CC BY
18
ускоряет процесс формирования орбитальной культи. В основной группе животных процесс фиброваскуляризации происходит к 7-14-м суткам, в то время как в группе сравнения этот процесс развивается к 14-21-м суткам.
Заключение
Результаты экспериментальных исследований свидетельствуют о том, что биоинженерный комплекс из никелида титана и аутоло-гичных мононуклеарных клеток за счет своих упругоэластичных свойств стабильно поддер-
живает форму орбитальной культи и хорошо переносится тканями глаза. Гистологически отмечено разрастание фиброваскулярной ткани в зоне размещения никелида титана, что подтверждает возможность использования его в качестве орбитального имплантата, а моно-нуклеарных клеток крови для ускоренного созревания соединительной ткани и укрепления орбитальной культи, что снижает риск развития послеоперационных осложнений (обнажение и отторжение имплантата).
Сведения об авторах статьи:
Горбунова Евгения Александровна - аспирант кафедры офтальмологии ГБОУ ВПО СибГМУ Минздрава России. Адрес: 634050, г. Томск, Московский тракт, 2. E-mail: [email protected].
Кривошеина Ольга Ивановна - д.м.н., профессор кафедры офтальмологии ГБОУ ВПО СибГМУ Минздрава России. Адрес: 634050, г. Томск, Московский тракт, 2. Тел./факс: 8(3822) 90-49-88. E-mail: [email protected].
Запускалов Игорь Викторович - д.м.н., профессор, зав. кафедрой офтальмологии ГБОУ ВПО СибГМУ. Адрес: 634050, г. Томск, Московский тракт, 2. Телефон: 8(3822) 90-49-71, E-mail: [email protected].
ЛИТЕРАТУРА
1. Вопросы эпидемиологии и реабилитации лиц с анофтальмом на территории Российской Федерации / Р.А. Гундорова, Е.Н. Вериго, М.П. Харлампиди [и др.] // Вестник офтальмологии. - 2007. - № 3. - С. 42-46.
2. Груша, Я.О. Сравнительное экспериментальное исследование современных имплантационных материалов, применяемых в хирургии орбиты / Я.О. Груша, А.А. Федоров, Т.В. Бакаева // Вестник офтальмологии. - 2012. - Т. 128, N° 2. - С. 27-33.
3. Лузьянина, В. В. Изучение свойств имплантатов для пластики опорно-двигательной глазной культи / В.В. Лузьянина, В.В. Егоров, Г.П. Смолякова // Вестник ОГУ. - 2009. - № 12. - С. 84-87.
4. Милюдин, Е. С. Амниопластика в современной офтальмологии / Е. С. Милюдин, А. В. Золотарев // Материалы VIII Всероссийской научно-практической конференции «Федоровские чтения - 2009». - М., 2009. - С. 508-509.
5. Филатова, И. А. Анофтальм. Патология и лечение / И. А. Филатова. - М., 2007. - 213 с.
6. Custer, P. L. Porous implant exposure: incidence, management and morbidity / P. L. Custer, K. M. Trinkaus // Ophthalm. Plast. and Reconst. Surg. - 2007. - Vol. 23, № 1. - P. 1-7.
7. Repair of orbital implant exposure using Müller's muscle flap / J. Delmas, J. P. Adenis, P. Y. Robert et al. // J. Fr. Ophtalmol. - 2014. -Vol. 37, № 8. - P. 618-622.
8. Turner, L. D The versatility of the temporoparietal fascial graft (TPFG) in orbital implant exposure / L. D. Turner, A. S. Haridas, T. J. Sullivan // Orbit. - 2014. - Vol. 33, № 5. - P. 352-355.
