в ранние сроки в лимфатической системе проявляются функциональные и морфологические признаки процессов повреждения, защиты и приспособления [4]. Когда в тканях накапливается жидкость, то первой адаптационной реакцией является её поглощение. Если же в условиях нарастания воспалительного отека осмотическое давление в тканях все более увеличивается, жидкость накапливается в отечной ткани [11]. Лимфатическая система помогает уменьшить тканевой отёк. При воспалении сгустки фибрина, остатки тканей и клеток, токсины и антигены из патологического очага поступают в лимфатическую систему. Диссеминированно блокируется микролимфатический дренаж тканей и пассаж лимфы через лимфатические узлы. Все это парализует барьерную и иммунную функции лимфатической системы [12]. Отек межуточной ткани имеет следствием открытие межэндотелиальных соединений, а также расширение, переполнение лимфой просвета сосуда. Помимо этого, существует ещё один патогенетический фактор -недостаточность клапанов лимфатических сосудов, который обуславливается поступлением большого количества белка, частей разрушенных клеток [5, 6]. Анализируя полученные результаты, можно предположить, что высокая объёмная плотность интерстициальных пространств в собственной пластинке слизистой желудка указывает на переполнение отделов лимфатической системы и нарушение лимфотока, так как при наличии язвенного дефекта происходит блокада лимфатических узлов или сосудов тканевым детритом, поступающим в очаг воспаления, который сопровождает язвенный процесс.
Таким образом, на фоне воздействия лазерного излучения в постоянном магнитном поле, в собственной пластинке желудка собак с экспериментальной язвенной болезнью, купируются признаки воспаления, улучшается микроциркуляция, лимфоток, вследствие чего и снижается количество интерстициальных пространств. В связи с восстановлением дренажной функции лимфатической системы, улучшением лимфотока, купированием воспаления (отека) уменьшается и площадь среза лимфатических сосудов, вследствие чего и увеличивается их количество, попадающее в поле зрения.
ЛИТЕРАТУРА
1. Медицинская морфология. Руководство [Текст]/Г.Г.Автандилов.-М.: Медицина, 1990.-384 с.
2. Комплексная терапия острых пневмоний с применением низкоинтенсивного лазера [Текст]/
А.М.Белов.-М.: Медицина, 1990.-С.129-134.
3. Лазеры в эксперименте и клинике [Текст]/Н.Ф.Гангалей.-М.: Медицина, 1972.-С.47-50.
4. Общая патология лимфатической системы [Текст]/Д.Д.Зербино.-Здоровье, Киев, 1974.-160 с.
5. Практическая лимфология [Текст]/Ю.М.Левин //Мариф.-Баку, 1983.-С.274-276.
6. Проблемы клинической лимфологии [Текст]/
Ю.М.Левин, Я.Д.Мамедов//Практическая
лимфология.-Баку, 1982.-С.112-118.
7. Лазеротерапия неспецифических болезней органов дыхания [Текст]/А.В.Лутай, Л.А.Егорова //Вопр. курортол.-2001.-№3.-С.17-19.
8. Структурная альтерация биологических жидкостей и их моделей при информационном воздействии [Текст]/Р.И.Минц, С.А.Скопинов //Действие электромагнитного излучения на биологические объекты и лазерная медицина.-Владивосток, 1989.-С.6-41.
9. Влияние лазерного излучения в постоянном
магнитном поле на морфофункциональное состояние слизистой желудка крыс при экспериментальном гастроэнтерите [Текст]/Л. А. Набока,
А.Н.Чубин//Вестник КрасГАУ.-Красноярск, 2003.-Вып.3.-С.270-272.
10. Болезни собак: практическое руководство для
ветеринарных врачей [Текст]/Х.Г.Ниманд,
П.Ф.Скутер.-М., 1998.-С.525.
11. Лимфатическая система в норме и патологии[Текст]/Б.В.Огнев//Лимфатическая система в эксперименте и клинике.-М., 1971.-С.11-12.
12. Физиология и патология лимфоидной системы [Текст]/А.Поликар.-М.: Медицина, 1965.-210 с.
13. Болезни мелких животных [Текст]/ С.В.Старченков.-СПб.: Лань, 1999.-С.115-117.
14. Влияние лазерного излучения на пролиферативную активность клеток в культуре [Текст]/В.П.Туманов, Е.В.Глущенко//Бюл. экспер. биол.-1994.-№3.-С.313-315.
