CC BY
17УДК:616.36:611.018.1:575.1:577 DOI: 10.37279/2224-6444-2021-11-2-40-46
ДИНАМИКА ИЗМЕНЕНИЙ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ОКИСЛИТЕЛЬНОГО ГОМЕОСТАЗА В ПРОЦЕССЕ РЕПЕРФУЗИИ ПЕЧЕНИ КРЫС ПОСЛЕ ВАСКУЛЯРНОЙ ЭКСКЛЮЗИИ
Попов К. А., Денисова Я. Е., Столярова А. Н., Азимов Э. А., Есауленко Е. Е., Быков М. И., Балачевская О. В., Басов А. А.
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Кубанский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО КубГМУ Минздрава России), 350063, ул. Митрофана Седина, 4, Краснодар, Россия
Для корреспонденции: Попов Константин Андреевич, кандидат медицинских наук, доцент кафедры фундаментальной и клинической биохимии ФГБОУ ВО КубГМУ Минздрава России, e-mail: naftalin444@ mail.ru
For correspondence: Konstantin A. Popov, PhD, Associate professor of the department of fundamental and clinical biochemistry, Kuban state medical university, e-mail: [email protected]
Information about authors:
Popov K. A., http://orcid.org/0000-0002-3649-1361 Denisova Y. E., http://orcid.org/0000-0003-1242-6909 Stolyarova A. N., http://orcid.org/0000-0002-5817-130X Azimov E. A., http://orcid.org/0000-0002-3884-2436 Esaulenko E. E., https://orcid.org/0000-0002-9386-8049 Bykov M. I., http://orcid.org/0000-0001-6806-1414 Balachevskaya O. V., http://orcid.org/0000-0002-5292-8383 Basov A. A., http://orcid.org/0000-0002-2262-4549
РЕЗЮМЕ
Изменения состояния системы антиоксидантной защиты и интенсификация свободнорадикальных процессов - ведущий патобиохимический механизм развития реперфузионных повреждений клеток. Цель работы - определить особенности изменений маркеров окислительного стресса в разные сроки развития острого реперфузионного периода после общей васкулярной эксклюзии печени крыс. Исследование выполнено на 100 белых нелинейных половозрелых самцах крыс массой 200-250 грамм. Животным опытных групп выполняли моделирование 20-ти минутной сосудистой изоляции печени. Кровь в объеме 2-3 мл забирали из нижней полой вены через 5, 15, 30, 60, 120, 180 минут, 8 часов и сутки после восстановления кровотока.
Результатыисследованияпоказали,чтона раннихсроках реперфузионного периода (5-60 минут)наблюдаются изменения обусловленными цитолизом гепатоцитов в период ишемии органа и вымыванием клеточного содержимого в кровь. Уровень радикальной сорбции ABTS плазмой крови кратковременно увеличивался на 20% к 5-й минуте периода реперфузии, в это же период отмечалось увеличение активности глутатионпероксидазы в 2,5 раза. Общая антиоксидантная активность, определенная железо-восстанавливающим методом, была увеличенной в 2 раза в период 15-30-ти минут периода после восстановления кровотока. Основные проявления реперфузионных повреждений печени развились спустя 60 минут после восстановления кровотока и характеризовались резким снижением общей АОА в 1,5-2 раза и концентрации восстановленного глутатиона на 20%. Система антиоксидантной защиты плазмы крови первой реагировала на распространение патологического процесса на системном уровне и ее изменения сохранялись спустя сутки после ишемии печени. 20-ти минутная васкулярная эксклюзия печени сопровождалась и изменениями антиоксидантного баланса в эритроцитарной взвеси, но данные изменения нормализовались спустя сутки после восстановления кровотока. Полученные данные позволяют разграничить вклад ишемических и реперфузионных повреждений в развитие окислительных нарушений, что важно с позиции оценки возможностей антиоксидантной терапии.
Ключевые слова: ишемия печени, реперфузия, антиоксидантная система, окислительный стресс.