УДК: 612.12: 617.711-002-092.9-085:537.63 © М.В. Медведева, Д.М. Ярмамедов, 2016
М.В. Медведева, Д.М. Ярмамедов БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ ЖИВОТНЫХ НА ФОНЕ ВОЗДЕЙСТВИЯ ПРЕПАРАТА ПОЛУДАН ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ КОНЪЮНКТИВИТЕ В МАГНИТНОМ ПОЛЕ ПОВЫШЕННОЙ НАПРЯЖЕННОСТИ ГБОУ ВПО «Курский государственный медицинский университет» Минздрава России, г. Курск
Развитие конъюнктивита в условиях магнитного поля повышенной напряженности имеет ряд особенностей. Препарат полудан оказывает противовирусное и иммуностимулирующее действие за счет стимуляции выработки эндогенного интерферона а. В сравнительном аспекте изучен ряд биохимических показателей в условиях экспериментального конъюнктивита с применением полудана. Исследование проведено на 30 морских свинках с экспериментальным конъюнктивитом. Исследуемая группа животных подвергалась влиянию магнитного поля аномально высокого уровня в 3 эрстеда, который соответствует значениям зоны Курской магнитной аномалии. После двухнедельной экспозиции у животных был вызван экспериментальный конъюнктивит. При этом экспериментальная группа получала лечение в виде ежедневного 15-минутного форсажа глазных капель препарата полудан в концентрации 1 ЕД в инфицированный глаз. Группа сравнения лечения не получала. Оценивали состояние фагоцитарного звена, а также содержание в сыворотке крови каталазы, лактата, супероксиддисмутазы, малонового диальдегида и лактоферина. Было выявлено, что использование препарата полудан в таких условиях повышает активность кислородзависимых бактерицидных систем, тем самым снижая выраженность воспалительного процесса.
Ключевые слова: конъюнктивит, магнитное поле, Курская магнитная аномалия, иммуномодулятор, полудан.
M.V. Medvedeva, D.M. Yarmamedov BLOOD BIOCHEMICAL PARAMETERS OF ANIMALS ON THE BACKGROUND OF THE DRUG POLUDANUM EFFECT AT EXPERIMENTAL CONJUNCTIVITIS UNDER HIGH INTENSITY
MAGNETIC FIELD
Conjunctivitis development under the influence of high intensity magnetic field possesses a set of features. Poludanum shows antiviral and immunostimulatory effects due to stimulation of endogenous interferon a production. The research made a comparative study of a number of biochemical parameters in experimental conjunctivitis with Poludanum application. The investigation included 30 guinea pigs with experimental conjunctivitis. The control group was compared to guinea pigs under conditions of abnormally high levels of magnetic field of 3 Unit, which corresponds to the values of the area of the Kursk magnetic anomaly. After two weeks of exposure in animals experimental conjunctivitis was induced. This experimental group was treated with a daily 15-minute afterburner eye drops Poludanum in a concentration of 1 Unit in the infected eye. The control group received no treatment. Then we assessed the state of phagocytic link and the content of catalase, lactate, superoxide dismutase, malondialdehyde and lactoferrin in blood serum. It was found that the use of drug Poludanum in these conditions increases the activity of oxygen-dependent bactericidal systems, thereby reducing the severity of the inflammatory process.
Key words: conjunctivitis, magnetic field, Kursk magnetic anomaly, immunomodulator, Poludanum.
Одним из актуальных вопросов офтальмологии являются заболевания переднего отрезка глаза. На их долю выпадает значительная часть обращаемости за офтальмологической помощью, а наиболее высокое эпидемиологическое значение в этой структуре имеют конъюнктивиты, составляющие до 2/3 в структуре воспалительных заболеваний глаз [9]. Поиск эффективных методов диагностики и лечения пациентов, страдающих конъюнктивитом, представляет высокую медицинскую и экономическую значимость. Лечение пациентов с конъюнктивитом направлено на устранение провоцирующего агента в зависимости от этиологии процесса (бактериальный, вирусный или аллергический конъюнктивит), а также на повышение антиинфекционной резистентности организма. К иммуностимулирующим препаратам в офтальмологической практике относится полудан. Действие полудана связанно с интерфероногенной активностью, он используется в офтальмологии при лечении вирусных конъюнктивитов, а его применение в комбинации с низкочастотным ультразвуком при внутриматочном введении эффективно восстанавливает репродуктивную функцию у женщин, страдающих хроническим эндометритом [14]. Полудан оказывает противовирусное и иммуностимулирующее действие за счет стимуляции выработки эндогенного интерферона а и в меньшей степени интерферона в и у. В офтальмологической практике препарат используется в виде капель для инстилляций или в виде инъекции раствора под конъюнктиву. На течение заболеваний переднего отрезка глаза помимо этиологических факторов влияют состояние антиинфекционной защиты организма, а также внешние факторы, такие как экологическая обстановка, и в частности геомагнитный фон. В экспериментальной модели на животных выявлена однонаправленность морфофункциональных изменений при возмущении геомагнитного поля Земли, а также при действии искусственных источников магнитного поля с различной напряженностью. При этом с повышением уровня организации биосистемы реакции на магнитные поля становятся слож-
ными, нелинейными [1], а изменения происходят на клеточном, органном, системном и организменном уровнях [12]. Интенсивное магнитное поле влияет на морфологические и биохимические показатели крови, вызывая снижение параметров неспецифической резистентности [4]. Возмущения магнитного поля могут оказывать влияние на организм через изменение активности медиаторов и окислительных ферментов [5]. Таким образом, в лечении заболеваний переднего отрезка глаза помимо этиологии процесса необходимо уделять должное внимание внешним факторам, в частности уровню геомагнитного поля и внутренним факторам специфической и неспецифической антиинфекционной защиты.
