CC BY
6ФАРМАКОЛОГИЯ
УДК: 639.3.091
К.В. Гаврилин, Т.А. Ершова
(ООО «<НВЦАгроветзащита», Всероссийский НИИ гельминтологии им. К.И. Скрябина)
БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА АНТИПРОТОЗОЙНО-БАКТЕРИАЛЬНОГО ПРЕПАРАТА «АНТИБАК ПРО»
Введение
В настоящий момент одной из важнейших проблем декоративного рыбоводства являются различные заболевания аквариумных рыб, значительное место среди которых занимают эндопротозойные инвазии, вызываемые представителями родов: Нехатйа, Ва1апйёшт, СгурШЫа и т.д., осложненные бактериальными инфекциями [3, 4]. Для борьбы с этими заболеваниями в нашей стране с недавнего времени весьма успешно применяется препарат «Анти-бак ПРО» [2].
Целью нашей работы было изучение безопасности его применения в ветеринарной практике.
Материалы и методы
Изучение параметров острой токсичности на лабораторных животных проводили на основании «Методических рекомендаций по изучению общетоксического действия фармакологических веществ», утвержденных Минздравом России в 2000 г.
Изучение острой токсичности препарата проводили на 36 белых беспородных мышах массой 18-20 г по 6 животных в каждой группе. Перед опытом их выдерживали на голодной диете в течение 1820 часов. Перед дачей препарат измельчали и разводили в 2% крахмальном клейстере. В процессе опыта учитывали клиническое состояние мышей и количество погибших животных в зависимости от дозы препарата.
Субхроническую токсичность изучали на 100 белых беспородных мышах, массой тела 18-20 г, разделенных по принципу аналогов на 4 группы (по 25 экз. в группе). Препарат вводили ежедневно в течение 20 суток при помощи иглы с оливой.
Использовали дозы: первой группе 1/5 от максимально введенной; второй группе -1/10; третьей группе - 1/20. Мышам 4 группы вводили 0,5 мл 2% раствора крахмала. Наблюдение за состоянием животных вели на протяжении 31 суток с момента первого введения.
На 21 сутки от начала введения препарата на 10 мышах каждой группы проводили определение детоксицирующей функции печени с помощью гексеналовой пробы. Гексенал вводили внутрибрюшинно в дозе 60 мг/кг массы тела в виде 0,2% раствора. Учет времени сна проводили с момента принятия мышами бокового положения до появления координированных движений.
Из декоративных рыб в опытах использовали чувствительных к действию хими-опрепаратов клариевых сомиков (С1апаБ gaerepinus) и зеленого лабео ^аЬео ГгепаШБ). Средний вес рыб был 21 г ± 1,2 г и 26 г ± 0,6 г соответственно. Из сомиков и лабео формировали опытные и контрольные группы. Всего в опытах использовали 132 рыбы.
Острую и субхроническую токсичность исследовали, пероральным введением различных доз препарата с суточной нормой корма равной 2% от массы тела рыб. Корм готовили в лабораторных условиях на основе полноценного рецепта «Вака» для аквариумных рыб. В случае неполной поеда-емости корма с препаратом оставшееся количество вводили принудительно через катетер.
При изучении острой токсичности использовали разовую дачу корма, а при изучении субхронической двадцатикратную дачу препарата в течение 20 дней.
Контрольным группам скармливали аналогичное количество корма «Вака» без препарата.
Каждая группа рыб находилась в 60 литровой непроточной емкости. Подмену воды проводили каждые 48 часов. Температура воды во всех емкостях, в которых содержались рыбы во время опытов, колебалась от 26,0 до 26,5° С, рН - 7,1-7,3, GH 1214° ёН, содержание в воде растворенного кислорода соответствовало 100% насыщению.
Результаты опытов учитывали по смертельным исходам, среднелетальную дозу (ЛД50) рассчитывали по методу Кёрбе-
ра [1].
Результаты и обсуждение
В течение 14 дней за подопытными животными велось наблюдение. Ни от одной из введенных доз гибели мышей не отмечено. Так как нам не удалось повысить дозу при введении в желудок мышам, то максимально введенная доза (15000 мг/кг) принята за среднелетальную.
Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что препарат «Ан-тибак ПРО» в условиях острого опыта при введении в желудок максимальных доз может быть отнесен к 4 классу опасности (ГОСТ 12.1.007-76).
При изучении субхронической токсичности «Антибака ПРО» гибели мышей во всех опытных и контрольной группах на
протяжении всего опыта, так же не отмечали. Клиническое состояние животных не изменялось. В течение эксперимента подопытные белые мыши были активны, подвижны, аппетит был сохранен. Потребление воды и корма в опытных и контрольных группах было одинаково.
