CC BY
28
Г.В. ЯРОВЕНКО s Л.Т. ВОЛОВА 2, Б.Н. ЖУКОВ 1, С.Е. КАТОРКИН 1
ДИНАМИКА ИЗМЕНЕНИЙ ЦИТОКИНОВОГО ПРОФИЛЯ В ПРОЦЕССЕ ЛЕЧЕНИЯ У ПАЦИЕНТОВ С ВТОРИЧНОЙ ЛИМФЕДЕМОЙ НИЖНИХ
КОНЕЧНОСТЕЙ
ГОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет Росздрава» ', Институт экспериментальной медицины и биотехнологий ГОУ ВПО «СамГМУ Росздрава» 2,
Российская Федерация
Цель. Оценить изменения цитокинов сыворотки крови у пациентов с вторичной лимфедемой до и после консервативного или оперативного лечения.
Материал и методы. Обследован 81 пациент с вторичной лимфедемой нижних конечностей, 1 группа (40 человек) с 1-2 степенью и 2 группа (41 пациент) с 3-4 степенью заболевания. Исследовали цитоки-ны сыворотки крови у пациентов обеих групп: интерлейкин - 1 (ИЛ-1), интерлейкин - 6 (ИЛ-6), интерлей-кин - 10 (ИЛ-10) и фактор некроза опухоли (ФНО) до и после консервативного или оперативного лечения.
Результаты. У всех пациентов выявлены изменения содержания цитокинов сыворотки крови. Более значимые изменения определялись у пациентов при 3-4 степени вторичной лимфедемы нижних конечностей. После консервативного лечения наблюдалось снижение всех исследованных цитокинов в обеих группах, кроме ИЛ-6. После оперативного лечения зафиксированы волнообразные изменения параметров цитокинов с последующим их снижением к 25 суткам.
Заключение. Количественные изменения цитокинов сыворотки крови у пациентов вторичной лимфедемой нижних конечностей свидетельствовали о снижении иммунитета, особенно при 3-4 степени заболевания, что необходимо учитывать при проведении предоперационной подготовки для определения оптимальных сроков оперативной коррекции у этой группы пациентов.
Ключевые слова: цитокины сыворотки крови, вторичная лимфедема нижних конечностей, консервативное лечение, оперативное лечение
Objectives. To estimate the changes of cytokines of the blood serum in patients with secondary lymphedema of the lower limbs before or after conservative or operative treatment.
Methods. 81 patients with secondary lymphedema of the lower limbs have been examined: the 1st group (40 persons) with the 1-2 degrees of the disease and the 2nd group (41 persons) with the 3-4 degrees. Cytokines of the blood serum of patients of both groups have been tested: IL-1, IL-6, IL-10 and necrosis of tumor's factor before and after conservative and surgical treatment.
Results. All patients' changes of cytokines of the blood serum content have been revealed. More significant changes are defined in the patients with 3-4 degrees of secondary lymphedema of the lower limbs. After conservative treatment decline of all tested cytokines in both groups is observed, except IL-6. After surgical treatment wavy changes of parameters of cytokines with their further decline by 25th day have been fixed.
Conclusions. Quantitative changes of cytokines of the blood serum in patients with secondary lymphedema of the lower extremities were evidence of decline of immunity, especially with the 3-4 degree of disease which is necessary to take into account during pre-operation preparation to determine an optimal period of surgical correction at this group of patients.
Keywords: cytokines of the blood serum, secondary lymphedema of the lower limbs, conservative and operative treatment
Вторичная лимфедема нижних конечностей - хроническое заболевание, которое ведет к выработке антител экспрессирующихся на поверхностной мембране В-лимфоцитов и способствующих синтезу иммуноглобулинов, идентичных поверхностному рецептору лимфоцита, формируя иммунный ответ на патологическое состояние организма [1]. Лимфатические узлы являются составляющей лимфоретикулярной
ткани, участвующей в иммунном ответе организма [2, 3]. Кортикальная зона лимфатического узла ответственна за иммунологическую реакцию выработки гуморальных антител (В-лим-фоцитов). В паракортикальной зоне пролифери-руют Т-лимфоциты (тимусзависимые) в процессе реакции клеточного иммунитета. Мозговые тяжи, так же, как и кортикальная зона, являются местом пролиферации В-лимфоцитов [4, 5].