15. Цитограмма тканевых лейкоцитов в слизистой оболочке желудка у собак при экспериментальной язвенной болезни на фоне лечения лазерным излучением в постоянном магнитном поле [Текст]/А.Н.Чубин, Л.А.Набока//Бюл. физиол. и патол. дыхания.-2006.-Вып.22 (приложение).-С.58-62.
п □ □
УДК 57.086.3:579.23:577.118
В.М.Катола\ Э.В.Хмелькова2
БАКТЕРИАЛЬНЫЕ ФОРМЫ НА СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКЕ НОСА У ЗДОРОВЫХ ЛЮДЕЙ
1 Институт геологии и природопользования ДВО РАН,
2ГУ Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания СО РАМН
РЕЗЮМЕ
Пользуясь новой методикой исследования, включающей сканирующую электронную
микроскопию, непосредственно на слизистой
оболочке носа здоровых людей визуализированы различные структуры бактериального
происхождения: цилиндрические клетки,
нитевидные формы, нанопалочки,
свободнолежащие шаровидные и овальные клетки,
отпочковывающие элементарные тельца и образующие крупные тела или конгломераты, и свободнолежащие элементарные тельца. Шаровидные (овальные) клетки, конгломераты (тела) и элементарные тельца представляют собою различные варианты L-форм бактерий, а сам процесс L-трансформации в носовых ходах является нормальным явлением. Отмечено также, что бактериальные L-конгломераты, локализованные на слизистой оболочке носа доноров, обладают собственным набором и содержанием химических элементов.
SUMMARY V.M.Katola, E.V.Khmelkova
BACTERIAL FORMS ON NASAL MUCOSA IN HEALTHY SUBJECTS
New investigation techniques, including scanning electron microscopy enabled us to visualize different bacterial structures: columnar cells, filamentary structures, nano-rods, nonattached globular and oval cells, elementary corpuscles coalescing to form conglomerates and free elementary corpuscles on nasal mucosa of healthy people. Globular (oval) cells, conglomerates (corpuscles) and elementary corpuscles representing different L-forms of bacteria and the process of L-transformation is a normal process. It was shown that bacterial L-conglomerates, located on nasal mucosa of donors have their own set and content of chemical elements.
Благодаря микробиологическим методам исследования установлено, что микробиоценоз носовых ходов человека формируют как непатогенные, так и некоторые факультативные патогенные виды микроорганизмов [2, 3, 4]. Тем не менее их морфологическое состояние непосредственно в месте обитания в литературе освещено слабо. Ранее нами [5] предложен новый методический прием, который позволил с помощью сканирующей электронной микроскопии
визуализировать непосредственно на слизистой
носовых раковин и поверхности полипов при полипозном риносинусите у больных бронхиальной астмой не только микроскопические и субмикроскопические формы бактерий, но и детализировать различные варианты их L-форм.
Методы исследования
Морфология нативных форм бактерий, локализующихся на слизистой оболочке носа, изучена у 15 практически здоровых людей (доноров). С этой целью отобранные у доноров препараты-отпечатки напыляли углеродом в вакуумной установке ВУП-4 для создания токопроводящего покрытия и
просматривали в сканирующем электронном микроскопе LEO 1420, который интегрирован с энергодисперсионным спектрометром фирмы «Rantek» (Германия). Это позволило также провести сравнительный микроанализ химических элементов у крупных вариантов L-форм бактерий, обнаруженных в носовых ходах как у доноров, так и пациентов с полипозным риносинуситом.
Результаты исследования и их обсуждение
Из представленного рис. 1 видно, что на слизистой оболочке носа у здоровых лиц постоянно и в больших количествах присутствуют: 1) разной конфигурации, величиною от 2 до 60 мкм и свыше конгломераты (тела) из шаровидных или овальных клеток, отпочко-вывающих элементарные тельца (ЭТ); 2) свободно-лежащие шаровидные и овальные клетки размером 0,4-
0,9 мкм, с неравномерным бинарным делением, делением в разных направлениях и почкованием ЭТ; 3) свободнолежащие ЭТ диаметром 0,3- 0,15 мкм; 4) мелкие (0,8-0,3 мкм) прямые или слегка изогнутые палочковидные формы - нанопалочки. Одновременно встречаются цилиндрические бактериальные клетки длиною 1,0-1,5 мкм, гораздо реже - различной длины сегментированные бактериальные нити с причудливым завитком на одном из полюсов.