Средние показатели массы тела, на момент окончания опыта (31 сутки) мышей составляли 28,0±0,15 - 29,9±0,23 г в опытных группах и 30,9±0,23 в контрольной. При математическом анализе полученных результатов обнаруженные различия были признаны не достоверными (Р > 0,05).
По результатам гексеналовой пробы у животных, получавших препарат в дозах 1/5, 1/10 и 1/20 от ЛД50 (максимально введенной дозы) продолжительность медикаментозного сна, составляла 23,1±1,2; 22,±1,2; 20,3±1,0 минут соответственно. Достоверных отличий средних показателей опытных групп от контрольной (20,6±1,0 минуты), так же не выявлено (Р > 0,05). Полученные данные могут свидетельствовать о нормальной детоксицирующей функции печени.
При патоморфологическом вскрытии выраженных дистрофических и некробио-тических изменений в печени и других органах у животных подопытных групп не было отмечено.
Учитывая литературные данные, согласно которым препарат в дозе 2,5 г/кг
Таблица 1
Острая токсичность «Антибака ПРО» для клариевых сомиков
Доза г/кг 5 10 15 20 25 Контроль
Сомиков, экз. 6 6 6 6 6 6
Погибло, экз. 0 0 0 2 6 0
Выжило, экз. 6 6 6 4 0 6
(п = 6) Е, г 5 5 5 5 -
D - - - 1 4 -
Е х D - - - 5 20 -
Доза г/кг 5 10 15 20 25 Контроль
Лабео, экз. 6 6 6 6 6 6
Погибло, экз. 0 0 1 4 6 0
Выжило, экз. 6 6 5 2 0 6
(п=6) Е, г 5 5 5 5 -
D - - 0,5 2,5 5,0 -
ЕхD - - 2,5 12,5 25 -
Таблица 2
Острая токсичность «Антибака ПРО» для зеленого лабео
массы рыб в сутки, при длительности кормления 5 суток не вызывает никаких видимых побочных эффектов [2], для испытания острой токсичности были выбраны дозы в 2-10 раз превышающие терапевтическую. Для исследования субхронической токсичности выбраны дозы в 2-8 раз превышающие лечебные, а максимальный рекомендуемый срок кормления увеличен в 4 раза.
В первом опыте исследовали острую токсичность препарата «Антибак ПРО» на 6 группах клариевых сомиков. Были испытаны следующие концентрации препарата: 5 г/кг; 10 г/кг; 15 г/кг; 20 г/кг; 25 г/кг живой массы. Результаты представлены в таблице 1.
Как следует из таблицы 1, ЛД50 (средне смертельная доза) препарата «Антибак ПРО» для клариевых сомиков равна: 21,8 г/ кг живого веса. Минимально смертельная доза равна 20 г/кг, а ЛД100 (абсолютно смертельная доза) - 25 г/кг.
Все рыбы в контрольной группе остались живы и не демонстрировали каких либо отклонений от нормального поведения.
Во втором опыте аналогичные исследования проведены на зеленом лабео, всего в данном опыте использовали 36 рыб. Результаты представлены в таблице 2.
Как следует из таблицы 2, ЛД50 препарата «Антибак ПРО» для зеленого лабео равно 18,3 г/кг живого веса. Минимально смер-
тельная доза равна 15 г/кг. ЛД100 - 25 г/кг.
Все рыбы в контрольной группе остались живы и не демонстрировали каких либо отклонений от нормального поведения.
Субхроническую токсичность «Анти-бак ПРО» изучали так же в двух опытах на клариевых сомиках и зеленом лабео. Ежесуточная доза средства в обоих опытах составляла: 5; 10; 15; 20 г/кг/сут живой массы.
В первом опыте было сформировано 5 групп клариевых сомиков, по 6 экз. в каждой. Полученные в опыте данные отражены в таблице 3.
Как видно из таблицы 3, минимально смертельной дозой для сомиков была 15 г/ кг/сут , ЛД100 - 20 г/кг/сут, ЛД50 - 15,83 г/кг/ сут.
Для проведения второго опыта были сформированы 5 групп зеленого ла-бео, всего 30 рыб. Полученные результаты представлены в таблице 4.
Как видно из таблицы 4, минимально смертельной дозой для лабео была 15 г/кг/ сут, ЛД100 - 20 г/кг/сут, ЛД50 - 16,7 г/кг/сут.
Все рыбы в контрольных группах остались живы и не демонстрировали, каких либо отклонений от нормального состояния.
Учитывая то, что терапевтическая доза препарата составляет 2,5 г/кг в сутки было установлено, что отравление рыб различных видов может произойти при единовременной передозировке препарата в 6-8 раз.