Перемещение лимфоцитов между тканями, кровяным руслом и лимфатическими узлами позволяет антигенчувствительным клеткам обнаруживать антиген и скапливаться в тех местах, где происходит иммунная реакция, а распространение по организму клеток памяти и их потомков позволяет организовать в лимфоидной системе генерализованный иммунный ответ [1, 6]. Поэтому нами изучены показатели цитоки-нов сыворотки крови (интерлейкин-1, интерлей-кин-6, интерлейкин-10, фактор некроза опухоли) и прослежена динамика их изменений у пациентов вторичной лимфедемой нижних конечностей 1-2 и 3-4 степеней до и после курса проводимого консервативного и оперативного лечения. Определение интерлейкина-1 (ИЛ-1) необходимо при проведении иммуномодулирующей терапии, так как с его помощью можно оценить эффективность лечения и прогнозировать исход воспалительного процесса. Интерлейкин-6 (ИЛ-6) играет ключевую роль в развитии воспаления и иммунного ответа на инфекцию или повреждение тканей. Количественное определение уровня ИЛ-6 имеет большое значение при оценке иммунного статуса организма. Интерлейкин-10 (ИЛ-10) обладает мощным противовоспалительным, иммуномодулирующим, иммуносуп-рессивным эффектом. Его главная роль - это ингибирование избыточного синтеза провоспа-лительных цитокинов. Цитокин альфа-ФНО является важным низкомолекулярным медиатором межклеточных взаимодействий. Количественное определение уровня альфа-ФНО имеет большое значение при оценке иммунного статуса организма. За основу изменения данных показателей взят вариант нормы у здоровых лиц. У практически здоровых людей уровень ФНОа в сыворотке и плазме крови не превышает 6 пг/мл, интерлейкина-1 до 11 пг/мл, интерлейки-на-6 до 10 пг/мл и интерлейкина-10 не более 20 пг/мл.
Цель исследования - оценить изменения цитокинов сыворотки крови у пациентов с вторичной лимфедемой до и после консервативного и оперативного лечения.
Материал и методы
Проведено изучение цитокинового профиля у 81 пациента с вторичной лимфедемой нижних конечностей. При распределении пациентов по полу и возрасту (от 15 до 83 лет) наибольшее число из них (61) составляли женщины в возра-
сте от 41 до 60 лет, что составило 75,3% от всех обследованных лиц работоспособного возраста. Поражение левой нижней конечности выявлено в 45 (55,5%), правой в 32 (39,5%) наблюдениях, а двухстороннее поражение отмечалось у 4 (5,0%) пациентов. Все пациенты разделены на 2 группы: 1 группа - пациенты с вторичной лимфедемой нижних конечностей 1-2 степени и 2 группа - пациенты с вторичной лимфедемой нижних конечностей 3-4 степени. Нами проведен анализ цитокинов сыворотки крови у 57 пациентов из обеих групп после стандартного консервативного (бензопироны, дезагреганты, ан-тигистаминные средства, вещества, регулирующие метаболические процессы, улучшающие реологические свойства крови, нестероидные противовоспалительные средства, вещества для системной энзимотерапии, витаминные препараты, симптоматические средства, АУФОК, физиотерапевтические процедуры, лечебная гимнастика, массаж или пневмомассаж пораженной конечности) и у 46 человек после оперативного лечения (наложения лимфоаденовеноз-ного или лимфоангиоанастомоза анастомоза).
Нами изучены изменения показателей ци-токинов сыворотки крови: интерлейкина-1, ин-терлейкина-6, интерлейкина-10 и фактора некроза опухоли (ФНОа). Для сравнения взяты показатели цитокинов сыворотки крови у здоровых лиц. Метод определения всех используемых нами интерлейкинов основан на твердофазном «сэндвич»-анализе - варианте иммунофермен-тного анализа. Специфическими реагентами являются моноклональные антитела к ИЛ-1 бета, ИЛ-6, ИЛ-10 и ФНО.