DYNAMICS OF CHANGES IN OXIDATIVE HOMEOSTASIS PARAMETERS DURING RAT LIVER REPERFUSION AFTER VASCULAR EXCLUSION
Popov K. A., Denisova Ya. E., Stolyarova A. N., Azimov E. A., Esaulenko Е. Е., Bykov M. I., Balachevskaya O. V., Basov А. А.
'Kuban state medical university, Krasnodar, Russia
SUMMARY
Changes in the state of the antioxidant protection system and the intensification of free radical processes are the leading pathobiochemical mechanism for the development of reperfusion damage to cells. The aim of this paper is to determine the features of changes in markers of oxidative stress at different periods of development of the acute reperfusion after total vascular exclusion of rat liver. The study was carried out on 100 white nonlinear sexually mature male rats weighing of 200-250 grams. The animals of the experimental groups were simulated with a 20-minute vas-
cular isolation of the liver. Blood in a volume of 2-3 ml was taken from the inferior vena cava for 5, 15, 30, 60, 120, 180 minutes, 8 hours and a day after the restoration of blood flow. The results of the study showed that in the early stages of the reperfusion period (5-60 minutes), changes are observed due to cytolysis of hepatocytes during the period of organ ischemia and leaching of cell contents into the blood. The level of radical sorption of ABTS by blood plasma briefly increased by 20% by the 5th minute of the reperfusion period; at the same period, an increase in glutathione peroxidase activity by 2.5 times was noted. The total antioxidant activity, determined by the iron-reducing method, was increased by 2 times within the period of 15-30 minutes after the restoration of blood flow. The main manifestations of reperfusion damage to the liver developed in 60 minutes after the restoration of blood flow and were characterized by a sharp decrease in total AOA by 1.5-2 times and the concentration of reduced glutathione by 20%. The system of antioxidant protection of blood plasma was the first to react to the spread of the pathological process at the systemic level and its changes persisted one day after liver ischemia. A 20-minute vascular exclusion of the liver was accompanied by changes in the antioxidant balance in the erythrocyte suspension, but these changes returned to normal a day after the restoration of blood flow.
The data obtained make it possible to distinguish between the contribution of ischemic and reperfusion injuries to the development of oxidative disorders, which is important from the standpoint of assessing the possibilities of antioxidant therapy.
Key words: liver ischemia, reperfusion, antioxidant system, oxidative stress.
Изменения состояния системы антиокси-дантной защиты и интенсификация свободно-радикальных процессов - ведущий патобиохи-мический механизм развития реперфузионных повреждений клеток. Если ткань успешно переживает ишемический период, она встречается со второй волной повреждающих факторов, развивающихся на фоне относительной гипероксии в период реоксигенации [1; 2]. Развитие окислительного стресса начинается еще в период сосудистой изоляции, так как в ткани всегда остается небольшое количество кислорода, однако основные проявления этого типового патологического процесса следуют за восстановление кровотока, именно этот период считается наиболее опасным [3; 4]. За изменениями на местном уровне следует распространение метаболических нарушений, в том числе окислительных нарушений и эндогенной интоксикации, на местном уровне. На данном этапе поражение одного органа, например, печени, может перейти в форму полиорганной недостаточности [5; 6]. Печень играет исключительную роль во всех видах обмена веществ, в том числе в интеграции разных путей метаболизма в целостном организме. Ишемиче-ски-реперфузионные поражения печени встречаются при сердечно-сосудистых заболеваниях, шоке, превентивном выключении кровотока при хирургических вмешательствах, трансплантациях органа [7; 8]. Нами ранее была показана потенциальная возможность раздельной оценки вклада ишемического и реперфузионного составляющего патологического процесса в поражение печени путем определения динамики изменений маркеров цитолитического синдрома [9]. Опираясь на эти результаты в данной статье аналогичным образом было проведено исследование изменений маркеров окислительного стресса в процессе реваскуляризации.
