Окончание табл. 9
1 2 3 4
Большеголовости 29,79±0,45 28,42±0,64 28,48±0,17
6 месяцев
Длинноногости 49,80±0,12 49,90±0,12 50,08±0,11
Растянутости 85,96±2,78 84,98±3,38 85,69±2,61
Тазо-грудной 114,98+1,07 115,64±4,68 113,15+2,06
Грудной 62,68+0,67 58,73±1,79 58,39±1,29
Сбитости 141,47±5,66 140,78±5,23 139,44±6,23
Костистости 14,75+0,22 14,99±0,22 14,48±0,41
Перерослости 105,24+0,39 103,14±0,56 104,08+0,96
Массивности 121,0±1,43 118,95±1,14 118,86±1,61
Широколобости 58,05+1,93 57,41±0,73 60,57+2,03
Большеголовости 28,92+0,35 27,65±0,49 27,42+0,21
Заключение. Таким образом, использование хрома в рационах бычков 1-й группы в расчете на 1 голову в сутки в возрасте 1 месяца в количестве 2,67; 2 месяцев - 3,67; 3 - 4,80; 4 - 5,94; 5 -7,12 и 6 -8,38 мг, а в рационах телочек соответственно 2,66; 3,56; 4,57; 5,60; 6,74 и 7,95 мг способствовало лучшему росту и развитию отдельных статей тела телят в течение молочного периода.
ЛИТЕРАТУРА
1. Арзуманян, Е.А. Основы интерьера крупного рогатого скота / Е.А. Арзума-нян. - М.: Сельхозиздат, 1957. - 92 с.
2. Малюгин, С.В. Потребность ремонтных телок в хроме при сенажном типе кормления: дис. ... канд. с.-х. наук / С.В. Малюгин. - Саранск, 1996. - 123 с.
3. Прудов, А.И. Скотоводство Мордовии / А.И. Прудов, Н.В. Дугушкин, А.П. Вельматов. - Саранск, 1999. - 342 с.
УДК 636.2:612.64.089.67
ДЕЙСТВИЕ КАПРОНАТ ОКСИПРОГЕСТЕРОНА НА ПРИЖИВЛЯЕМОСТЬ ЭМБРИОНОВ У РЕЦИПИЕНТОВ
Ю.А. ГОРБУНОВ, Н.Г. МИНИНА, А.А. КОЗЕЛ, Э.И. БАРИЕВА, В.Б. АНДАЛЮКЕВИЧ УО «Гродненский государственный аграрный университет» г. Гродно, Республика Беларусь, 230005
(Поступила в редакцию 28.01.2013)
Введение. Многочисленными исследованиями доказано, что эффективность трансплантации эмбрионов зависит от гормонального статуса как доноров, так и реципиентов.
При изучении гормонального статуса у коров с многократными безрезультатными осеменениями Л.Л. Смирновой [5], Н.И. Смысловой
177
и др. [6] установлено, что выживаемость эмбрионов у них зависит от соотношения эстрадиола и прогестерона в сыворотке крови в ранний период после осеменения. Так, животные с нормально развивающимися эмбрионами имели более высокую концентрацию прогестерона на 3-й и 6-й день после осеменения, чем с неоплодотворенными ооцита-ми и дегенерированными эмбрионами. По другим данным, нарушение гормонального статуса организма высокопродуктивных коров-доноров приводит к изменению состава среды яйцеводов и матки, снижению секреции маточных желез, кистозному перерождению яичников [2, 9].
Однако, по мнению I. Sreenan, M. Diskin [8], применение прогестерона оказывает отрицательное влияние на развитие и секреторную активность желтого тела и на его сохранение у коров. Аналогичные данные получили по результатам своих исследований I. Heyman [12], R. Maurer и др., [10, 11, 13], которые также не обнаружили положительное влияние инъекций прогестерона на выживаемость эмбрионов у коров и телок, несмотря на то что обработка стимулировала заметное увеличение размера и образование дополнительного количества желтых тел, а также рост в периферической крови данного гормона.