Статистическая обработка данных проводилась с использованием программ EXCEL 6, STATISTICA (версия 6,0). Полученные цифровые значения цитокинов представлены в формате «среднее значение (М) ± ошибка среднего (m)», а так же в формате коэффициента корреляции Пирсона, для определения взаимозависимости исследованных параметров цитокинов по формуле
_ r=E(X-X)(Y-Y)/ Vl(X-X)2 E(Y-Y)2, где X и
Y - средние значения переменных X и Y. Коэффициент корреляции принимает значения от -1 до +1. Чем теснее связь, тем больше абсолютная величина коэффициента корреляции. При r>0 говорят о прямой корреляции (с увеличением одной переменной другая также возрастает), при r<0 _ об обратной (с увеличением одной переменной другая уменьшается). Посколь-
пг/мл16
14 12 10 8 6 4 2 0 -2
/ \
/ \ К*
\ / Л
1 \ V
V / а е-' к\ К
J *> иг п
1 2 —3 4 5 6 7 8 9 10 11
-ФНО -ИЛ-1 ИЛ-6 ИЛ-10
варианты соотношения цитокинов в 1 группе
Рис. 1. Диаграмма соотношения цитокинов крови у пациентов вторичной лимфедемой нижних конечностей 1-2 степени
пг/мл 60
50 40 30 20 10 0 -10
2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
■ ФНО
- ♦ - ИЛ-6 -ч»—ИЛ-10
варианты соотношения цитокинов во 2 группе
Рис. 2. Диаграмма соотношения цитокинов крови у
пациентов вторичной лимфедемой нижних
конечностей 3-4 степени
ку гипотеза об отсутствии корреляции равнозначна гипотезе о нулевом наклоне прямой регрессии, то для оценки статистической значимости корреляции использовалась формула:
t=r/Vl-r2 /п-2.
Результаты и обсуждение
Содержание цитокинов сыворотки крови у пациентов вторичной лимфедемой отличалось от нормы. Анализ уровней провоспалительных (ИЛ-1, ФНОа, ИЛ-6) и противоспалительного (ИЛ-10) в сыворотке крови пациентов данной патологией показал, что в зависимости от выраженности клинических проявлений, таких, как: величина отека, явления индуративного целлю-лита, кратность перенесенных рожистых воспалений - цитокиновый профиль изменялся. Особенно характерны изменения для пациентов 1 группы. У большинства обследованных пациентов показатель ФНОа превышал нормативные значения или находился на верхней границе нормы. Показатели цитокинов крови пациентов вторичной лимфедемой 1 -2 степени представлены на диаграммах в сравнении с данными, полученными у пациентов с 3-4 степенью вторич-
ной лимфедемой нижних конечностей (рис. 1, 2). Отмечалось повышение уровня ИЛ-10 более чем в 6 раз у пациентов 2 группы с низкими значениями ФНОа, что характерно для хронического процесса, причем в состоянии ремиссии.
В результате исследований установлено, что количество лейкоцитов и лимфоцитов в крови варьировало в пределах физиологической нормы в обеих группах и составляло 5,97±0,52Х 109/л; 30,19±3,49% и 6,58±0,52 X 109/л; 33,29±1,91% соответственно (таблица 1).
Из полученных результатов обращало на себя внимание повышенное содержание в крови пациентов вторичной лимфедемой нижних конечностей 1-2 степени фактора некроза опухоли (ФНОа). Однако показатели всех прочих исследованных интерлейкинов (ИЛ-1, ИЛ-6 и ИЛ-10) у пациентов вторичной лимфедемой нижних конечностей 3-4 степени выше аналогичных в 2 и более раз, чем у пациентов в 1 группе (р<0,05).
Так, у 40% пациентов 1 группы (32 человека) с умеренно выраженными клиническими проявлениями (преходящим отеком) перед проведением консервативного или оперативного лечения было выявлено значительное, более
Таблица 1
Соотношение показателей периферической крови и цитокинов у пациентов вторичной лимфедемой нижних конечностей 1-2 и 3-4 степени
Исследуемые больные Показатели Больные вторичной лимфедемой нижних конечностей 1-2 степени (n=40) M±m Больные вторичной лимфедемой нижних конечностей 3-4 степени (n=41) M±m
Лейкоциты (109/л) 5,97±0,52 6,58±0,52
Лимфоциты (%) 30,19±3,49 33,29±1,91
СОЭ (мм/ч) 7±1,16 13±2,44
Интерлейкин-1 (пг/мл) 2,11±1,42 4,31±1,1
Интерлейкин-6 (пг/мл) 4,25±0,86 7,53±1,49
Интерлейкин-10 (пг/мл) 4,54±1,17 13,25±3,77
Фактор некроза опухоли (пг/мл) 5,36±1,81 1,12±0,81
чем в 4 раза, повышение спонтанного уровня ФНОа в сыворотке крови по сравнению с пациентами 2 группы (41 человек) и здоровыми людьми (р<0,05). Увеличение содержания цитокина не зависело от соответствующих изменений формулы крови, свидетельствующих о выраженности воспалительной реакции (коэффициенты корреляции с количеством лейкоцитов, лимфоцитов, СОЭ были минимальными), и наблюдалось как у пациентов с выраженным лимфоцитозом, так и у больных с повышенным содержанием нейт-рофильных гранулоцитов в крови. В среднем, уровень ФНОа в сыворотке крови в 1 группе составил 5,36±1,81 пг/мл. В противоположность этому, у большинства пациентов 2 группы уровень ФНОа выявлялся на уровне минимальных значений и был снижен даже по сравнению с группой здоровых доноров (2,5±0,7 пг/мл), составляя в среднем 1,12±0,82 пг/мл. Содержание ФНОа было высоким только у одной пациентки 2 группы, у которой отмечалось повышенное содержание лимфоцитов в крови (перенесшей острое рожистое воспаление эритематозной формы) и достигало 12 пг/мл. В целом, содержание цитокинов в сыворотке крови 2 группы слабо коррелировало с изменениями лейкофор-мулы и СОЭ (г=0,35).