Цель работы - определить особенности изменений маркеров окислительного стресса в
разные сроки развития острого реперфузионного периода после общей васкулярной эксклюзии печени крыс.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Исследование выполнено с участием 100 белых нелинейных половозрелых самцов крыс массой 200-250 грамм на момент эксперимента. В качестве контрольной группы использовали лабораторных животных (n=20), содержавшихся в аналогичных условиях, но без моделирования какого-либо патологического процесса. Остальным животным опытных групп выполняли моделирование сосудистой изоляции печени путем пережатия аналога гепатодуоденальной связки сосудистым зажимом типа Бульдог на 20 минут. После выжидания 20-ти минут ишемического периода сосудистый зажим снимали. С этого момента засекали время реперфузионного периода в процессе которого осуществляли забор крови для лабораторных исследований изменений состояния окислительного гомеостаза на системном уровне. Кровь в объеме 2-3 мл забирали из нижней полой вены через 5, 15, 30, 60, 120, 180 минут, 8 часов и сутки после восстановления кровотока. Таким образом было сформированы 8 опытных групп по 10 особей лабораторных животных. Все болезненные манипуляции выполняли под общей анестезией использованием Золетил 100 («Virbac», France), заранее вводимого внутримышечно в область бедра в дозировке 10 мг/кг. Целесообразность и соответствие этическим принципам были рассмотрены на заседании независимого этического комитета ФГБОУ ВО КубГМУ Минздрава России, на котором было одобрено проведение запланированного исследования (протокол № 51 от 23.05.2017 г.).
В крови лабораторных животных определяли ряд показателей прооксидантно-антиоксидант-ной системы. В эритроцитах были определены содержание ТБК-реактивных продуктов (про-
дукты перекисного окисления липидов, основной среди который малоновый диальдегид), активность ферментов антиоксидантной защиты - ка-талазы и глутатионпероксидазы (ГПО), а также концентрация восстановленной формы трипеп-тида глутатиона [10]. В плазме крови были определены изменения содержания тиоловых групп, а также общей антиоксидантной активности (АОА). Общая АОА была определена методом оценки радикальной сорбции ABTS и методом оценки железо-восстанавливающей способности (FRAP) [11]. Содержание тиоловых групп и глутатиона определяли с помощью реактива Эллма-на (5,5'-дитиобис-(2-нитробензойная кислота)). Каталазную активность определяли по скорости разложения перекиси водорода гемолизатом эритроцитов, которую регистрировали фотометрически при 260 нм. Активность ГПО определяли по скорости расходования глутатиона на окисление гидроперекиси трет-бутила [12].
Статистический анализ результатов исследования выполнен с помощью программы Stat Plus for Windows (AnalystSoft Inc.). Данные в статье были представлены в виде медианы (Ме) и квартилей (Q1 и Q3), сравнение отличий между показателями групп проводили с использованием критерия Краскела-Уоллиса, так как группы были независимыми и в сравнении участвовало более 2-х групп. При обнаружении статистически значимых отличий выполняли дальнейшие попарные сравнения с помощью критерия Манна-Уит-ни. Различия между показателями групп считали статистически значимыми при уровне р<0,05.
РЕЗУЛЬТАТЫ
В результате проведенных исследований был определен нелинейных характер изменений маркеров окислительного стресса и состояния системы антиоксидантной защиты на фоне ре-перфузии после ишемии печени крыс в течение 20 минут. Некоторые показатели были резко увеличены в крови сразу после ишемии, некоторые увеличивались чуть позже, но затем снижались, другие параметры характеризовались сниженными значениями относительно контрольной группы. Низкие значения были характерны для концентрации восстановленной формы глутатиона в эритроцитарной взвеси (таблица 1). Однако заметное снижение данного параметра на 13-20% отмечалось только спустя 120 минут после начала периода реоксигенации органа и сохранялось как минимум до 8 часов. Через сутки после начала реперфузии уровень глута-тиона в крови животных возвращался к нормальным значениям. Аналогичная тенденция к снижению наблюдалась для содержания общих тиоловых групп в плазме крови (таблица 1). Данный параметр был снижен на 19% уже через 5 минут после снятия зажима с аналога гепатодуоденальной связки крыс, а через 15 минут достигал минимальных значений - на 42% ниже контрольного уровня. Кроме того, уровень тиоловых групп плазмы крови оставался ниже контрольных значений на протяжение всего дальнейшего исследования, в том числе через сутки после начала реперфузии.