Целью данной работы являлся анализ динамики факторов антиинфекционной защиты и антиоксидантных систем в сыворотке крови у морских свинок с экспериментальным конъюнктивитом в условиях действия магнитных полей различной напряженности.
Материал и методы
Исследование проведено на 30 морских свинках массой тела 700-900 г с экспериментальным конъюнктивитом. Патологический процесс вызвали путем инфицирования конъюнктивы глаза взвесью суточной агаровой культуры Staphylococcus aureus (2*109 микробных тел/мл). Эксперименты проводились в соответствии с положениями Страс-бургской Конвенции по защите прав позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других целей (1986 г). Животные были разделены на три группы. Первая группа (контрольная) состояла из 10 условно здоровых животных, которые на протяжении всего эксперимента находились в условиях действия фонового геомагнитного поля напряженностью 0,5 эрстеда. Две другие группы морских свинок (экспериментальная и группа сравнения) по 10 животных в каждой были помещены в установку, генерирующую аномально высокий уровень магнитного поля в 3 эрстеда, соответствующий значениям зоны Курской магнитной аномалии, за две недели до начала эксперимента и находились в ней в течение всего опыта. После двухнедельной
экспозиции в установке у животных экспериментальной группы и группы сравнения был вызван экспериментальный конъюнктивит. При этом экспериментальная группа получала лечение в виде ежедневного 15-минутного форсажа глазных капель препарата полудан с концентрацией 1 ЕД в инфицированный глаз. Группа сравнения лечения не получала. Для оценки параметров антиинфекционной защиты производился внутрижелудочковый забор крови в объеме 5 мл на третьи и четырнадцатые сутки после инфицирования. Оценивали состояние фагоцитарного звена, а также содержание в сыворотке крови каталазы, лакта-та, супероксиддисмутазы (СОД), малонового диальдегида (МДА) и лактоферина. При этом фагоцитарный показатель и активность кис-лородзависимых бактерицидных систем оценивались по общепринятым методикам [2]. Уровни лактоферрина определяли методом твердофазного ИФА, лактата - по В.В. Меньшикову [10], каталазы - по М.А. Королюку и соавт. [11], супероксиддисмутазы - по Н.Р. Мта, Y. Fredovich [15], церулоплазмина - по
При этом клинические проявления патологического процесса были достаточно выражены. В экспериментальной группе, получавшей инстилляции полудана на протяжении 10 суток, к концу эксперимента было также отмечено повышение фагоцитарного показателя с 58,1±3,34% до 61,2±4,05%. Это сопровождалось снижением активности ферментов анти-оксидантной защиты - уровень каталазы уменьшился с 7,15±0,59 до 6,81±0,60 мккал/мл, супероксиддисмутазы - с 8,78±0,45 до 8,31±0,49 у.е., снижением выраженности воспалительного процесса по сравнению с животными группы сравнения. Достоверных изменений таких показателей, как лактоферрин, це-
В.С. Камышникову [7], малонового диальдегида - по В.Г. Гаврилову и соавт. [3].
Обработка результатов исследования проводилась методами непараметрической статистики [6,8,13]. При оценке отличий между количественными данными внутри групп использовался критерий Вилкоксона. Различия считались достоверными при р<0,05.
Результаты и обсуждение
К третьим суткам после инфицирования конъюнктивы глаза взвесью золотистого стафилококка у животных как группы сравнения, так и экспериментальной группы сформировался воспалительный процесс. Однако развитие патологических изменений не сопровождалось статистически выраженными изменениями со стороны исследуемых показателей. Вместе с тем к концу срока наблюдения в группе сравнения были отмечены изменения со стороны фагоцитарного показателя и системы кислородзависимой бактерицидности фагоцитов: значения фагоцитарного показателя увеличились с 57,20±3,92% до 61,80±3,27% (таблица).