Изменение уровня другого провоспалитель-ного цитокина - ИЛ-1 в сравниваемых группах имело противоположный характер. В 1 группе содержание ИЛ-1 в сыворотке крови составило 2,11±0,43 пг/мл, что не отличалось от показателей здоровых людей (2,71±0,5 пг/мл), и было повышено лишь у одной пациентки, у которой наблюдались явления гипостатической экземы на фоне вторичной лимфедемы левой нижней конечности. Корреляция между изменениями уровней цитокина и лейкоформулы была низкой (г=0,11). Во 2 группе отмечалось статистически значимое повышение уровня ИЛ-1, концентрация которого составляла 4,31±1,1 пг/мл (р<0,05). Максимальные значения показателя в группе превышали таковые у здоровых людей и в группе 1 в 6-8 раз (р<0,05). При этом содержание ИЛ-1, как и в группе 1, не зависело от изменений формулы крови (г=0,01).
Концентрация ИЛ-6, также являющегося провоспалительным цитокином, изменялась подобно ИЛ-1 и зависела от степени клинических проявлений. В группе 1 уровень ИЛ-6 не отличался от показателей здоровых людей (4,25±0,86 пг/мл и 4,3±1,0 пг/мл соответственно), а в группе 2 был статистически значимым, повышен и
составляя 7,53±1,5 пг/мл (р<0,05). При этом одновременный подъем уровней ИЛ-1 и ИЛ-6 отмечался у одних и тех же пациентов и сопровождался частыми рецидивами рожистого воспаления нижних конечностей и наличием трофических расстройств. Необходимо отметить, что была обнаружена умеренная отрицательная (обратная) корреляция между содержанием ИЛ-6 и показателями лейкоформулы в 1 группе (г=-0,38).
Что касается противовоспалительного цитокина ИЛ-10, то при вторичной лимфедеме нижних конечностей, не зависимо от тяжести заболевания, наблюдали статистически значимое, по сравнению со здоровыми людьми, повышение уровня ИЛ-10 в крови (р<0,05). При этом по мере нарастания клинических проявлений содержание ИЛ-10 возрастало. Так, в группе 2 уровень ИЛ-10 составлял 13,25±3,77 пг/мл, превышая средние значения показателя в группе 1 (4,55±1,17 пг/мл) в 3 раза, а относительно группы здоровых доноров (2,2±0,6 пг/мл) - в 6 раз (р<0,001). Максимальные значения уровня ИЛ-10 прослеживались перед проведением лечения у пациентов вторичной лимфедемой 3-4 степени и достигали значений 40-55 пг/мл. Во 2 группе корреляции между содержанием ИЛ-10 и изменениями формулы крови не было выявлено (г=0,05), в 1 группе отмечалась отрицательная корреляция с показателями лимфоцитов периферической крови (г=-0,35).
Учитывая взаимозависимость выработки провоспалительных и противовоспалительных цитокинов, мы провели корреляционный анализ Пирсона между уровнями исследуемых цито-кинов в сравниваемых группах (таблица 2).