Таблица 1
Изменение показателей тиолового звена системы антиоксидантной защиты эритроцитов и плазмы крови в разные сроки реперфузии после 20-ти минутной ишемии печени крыс (Ме(р0,25/р0,75))
Исследуемые группы / время реперфузии Исследуемые показатели
Глутатион, мкмоль/мл ГПО, ммоль/лхмин Общие SH-группы, е.о.п.*100/г белка
Контроль 3,0 (2,8/3,2) 1,7 (1,5/1,8) 0,36 (0,35/0,40)
5 мин 3,2 (2,8/3,2) 4,2 (3,6/4,4)* 0,29 (0,27/0,33)*
15 мин 2,3 (2,0/2,4)*л 1,2 (1,1/1,4)*л 0,21 (0,20/0,24)*л
30 мин 3,0 (2,7/3,0)л 1,8 (1,6/2,0)л 0,30 (0,28/0,33)*л
60 мин 3,2 (2,8/3,3) 1,8 (1,4/1,9) 0,31 (0,29/0,34)*
120 мин 2,6 (2,3/2,7)*л 1,7 (1,5/1,8) 0,25 (0,23/0,29)*л
180 мин 2,6 (2,3/2,7)* 2,1 (1,9/2,3)*л 0,28 (0,26/0,31)*
8 ч 2,4 (2,2/2,4)* 1,7 (1,5/1,9)л 0,26 (0,24/0,29)*
сутки 3,2 (2,9/3,3)л 1,6 (1,5/1,8) 0,30 (0,28/0,34)*
Примечание: * - статистически значимые отличия (р<0,05) от соответствующего показателя контрольной группы; А - статистически значимые отличия (р<0,05) от показателя предыдущей группы.
Активность ГПО была резко увеличена сразу после начала периода реперфузии - в 2,5 раза относительно контрольных значений соответствующего показателя (таблица 1). Однако уже к 15-й минуте периода реоксигенации уровень активности рассматриваемого фермента снижался, достигая значений даже ниже контрольного уровня на 29%. В дальнейшем активность ГПО поддерживалась в пределах нормальных значений, только в период 180-ти минут после снятия сосудистого зажима с аналога гепатодуоденальной связки фер-
ментативная активность вновь была увеличена на 24%. Каталазная активность эритроцитарной взвеси имела устойчивую тенденцию к увеличению на 43-60% на протяжении реперфузионного периода (таблица 2). Только в период 15-ти и 120-ти минутной реваскуляризации печени отмечалось кратковременное снижение активности данного фермента, а также через сутки после выполнения эксперимента активность каталазы возвращалась к уровню, соответствующему значению показателя группы интактных животных.
Таблица 2
Изменение показателей системы антиоксидантной защиты эритроцитов в разные сроки реперфузии после 20-ти минутной ишемии печени крыс (Ме(р0,25/р0,75))
Исследуемые группы / время реперфузии Исследуемые показатели
ОАОА (ABTS), % инг ОАОА (FRAP), мМ вит С КАТ, моль/лхмин
Контроль 24,5 (22,7/25,6) 0,76 (0,70/0,82) 16,2 (15,4/18,9)
5 мин 29,4 (27,8/30,8)* 0,85 (0,79/0,90) 23,1 (22,0/24,8)*
15 мин 20,8 (19,6/22,0)*л 1,50 (1,32/1,60)*л 19,2 (18,0/21,5)л
30 мин 20,0 (19,2/21,4)* 1,50 (1,33/1,60)* 24,9 (22,5/26,0)*л
60 мин 20,4 (19,3/21,5)* 0,63 (0,58/0,73)л 25,0 (23,9/26,0)*
120 мин 22,3 (20,4/23,0)* 0,50 (0,45/0,60)* 19,6 (17,3/22,1)л
180 мин 11,6 (10,5/12,7)*л 0,49 (0,45/0,56)* 23,0 (21,3/24,7)*
8 ч 11,7 (10,4/13,0)* 0,45 (0,40/0,52)* 25,9 (23,9/27,5)*
сутки 11,3 (10,3/13,0)* 0,65 (0,60/0,72)* 18,2 (16,0/19,2)л
Примечание: * - статистически значимые отличия (р<0,05) от соответствующего показателя контрольной группы; А - статистически значимые отличия (р<0,05) от показателя предыдущей группы.