Таблица
рулоплазмин, малоновый диальдегид и лактат, на протяжении эксперимента в исследованных группах выявлено не было.
Заключение
Таким образом, при развитии конъюнктивита в условиях непрерывного длительного воздействия магнитного поля, значительно превышающего фоновые значения геомагнитного поля, отмечается усиление фагоцитарного процесса со снижением резерва кислород-зависимых бактерицидных систем. Использование препарата полудан в таких условиях повышает активность кислородзависимых бактерицидных систем, тем самым снижая выраженность воспалительного процесса.
Показатели фагоцитарного звена и ферментных систем организма в крови морских свинок в эксперименте
Показатели Группы животных
контроль группа с равнения опытная группа
3-й день 14-й день 3-й день 14-й день
1 2 3 4 5
Лактоферрин, нг/мл 4603,40±461,41 4882,50±476,22 5007,60±370,74 4742,10±448,10 4892,60±429,31
Церулоплазмин, г/л 0,54±0,07 0,57±0,05 0,59±0,05 0,57±0,06 0,57±0,05
МДА, мкмоль/л 4,98±0,37 4,97±0,50 4,94±0,56 5,15±0,44 5,12±0,51
СОД, у.е. 8,32±0,41 8,70±0,47 8,34±0,52 8,78±0,455 8,31±0,494
Каталаза, мккал/мл 7,19±0,58 7,02±0,61 6,93±0,65 7,15±0,595 6,81±0,604
Лактат, ммоль/л 3,93±0,35 4,06±0,45 3,76±0,40 3,89±0,41 3,85±0,39
ФП, % 59,60±4,93 57,20±3,923 61,80±3,272 58,10±3,345 61,20±4,054
Примечание. Цифрами надстрочного индекса указаны показатели, по отношению к которым изменения достоверны (р<0,05).
Сведения об авторах статьи: Медведева Марина Викторовна - к.м.н., доцент кафедры офтальмологии ГБОУ ВПО КГМУ Минздрава России. Адрес: 305004 г. Курск, ул. К. Маркса, 3. E-mail: [email protected].
Ярмамедов Дмитрий Муталифович - ассистент кафедры оперативной хирургии и топографической анатомии ГБОУ ВПО КГМУ Минздрава России. Адрес: 305004 г. Курск, ул. К. Маркса, 3. E-mail: [email protected].
ЛИТЕРАТУРА
1. Агаджанян, Н.А. Магнитное поле земли и организм человека / Н.А. Агаджанян, И.И. Макарова // Экология человека. - 2005. -№ 9. - С. 3-8.
2. Виксман М.Е. Способ оценки функциональной активности нейтрофилов человека по реакции восстановления нитросинего тетразолия: метод. реком. / Виксман М.Е., Маянский А.Н. - Казань, 1979. - 14 с.
3. Гаврилов, В.Г. Анализ методов определения продуктов перекисного окисления липидов в сыворотке крови по тесту с тиобарбиту-ратовой кислотой / В.Г. Гаврилов, А.Р. Гаврилова, Л.М. Мажуль // Вопросы медицинской химии. - 1987. - №1. - С.118-121.
4. Горбунова, Е.Л. Определение интенсивности магнитного поля Земли и его влияния на организм животных в условиях свиноводческого хозяйства Увельского района Челябинской области / Е.Л. Горбунова О.Р. Сухова // Молочно-хозяйственный вестник. - 2014. - №1 (13). - С.13-18.
5. Горго, Ю.П. Некоторые механизмы влияния изменений магнитного поля земли на биологические объекты / Ю.П. Горго, Ю.Я. Садовская // Электронный научно-образовательный вестник «Здоровье и образование в XXI веке». - 2007. - Т.9, №5. - С.194-195.
6. Гублер, Е.В. Применение непараметрических критериев статистики в медико-биологических исследованиях. Изд. 2-е / Е.В. Гублер, А.А. Генкин - Л.: Медицина, 1973. - 141 с.
7. Камышников, В.С. Клинико-биохимическая лабораторная диагностика: справочник. В 2 т. / В.С. Камышников. - Минск: Ин-терпрессервис, 2003. - Т.2. - 463 с.
8. Лакин, Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин - М.: Высш. школа, 1980. - 293 с.
9. Майчук, Ю.Ф. Конъюнктивиты. Современная лекарственная терапия / Ю.Ф. Майчук. - М., 2014. - 58 с.
10. Меньшиков, В.В. Лабораторные методы исследования в клинике / В.В. Меньшиков - М.: Медицина, 1987. - 240 с.