В 1 группе пациентов исследуемые цитоки-ны прямо коррелировали между собой в виде возрастания от ИЛ-1 (г=0,13) до ИЛ-6 (г=0,44) и ИЛ-10 (г=0,48), причем первый влечет за собой возрастание последующих, что подтверждает их взаимосвязь, более тесную между ИЛ-6 и ИЛ-10. И только между ИЛ-6 и ФНОа получен отрицательный результат (г=-0,28), т.е. обратная связь (с увеличением одной переменной другая уменьшается). Для 2 группы больных корреляционный анализ показал очень слабую обратную связь для ФНОа (г=-0,09), ИЛ-6 (г=-0,16) и ИЛ-10 (г=-0,17). Наиболее взаимосвязаны изменения между ИЛ-1 и ИЛ-6, коэффициент корреляции между ними (г=0,41), что подтверждает их более тесное взаимодействие у пациентов 2 группы. При проведении корреляционного ана-
Таблица 2
Корреляционный анализ Пирсона показателей цитокинов сыворотки крови в исследуемых группах (п=40, для каждого интерлейкина)
Показатели ФНОа 1 группа 2 группа ИЛ-1 1 группа 2 группа ИЛ-6 1 группа 2 группа ИЛ-10 1 группа 2 группа
ФНОа (1гр.) - 0,13 -0,28 0,05
ФНОа (2гр.) 0,28 - -0,09 0,04 -0,17
ИЛ-1 (1 гр.) 0,13 - 0,44 0,26
ИЛ-1 (2 гр.) -0,09 -0,49 - 0,41 0,32
ИЛ-6 (1 гр.) -0,28 0,44 - 0,48
ИЛ-6 (2 гр.) 0,04 0,41 -0,24 - -0,16
ИЛ-10 (1гр.) 0,05 0,26 0,48 -
ИЛ-10 (2гр.) -0,17 0,32 -0,16 -0,31 -
лиза Пирсона между цитокинами обеих групп получены данные о положительном коэффициенте только для ФНОа (г=0,28), а для остальных цитокинов результат отрицательный, больше ИЛ-1 (г=-0,49), менее выражен ИЛ-10 (г=-0,31) и минимальное значение имеет ИЛ-6 (г=-0,24), что говорит о степени выраженности взаимосвязи последних. То есть, только ИЛ-1 для обеих групп является критерием эффективности проводимого лечения. Патологический процесс в лимфатической системе имеет тенденцию к переходу в хроническое состояние, а изменения уровней цитокинов опережают изменения других клинико-лабораторных показателей и являются предикторами прогрессирования заболевания - вторичной лимфедемы нижних конечностей.
Исследование цитокинов сыворотки крови нами было осуществлено после курса стандартного консервативного лечения у 57 пациентов, 26 из 1 группы и 31 из 2 группы (таблица 3).
После консервативного лечения у пациентов обеих групп наступали однонаправленные изменения, характеризующиеся уменьшением
показателей ФНОа с 8,0±2,82 пг/мл до 5,87±2,06 пг/мл (р<0,001) у пациентов 1 группы и с 2,0±1,41 пг/мл до 0,03±0,02 пг/мл - во 2 группе соответственно, увеличением показателей ИЛ-1, ИЛ-6 и уменьшением ИЛ-10. Особенно значительное изменение выявлено для интерлейкина-10, так как его значение снизилось у пациентов 1 группы с 3,16±1,58 пг/мл до 1,0±1,43 пг/мл (р <0,001), а у пациентов 2 группы с 17,66±6,48 пг/мл до 6,66±4,36 пг/мл. Менее контрастно повышались данные показателей ИЛ-1 и ИЛ-6, причем для ИЛ-6 характерны разнонаправленные изменения в группах, с 3,36±0,69 пг/мл до 3,2±1,41 пг/мл в первой (изменения не достоверны) и с 6,13±2,52 пг/мл до 7,5±3,14 пг/мл (р<0,05) во второй соответственно. У пациентов с вторичной лимфеде-мой 1-2 степени возникали достоверные различия ИЛ-1 с 1,33±0,47 пг/мл до 2,87±1,01 пг/мл (р<0,005). У пациентов вторичной лимфедемой нижних конечностей 3-4 степени подобные изменения были так же достоверны и соответствовали от 2,83±1,27 до 3,33± 1,15 пг/мл (р<0,005).
