УДК 579.843.94
Bi6eH I.A., к. вет. н., доцент ([email protected]) © Дмпропетровсъкии державный аграрнииутверситет
ЧУТЛИВ1СТЬ SALMONELLA PULLORUM-GALLINARUM ДО ЕНРОФЛОКСАЦИНУ ЗА СП1ЛЬНОГО КУЛЬТИВУВАННЯ 3 AEROCOCCUS VIRIDANS AVIUM 21
Наведено результаты вивчення in vitro nymnueocmi до енрофлоксацину ряду послгдовних генерацт Salmonella pullorum-gallinarum при стлъному вирощувант з Aerococcus viridans avium 21, продукуючого H2O2. Встановлено, що у кожти наступит генерацп S. pullorum-gallinarum при стлъному вирощувант на ргдких поживних середовищах з A. viridans avium 21 збыъшувалася зона затримки росту салъмонел навколо дисюв з енрофлоксацином, що не вгдзначалося в генеращях, вирощуваних у eidcymnocmi aepoKOKie.
Ключое1 слова: Aerococcus viridans avium 21, Salmonella pullorum-gallinarum, перекис водню, послгдовт генерацп, чутлимстъ до енрофлоксацину
Вступ. Актуальшсть i важливкть проблеми сальмонельозно! шфекцп обумовлена зниженням ефективносп антибактер1альних препарата, повсюдним поширенням антибютико-резистентних штам1в сальмонел [3,5].
Застосування антибютиюв та xiMionpenapariB для лжування та профшактики шлунково-кишкових захворювань у багатьох випадках не дае позитивних результата, а в окремих нав1ть навпаки породжуе ряд проблем [1,2,].
Це, в першу чергу, поява антибютико-резистентних штам1в, порушення кишкового мшробного балансу, вироблення у тварин стшкого ¿мунодефщиту, який може знижувати ефектившсть вакцинацп. Антибютикотератя часто е безсплою при лжвщацп збудниюв кишкових шфекцш, що призводить до появи велико1 кшькост1 бактерюноспв, виникнення клмчних i субклш1чних форм захворювання [4].
Тому, питания пошуку нових ефективних шлях1в корекцп мжрофлори шлунково-кишкового тракту е одним з важливих у сучаснш ветеринарнш медицин!. Найбшьш виправданим, з еколопчних позицш, методом санацп бактерюноспв та збудниюв кишково! шфекцп е застосування бактер1альних препарата з живих мжрооргашзм1в, здатних проявляти антагошстичну i конкурентну дш по вщношенню до патогенних м1кроб1в [3].
Мета нашо! роботи досл1дити in vitro чутливкть ряду послщовних генерацш S. pullorum-gallinarum до енрофлоксацину при сптьному вирощувант з Aerococcus viridans avium 21 на рщких живильних середовищах.
Матер1али та методи дослщжень. У дослщженш використовувалися штам A. viridans avium 21, продукуючий перекис водню, стандартний штам
©Ei6eH I.A., 2013
35
S.pullorum-gallinarum, отриманий з музею Державного науково-контрольного шституту бютехнологи i штам1в м1кроорган1зм1в i видщений вщ птищ на птахофабрищ штам Salmonella pullorum-gallinarum "польовий".
У 50 мл простого м ясопептоного бульйону заавали 1 мл 20 млрд/мл cycnemii' св1жо! культури A. viridans avium 21 . Шсля дводобово! шкубаци при 370С пщ авали 0,1 мл 1 млрд/мл cycnemii' добово! культури S.pullorum-gallinarum. Птсля повторно! добово! шкубаци при 370С проводили визначення чутливоси видшених S.pullorum-gallinarum (перша генерацш) до енрофлоксацину методом дифузи в агар i3 застосуванням паперових дискш, що мютять 30 мкг антибютика [4]. Для одержання наступних генерацш видшеш штами сальмонел пщшвали до аерокоюв за зазначеною вище схемою. Для контролю використовували штами сальмонел, яю культивувались без аерокоюв.
Оцшку в1рог1дност1 розходжень визначали по t-критерш Ст юдента з використанням програми BIOSTAT.
Результати досл1дження. Установлено, що в кожнш наступн1й генерац1! S. pullorum-gallinarum при спшьному вирощуванн1 в МПБ з А. viridans avium 21 збшьшувалася зона затримки росту сальмонел навколо диск1в з енрофлоксацином, що не в1дзначалося в контрольних генерац1ях, вирощуваних у в1дсутност1 аерокоюв. Вщзначеш властивост1 штам1в S. pullorum-gallinarum (музейний та польовий) були аналопчними, що п1дтверджуюеться наведеними даними (табл.1, 2).