Таким образом, имеются довольно противоречивые мнения о роли экзогенного прогестерона в повышении приживляемости зародышей после искусственного осеменения или трансплантации эмбрионов. Поэтому изучение влияния гормонального препарата капронат окси-прогестерона на эффективность трансплантации эмбрионов в условиях центра по трансплантации в КСУП «Племзавод «Россь» Волковысско-го района Гродненской области является весьма актуальным. Это позволит осуществлять более ускоренное размножение животных желательного генотипа посредством использования криобанка эмбрионов.
Цель работы - изучить действие гормонального препарата капронат оксипрогестерона (12,5 %-ный раствор КОП) пролонгированного действия на изменение гормонального статуса организма, а также приживляемость эмбрионов у реципиентов.
Материал и методика исследований. Опыты проводили в КСУП «Племзавод «Россь» Волковысского района Гродненской области, а также в научно-исследовательской лаборатории УО «Гродненский государственный аграрный университет».
Уровень содержания прогестерона, эстрадиола-nß, кортизола, тироксина и трийодтиронина в периферической крови телок-реципиентов определяли радиоиммунологическим методом в ГУ «НПЦ Институт фармакологии и биохимии НАН Беларуси» (г. Гродно). Одновременно с взятием крови проводили ректальную пальпацию яичников на клиническую выраженность в них желтых тел по общепринятой методике с некоторыми нашими уточнениями, касающимися телок. Дозировка 12,5 %-ного раствора капронат оксипрогестерона-17а для телок рассчитана согласно рекомендациям Главного ветеринарного управления
Госагропрома РФ [3], который вводили внутримышечно в дозе 12 мл (Ю.А. Горбунов [1]).
Препарат КОП-17а является синтетическим аналогом гормона желтого тела - прогестерона. Химически отличается от него тем, что в положении С17 содержит остаток капроновой кислоты. Будучи эфиром оксипрогестерона, капронат более стоек в организме, чем прогестерон, действует медленнее и оказывает пролонгирующий эффект. После однократной внутримышечной инъекции масляного раствора капронат оксипрогестерона его действие продолжается до 14 дней. Вызывает переход слизистой оболочки матки из фазы пролиферации, вызываемой фолликулярным гормоном, в секреторную фазу, а после оплодотворения способствует ее переходу в состояние, необходимое для развития оплодотворенной яйцеклетки. Его пролонгирующее действие способствует нормальной обеспеченности прогестероном организма животных при обработке в период за 48 ч до пересадки эмбрионов (5-й день полового цикла) и повторно на 15-й день полового цикла, что совпадает с периодами формирования желтого тела, усиления секреции трофобласта, имплантации зиготы в эндометрий, начальной стадии плацентации, т.е. приходится на критические периоды внутриутробного развития.
Для изучения влияния экзогенного прогестерона на приживляе-мость эмбрионов в организме реципиентов были сформированы две группы телок-аналогов по возрасту (14-16 месяцев) и живой массе (380-400 кг) по 36 голов в каждой. Методика исследований, дозы и кратность обработки отображены в табл. 1.
Таблица 1. Схема исследований, доза и кратность введения КОП-17а телкам-реципиентам
Группы n Способ введения, доза, кратность обработки на одну голову
1-я контрольная 36 Внутримышечно, 12 мл физиологического раствора хлористого натрия, двукратно, на 5-й (за 48 ч до пересадки эмбрионов) и повторно - на 15-й дни полового цикла
2-я опытная 36 Внутримышечно, 12 мл 12,5 %-ного раствора КОП 17-а, двукратно, на 5-й (за 48 ч до пересадки эмбрионов) и повторно - на 15-й дни полового цикла
Извлечение, оценку и пересадку эмбрионов, осуществляли согласно рекомендациям по трансплантации эмбрионов в молочном и мясном скотоводстве [4]. Криоконсервацию эмбрионов проводили с использованием высококонцентрированных защитных сред и процесса витрификации согласно методике И.П. Шейко и др. [7].