В связи с тем, что вторичная лимфедема
Таблица 3
Изменение цитокинов крови у пациентов вторичной лимфедемой нижних конечностей до и после консервативного лечения
Группы больных Вторичной лимфедемой 1- 2 степени Вторичной лимфедемой 3-4 степени
(п = 26) (п =31)
До лечения После лечения До лечения После лечения
Показатели М т М т М т М т
Интерлейкин-1 1,33 1,47 2,87** 1,27 2,83 1,0 3,33** 1,15
Интерлекин-6 3,36 0,69 3,2 1,41 6,13 2,52 7,5* 3,14
Интерлейкин-10 3,16 2,68 1,01*** 2,43 17,6 6,48 6,66 4,36
Фактор некроза опухоли 8,0 2,82 5,87*** 2,06 2,0 1,41 0,03 0,02
* - Достоверность результатов по сравнению с исходными показателями у пациентов, при р<0,05;
** - Достоверные различия показателей цитокинов по сравнению с их значениями у пациентов до лечении,
при р<0,005;
*** - Достоверные данные интерлейкина-10 и ФНОа по сравнению с их величиной у пациентов до консервативного лечения, при р<0,001.
пг/мл 12
108 6 4 2 0
до лечения
после лечения
■ фно и ил-1 а ил-6 □ ил-10
пг/мл
Рис. 3. Диаграмма изменения цитокинов сыворотки крови у пациентки С. 21 год, история болезни №№614/99. Диагноз: вторичная лимфедема левой нижней конечности II степени
до лечения
в фно и ил-1 о ил-6 а ил-10
после лечения
Рис. 4. Диаграмма изменения цитокинов сыворотки крови у пациентки К. 49 лет, история болезни №№12470/1128. Диагноз: вторичная лимфедема левой нижней конечности III степени
2
2
развивалась у большинства обследованных нами пациентов после рожистого воспаления, то высокие показатели ФНОа для 1 группы обоснованы. Происходит хронизация процесса с длительной ремиссией или рецидивами рожистого воспаления. В момент обострения рожистого воспаления ФНОа вновь повышается на непродолжительный период времени (5-7 дней), а в период ремиссии его значения минимальны или равны 0. При понижении ФНОа всегда увеличивается показатель ИЛ-10 (противовоспалительного цитокина), больше в первой группе, чем во второй. Высокие величины этого цитокина присутствовуют в сыворотке крови длительный период, ингибируя избыточный синтез провос-палительных цитокинов, так как он обладает мощным противовоспалительным, иммуномоду-лирующим, иммуносупрессивным эффектом, а так же угнетают продукцию макрофагальных ангиогенных факторов. Повышение значений ИЛ-6 для обеих групп так же обосновано, так как он играет ключевую роль в развитии воспаления и иммунного ответа на инфекцию или повреждение тканей. Этот цитокин регулирует процесс созревания антителопродуцирующих клеток из В-лимфоцитов и саму продукцию иммуноглобулинов. Анализируя изменения ИЛ-1, который контролирует уровни провоспалитель-ных цитокинов и активирует ФНОа и сам себя, можно оценить роль проводимого лечения, что в нашем случае, при увеличении его значений характеризует положительную роль консервативного лечения, а его исследование может прогнозировать благоприятный исход воспалительного процесса. О взаимодействии исследованных цитокинов сыворотки крови можно судить об активности иммунного процесса в ответ на любой фактор, воздействующий на пораженную конечность и проанализировать ранние резуль-
таты лечения, но не отдаленные (рис. 3, 4). Проводя корреляционный анализ Пирсона между исследуемыми цитокинами у пациентов с вторичной лимфедемой нижних конечностей 1 -2 степени до лечения выявлена тесная взаимосвязь ФНОа и ИЛ-1 (г=0,97), ИЛ-6 (г=0,99) и ИЛ-10 (г=0,7), однако после лечения аналогичные соотношения равны (г=0,04, г=0,106 и г=0,132) соответственно. Для пациентов вторичной лим-федемой нижних конечностей 3-4 степени корреляционный анализ Пирсона выявил тесную прямую взаимосвязь между ФНО а и ИЛ-1 (г=0,58), ИЛ-6 (г=0,96) и обратную взаимосвязь между ИЛ-10 (г=-0,47) до лечения. После консервативного лечения получены следующие обратные соотношения между ФНОа и ИЛ-1 (г=- 0,94), ИЛ-6 (г=- 0,36) и ИЛ-10 (г=- 0,5).