Таблиця1
Питома вага штам1в S. Salmonella pullorum-gallinarum - "музейний" за
чутливктю до енрофлоксацину (M±m); n=5
№ Д1аметр зони затримки росту сальмонел в мм навколо дисков
генерацп 38,0- 39,0- 40,0- 41,0- 42,0- 43,0- 44,0- 45,0- 46,0-
38,9 39,9 40,9 41,9 42,9 43,9 44,9 45,9 46,9
ДОСЛ1Д - сальмонели, яш були в контакт! з А. viridans avium 21
1 0 10 50 30 10 0 0 0 0
2 0 0 20 50 20 10 0 0 0
3 0 0 20 40 20 20 0 0 0
4 0 0 20 30 20 10 20 0 0
5 0 0 10 20 20 50 0 0 0
6 0 0 0 10 40 40 0 0 0
7 0 0 0 0 10 30 20 40 0
КОНТРОЛЬ - сальмонели, яш не були в контакт! з А. viridans avium 21
1 0 0 20 40 40 0 0 0 0
2 0 30 60 10 0 0 0 0 0
3 40 30 20 10 0 0 0 0 0
4 0 50 30 20 0 0 0 0 0
5 0 50 50 0 0 0 0 0 0
6 0 20 30 50 0 0 0 0 0
7 0 0 30 40 40 0 0 0 0
Прим1тка. BiporiAHicTb м1ж дослщом i контролем у 1-й генерацп p>0,05, в iHmnx p<0,01
36
Таблиця 2
Пнтома вага штам1в S. Salmonella pullorum-gallinarum "польовий" за _чутливктю до енрофлоксацину (M±m); n=5_
№ Д1амет р зони затримки росту салььонел в мм навколо дисков
гене- 38,0- 39,0- 40,0- 41,0- 42,0- 43,0- 44,0- 45,0- 46,0-
рацп 38,9 39,9 40,9 41,9 42,9 43,9 44,9 45,9 46,9
ДОСЛ1Д - сальмонели, як1 були в контакт! з А. viridans avium 21
1 0 20 50 30 0 0 0 0 0
2 0 0 30 40 30 0 0 0 0
3 0 0 40 50 10 0 0 0 0
4 0 0 60 20 10 10 0 0 0
5 0 0 40 20 30 10 0 0 0
6 0 0 10 50 30 10 0 0 0
7 0 0 0 0 10 0 30 20 10
КОНТРОЛЬ - сальмонели , яш не були в контакт! з А. viridans avium 21
1 0 50 40 10 0 0 0 0 0
2 30 40 30 0 0 0 0 0 0
3 50 50 0 0 0 0 0 0 0
4 40 50 10 0 0 0 0 0 0
5 60 40 0 0 0 0 0 0 0
6 10 50 40 0 0 0 0 0 0
7 0 40 60 0 0 0 0 0 0
Примтка. Bipozidnicmb м1ж docßidoM i контролему 1-й генерацПp>0,05, в тшихp<0,01
Даш, наведен! в таблицях, свщчать про picT у дослщ1 вщсотка штам1в S. Salmonella pullorum-gallinarum , що мають бшьшу зону затримки росту навколо диск1в з енрофлоксацином i обумовлюеться змшами бюлопчних властивостей сальмонел [1,3]. Бшьш наочно зазначеш змши властивостей сальмонел видно за середшми д1аметрами затримки росту сальмонел навколо диск1в з енрофлоксацином (табл.3).
Таблиця 3
Середш д1аметри зон затримки росту сальмонел (у мм) навколо диск1в з
енрофлоксацином (M±m); n=5
№ штаму Умови дослщу Номер гене] рацп
1 2 3 4 5 6 7
37 Дослщ 40,9 41,6 41,8 42,2 42,4 42,7 44,4
Контроль 41,4 40,1 39,0 40,0 39,9 40,6 41,5
польовий Дослщ 41,6 42,3 42,2 42,1 42,4 42,7 44,8
Контроль 40,9 40,4 39,8 39,6 39,4 40,6 40,9
На рисунку показана динамша чутливост1 вивчених штам1в сальмонел до енрофлоксацину залежно в1д номера генерацп .
37
Рисунок. Динамжа чутливосп S.pullorum-gallinarum до енрофлоксацину
залежно ввд номера генерацй'
Примака. 1 - контроль штаму 37, 2 - контроль польового штаму, 3 - дослщ штаму 37, 4 - дослщ польового штаму.
Анал1з рисунку виявляе виражеш розходження м1ж дослщом i контролем. Характерно ч1ткий пщроздш на тенденцш до збшьшення д1аметр1в зон затримки росту сальмонел у дослщ1 i в1дсутн1сть тако! в контроле
Висновки. При проведенн1 досл1дження в1рогщно встановлено, що в кожн1й наступит генерацй S.pullorum-gallinaum при сп1льному вирощуванш на р1дких живильних середовищах A. viridans avium 21, продукуючого перкис водню, зб1льшувалася зона затримки росту сальмонел навколо диск1в з енрофлоксацином.
Л1тература
1.Acohob Н. Р. Микробиология / Н. Р. Асонов. - М.: Колос, Колос-Пресс, 2007. - 352 с.
2. Градова Н. Б. Лабораторный практикум по общей микробиологии / Н. Б. Градова. - М.: ДеЛи принт, 2004. - 144 с.
3. Панин А., Серых Н., Малик Е. Второе рождение пробиотиков // Ветеринарная газета № 17 (79). 22 августа - 4 сентября 2005г. - С.
4. Чахова О. В., Горская Е. М. Носительство патогенных микроорганизмов как фаза резервации возбудителя в межэпидемическом периоде // Журнал микробиологии, эпидемиологии, иммунобиологии. -2010. -№ 9. - С.9-16.
5. Bowler IC. Is control of methicillin-resistant Staphylococcus aureus justified? QJM. 2007 Apr;90(4), p. 243-246.
38
Summary
Are Represented the study results in vitro of sensitiveness to row enrofloxacine of the successive generations Salmonella pullorum-gallinarum attached to the ^ joint growing with Aerococcus viridans avium 21 H2O2produced.
Established, that in each consequent generation S. pullorum-gallinarum attached to the joint growing on liquid nourishing Wednesdays with A.viridans avium 21 increased a growth delay zone Salmonella pullorum-gallinarum discs with enrofloxacin , that does not check in at generations, reared in absence Aerococcus.
Рецензент - д.вет.н., професор Гуфрш Д.Ф.
39