АУТОЛОГИЧНЫЙ ОБОГАЩЕННЫЙ ГЕНЕТИЧЕСКИМ МАТЕРИАЛОМ ЛЕЙКОКОНЦЕНТРАТ ДЛЯ ПРЕВЕНТИВНОЙ ГЕННОЙ ТЕРАПИИ ИШЕМИЧЕСКОГО ИНСУЛЬТА В МОДЕЛИ НА МИНИ-СВИНЬЯХ Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ

227

Мигрировавшие из эксплантата клетки, на основе морфологических параметров и экспрессии mHsp70, разделили на две субпопуляции — фибробластоподобные 1Г1^р70-отрицательные (mHsp70-) и опухолевые 1Г1^р70-положительные клетки (mHsp70+).

Результаты анализа подвижности показали, что средняя скорость движения mHsp70+ клеток существенно выше, чем mHsp70- клеток. Более того, при подавлении mHsp70 низкомолекулярными ингибиторами скорость движения mHsp70+ клеток снижалась, что может свидетельствовать о возможном участии белка в инвазии и миграции опухолевых клеток. mHsp70+ клетки также обладали более извилистыми треками движения, что может указывать на их высокий инвазивный потенциал. Исследование выполнено при финансовой поддержке Министерства науки и высшего образования Российской Федерации (Соглашение № 075-15-2022-301 от 20.04.2022).

Литература:

1. Vollmann-Zwerenz A., Leidgens V., Feliciello G. et al. Int J Mol Sci. 2020. V. 21. № 6. P. 1932.

2. Lathia J.D., Heddleston J.M., Venere M. et al. Cell Stem Cell. 2011. V. 8. № 5. P. 482.

3. Charles N.A., Holland E.C., Gilbertson R. et al. Glia. 2012. V. 60. № 3. P. 502.

4. Soubéran A., Tchoghandjian A. Cancers. 2020. V. 12. № 9. P. 2347.

5. Shin B.K., Wang H., Yim A.M. et al. J. Biol. Chem. 2003. V. 278. P. 7607.

АУТОЛОГИЧНЫЙ ОБОГАЩЕННЫЙ ГЕНЕТИЧЕСКИМ МАТЕРИАЛОМ ЛЕЙКОКОНЦЕНТРАТ ДЛЯ ПРЕВЕНТИВНОЙ ГЕННОЙ ТЕРАПИИ ИШЕМИЧЕСКОГО ИНСУЛЬТА В МОДЕЛИ НА МИНИ-СВИНЬЯХ

С.С. Таргачев, Д.А. Трофимов, Г.Г. Кундакчян, А.М. Агаев, Л.А. Новичёнков, Р.Р. Гарифулин, А.А. Измайлов, М.Е. Соколов, В.А. Маркосян, З.З. Сафиуллов

ФГБОУ ВО Казанский ГМУ Минздрава России, Казань, Россия

e-mail: [email protected]

Ключевые слова: лейкоконцетрат, превентивная генная терапия, ишемический инсульт, животные модели.

В предыдущих работах нами был разработан эффективный способ лечения травматического повреждения спинного мозга у мини-свиней с помощью аутологичного лейкоконцентрата, обогащенного генами, кодирующих сосудистый эндотелиальный фактор роста (VEGF), гли-альный нейротрофический фактор (GDNF) и нейрональ-ную молекулу клеточной адгезии (NCAM).

В настоящем исследовании мы использовали данный препарат с целью генной терапии ишемического инсульта. Эксперименты выполнены на взрослых самках мини-свиньях (n=6), которым моделировали ишемический инсульт головного мозга путем окклюзии средней мозговой артерии с последующей перевязкой сонной артерии на противоположной стороне. Опытным животным (n=3) за 2 суток до операции внутривенно вводили аутологич-ный лейкоконцентрат, обогащенный генами vegf165, gdnf и ncaml. Контрольным мини-свиньям (n=3) свиньям вводили физиологический раствор. В течение 21 сутки после моделирования инсульта у подопытных животных

оценивали двигательную активность с помощью поведенческого теста «Открыто поле». Мини-свиней помещали в арену (3x3м), разделенную линиями на 6 одинаковых квадратов, и в течение 10 минут подсчитывали количество пересеченных линий.

Через три недели эксперимента животных наркотизировали, забирали головной мозг и оценивали объем инфаркта мозга. Для измерения абсолютного объема инфаркта (АОИ) получали цифровые изображения фронтальных срезов головного мозга толщиной 3 мм, которые фотографировали с обеих сторон. Относительный объем инфаркта (ООИ) высчитывали по формуле: АОИ/ АОИ+объем головного мозга. Выживаемость клеток в периинфарктной области изучали иммунофлуорес-центным методом помощью антител к проапоптотиче-скому белку (СаэраэеЗ) и белку теплового шока 70 кДа (Изр70). На 3-й день после моделирования инсульта показано снижение двигательной активности в обеих группах животных с последующим восстановлением на 7-й и 14-й дни. На 21-й день наибольшее улучшение показателей было выявлено в терапевтической группе. Макроскопический анализ мозга через 21 день после моделирования инсульта выявил очаговый ишемиче-ский инфаркт, локализованный в височной доле левого полушария.

Анализ объемов инфаркта мозга подопытных животных обнаружил, что у мини-свиней из опытной группы объем инфаркта был в два раза меньше, чем контрольной группе. При этом, иммунофлуоресцентое окрашивание показало, что количество клеток, вступивших в апоп-тоз, было больше в контрольной группе, чем в опытной, однако Изр70-иммупозитивная область не отличалась между группами.

Полученные данные свидетельствуют о положительном влиянии превентивной внутривенной инфузии ау-тологичного лейкоконцентрата, несущего гены уедИб5, дСП и псат1, на восстановление двигательной активности и сохранности ткани мозга после моделирования ишемического инсульта.

ПОЛУЧЕНИЕ ГИБРИДНЫХ МАТРИКСОВ НА ОСНОВЕ ПРИРОДНЫХ И СИНТЕТИЧЕСКИХ ПОЛИМЕРОВ

Т.Х. Тенчурин2, Д.М. Седов1' 2, Р.В. Шариков2, Л.И. Давыдова2, К.В. Сидорук2, Е.В. Соловьева2, В.Г. Богуш2, Т.Е. Григорьев2

1 РТУ МИРЭА, Москва, Россия

2 НИЦ Курчатовский Институт, Москва, Россия

e-mail: [email protected]

Ключевые слова: поли-(_-лактид-со-8-капролактона), диа-цетата целлюлозы, рекомбинантный спидроин, электроформование, раневые повязки.

Травмы, получаемые в результате аварий, падений, ожогов или военных действий, ежегодно приводят к смерти более 5 миллионов человек во всем мире. Особое место в снижении производительности труда и повышении расходов на медицинское обслуживание занимают ожоговые травмы. Несмотря на широкий ассортимент перевязочных средств, представленных на парафар-мацевтическом рынке, нет покрытия, в полной мере удовлетворяющего требованиям полифункционального, недорогого и эффективного изделия. В этой связи в настоящей работе разработан двухслойный волокнистый материал на основе диацетата целлюлозы (ДАЦ)

Гены & Клетки XVII, №3, 2022