PHAGOCYTOSIS IN VITRO WITH VIRULENT MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS AND ATYPICAL
Trubkin A.I., Haritonov M.V.
Summary
In the system of anti-episootic measures in the main method of animal tuberculosis in vivo diagnosis is allergy test, which allows to detect infected animals at 80% or more of cases.
УДК 619:616.07+616.5-002.9:636 ДИАГНОСТИКА САРКОПТОИДОЗОВ ЖИВОТНЫХ
Фазулзянова А.М. - аспирант; Хамзина Е.В. - к.б.н., ассистент; Лутфуллина Н.А. -
к.в.н., ассистент; Лутфуллин М.Х. - д.в.н., профессор, зав. кафедрой ФГБОУ ВПО КГАВМ, тел. (843) 238-2569
Ключевые слова: саркоптоидозы, клещи, соскоб, генцианвиолет, диметилсульфоксид.
Key words: sarcoptoidоsis, mites, scraping, gentian violet,
dimethylsulfoxide.
Введение. Под названием «чесоточные клещи» обычно объединяются клещи - паразиты человека, домашних и диких животных, паразитирующие внутри или на коже их и вызывающие длительное заболевание - чесотку. Чесоточные клещи относятся к типу членистоногих, к классу паукообразных и к отряду клещей.
Саркоптоидозы в большинстве случаев протекают в хронической форме, что является причиной отсутствия лечения и профилактических мероприятий. Однако данные инвазии наносят значительный экономический ущерб, который складывается из снижения продуктивности животных, ухудшения качества шкуры, затрат на проведение лечебно-профилактических мероприятий (Токарев А.Н., 2008).
Спектр клинических признаков при болезнях, вызываемых паразитическими клещами широк: от зуда и локальных поражений кожи до интоксикации и угнетения центральной нервной системы.
Интенсивное развитие животноводческих хозяйств и создание крупных комплексов со всей необходимостью ставят вопрос о разработке методов ранней диагностики саркоптоидозов. Это сделает возможным своевременное выявление и изолирование больных животных, что предотвратит широкое распространение больных животных и позволит точно установить диагноз.
Многие исследователи рекомендуют после взятия соскоба пораженных мест животных залить материал 10% раствором едкого натра на 12 часов, до размягчения и частичного растворения корок. Этот процесс можно ускорить подогреванием в течение 10-20 минут. После того как корки размягчатся, их по кусочкам переносят на покровные стекла, размягчают иглами и исследуют под микроскопом (Дубинин В.Б.,1954; Кербабаев Э.Б., 2000; Рогозина И.Е., 2004).
Другая серия усовершенствования метода исследования соскоба предусматривает возможность осаждения паразитов на дне сосуда или, наоборот, концентрации их на поверхностной пленке растворов в центрифужной пробирке.
Так, Вайда (1938) рекомендует залить соскоб в пробирках водой, прогреть их в водяной бане при температуре 50-60 °С в течении 15-20 минут, после чего добавить три части глицерина и отстаивать полученную смесь в течение часа или центрифугировать в течение 15 минут. Основная масса клещей при этом всплывает на поверхность жидкости, откуда паразиты собираются петлей и исследуются.
Шик Г.З. (1947) предложил метод осаждения чесоточных клещей на дно центрифужной пробирки. Собранный соскоб размельчается скальпелем и помещается в центрифужную пробирку, заливается 10% раствором едкого натра и подогревается несколько раз в течение 15-20 минут на пламени спиртовки. После каждого подогревания содержимое пробирки перемешивается. После достаточного растворения корок пробирки центрифугируются в течение 10-15 минут, жидкость сливают, а осадок исследуют под микроскопом.
Таким образом, авторы предлагают различные методики для обнаружения чесоточных клещей. Почти все они связаны с ожиданием выхода клещей, что связано с затратой рабочего времени. Следовательно, изыскание новых средств диагностики саркоптоидозов является актуальной проблемой.
Задачей данного исследования является разработка способа диагностики саркоптоидозов животных для определения паразитологической ситуации и своевременного проведения необходимых лечебно-профилактических мероприятий.
Материалы и методы. Брали соскобы кожи от крыс, экспериментально зараженных Notoedres notoedres, от кошек, спонтанно инвазированных ^oderies cynotis, от кроликов, зараженных Psoroptes cuniculi, от крупного рогатого скота, зараженного P. bovis, от свиней, зараженных Sarcoptes suis, которые исследовали на кафедре паразитологии и радиобиологии КГАВМ. От каждого вида животных соскобы помещали в чашки Петри. В одни чашки добавляли 10% раствор едкого натра, а в другие - 0,1% раствор генцианвиолета в концентрате диметилсульфоксида. Содержимое перемешивали и исследовали под малым увеличением микроскопа. Определяли время выхода клещей из соскоба. Для
контроля за эффективностью диагностики использовали витальный метод (термостат).
Результаты. Результаты исследования времени выхода клещей из соскобов кожи представлены в таблице 1.
