УДК 616.441-002+616.441-008.61-073
M. V. POTAPOVA, V. B. LIFSHITS, V. E. NIKITINA, H. G. PONOMAREVA
BACTERIAL FUCOSE - SPECIFIC LECTIN IN ASSESSMENT OF MUCOSA PROTECTION AT H. PYLORI-ASSOCIATED DUODENAL ULCER
H. pylori can directly and indirectly influence the chaince of pathogenesis of ulcer disease. Destructive changes of the mucosa appear after microbial adhesion. The main bacterial receptors
are considered fucosalated components of mucosa. Thus, fucosa is an ultrastructural component of gastroduodenal protection and mediator of H. pylori — invasion as well. It causes a hystochemical research of a mucous membrane with the help of fucolectins, which is absolutely relevant. We have revealed the reduction of a level of antrum fucosalated structures in an aggravation of peptic ulcer. Lectin of a bacterial origin has a number of advantages to compare with plant by its character reference.
Л. В. САВИНА, Т. В. ЛУКОШНИКОВА, С. В. БУТАЕВА
ДИАГНОСТИКА СТРУКТУРНЫХ ИЗМЕНЕНИЙ В ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЕ ПРИ АУТОИММУННОМ ТИРЕОИДИТЕ
Кафедра терапии № 1 факультета усовершенствования врачей Кубанского государственного медицинского университета
Наиболее частой причиной морфофункциональных изменений щитовидной железы (ЩЖ) с последующим развитием гипотиреоза является аутоиммунный ти-реоидит (АИТ) с последующим развитием гипотиреоза [2], в связи с чем разработка диагностических методов исследования структуры ЩЖ на ранних этапах заболевания по-прежнему актуальна.
Любой орган, функционирующая клетка являются источником и носителем электромагнитного излучения, ритм которого меняется в зависимости от интенсивности хода обменных процессов [3].
Для регистрации электромагнитного излучения живых объектов применяют биологические жидкие кристаллы (ЖК), обладающие высокой оптической активностью и способностью к передаче информационной структуры [1].
Целью данного исследования явилась разработка биологической тест-системы (БТС), обладающей свойствами ЖК, для регистрации энергетического излучения ЩЖ и диагностики структурных изменений в ней при АИТ.
Материалы и методы
Обследовано 65 женщин в возрасте от 20 до 45 лет, из них у 32 была гипертрофическая форма АИТ с манифестным гипотиреозом, у 13 - с субклиническим гипотиреозом, и 20 практически здоровых женщин. Давность заболевания составила от 1 года до 6 лет.
Всем больным проводили общепринятые общеклинические, лабораторные и инструментальные исследования. Изучали: тиреоидный статус с использованием иммунодиагностической системы «Амерлайт» фирмы Amersham - определение в сыворотке крови свободного трийодтиронина (св Т3), свободного тироксина (св Т4), тиреотропного гормона (ТТГ); антитела к тирео-глобулину, к тиреоидной пероксидазе; проводили тонкоигольную пункционную биопсию ЩЖ. Осуществляли ультразвуковое сканирование щитовидной железы на ультразвуковом сканере GE Vingmed System Five с использованием высокочастотного датчика 7,5 мГц. Объем щитовидной железы (V жел., см3) рассчитывали по
формуле J. Brunn (1981): V жел.= [(Т1хЩ1хД1) справа + (Т2хШ2хД2) слева х 0,479], где Т - толщина доли; Ш - ширина доли; Д - длина доли [3]. Для получения количественной характеристики органного кровотока использовался режим импульсного допплера [4]. Контрольный объем устанавливался на нижнещитовидную артерию, изображение которой было получено в режиме цветового допплеровского картирования. Использовались следующие количественные характеристики допплеровского спектра: максимальная систолическая скорость кровотока (V max, см/с), конечная диастолическая скорость кровотока (V min, см/с), пульсаторный индекс (Pi, у. е.), резистивный индекс Пурсилота (Ri, у. е.).
БТС состояла из 0,1%-ного водного раствора 10 аминокислот (лейцин, глицин, пролин, серин, фенилаланин, гистидин, оксипролин, аргинин, глутаминовая, аспарагиновая), 0,5%-ного водного раствора нейромедиаторов - дофамина и гистамина, 12%-ного водного раствора сернокислой магнезии. Соотношение аминокислот нейромедиаторов и сернокислой магнезии составило 4:1:5. БТС объемом 0,05-0,06 мл наносили на стеклянную пластину в виде тонкой пленки. Затем пластину помещали на исследуемый участок кожи (зона проекции долей и перешейка щитовидной железы), выдерживали 5-7 минут. Полученный препарат высушивали в термостате при Т=+35-40° С на протяжении 2-3 минут, изучали его структуру в поляризационном свете (микроскоп - Мин-8) [6, 7].