Результаты исследований и их обсуждение. На первом этапе исследований была изучена степень влияния инъекций препарата КОП-17а на гормональный статус крови телок-реципиентов, а также на клиническую выраженность у них желтых тел. Результаты приведены в табл. 2.
Таблица 2. Содержание гормонов трийодтиронина и тироксина
Группы Трийодтиронин (Т3), нг/мл | Тироксин (Т4), мкг/100мл
Дни взятия проб крови
7-й 17-й 27-й 7-й 17-й 27-й
1-я контрольная 1,47± ±0,15 1,39± ±0,13 1,40± ±0,07 4,10± ±0,35 3,76± ±0,27 3,33± ±0,21
2-я опытная 1,51± ±0,16 1,41± ±0,15 1,25± ±0,05 4,10± ±0,33 4,40± ±0,38 4,45± ±0,40*
*Р<0,05.
Нами не обнаружено достоверных изменений в содержании трийодтиронина (Т3) у опытных телок двух групп в течение полового цикла и после применения инъекций КОП-17а по сравнению с контролем.
Анализ данных по содержанию тироксина (Т4) показал, что концентрация гормона изменяется в неодинаковой для животных разных групп последовательности. Наиболее значительным является снижение его уровня у животных контрольной группы по сравнению с опытной к 27-му дню после начала охоты - 3,33 мкг/100 мл против 4,45 мкг/100 мл (р<0,05).
Сопоставление содержания кортизола в крови телок 1-й и 2-й групп показало, что динамика секреции гормона к концу первой недели после наступления охоты была примерно одинаковой (табл. 3). Уровень гормона в дальнейшем достигал максимальной концентрации к 17-му дню цикла у животных как контрольной, так и опытной групп при дальнейшем несущественном понижении показателя к 27-му дню (соответственно до 18,4 и 17,6 нг/мл).
Таблица 3. Содержание гормонов кортизола и эстрадиола
Кортизол, нг/мл Эстрадиол, пг/мл
Группы Дни взятия проб крови
7-й 17-й 27-й 7-й 17-й 27-й
1-я контрольная 14,81± ±2,75 19,31± ±3,31 18,4± ±3,17 19,30± ±3,39 21,80± ±3,60 24,68± ±3,49
2-я опытная 12,49± ±2,19 18,03± ±3,15 17,6± ±3,07 20,33± ±3,42 25,82± ±3,78 28,12± ±3,91
Изучение динамики эстрадиола в сыворотке крови показало, что концентрация этих гормонов в течение полового цикла изменяется у реципиентов как опытной, так и контрольной групп. Установлено, что к 17-му дню полового цикла при наличии уже хорошо пальпируемых желтых тел у животных обеих групп уровень концентрации эстрадиола повысился: у животных контрольной группы - в среднем на 2,5 пг и составил 21,80 пг/мл, в опытной этот показатель увеличился на 5,49 пг и достиг величины, равной 25,82 пг/мл. Уровень эстрогенной активности имел тенденцию к дальнейшему повышению. К 27-му дню данный
180
показатель по сравнению с 7-м днем у реципиентов контрольной группы увеличился на 5,38 пг/мл (24,68 пг/мл против 19,30 пг/мл), а у животных опытной группы - на 7,79 пг/мл (28,12 пг/мл против 20,33 пг/мл). При этом у животных опытной группы содержание эстрадиола в указанные дни полового цикла было выше, чем у реципиентов контрольной группы.
Концентрация прогестерона также имела тенденцию к увеличению к 27-му дню полового цикла у телок-реципиентов опытной и контрольной групп (табл. 4).
Таблица 4. Содержание прогестерона в крови телок-реципиентов
Группы Прогестерон, нг/мл
Дни взятия проб крови
7-й 17-й 27-й
1-я контрольная 2,08±0,13 2,16±0,21 2,51±0,36
2-я опытная 2,36±0,19 3,21±0,45* 3,42±0,50
*Р<0,05.
Однако у животных опытной группы, которым вводили КОП-17а, содержание прогестерона в крови было несколько выше в сравнении с реципиентами контрольной группы. При этом на 17-й день цикла содержание прогестерона у реципиентов опытной группы было достоверно выше на 1,05 нг/мл в сравнении с контролем: 3,21 нг/мл против 2,16 нг/мл (Р<0,05).