№ п/п Препарат Время появления клещей (мин.) Количество обнаруженных клещей
1 2 3 4
Соскоб кожи крыс, зараженных №1оеёге8 по1оеёге8
1 10% едкого натра 11±2,8 2±1,4
2 исследуемый метод 0,45±0,18 7,5±2,1
3 термостат 20,5±0,7 3,5±2,1
Соскоб кожи кошек, зараженных ОК^ейеБ супоЙБ
4 10% едкого натра 7±1,2. 2±2,1
5 исследуемый метод 0,12±0,1 4,5±1,3
6 термостат 12,4±2,1 1±1,2
Соскоб кожи кроликов, зараженных РБОГорІеБ сипісиїі
7 10% едкого натра 21±1,4 5±1,4
8 исследуемый метод 0,87±0,17 7,5±0,7
9 термостат 16,5±4,9 4,5±0,7
Соскоб кожи кр. рог. скота, зараженных РвогорІеБ Ьоуїб
10 10% едкого натра 18±1,1 4±0,21
11 исследуемый метод 0,92±0,1 7±0,9
12 термостат 18,3±2,1 4±1,1
Соскоб кожи свиней, зараженных БагсорІеБ бшб
13 10% едкого натра 11,2±2,3 6±3,1
14 исследуемый метод 0,91±0,5 7±1,5
15 термостат 23,4±1,1 4,5±0,9
Из таблицы видно, что клещи N. п^оеёгеБ из соскобов кожи в присутствии 10% едкого натра выходили в количестве 2±1,4 экземпляров из пробы на 11±2,8 минуту. При добавлении 0,1% генцианвиолета в концентрате диметилсульфоксида время выхода клещей составило 0,45±0,18 минут, и было обнаружено 7,5±2,1 экземпляров клещей.
При исследовании соскоба кожи от кошек, зараженных ОЬёеСеБ супойБ установлено, что клещи появлялись на 0,12±0,1 минуты.
Клещи РБОГСреБ сипісиїі в присутствии 10% едкого натра выходили на 21±1,4 минуту, количество обнаруженных клещей при этом было 5±1,4 экземпляров. При исследовании соскоба витальным методом обнаружили клещей через
1б,5±4,9 минут. Наш метод позволил обнаружить в соскобах 7,5±0,7 клещей, а время выхода составило при этом 0,87±0,17 минут.
При исследовании соскоба кожи от крупного рогатого скота, зараженного Psoroptes bovis, клещи выходили из корочек новым методом на 0,92±0,1 минуту, при добавлении 10% раствора едкого натра через 18±1,1 минут, витальным методом - 18,3±2,1 минут.
Аналогичные результаты получили при исследовании соскоба кожи от свиней (таблица 1).
Таким образом, добавление 0,1% раствора генцианвиолета в концентрате диметилсульфоксида в соскобы кожи животных, пораженных саркоптоидозами, сокращает время выхода клещей и увеличивает их количество в исследуемом материале.
ЛИТЕРАТУРА: 1. Дубинин В.Б. Чесоточные клещи, их биология, вред в сельском хозяйстве, меры профилактики и борьба с ними. М.: Сов.Наука.1954.-с.170. 2. Кербабаев Э.Б. Арахноэнтомозы
сельскохозяйственных животных / Э.Б. Кербабаев, Ф.И. Василевич, Т.С. Катаева и др.// Учебное пособие для вузов. - М., 2000. - с.136. 3. Рогозина И.Е. Лечение собак при отодектозе / И.Е. Рогозина, В.И. Роменский, А.Н. Шинкаренко и др.// Тез.докл. 55-ой научной конференции ФГОУ ВПО «Костромская ГСХА», Кострома, 2004, т.2., с.156-157. 4. Токарев, А.Н. Изучение активности «Инсектоакарицида - Д» /А.Н. Токарев// Мат. науч.-. практич. конф. «Вклад молодых ученых в отраслевую науку с учетом современных тенденций развития АПК». - М., 2008. - с.265-266. 5. Шик Г.З. К методике лабораторного исследования материала на наличие чесоточных клещей /Г.З. Шик// Ветеринария. - №7. - 1947. - с.18-19.
ДИАГНОСТИКА САРКОПТОИДОЗОВ ЖИВОТНЫХ
Фазулзянова А.М., Хамзина, Е.В., Лутфуллина Н.А., Лутфуллин М.Х.
Резюме
Добавление 0,1% раствора генцианвиолета в концентрате диметилсульфоксида в соскобы кожи, взятые от животных разных видов, зараженных саркоптоидозами, сокращает время выхода клещей и увеличивает их количество в исследуемом материале.
DIAGNOSIS OF ANIMALS SARCOPTOIDOSIS
Fazulzyanova A.M., Hamzina E.V., Lutfullina N.A., Lutfullin M.H.
Summary
Adding a 0.1% solution of gentian violet in the concentrate dimethylsulfoxide in skin scrapings taken from animals of different species of infected sarkoptoidosis, reduces time of mites and their number increases in the material.