Характер изменений общей АОА, определенной разными методами, имел значительные отличия (таблица 2). Степень радикальной сорбции ABTS плазмы крови кратковременно увеличивалась на 20% к 5-й минуте периода реперфузии, а затем прогрессирующе снижалась. Наиболее значительные изменения данного показателя были определены на 15-й и 180-й минутах после восстановления кровотока в печени крыс. На 180-й минуте реперфузии уровень радикальной сорбции плазмы крови был снижен в 2,1 раза относительно контрольных цифр и не увеличивался даже спустя сутки после начала эксперимента. Общая АОА, определенная железо-вос-станавливающим методом, была увеличенной в 2,0 раза в период 15-30-ти минут периода после восстановления кровотока в ткани печени после 20-ти минутной ишемии. К 60-й минуте данный параметр снижался до уровня контрольных значений, а затем и еще ниже. Минимальные значения общей АОА (FRAP) были получены спустя 8 часов реперфузии, но и в данном случае показатель был ниже контроля всего на 41%, а спустя сутки после моделирования ишемического по-
ражения печени отмечалось частичное восстановление анализируемого показателя, который достигал значений ниже контроля всего на 14%.
ОБСУЖДЕНИЕ
В изменении изученных показателей окислительного метаболизма прослеживается влияние цитолиза гепатоцитов в период ишемии, что отражается в кратковременном увеличении общей антиоксидантной активности и активности ГПО на начальном этапе реперфузии. При этом активность ГПО, достигая пиковых значений на 5-й минуте после восстановления кровотока, быстро возвращается к нормальным значениям, что характерно и для другого фермента системы глутатиона - глутатион^-трансферазы плазмы крови. Отсутствие существенных изменений концентрации восстановленной формы глута-тиона в первые 60 минут также подтверждает небольшую вовлеченность данного звена эри-троцитарной взвеси в регуляцию окислительного метаболизма в период ишемии печени. Как было показано ранее с 60-й минуты начинается активное увеличение активности аминотрансфе-
2021, т. 11, № 2
раз и ЛДГ в плазме крови, что вероятнее всего связано с усилением реперфузионных повреждений органа [9]. С этого же времени определяется сниженный уровень содержания глутатио-на в эритроцитах, что указывает на активную вовлеченность данной системы клеток крови в поддержание редокс гомеостаза в периоде восстановления кровотока. Сниженный уровень тиоловых групп плазмы крови на протяжении всего эксперимента обусловлен высокой их чувствительностью к окислению и первоочередной вовлеченностью метаболических систем плазмы крови в распространение патологического процесса на системном уровне. Различный характер реагирования общей АОА, обусловленной радикальной сорбцией или железо-восстанав-ливающей способностью, указывает более длительную циркуляцию в крови веществ, предположительно вымываемых из поврежденной ткани печени крыс, потенциально обладающих восстанавливающей активность, однако не способных обеспечить адекватную защиту от распространения свободнорадикальных процессов. Резкое снижение данных параметров на 60-й и 120-й минуте также в некоторой степени обозначает границу дополнительного усиления репер-фузионного повреждения печени. Наличие изменений антиоксидантного статуса через сутки после моделирования ишемического поражения органа (сниженные общая АОА и содержание тиоловых групп плазмы крови) указывают на значительную выраженность патологического процесса, не способного за сутки полностью компенсироваться, а также на то, что повышенные значения маркеров цитолиза гепатоцитов [9] не являются просто остаточным явлением, а свидетельствуют о продолжении реперфузи-онных нарушений и сохранении опасности развития осложнений, в частности печеночной или полиорганной недостаточности. Сравнительно невысокий риск таких осложнений в условиях 20-ти минутной сосудистой изоляции печени крыс подтверждается быстрым (через сутки) восстановлением всех изученных параметров системы антиоксидантной защиты эритроцитов.