Уровень прогестерона к 27-му дню у животных контрольной группы увеличился на 0,43 (2,51 против 2,08) нг/мл, а у животных опытной группы - на 1,06 (3,42 против 2,36) нг/мл.
Использование технологии криоконсервирования эмбрионов позволяет сохранить ценный эмбриоматериал при отсутствии животных-реципиентов, а также проводить трансплантацию зародышей в строго определенное время с максимальной эффективностью. Усовершенствованный способ криоконсервации эмбрионов крупного рогатого скота с использованием высококонцентрированных защитных сред и процесса витрификации предусматривает насыщение зародышей криопротектором, охлаждение их в парах жидкого азота и погружение в жидкий азот при температуре минус 196 оС. Для этого сначала эмбрионы помещают на 5 мин в первую защитную среду, затем - на 7080 секунд во вторую защитную среду, а затем пайеты с эмбрионами переносят в паты жидкого азота на 60 с.
Приготовление защитных сред осуществляется следующим образом: 1-я защитная среда (10 %-ный раствор глицерина): отмеряют 1 мл химически чистого глицерина и доводят объем раствора до 10 мл фос-фатно-солевым буфером Хенкса, приготовленным ранее с добавлением бычьего сывороточного альбумина (5 г/л), гентамицина (12 мкг/мл) и ампициллина (100 ед/мл); 2-я защитная среда: отмеряют 3 мл химически чистого глицерина, 1,5 мл химически чистого диметилсульфок-сида, 0,5 мл раствора поливидона, смешивают компоненты и доводят
181
раствор до 10 мл фосфатно-солевым буфером Хенкса, приготовленным так, как указано для 1-й защитной среды.
Показатели приживляемости эмбрионов у реципиентов после введения им за 48 ч до пересадки эмбрионов (5-й день полового цикла) и повторно на 15-й день гормонального препарата капронат оксипроге-стерона пролонгированного действия представлены в табл. 5.
Таблица 5. Эффективность применения препарата КОП-17а
Группы n Препараты Стали стельными
голов %
1-я контрольная 36 1 %-ный физиологический раствор хлористого натрия 15 42
2-я опытная 36 12,5 %-ный раствор КОП 17-а 22 51
После пересадки эмбрионов процент стельности в опытной и контрольной группах составил 51 против 42 соответственно. Установлено, что применение капронат оксипрогестерона-17а способствует повышению приживляемости эмбрионов на 7 голов, или на 9 %, за счет своевременной стабилизации баланса половых гормонов в организме реципиента в наиболее ответственные для этого периоды.
Заключение. С целью повышения приживляемости эмбрионов целесообразно проводить двукратную обработку реципиентов 12,5 %-ным раствором препарата КОП-17а за 48 ч до пересадки эмбрионов (5-й день цикла) и повторно через 10 дней (15-й день цикла) внутримышечно в дозе 12 мл. Это способствует увеличению количества стельных реципиентов на 7 голов (9 %). При осуществлении криокон-сервации эмбрионов эффективно использование высококонцентрированных защитных сред и процесса витрификации.
ЛИТЕРАТУРА
1. Горбунов, Ю.А. Использование экзогенного прогестерона (КОП) для предупреждения эмбриональной смертности у коров и телок / Ю.А. Горбунов // Проблемы производства молока и говядины: матер. междунар. конф., Жодино, 19-20 июня 1996 г. / Акад. аграр. наук Респ. Беларусь; БелНИИживотноводства. - Жодино, 1996. - С. 21-22.
2. Горбунов, Ю.А. Методы искусственной регуляции репродуктивной функции у коров при трансплантации эмбрионов и воспроизводстве стада: монография / Ю.А. Горбунов. - Минск: РУП Белорус. науч. ин-т внедр. новых форм хозяйств. в АПК, 2003. - 78 с.
3. Наставление по применению комплекса гормональных препаратов для синхронизации половой охоты у телок. - М.: Россельхозиздат, 2009. - 14 с.