Статистический анализ проводили по программе «STATISTICA 5.0 for Windows». Статистические различия средних в парных сравнениях проверяли по t-критерию для зависимых выборок.
Результаты и их обсуждение
Микроскопическое исследование препаратов, полученных при регистрации излучения ЩЖ, обнаружило их высокую оптическую активность - наличие пестрых цветов интерференционной окраски по шкале Мишель-Леви [5]. При исследовании структуры БТС выделены селективные микротипы, присущие для ЩЖ здорового человека и АИТ. Приводим исходную структуру БТС,
Рис. 1а Рис. 1б
Рис. 1а, б. Типовые структуры БТС:
а - исходная структура БТС, х 350, б - полигональные камеры, х 350
Рис. 2а Рис. 2б
Рис. 2в Рис. 2г
Рис. 2а-г. Типовые структуры БТС при АИТ:
а, б - мелкие деградированные полигональные камеры, х 350, в - кратерообразно углубленные полигональные камеры, х 350, г - зияющие кратерообразные полигональные камеры, х 350
которая представлена на рисунке 1а в виде субпарал-лельных агрегатов, выполненных спиралеобразными жгутами и отдельными зернами. На рисунке 1б показана структура БТС, полученная при помещении стеклянной пластины с нанесенным на нее индикатором на зону проекции ЩЖ здорового человека. Видны хорошо ориентированные полигональные камеры.
Аутоиммунный тиреоидит Анализ структур БТС показал, что изменение биосенсорного индикатора на ранних этапах заболевания характеризовалось появлением мелких деградированных полигональных камер, занимающих до 70-85% от общего объема препарата (рис. 2а, б).
Цвета интерференционной окраски были сероватокоричневыми, что свидетельствовало о низкой оптической активности исследуемых препаратов - косвенного маркера гипофункции ЩЖ. Клинически выраженный гипотиреоз различной степени был диагностирован у 32 больных, субклинический гипотиреоз, диагностированный с использованием пробы с тиролиберином, - у 13 больных. При лабораторном исследовании антитела к тиреоглобулину были выявлены в 60% случаев, антитела к тиреоидной пероксидазе - в 97% случаев. Самым характерным морфологическим признаком АИТ явились сплошная лимфоплазмоцитарная инфильтрация стромы с формированием лимфоидных фолликулов, почти полная утрата фолликулов из тироцитов, наличие клеток Аскинази (гюртклеточная реакция) [9]. При нарастании склероза стромы численность плазматических клеток уменьшилась, а лимфоидная инфильтрация сохранялась в виде небольших очагов. При исследовании структуры БТС у таких больных в поле зрения появлялись кратерообразно углубленные полигональные камеры, рис. 2в).
При давности заболевания 5-6 лет (11 пациентов с манифестным гипотиреозом) в аспирате синхронно с процессом фиброзирования и наличия гиалиноза наблюдалось постепенное уменьшение эпителиальных структур ЩЖ, ткань которой представала в виде полей фиброзной ткани с редкими плазматическими клетками, немногочисленными лимфоидными инфильтратами. В структуре БТС у этих пациентов на фоне сплошной пленки присутствовали зияющие кратерообразные камеры (рис. 2г).
Показатели тиреоидных гормонов свидетельствовали о выраженной гипофункции ЩЖ. У 7 пациентов уровень ТТГ колебался от 25 до 45 мМЕ/л (N -0,24±2,9 мМЕ/л).
При проведении ультразвукового сканирования отмечалось достоверное увеличение объема тиреоидной ткани за счет преимущественно толщины и ширины долей. V жел. составил при манифестном гипотиреозе 21,33±3,10 см3 (р=0,001) с давностью заболевания до 5 лет, 20,54±2,34 см3 (р=0,001) с давностью заболевания 5-6 лет. При субклиническом гипотиреозе данный параметр был увеличен в 1,4 раза (р=0,001). Эхогенность тиреоидной ткани у всех исследуемых пациентов была снижена. Структура определялась как диффузно неоднородная. Обнаруживались участки: изоэхогенные к ткани слюнных желез (не вовлеченные в процесс), сниженной эхогенности неправильной формы с размытыми контурами, расположенные преимущественно подкапсульно при субклиническом гипотиреозе, по всему объему - при манифестном гипотиреозе (зоны лимфоидной инфильтрации), повышенной эхогенности (замещающее фиброзирование) [8].