ВЫВОДЫ
Результаты исследования показали, что на ранних сроках реперфузионного периода (5-60 минут) наблюдаются изменения обусловленными цитолизом гепатоцитов в период ишемии органа и вымыванием клеточного содержимого в кровь. Основные проявления реперфузион-ных повреждений печени развиваются спустя 60 минут после восстановления кровотока и характеризуются резким снижением общей АОА и концентрации восстановленного глутатиона.
Система антиоксидантной защиты плазмы крови первой реагирует на распространение патологического процесса на системном уровне и ее изменения сохраняются спустя сутки после ишемии печени. 20-ти минутная васкулярная эксклюзия печени сопровождается и изменениями антиоксидантного баланса в эритроци-тарной взвеси, но данные изменения компенсируются спустя сутки после восстановления кровотока.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Conflict of interest. The authors have no conflict of interests to declare.
Финансирование. Исследование выполнено в рамках государственного задания Министерства здравоохранения Российской Федерации № 121022600268-0.
Funding. The study was carried out as part of the state assignment of the Ministry of Health of the Russian Federation № 121022600268-0.
ЛИТЕРАТУРА
1. Basov A. A., Elkina A. A., Dzhimak S. S., Bikov I. M., Popov K. A., Kozin S. V., Moiseev A. V. Changes in prooxidant-antioxidant system indices in the blood and brain of rats with modelled acute hypoxia which consumed a deuterium-depleted drinking diet. Biology Bulletin. 2019;46(6):531-535. doi:10.1134/S1062359019060049.
2. Dzhimak S. S., Basov A. A., Volchenko N. N., Samkov A. A., Baryshev M. G., Fedulova L. V. Changes in the functional activity of mitochondria isolated from the liver of rat that passed the preadaptation to ultra-low deuterium concentration. Doklady Biochemistry and Biophysics. 2017;476(1):323-325. doi:10.1134/ S1607672917050088.
3. Звягина В. И., Бельских Э. С., Урясьев О. М., Медведев Д. В., Киселева В. А., Твердова Л. В. Влияние карнитина хлорида на митохондрии сердца крыс при моделировании гиперго-моцистеинемии. Медицинский вестник Северного Кавказа. 2018;13(1-1):78-81. doi:10.14300/ mnnc.2018.13022.
4. Saidi R. F., Kenari S. K. Liver ischemia/ reperfusion injury: an overview. J. Invest. Surg. 2014;27(6):366-379. doi:10.3109/08941939.2014 .932473.
5. Мелконян К. И., Бирюкова А. О., Улитина Н. Н., Русинова Т. В., Юцкевич Я. А., Литвинова М. Г., Быков И. М., Карташевская М. И. Компоненты внеклеточного матрикса в восстановлении поврежденных тканей: биохимические взаимодействия и протективный эффект. Крымский журнал экспериментальной и клинической медицины. 2019;9(4):55-62.
6. Li Y., Li R., Wang J. Protective effects of fisetin on hepatic ischemia-reperfusion injury through alleviation of apoptosis and oxidative stress. Arch Med Res. 2021;52(2):163-173. doi:10.1016/j. arcmed.2020.10.009.
7. Boteon Y. L., Boteon A. P. C. S. Impact of graded donor liver steatosis on ischemia-reperfusion injury after liver transplantation: where are we now? J Clin Exp Hepatol. 2021;11(1):157-158. doi:10.1016/j.jceh.2020.06.007.
8. Wang P. P., Huang X., Yang M. W., Fang S. Y., Hong F. F., Yang S. L. Effects of non-drug treatment on liver cells apoptosis during hepatic ischemia-reperfusion injury. Life Sci. 2021:119321. doi:10.1016/j.lfs.2021.119321.