Таблица 3
Субхроническая токсичность «Антибака ПРО» для клариевых сомиков
Доза г/кг в сутки 5 10 15 20 Контроль
Сомиков, экз. 6 6 6 6 6
Погибло, экз. 0 0 2 6 0
Выжило, экз. 6 6 4 0 6
(п = 6) Е, г 5 5 5 -
D - - 1 4 -
ЕхD - - 5 20 -
Таблица 4
Субхроническая токсичность «Антибака ПРО» для зеленого лабео
Доза г/кг в сутки 5 10 15 20 Контроль
Лабео, экз. 6 6 6 6 6
Погибло, экз. 0 0 1 6 0
Выжило, экз. 6 6 5 0 6
(п=6) Е, г 5 5 5 -
D - - 0,5 3,5 -
ЕхD - - 2,5 17,5 -
Это представляется маловероятным, так как рыба при вольном кормлении не сможет съесть количество корма содержащего такую дозу.
В условиях хронического опыта минимально смертельная доза, независимо от вида рыбы, выше терапевтической в 6 раз. По тем же причинам отравление и гибель
даже единичных рыб при их лечении «Антибаком ПРО» маловероятны.
Результаты, полученные при определении острой и субхронической токсичности «Антибака ПРО», позволили установить, что рекомендуемые терапевтические дозы и сроки введения препарата будут безопасны для декоративных рыб.
РЕЗЮМЕ
Исследована острая и субхроническая токсичность препарата «Антибак ПРО» на лабораторных животных и рыбах. При исследовании острой токсичности на лабораторных животных LD50 не установлено. Максимально введенная доза (15000 мг/кг), не вызывала гибели мышей. При исследовании острой токсичности на декоративных рыбах установлено, что LD50 колеблется в пределах 18,3 - 21,8 г/кг в зависимости от вида рыб. LD50 в хроническом опыте длительностью 20 суток от 15,9 г/ кг до 16,7 г/кг. Выявленный уровень токсичности говорит о возможности использования «Антибака ПРО» в ветеринарной практике.
SUMMARY
Acute and subchronical toxic preparation «Antibak PRO» on laboratory animal and fishes are investigated. At research of acute toxicity on laboratory animals LD50 it is not established. As much as possible entered dose (15000 mg/kg), did not cause dead of mice. At research of acute and subchronical toxic preparation 'Antibak PRO" on ornamental fishes LD50 in acute experiment - 18,3-21,80 g/kg in depend to fish species. If 'Antibak PRO" is oral route of administration for 20 days LD50 - 15,9 - 16,7 g/kg. The research level toxic this preparation determine possibility it use in the veterinary practice.
Литература
1. Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. Л.; Государственное издательство медицинской литературы, 1963. - 149 с.
2. Гаврилин К.В., Енгашев В.Г., Юхименко Л.Н., Бычкова Л.И. Результаты научных исследований по препарату «АНТИБАК»// Проблемы аквакультуры: Межвед. сб. науч. и науч.-ме-
тод. тр./Московский зоопарк, 2005, С.133-134.
3. Dr. Chris Andrews, Adrian Exell & Dr. Neville Carington. The interpet manual of fich health.-Interpet Ltd.-2005. - 208 p.
4. Bassleer G. The new illustrated guide to fish diseases in ornamental tropical and pond fish. -Westmeerbeec: Responsible publisher.- 2005. -232. p.
УДК: 619:616.993.192.5:636.22/28:636.32/38 Н.Ш. Камолов, В.Т. Заблоцкий, Н.А. Казаков
ЛЕЧЕБНАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ БЕРЕНИЛА И ДИОКСИВЕТИНА ПРИ АНАПЛАЗМОЗЕ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
В развитии ветеринарной химиотерапии огромная роль принадлежит В.Л. Якимову и его многочисленным ученикам и последователям. Было испытано большое число разнообразных по своей химической структуре препаратов. Наиболее эффективными изо всех имеющихся лечебных средств при пироплазмидозах животных в ветеринарной практике был беренил (произведенный в Германии) и его аналог - советский препарат азидин. Было установлено, что беренил и азидин не обладают терапевтическим действием у животных, больных тейлериозами и анаплазмозом (цит. по А.А. Маркову) [1].
Однако, вопреки установленным результатам о неэффективности беренила при анаплазмозе рогатого скота, в ряде областей центральной России (Владимирс-
кая, Рязанская обл. и др.) практические ветеринарные врачи стали применять бере-нил и его аналог - верибен при указанном заболевании, а ученые зоны Северного Кавказа пытались оформить патент на эффективное лечение анаплазмоза рогатого скота с использованием беренила.
Отмеченные заблуждения ветврачей и некоторых ученых - протозоологов, видимо, не случайны, так как история изучения анаплазмоза не проста: существовали различные точки зрения на природу анап-лазм:
1. анаплазмы - это вирусы, но впоследствии оказалось, что вирусы бывают ДНК или РНК - содержащие, а в составе анап-лазм одновременно содержатся обе эти рибонуклеиновые кислоты;
2. анаплазмы - это одна из стадий в раз-
