силу и глубину воздействия цитостатического воз-