9. Попов К. А., Цымбалюк И. Ю., Сепиаш-вили Р. И., Быков И. М., Устинова Е. С., Быков М. И. Выбор оптимального маркера острого повреждения печени крыс в эксперименте. Вестник Российского университета дружбы народов. Серия: Медицина. 2020;24(4):293-303. doi:10.22363/2313-0245-2020-24-4-293-303.
10. Richelmi P., Ferrigno A., Berardo C. Changes in glutathione content in liver diseases: an update. Antioxidants (Basel). 2021;10(3):364. doi:10.3390/ antiox10030364.
11. Вяткин А. В., Пастушкова Е. В., Феофи-лактова О. В. Обзор методов определения общей антиоксидантной активности. Современная наука и инновации. 2018;21(1):58-66.
12. Карпищенко А. И. Медицинские лабораторные технологии. Справочник. СПб: Интермедика, 2002.
REFERENCES
1. Basov A.A., Elkina A.A., Dzhimak S.S., Bikov I.M., Popov K.A., Kozin S.V., Moiseev A.V. Changes in prooxidant-antioxidant system indices in the blood and brain of rats with modelled acute hypoxia which consumed a deuterium-depleted drinking diet. Biology Bulletin. 2019;46(6):531-535. doi: 10.1134/S1062359019060049.
2. Dzhimak S. S., Basov A. A., Volchenko N. N., Samkov A. A., Baryshev M. G., Fedulova L. V. Changes in the functional activity of mitochondria isolated from the liver of rat that passed the preadaptation to ultra-low deuterium concentration. Doklady Biochemistry and Biophysics. 2017;476(1):323-325. doi:10.1134/ S1607672917050088.
3. Zvyagina V. I., Belskikh E. S., Uryasev O. M., Medvedev D. V., Kiseleva V. A., Tverdova L. V. Influence of carnitine chloride on mitochondria of the heart of rats during the modeling of hyperhomocyste. Medical News of North Caucasus. 2018;13(1-1):78-81. doi:10.14300/ mnnc.2018.13022. (In Russ.)
4. Saidi R. F., Kenari S. K. Liver ischemia/ reperfusion injury: an overview. J. Invest. Surg. 2014;27(6):366-379. doi:10.3109/08941939.2014 .932473.
5. Melkonyan K. I., Biryukova A. O., Ulitina N. N., Rusinova T. V., Yutskevich Y. A., Litvinova M. G., Bykov I. M., Kartashevskaya M. I. Extracellular matrix components in repair of damaged tissues: biochemical interactions and protective effect. Crimea Journal of Experimental and Clinical Medicine. 2019;9(4):55-62. (In Russ.)
6. Li Y., Li R., Wang J. Protective effects of fisetin on hepatic ischemia-reperfusion injury through alleviation of apoptosis and oxidative stress. Arch Med Res. 2021;52(2):163-173. doi:10.1016/j. arcmed.2020.10.009.
7. Boteon Y. L, Boteon A. P. C. S. Impact of Graded Donor Liver Steatosis on Ischemia-Reperfusion Injury After Liver Transplantation: Where are We now? J Clin Exp Hepatol. 2021;11(1):157-158. doi:10.1016/j.jceh.2020.06.007.
8. Wang P. P., Huang X., Yang M. W., Fang S. Y., Hong F. F., Yang S. L. Effects of non-drug treatment on liver cells apoptosis during hepatic ischemia-reperfusion injury. Life Sci. 2021:119321. doi:10.1016/j.lfs.2021.119321.
9. Popov K. A., Tsymbalyuk I. Y., Sepiashvili R. I., Bykov I. M., Ustinova E. S., Bykov M. I. Optimum marker selection of acute liver damage in rats in the experiment. RUDN Journal of MEDICINE. 2020;24(4):293-303. doi:10.22363/2313-0245-2020-24-4-293-303.
10. Richelmi P., Ferrigno A., Berardo C. Changes in glutathione content in liver diseases: an update. Antioxidants (Basel). 2021;10(3):364. doi:10.3390/ antiox10030364.