По морфологическим характеристикам, способу образования и деления клеток конгломераты, субмикроскопические шаровидные и овальные клетки и элементарные тельца полностью соответствуют структурам, из которых состоят L-колонии гетеротрофных бактерий, обнаруженных в организмах инфицированных животных и человека [1, 7, 8] и объектах окружающей среды [6]. То есть, на слизистой оболочке носа здоровых людей постоянно образуются и обитают различные варианты L-форм бактерий. Все это лишний раз свидетельствует о том, что процесс L-трансформации бактерий или начальные ее этапы широко распространены.
Следует отметить, что нитевидные формы и ЭТ не редкость у растущих на традиционных питательных средах Escherichia coli, Mycobacterium tuberculosis и других бактерий. Однако мы не склонны относить к L-формам нитевидные структуры и нанопалочки, поскольку первые возникают как форма несбалансированного роста бактерий [7], а вторые - при распаде сегментированных нитей [6].
В предыдущей работе нами сообщалось [5], что L-формы были визуализированы нами на поверхности слизистой оболочки носовых раковин и полипах при полипозном риносинусите у больных бронхиальной астмой. Поэтому было обращено внимание на тот факт, что у здоровых доноров, в отличие от пациентов с полипозном риносинуситом и бронхиальной астмой, ряд бактериальных морфотипов на слизистой носа обнаруживается значительно реже. Например, те же сегментированные или несегментированные нити и особенно нити, которые участвуют в образовании ЭТ, шаровидных клеток или распадающиеся на нанопалочки. В результате создалось впечатление, что переход в L-формы бактерий, постоянно обитающих в носовых ходах здоровых людей или даже задерживающихся в них при дыхании, ускоряется. Такое ускорение L-трансформации возможно только под влиянием защитных механизмов организма, в частности высокого содержания в носовом секрете лизоцима. Именно он служит важным фактором, повреждающим in vivo компоненты клеточной стенки, в первую очередь, у грамотрицательных бактерий и изменяющим их морфологию [7].
t Л м -
/ ч
/ • 4
1 1|.!ГП*
I 1 Ое1ес1ог = 8Е1
2опе Мад = 6.85 К X ЕНТ = 20.00 кУ
•
. ' :<
' 1 * 9 % %
<4, ■* ^ 1рпл+ * ■ 1 * 9
Н ■ Ое1ес1ог = БЕ1
гопе Мад = 2,00 КХ ЕНТ = 20.00 кУ
31 гь <*?*] < #, Г г
■й
Мад = 7.00 К X Ое1ес(ог = ЭЕ1 ЕНТ = 10.С
Рис. 1. Сканирующая электронная микроскопия микро- и субмикроскопических бактериальных форм на слизистой носовых ходов здоровых людей: а - фрагментированная бактериальная нить с завитком на нижнем полюсе, нанопалочки, множество элементарных телец (ЭТ) и крупный Ь-конгломерат; увеличение х 6850; б - множество ЭТ, единичные нанопалочки, мелкие и крупные Ь-конгломераты; увеличение х 2000; в - крупный Ь-конгломерат, клетки которого отпочковывают ЭТ; увеличение х 7000; г - Ь-конгломерат, отдельные овальные клетки на стадии почкования ЭТ и свободнолежащие ЭТ; увеличение х 10000.
б
а
в
г
в
Рис. 2. Сканирующая электронная микроскопия: а - структура, представляющая собою скопление мелких палочковидных форм. Рядом элементарные тельца, вверху - изогнутая бактериальная клетка; увеличение х 3000; б - образование структуры с участием нанопалочек; увеличение х 10000; в - частицы пыли на волосе преддверия и слизистой оболочке носа; увеличение х1500.
Но не только эти особенности обращали внимание. Сравнительный микроанализ элементов показал (табл.), что бактериальные Ь-конгломераты (тела),
локализующиеся на слизистой оболочке носа доноров и поверхности полипов при полипозном риносинусите у больных бронхиальной астмой сильно различаются элементным составом. Так, в Ь-телах здоровых доноров постоянно обнаруживались только Са, 8, Со и Сг, у больных 8, Со и Сг не выявлялись, зато констатированы десять иных элементов, включая РЬ и Р1 Известно, что важными компонентами бактериальных клеток являются химические элементы, которые находятся в различных количествах и соотношениях. Без них невозможны транспорт электронов, стабилизация мембран, поддержание осмотического давления, энергетического состояния, активация и стабилизация ферментных систем и другие важные процессы. Специфический набор химических элементов, установленный у бактериальных Ь-конгломератов (тел), вегетирующих на слизистой оболочке носа здоровых людей и на поверхности полипов у пациентов с полипозным риносинуситом, отражает необычность их физиологического состояние и метаболизма и не влияет на морфологический статус. Естественно, такие нюансы не могут не сказаться на реверсии Ь-конгломератов в исходный бактериальный вид или культурабельности.
