CC BY
17
УДК 619:615.5
nepir Ж.М., к.вет.н, с.н.с., Юсщв О.С., н.с., Кабанець A.C., м.н.с., Юшко A.C., лжар ветмедицини © Державный науково-доелгдный контрольный тстытут ветеринарных npenapamie та кормовых добавок, м. Лъвгв
ВИЗНАЧЕННЯ КОЕФ1Ц1СНТА КУМУЛЯЦП ПРЕПАРАТУ "ЩИТНИК " У ДОСЛ1ДАХ НА ЛАБОРАТОРНИХ ТВАРИНАХ
У doenidax на быых щурах встановлено, що препарат "Щытнык" проявляв слабо кумулятывш властывост1. Коефщент кумуляцп за тестом "субхрошчног токсычностг" становытъ 7,9 одыныцъ. Введения препарату "Щытнык " протягом 24 di6 за умов кумуляцп вплынуло на функцюналъный стан печ1нкы, внаелгдок токсычног dii на гепатоцыты, спрычыныло розвыток лейкоцытозу на тл1 л1мфоцытозу та нейтропешю.
Ключое1 слова: щытнык, кумулящя, коефщент кумуляцп, бт щуры, маса mwa.
Вступ. Лжарсью рослини були вщом1 людству з глибоко! давнини i довгий час залишались практично единим джерелом лтв. Основною перевагою лжувального впливу препарата рослинного походження е багатограншеть i м'яюсть дп на оргашзм i, як наслщок цього, добра витримувашеть, вщеутшеть, зазвичай, поб1чно! дп та ускладнень нав1ть, за умов довготривалого його застосування. Вказана проблема надзвичайно актуальна в сучасних умовах використання велико! кшькост1 х1м1чних сполук, високотоксичних, мутагенних, ¿мунотоксичних, алергенних, яю суттево впливають на навколишне середовище, здоров'я тварин i людей. Численш дослщження науковщв доводять високу ефектившеть ф1топрепарата та ix високу актившеть за лжування р1зних патолопчних сташв [1].
У ветеринарнш практищ рашше як антигельмштний 3aci6, використовували еф1рний екстракт чолов1чо! nanopoTi, вщомий пщ назвою "Фшксан". Однак, виготовлення екстракта на основ! етилового еф1ру, потребуе вдосконалення метод1в отримання. У зв'язку з цим, нами розроблено офщинальний препарат "Щитник", створений за безпечною технолопею виготовлення з кореневища nanopoTi чолов1чо! (Filicis maris) [2].
Важливим етапом у розробщ нових препарата е токсиколопчш дослщження, зокрема, виявлення кумулятивних властивостей. Багаторазове введения в оргашзм тварин лжарсько! речовини може призвести до накопичення И у тканинах оргашзму, тому вивчення кумулятивних властивостей речовин особливо важлив1 для розумшня патогенезу штоксикаци, бо це явище часто лежить в основ! гострих i хрошчних отруень [3]. Нами вивчено токсиколопчш властивосп препарату щитник у гострих та хрошчних
© nepir Ж.М., Кющв О.С., Кабанець A.C., Юшко A.C., 2013
382
дослщах на бших щурах [4]. Проте кумулятивш властивосп препарату щитник при введенш його лабораторним тваринам ще не дослщжено.
Метою дослщжень було: вивчення на лабораториях тваринах (бших щурах) кумулятнвннх властнвостей нового антигельмштного ф1топрепарату "Щитник".
Матер1ал та методи. Властивост1 препарату щодо кумуляци вивчали на бших щурах, 2-м1сячного в1ку, масою 140-160 г. Для визначення ступеня кумуляци препарату використали метод-тест "субхрошчно! токсичност^' за К. С. Лмом з1 сшвавторами у модифжаци К. К. Сидорова [5, 6]. За умов проведения "субхрошчно! токсичностГ' було використано 18 щур1в, з яких було сформовано 2 аналопчш групи (I — контрольна, II — дослщна) по 9 тварин, в кожнш. Щурам II групи препарат "Щитник" вводили перорально, щодобово починаючи з дози 1300 мг/кг, яка становила 1/10 ОЬ50, з послщовним збшьшенням дози у 1,5 рази кожш 4 доби. Дозу 1/10 ОЬ50 було визначено при вивченш гостро! токсичност1 щитника на бших щурах [4]. Контрольнш груш тварин вводили пропшенглжоль з водою у стввщношенш 1:1. На початку дослщу перед введениям, 1 кожш 4 доби, проводили зважування лабораторних тварин та визначали !х загальний стан. Залежно вщ дози препарату, вираховували коефщент кумуляци за формулою, запропонованою Ю. С. Каганом 1 В. В. Станкевичем [2, 4, 7]: КкуМ = БЬ50 п : БЬ50 1
де: Ккум — коефщент кумуляци, БЬ50 п та БЬ50 1 — середш смертельш дози за багаторазового та одноразового введения.