11. Метод определения активности каталазы / М.А. Королюк [и др.] // Лабораторное дело. - 1988. - №1. - С.16-18.
12. Показатели перекисного окисления липидов, состояние антиоксидантной системы и водного компонента сыворотки крови у лиц, страдающих ишемической болезнью сердца, при изменении магнитного поля Земли / И.И. Макарова [и др.] // Электронный научно-образовательный вестник «Здоровье и образование в XXI веке». - 2007. - Т.9, №12. - С.477.
13. Реброва, О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета программ Statistica / О.Ю. Реброва - М.: Ме-диасфера, 2002. - 312 с.
14. Спирина, Ю.В. Подготовка пациенток, страдающих хроническим эндометритом, к программам вспомогательных репродуктивных технологий / Ю.В. Спирина, И.Д. Евтушенко // Сибирский медицинский журнал. - 2008. - Т. 23. - № 4-1. - С.84-85.
15. Mirsa H.P.The role of super oxide anion in the antioxidation of epinephrine and simple assay for superoxide dismutase / H.P. Mirsa, Y. Fredovich // IAMA. - 1972. - Vol. 247, №10. - P.3170-3175.
УДК 617.713-089.843
© Е.О. Филиппова, О.И. Кривошеина, И.В. Запускалов, 2016
Е.О. Филиппова, О.И. Кривошеина, И.В. Запускалов ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ПРИМЕНЕНИЯ АУТОЛОГИЧНЫХ МОНОНУКЛЕАРОВ КРОВИ В ЛЕЧЕНИИ ЭНДОТЕЛИАЛЬНО-ЭПИТЕЛИАЛЬНОЙ ДИСТРОФИИ РОГОВИЦЫ
ГБОУ ВПО «Сибирский государственный медицинский университет» Минздрава России, г. Томск
Изучены закономерности развития репаративной регенерации при эндотелиально-эпителиальной дистрофии (ЭЭД) роговицы на фоне внутрикамерного применения аутологичных мононуклеаров крови. Выполнена серия экспериментов на крысах породы Wistar (основная группа) которым производили внутрикамерное введение и наслоение аутологичных суспензий мононуклеарных клеток на заднюю поверхность роговицы с предварительно индуцированной ЭЭД. Животные группы сравнения получали традиционное консервативное лечение.
В ходе эксперимента выявлена высокая эффективность внутрикамерного применения: площадь тканевых полостей в строме роговицы на 3-и сутки в основной группе сократилась в 2,2 раза, в группе сравнения - в 1,04 раза. Начиная с 7-х суток в основной группе обнаруживались признаки пролиферации эндотелиального слоя роговой оболочки, который к 14-м суткам был представлен слоем отростчатых клеток. В группе сравнения эндотелиальный слой роговицы на 21-е сутки от начала лечения содержал дистрофически измененные клетки.
Таким образом, внутрикамерное ввведение аутологичных мононуклеаров крови с их наслоением на внутреннюю поверхность роговицы при ЭЭД стимулирует регенерацию эндотелиального слоя, способствуя восстановлению его барьерной функции и уменьшению отека роговой оболочки.
Ключевые слова: эндотелиально-эпителиальная дистрофия, аутологичные мононуклеары крови, полипотентность клеток, микроокружение, репаративная регенерация.
E.O. Filippova, O.I. Krivosheina, I.V. Zapuskalov EXPERIMENTAL STUDY OF AUTOLOGOUS MONONUCLEARS OF BLOOD CELLS IN THE TREATMENT OF ENDOTHELIAL EPITHELIAL
CORNEAL DYSTROPHY
The present work have studied patterns of reparative regeneration development in the corneal endothelial-epithelial dystrophy with intracameral use of autologous mononuclear blood cells. Several experiments on Wistar rats have been made. The main group of rats has been injected intracameral mononuclear cell suspension onto the rear surface of the cornea after the corneal endothelialepithelial dystrophy simulation. Animals of the control group have been treated using traditional conservative methods.
The experiment revealed a high efficiency of intracameral mononuclear cells treatment. The area of tissue cavities in the corneal stroma was 2.2 times less in the main group than in control group on the third day after operation. On the seventh day after the operation the regeneration signs were observed in the main group. On the fourteenth day the corneal endothelium was represented by a layer of normal endothelial cells. In the control group the corneal endothelium consisted of dystrophycally changed endothelial cells on the twenty first day.