Для окончательного объяснения, чем же обусловлены различия в элементном наборе Ь-конгломератов, находящихся непосредственно на слизистой оболочке носовых ходов у доноров и на поверхности полипов у больных полипозным риносинуситом, требуются гистологические, иммунологические и прочие сопоставления. Но при этом нельзя игнорировать и общеизвестные механические способы защиты. По нашим данным у здоровых людей на волосках предверия носовых полостей и на слизистой оболочке носа пылевые
частицы выявляются чаще, чем у больных полипозным риносинуситом. Частицы отличаются высокой плотностью, различными размерами, формой и резкими очертаниями (рис. 2 в). При этом они могут обладать еще разными строением, химическим составом, экстракцией, растворением и взаимодействием с биосубстратом. Человек же чувствителен ко всем токсикантам, которые преодолевают защитные барьеры, в том числе механический барьер носа и проникают в организм через дыхательные пути. Кроме различных бактериальных морфотипов в носовых ходах здоровых лиц нередко просматриваются крупные структуры не совсем ясной природы и механизма образования (рис. 2 а, б). Внешне они больше напоминают скопления, даже колонии нанопалочек. Между тем их трудно отличить от распадающихся ветвистых форм микоплазм, которые могут находиться в носовых ходах. Подобные структуры часто обнаруживаются в почве и отходах золотодобычи.
Выводы
1. Сканирующей электронной микроскопией на
слизистой оболочке носа здоровых людей постоянно обнаруживаются различные структуры
бактериального происхождения: цилиндрические
палочковидные клетки, нитевидные формы, нанопалочки, свободнолежащие шаровидные и овальные клетки, образованные ими крупные конгломераты и тела и многочисленные элементарные тельца. Шаровидные (овальные) клетки, конгломераты (тела) и элементарные тельца являются вариантами Ь-форм бактерий и представляют собою нормальное явление.
2. Ь-конгломераты, формирующиеся в носовых ходах здоровых людей, характеризуются собственным набором и количеством химических элементов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Биология Ь-форм бактерий [Текст]/В.Д.Тимаков, Г.Я.Каган.-М.: Медгиз, 1961.-233 с.
2. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология [Текст]/А.И.Коротяев, С.А.Бабичев.-Слб.: Спец. Литература, 1998.-580 с.
3. Медицинская микробиология [Текст]/под ред.
В.И.Покровский, О.К.Поздеев.-М.: ГЭоТаР
МЕДИЦИНА, 1999.-1183 с.
4. Медицинская микробиология. Учебник для
вузов [Текст]/О.К.Поздеев.-М.: ГЭОТАР
МЕДИЦИНА, 2001.-765 с.
5. Техника взятия материала из небольших по площади или труднодоступных участков тела человека для изучения микроорганизмов [Текст]/В.М.Катола,
Э.В.Хмелькова, Т.Б.Макеева//Бюл. физиол. и патол. дыхания.-2004.-Вып.18.-С64-68.
6. Электронномикроскопический анализ
морфофизиологического состояния бактерий в местах колонизации [Текст]/Катола В.М. [и др.]//Бюл. физиол. и патол. дыхания.-2005.-Вып.2Ь-С.79-83.
7. Ь-формы бактерий (механизм образования,
структура, роль в патологии)
[Текст]/С.В.Прозоровский, Л.Н.Кац, Г.Я.Каган.-М.: Медицина, 1981.-236 с.
8. Ь-формы бактерий и семейство
Мусор^шаїасеае в патологии [Текст]/В.Д.Тимаков, Г.Я.Каган.-М.: Медицина, 1973.-391 с.
Таблица
Сравнительный химический состав (в %) бактериальных Ь-конгломератов
Элементы Локализация Ь-конгломератов
на слизистой оболочке носа у доноров на поверхности полипов носа у пациентов
Бі - 0,23-0,35
А1 - 0,4-0,45
К - 0,29-0,4
№ - 0,3
Са 0,74-1,18 0,9
Р - -
Б 14,77- 17,95 -
С1 - 0,42-0,44
Бе - 0,15
Мп - -
Мй - 0,35-0,38
Со 1,47-4,53 -
Сг 79,25-80,43 -
РЬ - 0,6
Р1 - 0,3-0,65
Примечание: (-) - элемент не обнаружен.