11. Vyatkin A. V., Pastushkova E. V., Feofilaktova O. V. The review of methods for antioxidant activity determination. Modern Science and Innovation. 2018;21(1):58-66. (In Russ.)
12. Karpishchenko A.I. Handbook. Medical Laboratory Technology. Sankt-Petersburg: Intermedika, 2002. (In Russ).
2021, т. 11, № 2
Feces, and Saliva. Exp Suppl. 2015;106:245-252. doi:10.1007/978-3-0348-0955-9_11.
47. Patel R. S, Jakymiw A., Yao B., Pauley B. A., Carcamo W. C., Katz J., Cheng J. Q., Chan E. K. High resolution of microRNA signatures in human whole saliva. Arch Oral Biol. 2011 Dec;56(12):1506-13. doi:10.1016/j.archoralbio.2011.05.015.
48. Zhang L., Xiao H., Karlan S., Zhou H., Gross J, Elashoff D., Akin D., Yan X., Chia D., Karlan B., Wong D. T. Discovery and preclinical validation of salivary transcriptomic and proteomic biomarkers for the non-invasive detection of breast cancer. PLoS One. 2010 Dec 31;5(12):e15573. doi:10.1371/journal.pone.0015573.
49. Sugimoto M., Wong D. T., Hirayama A., Soga T., Tomita M. Capillary electrophoresis mass spectrometry-based saliva metabolomics identified oral, breast and pancreatic cancer-specific profiles. Metabolomics. 2010 Mar;6(1):78-95. doi:10.1007/ s11306-009-0178-y.
50. Takayama T, Tsutsui H, Shimizu I, Toyama T, Yoshimoto N, Endo Y, Inoue K, Todoroki K, Min JZ, Mizuno H, Toyo'oka T. Diagnostic approach to breast cancer patients based on target metabolomics in saliva by liquid chromatography with tandem mass spectrometry. Clin Chim Acta. 2016 Jan 15;452:18-26. doi:10.1016/j.cca.2015.10.032.
51. Brooks M. N., Wang J., Li Y., Zhang R., Elashoff D., Wong D. T. Salivary protein factors are elevated in breast cancer patients. Mol Med Rep. 2008 May-Jun;1(3):375-8.
52. Streckfus C. F., Bigler L. A Catalogue of Altered Salivary Proteins Secondary to Invasive Ductal Carcinoma: A Novel In Vivo Paradigm to Assess Breast Cancer Progression. Sci Rep. 2016 Aug 1;6:30800. doi: 10.1038/srep30800.
53. Bernstein C., Nfonsam V., Prasad A. R., Bernstein H. Epigenetic field defects in progression to cancer. World J Gastrointest Oncol. 2013 Mar 15;5(3):43-9. doi: 10.4251/wjgo.v5.i3.43.
54. Li F., Adam L., Vadlamudi R. K., Zhou H., Sen S., Chernoff J., Mandal M., Kumar R. p21-activated kinase 1 interacts with and phosphorylates histone H3 in breast cancer cells. EMBO Rep. 2002 Aug;3(8):767-73. doi:10.1093/embo-reports/ kvf157.
55. Farahani H., Amri J., Alaee M., Mohaghegh F., Rafiee M. Serum and Saliva Levels of Cancer Antigen 15-3, Carcinoembryonic Antigen, Estradiol, Vaspin, and Obestatin as Biomarkers for the Diagnosis of Breast Cancer in Postmenopausal Women. Lab Med. 2020 Nov 2;51(6):620-627. doi:10.1093/labmed/lmaa013.
56. Streckfus C. F. Salivary Biomarkers to Assess Breast Cancer Diagnosis and Progression: Are We There Yet? Saliva and Salivary Diagnostics, Sridharan Gokul, IntechOpen, 2019. doi:10.5772/ intechopen.85762. Available from: https://www. intechopen.com/books/saliva-and-salivary-diagnostics/salivary-biomarkers-to-assess-breast-cancer-diagnosis-and-progression-are-we-there-yet-.