4. Рекомендации по трансплантации эмбрионов в молочном и мясном скотоводстве / В.С. Антонюк [и др.]; Министерство сельского хоз-ва и продовольствия РБ, БелНИИЖ. -Жодино, 1995. - 38 с.
5. Смирнова, Л.Л. Влияние молочной продуктивности коров на уровень воспроизводства стада / Л.Л. Смирнова // Совершенствование методов воспроизводства и искусственного осеменения сельскохозяйственных животных. - М., 2003. - С. 64-69.
6. Смыслова, Н.И. Приживляемость эмбрионов в зависимости от гормонального профиля крови телок-реципиентов / Н.И. Смыслова, М.Н. Ефремова, Ю.Н. Петраков // Биотехнология в животноводстве: бюл. научн. работ / ВИЖ. - Дубровицы, 1997. - С. 5052.
7. Способ глубокого замораживания эмбрионов крупного рогатого скота: пат. 9315 / И.П. Шейко [и др.] // Нац. центр интеллектуал. собственности РБ. - Минск, 2007. - С. 48.
8. Sreenan, I.M. Factors attecting pregnancy rate following embryo-transfer in the cows / I.M. Sreenan, M.G. Diskin // Theriog. - 2007. - Vol. 27. - P. 99-114.
9. Nakagata, N. High survival rate of unfertilized mouse oocytes after vitrification / N. Nakagata // J Reprod. Fertil. - 1999. - P. 479-483.
10. Pope, W.F. Uterine asynchrony: a cause of embryonic loss / W.F. Pope // Biol. Re-prod. - 2008. - Vol. 39. - P. 999-1003.
11. Erb, R.E. Profile of reproductive hormones associated with fertile and non - fertile inseminations of dairy cattle / R.E. Erb, H.A. Gaverik // Theriog. - 2003. - Vol. 5. - P. 227-242.
12. Heyman, I. Embryonic loss in cattle after transfer of fresh, frozen or cultured embryos / I. Heyman // Proc. x Int. Congr. Anim. Reprod. and A.I. - 2004. - Vol. 2. - Р. 228
13. Maurer, R.R. Hormonal asynchrony and embryonic development / R.R. Maurer, S.E. Echterkamps // Theriog. - 2003. - Vol. 12. - P. 11-22.
УДК 636.2.082
СЕЗОН РОЖДЕНИЯ КАК ОДИН ИЗ ФАКТОРОВ, ОБУСЛОВЛИВАЮЩИХ СРОК ПРОДУКТИВНОГО ИСПОЛЬЗОВАНИЯ КОРОВ
С.И. КОРШУН, Н.Н. КЛИМОВ, Т.М. КОМЕНДАНТ УО «Гродненский государственный аграрный университет» г. Гродно, Республика Беларусь, 230008
(Поступила в редакцию 28.01.2013)
Введение. Современное состояние молочного скотоводства во многих странах мира характеризуется существенными качественными и количественными изменениями. Особенно четко прослеживаются следующие тенденции: снижение численности маточного поголовья, существенное повышение продуктивности коров, широкое использование голштинского скота североамериканской селекции, расширение применения системы однозначной регистрации и идентификации племенных животных, активное использование биотехнологии, возрастание доли государственных доходов от интенсификации селекции. Практика многих стран с развитым молочным скотоводством показала, что успех этой отрасли был обеспечен путем стабилизации поголовья коров, внедрения в производство прогрессивных методов селекции, широкого использования генофонда высокопродуктивных пород для преобразования имеющегося скота [7].
Одним из важнейших условий эффективной селекционной работы с молочными породами скота является долголетнее использование маточного поголовья, особенно высокопродуктивных коров. Обоснованная гипотеза о возможности наследования свойства долговечности вызвала во многих странах огромный интерес к исследованию причин долголетия коров. Все чаще и чаще появляются публикации из области зоотехнической геронтологии. Наследуемость продуктивного долголетия низка, и причинами изменения данного показателя могут быть многочисленные факторы генетического и паратипического характера
[1, 4].