При цветовом допплеровском картировании определялось умеренное усиление сосудистого рисунка за счет как увеличения количества, так и просвета сосудов. При количественной оценке васкуляризации при манифестном гипотиреозе выявлено достоверное повышение показателей: V max - 22,66±3,11, р=0,01; V min - 7,10±1,42 с тенденцией к снижению при давности заболевания 5-6 лет.
Также достоверно увеличился Ri - 0,68±0,10 у. е. (р=0,01). Увеличение последнего показателя может указывать на нарастание регионарного сопротивления в сосудах при манифестном гипотиреозе. Статистически значимых изменений данных показателей не было найдено.
Таким образом, нами впервые разработан биологический сенсор, способный регистрировать энергетиче-
ское излучение ЩЖ. Высокая оптическая активность, способность регистрации энергии жизненного метаболизма и передача информации в виде определенной структуры позволили использовать предложенную БТС для экспресс-диагностики структурных преобразований в ЩЖ при ее гипофункции. БТС - сложная, биологическая система, воспринимает вещественноэнергетический стимул как сигнал в форме кодированной структуры. Результаты комплексных исследований (гормональный спектр, пункционная биопсия, УЗИ с использованием допплеровского картирования) подтвердили возможность применения БТС для диагностики структурных изменений в ЩЖ. В связи с этим предложенный нами способ высокоинформативный, его целесообразно использовать в практической деятельности.
Выводы
Впервые разработана БТС для регистрации энергетического излучения ЩЖ.
В структуре БТС выделены микротипы, являющиеся маркерами гипофункции ЩЖ.
Поступила 22.02.2008
ЛИТЕРАТУРА
1. Браун Г., Уолкен Дж. Жидкие кристаллы и биологические структуры. М., 1982.
2. Дедов И. И., Трошина Е. А, Антонова С. С., Александров Г. Ф., Зилов А. В. Аутоиммунные заболевания щитовидной железы: состояние проблемы // Проблемы эндокринологии. 2002. Т. 48, № 2. С. 6-13.
3. Казначеев В. П., Михайлова Л. П. Биоинформационная функция естественных электромагнитных полей. Новосибирск, 1985. 195 с.
4. Куликов В. П. Цветное дуплексное сканирование в диагностике сосудистых заболеваний. Новосибирск, 1997. 156 с.
5. Лазаренко Е. К. Курс минералогии. П., 1971. 500 с.
6. Савина Л. В., Чекмарева С. Е., Болотова Е. В. Способ экспресс-диагностики гиперфункции щитовидной железы человека. Патент на изобретение № 2247375, Россия. Бюл. № 6. 27.02.2005.
7. Савина Л. В., Чекмарева С. Е, Мингалева Н. В. Способ экспресс-диагностики структурных изменений в щитовидной железе человека. Патент на изобретение № 2247376, Россия. Бюл. № 6. 27.02.2005.
8. Шилин Д. Е., Пыков М. И. Ультразвуковое исследование щитовидной железы // Клин. руководство по ультразвуковой диагностике в педиатрии. М.: ВИДАР, 1998. С. 319-346.
9. Хмельницкий О. К. Цитологическая и гистологическая диагностика заболеваний щитовидной железы. СПб, 2002.
L. V. SAVINA, N. V. LUKOSHNIKOVA, S. V. BUTAEVA
EXPRESS-DIAGNOSTICS OF STRUCTURE DISORDERS IN THYROID GLAND THE PATIENTS WITH AUTOIMMUNE THYROIDITIS
To registrate energetic radiation of thyroid gland and to diagnose disorders of its structure biological with properties of liquid crystal was elaborated. Aminoacids, neuromediators and magnesium sulfate were the components of BTS female aged from 20 to 45 years were examined; 45 with autoimmune thyroiditis and hypothyroidism (AT), 20 — practically healthy.
Thyroid status was estimated with measurements of the level of anti-thyroid antibodies, aspiration cytology, ultrasonography and Doppler studies. BTS in volume 0,05—0,06 ml put on glass plate by the fine film. Then the plate put in the zone of projection of lobes and isthmus of the thyroid during the 5—7 minutes. Preparation was dry in thermostat in T=+35— 40o C during 2— 3 minutes, then its structure estimates in polarized light. In microscopic investigation of preparation the micro types inherent in healthy and pathological thyroid gland
were determined. The structures of BTS in healthy people were characterized by orientated polygonal chambers. In AT existence of small degraded polygonal and cratershaped chambers was typical.