Сумарну середню дозу препарату на одну дослщну тварину визначали за методом К. К. Сидорова [5].
Результата дослщження. При дослщженш кумулятивних властивостей препарату "Щитник" за метод-тестом "субхрошчно! токсичностГ' встановлено, що загибель щур1в настала на 16 та 17 та 20 доби вщ початку введения препарату. Препарат вводили в збшьшуючих дозах вщ 1/10 БЬ50 до 0,75 БЬ50 , або вщповщно вщ 1300 до 9871,9 мг/кг. Загибель щур1в настала теля введения препарату в доз1 4387 мг/кг, що у 3,4 раза бшьша вщ терапевтично! I становила 0,34 БЬ50. Сумарна доза препарату "Щитник" на щура при введенш протягом 24 д1б посшль становила 36196,96 мг/кг, що у 27 раз1в бшьше за терапевтичну. Отже, за формулою, коефщент кумуляци становить:
КкуМ = 102821,96 :13000 = 7,9 одиниць.
Таким чином, при визначенш кумулятивних властивостей препарата "Щитник" за методом-тестом "субхрошчно! токсичност^' встановлено, що коефщент кумуляци становить 7,9 одинищ, що вказуе на слабо виражеш кумулятивш властивосп препарату "Щитник"[5, 6].
Анал1зуючи динамку змш маси тша дослщних тварин, встановили, що препарат "Щитник" протягом 16 д1б посшль не впливав на масу тша тварин, пор1вняно з контролем. Встановлена тенденщя до збшьшення маси бших щур1в у дослщнш груш тварин на 4-у та 8-му доби введения, пор1вняно з контролем (рис. 1). Тенденцш до зменшення маси дослщних тварин установлено, починаючи з 16 доби досл1ду.
383
маса Tina (г)
200 150 100 50 0 -
12 16 20
24
контрольна ■ доел щна
доба
Рис.1 Динамжа маси бших щу|мв при впвченш кумулятивних властивостей препарату "Щитник" (M±m, n=9)
За умов кумуляци "Щитника" встановлено в1рогщне тдвищення коефшдента маси печшки на 32,8 % (р < 0,001), а також тенденцш до зниження коефщ1ент1в маси серця та збшьшення коефщента маси селезшки (табл. 1).
Таблиця 1
Коефщ1енти маси внутр1шшх оргашв бших щу|мв за вивчеиня кумулятивних властивостей препарату "Щитник"
Органи Контроль Дослщ
Печшка 30,2±0,48 40,1±1,23***
Легеш 12,0±3,18 11,3±0,6
Нирка права 3,9±0,15 3,9±0,09
Нирка л1ва 3,6±0,17 3,9±0,12
Нирки обидв1 7,5±0,25 7,9±0,17
Серце 4,06±0,17 3,7±0,2
Селезшка 4,6±0,28 4,9±0,27
Примггка: у цш та шших таблицях стушнь в1ропдносп до контролю: Р<0,01, *** - Р<0,001
Р<0,05,
При анал1з1 морфолопчних показниюв кров1 щур1в за вивчеиня кумулятивних властивостей встановлено в1рогщне зниження вмкту гемоглобшу та кшькост1 еритроцит1в на 9,85 % (Р<0,05) та 13,6 % (Р<0,01) вщповщно та збшьшення середнього об'ему еритроцита на 21,9 % (Р<0,001), при цьому величини еритроцитарних шдекЫв кров1 були в межах ф1зюлопчно! норми (табл.2).
0
4
8
384
Таблиця 2
МорфолоНчш показники кров1 бших щур1в за вивчення кумулятивних _властивостей препарату "Щитник" (M±m, n=9)_
Показник Контроль Дослщ
Гемоглобш, г/л 135,0±0,61 121,7±0,11*
Еритроцити, Т/л 4,7±0,28 4,06±0,12**
Гематокрит, л/л 0,35±0,06 0,37±0,02
Кол1рний показник 0,86±0,06 0,89±0,03
Середнш вм1ст гемоглоб1ну в 28,7±1,89 29,4±1,53
еритроцит1,пг
Середня концентращя гемоглобшу в 38,5±0,21 32,9±0,14
еритроцнп, %
Середнш об'ем еритроцнпв, мкм3 74,0±0,23 90,24±0,32**
Лейкоцити, Г/л 8,76±0,56 12,1±0,58**
Базофши, % 0,2±0,35 0,20±0,26
Еозиноф1ли, % 1,6П0,42 1,1 □ 0,17
Нейтрофши, % 35,6±3,50 19,2±2,39**
.Шмфоцити, % 57,5±4,48 75,2±2,99**
Моноцити, % 5,1±1,98 4,3±1,33
3 анал1зу лейкограми кров1 щур1в встановлено, що за тривалого введения "Щитника" вщзначалося в1рогщне збшьшення, пор1вняно до контролю, кшькост1 лейкоципв на 38,1 % (Р<0,001) за рахунок л1мфоцит1в (на 30,8 %, Р<0,001) i зменшення вщсотку нейтрофЫв на 46,1 % (Р<0,001). Лейкоцитоз та л1мфоцитоз можна вважати як наслщок стимуляци лейкопоезу у вщповщь на дш ендогенних чинниюв на мононуклеарну систему оргашзму, а нейтропешя е наслщоком штоксикаци оргашзму препарату у великих дозах [7]. Встановлено тенденцш до незначного зниження вщсотка моноцит1в та еозинофтв у кров1 дослщних тварин.