Нами проведена оценка показателей периферической крови пациентов вторичной лимфе-демой нижних конечностей так же после оперативного лечения. Было установлено, что количество лейкоцитов составляло 5,97±0,52 X 109/л, лимфоцитов 30,19±3,49% для пациентов 1 группы. У пациентов 2 группы данные показатели регистрировались тоже в пределах нормы и составляли 6,71±0,54 X 109/л и 33,29±1,91% соответственно. Показатели цитокинов сыворотки крови у пациентов обеих групп в раннем послеоперационном периоде изменялись волнообразно (рис. 5, 6). Исходные значения у пациентов 1 группы ФНОа соответствовали 7 пг/мл. В дальнейшем прослеживалась тенденция к уменьшению данного показателя к 10 суткам после операции, с умеренным ростом до 3 пг/мл к 20 суткам и последующим аналогичным спадом. Для всех исследованных значений цитокинов сыворотки крови характерны волнообразные изменения, причем разнонаправленные. При уменьшении значений ФНОа к 14 суткам происходит
пг/мл|2
■фно ■ил-1 ил-6 ил-10
дни после операции Рис. 5. Динамика изменений показателей цитокинов сыворотки крови в раннем послеоперационном периоде у пациентов 1 группы
увеличение интерлейкинов 1, 6 и 10. Однако в последующем изменения ФНОа и ИЛ-10 становятся однонаправленными, причем величина последнего на 20 сутки достигает его значений на 8 сутки после операции. Для пациентов 2 группы так же характерны волнообразные изменения всех интерлейкинов кроме ФНОа, который определялся на значениях практически равных 0, что подтверждает сниженную реактивность организма. Увеличение ИЛ-1 для этой группы пациентов только до 5,0 пг/мл говорит об умеренной эффективности лечения (у пациентов 1 группы ИЛ-1 вырос до 6,5 пг/мл).
Заключение
Взаимодействуя с воспалительным или аутоиммунным агентом, у пациентов в 1 группе ФНОа способствует активации ИЛ-1, ИЛ-6 и ИЛ-10. Выявлена очень тесная взаимосвязь (практически равная 1), причем после лечения она резко ослабевает. Для пациентов 2 группы эта взаимосвязь менее выражена до лечения, кроме корреляции между ФНОа и ИЛ-6. В то же время выявлена тесная обратная взаимосвязь после лечения между ФНОа и ИЛ-1 (практически равная -1). Анализируя полученные данные можно сделать заключение о напряженности иммунитета у пациентов в 1 группе изначально и его активации у пациентов 2 группы после лечения. Для получения максимального положительного результата у пациентов с данной патологией оперативное лечение целесооб-
10 ■ 8 6 ■
4 2 0
■ фно • ил-1 - ♦ - ил-6 ■ил-10
до
14
дни после операции
Рис. 6. Динамика изменений показателей цитокинов крови в послеоперационном периоде у пациентов 2 группы
разно проводить в период стабилизации показателей цитокинового профиля.
ЛИТЕРАТУРА
1. Roitt, I. M. Основы иммунологии / I. M. Roitt. - М.: Мир, 1991. - 327 с.
2. Pecking, A. P. Tests and imaging of the lymphatic system / A. P. Pecking, J. P. Desprez-Curely, R. V Cluzan // Rev. Med. Interne. - 2002. - Vol. 23. - Suppl. 3. -P. 391-397.
3. Barrett, T. Imaging of the lymphatic system: new horizons / T. Barrett, P. L. Choyke, H. Kobayashi // Contrast Media Mol. Imaging. - 2006. - N 1 (6). - P. 230245.
4. Бобова, Л. П. Гистофизиология крови и органов кроветворения и иммуногенеза / Л. П. Бобова, С. Л. Кузнецов, В. П. Сапрыкин. - М.: Изд-во «Новая волна», 2003. - 156 c.
5. Takahashi, K. SDF-1-induced adhesion of monocytes to vascular endothelium is modulated by azelnidipine via protein kinase C inhibition / K. Takahashi, K. Shimokado, M. Yoshida // Eur. J. Pharmacol. - 2006. -Vol. 552, N 1-3. - P. 162-169.
6. Tammela, T. Molecular lymphangiogenesis: New players / T. Tammela; T. V. Petrova, K. Alitalo // Trends Cell Biol. - 2005. - Vol. 15. - P. 434-441.
Адрес для корреспонденции
443079, Российская Федерация, г. Самара, пр. Карла Маркса, 165 Б, клиника госпитальной хирургии, тел. раб: +846 276-77-89, e-mail: [email protected], Яровенко Г.В.
Поступила 27.12.2010 г.