The data of instrumental investigations and aspiration cytology confirms received results.
So, employment of BTS allows revealing the structures disorders in thyroid gland.
Key words: biological indicator, micro type, structure of thyroid gland.
О. А. ТЕРЕЩЕНКО, Э. А. ПЕТРОСЯН, А. А. СУХИНИН, М. С. КУПРЕЕВА
ОЦЕНКА НАРУШЕНИЙ БЕЛКОВОГО МЕТАБОЛИЗМА ПРИ ЖЕЛЧНОМ ПЕРИТОНИТЕ
Кафедра оперативной хирургии и топографической анатомии КГМУ, лаборатория экспериментальной гастроэнтерологии РЦ ФХГ
Несмотря на достижения современной хирургии, желчный перитонит (ЖП) и в настоящее время остается одной из актуальнейших проблем современной абдоминальной хирургии [3, 16]. Широкое внедрение лапароскопических методов в хирургию гепатобилиарной зоны, увеличение количества больных с травматическими повреждениями печени, а также с осложненными формами желчнокаменной болезни сопровождаются развитием желчного перитонита, что обуславливает необходимость поиска новых способов его эффективного лечения [3, 17]. Летальность при ЖП согласно данным некоторых авторов составляет 10^34% [7, 15].
Известно, что развитие ЖП сопровождается синдромом системной воспалительной реакции. Перенапряжение и срыв компенсации детоксицирующих систем, несбалансированность на биомолекулярном уровне ведут к структурно-метаболическим изменениям, служащим причиной развития эндогенной интоксикации (ЭИ) в организме [9].
Одним из проявлений ЭИ является токсическое поражение печени, приводящее к уменьшению концентрации белков крови и изменению их нормального соотношения. Снижение наиболее характерно для группы транспортных протеинов: альбумина, преаль-бумина и некоторых других. Уменьшение концентрации альбумина происходит из-за развития патологического метаболизма и выхода его из внутрисосудистого пространства при нарушении проницаемости через гломерулярную мембрану и стенки сосудов [6].
Состояние пула альбумина крови может быть охарактеризовано несколькими параметрами. Первый - общая концентрация альбумина в сыворотке или плазме (ОКА). Второй - эффективная концентрация альбумина (ЭКА) [2, 11]. На ЭКА могут влиять три фактора: потеря альбумина (снижение ОКА), загрузка альбумина метаболитами и изменение конформации молекулы альбумина. В отличие от ОКА ЭКА чрезвычайно чувствительна к наличию различных патологических процессов и зависит не только от концентрации белка, но и от состояния его молекулы [2].
Третий параметр - резерв связывания альбумина (РСА) или его связывающая способность отражает из-
менения структуры связывающих центров и является отношением эффективной концентрации альбумина к общей, соответствуя отношению свободных связей пула молекул альбумина к общему количеству его связей [2]. В норме показатель близок к 100%. Чем больше изменена молекула альбумина при нарушениях функций организма, тем больше он снижается.
В клинической практике оказался удобным индекс токсичности (Т), являющийся показателем количества конформационно измененных молекул альбумина. В норме Т близок к нулю и возрастает по мере изменения молекулы альбумина. Оба расчетных показателя (РСА и Т) зависят только от состояния молекулы альбумина, но не от его концентрации [12].
Некоторые авторы предлагают в качестве показателя, отражающего потенциальные возможности альбумина к иммобилизации, использовать разность общей и эффективной концентраций альбумина - резерв альбумина (РА) [14]. Мотивировка состоит в том, что этот показатель отражает количественную сторону заблокированного альбумина (т. е. его возможный резерв) и является критерием целесообразности проведения детоксикацион-ных мероприятий для деблокирования его центров. Чем больше разница, тем больше резерв, и если резерв резко снижается, то нет смысла пытаться их деблокировать активными детоксикационными мероприятиями.
Одним из традиционно использующихся показателей, отражающих интенсивность белкового обмена и эндогенной интоксикации, являются вещества низкой и средней молекулярной массы (ВНСММпл), растворенные в плазме. Поскольку большая часть ВНСММпл имеет гидрофобную природу и элиминируется из организма в комплексе с альбумином, практическое значение имеет отношение содержания ВНСММпл к ЭКА.
Целью настоящего исследования является оценка метаболизма белков при развитии желчного перитонита.
Методика исследования
Работа была проведена на белых крысах-самцах весом 160-220 г (п=39). Для решения поставленной задачи животные были разделены на 2 группы: 1-я группа- интактные животные (п=24); 2-я группа - животные,
УДК 616.381-002-008-9.001.6