Отже, при вивченш кумулятивних властивостей препарату "Щитник", за введения його в шлунок бшим щурам, встановлено, що вш впливае на лейкопоетичну функцш оргашзму, внаслщок чого виникае лейкоцитоз на фош л1мфоцитозу та нейтропени.
Висновки. 1. Препарат "Щитник", отриманий з кореневища nanopoTi чолов1чо! (Filicis maris, родини багатошжкових - Polypodiaceae), волод1е слабо вираженими кумулятивними властивостями. Коефщент кумуляцп за тестом "субхрошчно! токсичноси" становив 7,9 одиниць.
2. Препарат "Щитник" за умов кумуляцп протягом 15 д1б сприяв збшьшенню маси тша внаслщок актив1заци процеЫв метабол1зму, в тому числ1 обмшу пластичного бшка, а з 16-1 доби досл1ду, викликав И зменшення, унаслщок токсичного впливу, насамперед на бшоксинтезуючу функцш печшки.
3. Введения препарату "Щитник" протягом 24 д1б за умов кумуляцп знижувало р1вень гемоглоб1ну та кшьюсть еритроцит1в, спричинило розвиток лейкоцитозу на rai л1мфоцитозу та нейтропенш.
385
Л1тература
1. Фармацевтические и медико-биологические аспекты лекарств /[ под ред. проф. И. М. Перцева и И. А. Зупанца] .- Т.2. - Харьков: НФАУ. - 1999.- 453 с.
2.Пат.64274.-Укра!на. Протипаразитарний фп-опрепаратЩитник - сухий екстракт, отриманий способом лужиого г1дрол1зу i3 кореневища nanopoTi чолов1чо!/ I. Я. Коцюмбас, Ж. М. nepir, Р. В.Хомяк та ¿и:// Заявник та патентовласник: ДНДК1 ветпрепарат1в та кормових добавок № u 2011 01040. Заявлено 31.01.11.Опублжовано 09.02.11.
3.Доклмчш дослщження ветеринарних лжарських засоб1в / 1.Я.Коцюмбас, О.Г.Малик, 1.П.Патерега та ¿и.; За ред. 1.Я. Коцюмбаса. — Льв1в: Тр1ада плюс, 2006. — 360 с.
4. nepir Ж. М. Токсиколопчна оцшка дп ф1топрепарату Щитник / Ж. М. nepir // Науково-техшчний бюлетень шституту бюлоги тварин НААН та ДНДК1 ветпрепарапв та кормових добавок. — Льв1в: Тр1ада плюс, 2012. — Вип. 13, № 1-2. — С. 347-350.
5. Сидоров К. К. О некоторых методах количественной оценки кумулятивного эффекта / К. К. Сидоров // Токсикология новых промышленных химических веществ. — 1967. — Вып. 9. — Л.: Медицина. — С. 19-27.
6.Lim K. S. A method for the evaluation of cumulation and tolerance by the determination of acute and subchronic median effective doses / K. S. Lim, K. G. Rink, H. G. Glass // Arch. Intern. Pharmacodyn. Ther. — 1961. — Vol. 130. — P. 336-353.
7.Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии: Справочное издание / И.П.Кондрахин, Н.В.Курилов, А.Г.Малахов и др. — М.: Агропромиздат, 1985. — 287 с.
Summary
Perih Zh.M., Kistsiv O.S., Kabanets' A.S., Kishko A.S.
State Scientific-Research Control Institute of Veterinary Preparations and Feed
Additives, Lviv, Ukraine DETERMINATION OF ACCUMULATION COEFFICIENT OF MEDICINAL
PRODUCTS "SHCHYTNYK" IN THE EXPERIMENTS USING LABORATORY ANIMALS
The experiments with usage of white rats showed that medicinal product "Shchytnyk" possesses insignificantly cumulative peculiarities. Accumulation coefficient according to test of "subchronic toxicity" equals to 7,9 units. Administration of medicinal product during 24 days on condition of accumulation influenced functional condition of liver and as a result of toxic effect on hepatocytes it caused the development of leucocytosis on background of lymphocytosis and hypogranulocytosis.
Key words: Shchytnyk, accumulation, accumulation coefficient, white rats, body weight.
Рецензент - д.вет.н., професор Гунчак В.М.
386
