CC BY
7
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 1990 УДК 614.48-036.8-078
В. #. Бессонова, М. М, Лившиц, Л. А. Пономарева
АПРОБАЦИЯ БИОТЕСТОВ ДЛЯ КОНТРОЛЯ СТЕРИЛИЗАЦИИ
Центральная контрольно-исследовательская лаборатория Московской дезинфекционной
станции
М. И. Леей, Р. Л. Гутерман, Л. Б. Пирятинский , Е. М. Гагу а,
В настоящее время в СССР для бактериологического контроля работы паровых стерилизаторов используют только биопробы «садовой земли» [1]. К недостаткам этой методики относятся ее трудоемкость и сложность подбора тест-объекта, так как наличие термоустойчивых микроорганизмов не гарантируется во всех пробах земли.
В 60-е годы для контроля процесса стерилизации паром стали применять споры термофильного микроорганизма Bacillus stearothermophi-lus. Для контроля стерилизации воздухом используют несколько споровых микроорганизмов, чаще других Bacillus subtilis.
В настоящей работе приведены результаты апробации бактериологического контроля работы паровых и воздушных стерилизаторов в некоторых лечебных учреждениях Москвы. Для контроля работы паровых стерилизаторов применяли В. stearothermophilus штамм ВКМ В.— 718, а для контроля воздушных — Bacillus liche-niformis штамм В. — G.
Биологические тесты представляли собой ин-сулиновые флаконы, содержащие споровую взвесь (20 мкл), высушенную при 37 °С. Для контроля стерилизации паром на дно флакона помещали 106 спор В. stearothermophilus, а для контроля воздушной стерилизации — 103 спор В. licheniformis. Флаконы помещали в пакеты из упаковочной бумаги. Пакеты (5 штук) располагали в стерилизационной камере парового стерилизатора вместимостью до 100 л или воздушного вместимостью до 80 л. В случае больших размеров стерилизатора число пакетов увеличивали. После окончания цикла стерилизации (или на следующий день) пакеты возвращали в лабораторию, где во флаконы добавляли цветную питательную среду, после чего их плотно закрывали резиновой пробкой. В состав питательной среды входил бульон Хоттингера (20 %), феноловый красный (0,002%), сахар-глюкоза и минеральные соли. Одновременно питательную среду вводили в контрольные флаконы с тест-микробами. После стерилизации воздухом флаконы помещали в термостат при температуре 37 °С, после паровой — 55 °С. Общая продолжительность наблюдения за флаконами составляла 7 сут, однако предварительное заключение могло быть вынесено через 24—48 ч по изменению цвета питательной среды с красного на желтый или оранжевый. Окончательный ответ в случае
изменения цвета и помутнения среды основывался в случае В. НсЬегШоггшэ на капельной агглютинации среды с раствором антимикробной кроличьей сыворотки на стекле, а также по специфической форме колоний при посеве на чашки с мясопептонным агаром. Для В. stearothermophi-1иБ изменение цвета питательной среды обычно являлось достаточным признаком роста исходной культуры, так как другие микроорганизмы при 55 °С не растут.
Наряду с биологическими тестами мы применяли химические тесты: для контроля стерилизации паром употребляли трубки, в которых была запаяна бензойная кислота, горячим воздухом— трубки с сахарозой. Кроме химических тестов, для контроля паровых стерилизаторов использовали термоиндикаторные краски.
В общей сложности был проведен контроль 176 циклов стерилизации паром и 261 цикла стерилизации горячим воздухом. Анализу после стерилизации паром подвергали 810 биологических тестов, из которых в 43 (5,3%) был зарегистрирован рост исходной культуры. Для контроля стерилизации воздухом исследовали 1320 флаконов, при этом рост тест-культуры был зарегистрирован в 34 (2,6%) случаях.
В 21 случае (12%) паровая стерилизация была признана неудовлетворительной, так как биологические тесты (все или часть из них) при посеве содержали жизнеспособные споры В. агоШегторЫ1из. Почти во всех случаях, за исключением двух, результаты биотестов совпали с данными, полученными с использованием термоиндикаторных красок. Химические тесты показали неудовлетворительные результаты только в 6 случаях. В связи с этим применение бензойной кислоты вряд ли является оправданным для контроля паровой стерилизации при 132°С, вероятно, ее следует использовать в качестве теста для контроля паровой стерилизации при 120°С. В то же время применение термоиндикаторных красок весьма желательно. Из испытанных типов паровых стерилизаторов наиболее часто (более чем в 50 % случаев) неблагоприятные результаты были получены при исследовании горизонтальных прямоугольных паровых стерилизаторов ГП-360-1М (устаревшие образцы). Причинами неудовлетворительных результатов были нарушения продувки паровых стерилизаторов (2 случая), переуплотнение камер (3 случая), техническая неисправность аппаратов.
В процессе проверки биологических тестов были испытаны различные формы тестов и питательных сред. Мы остановили свой выбор на ин-сулиновых флаконах с высушенными спорами тест-микроорганизмов и цветной питательной средой указанного выше состава. ^В 32 (12%) случаях из 261 исследованного Бездушного стерилизатора были зарегистрированы неудовлетворительные результаты. Из этого числа в 11 случаях неблагоприятные результаты биологических и химических тестов совпали, в 10 случаях такой же результат зафиксирован только в биологиечских тестах, а еще в 11 не расплавилась сахароза, несмотря на то, что рост спор В. ПсЬегШопшз не отмечен. Контрольные замеры показали, что использованная нами партия сахарозы имела точку плавления 186°С, т. е. выше минимально допустимой температуры используемого режима стерилизации.
Представленные данные свидетельствуют о необходимости использования как биологических, так и химических тестов при контроле ^воздушных стерилизаторов. Следует указать, что стерилизаторы с принудительной скоростной циркуляцией воздуха пока еще относительно редко встречаются в лечебных учреждениях, поэтому и в нашей работе результаты контроля
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 1990 УДК Г>14.35:[615.465.03:616.31
Ф
%
4
В настоящее время в практике ортопедической стоматологии широко используются сплавы из неблагородных металлов.
Стоматологические сплавы — системы многокомпонентные. Их составляющие, выходя из сплава в полость рта в виде ионов, играют важную роль в жизнедеятельности организма, но при этом не должны оказывать вредного влияния на слизистую оболочку полости рта и весь организм в целом [1, 5, 7, 8]. Для применения этих сплавов в практическом здравоохранении необходима их токсикологическая оценка.
Настоящая работа проведена в соответствии с методическими указаниями к токсиколого-гн-гиеническому исследованию стоматологических металлических сплавов [4]. Нами была изучена ^возможность выхода ионов металлов из стоматологических сплавов в модельную среду. В качестве последней использовали дистиллированную воду. Исследовали применяемые в стоматологии кобальтохромовый сплав (КХС), выпус-
этих стерилизаторов составили всего 3 % от общего числа анализов, причем все они были благоприятными. Иные результаты дал контроль стерилизаторов устаревших типов. В одной из ведомственных санэпидстанций при контроле воздушных стерилизаторов различных типов по предложенной нами методике было исследовано 26 циклов стерилизации. В 7 из них получены неблагоприятные результаты с тестами В. НсЬе-г^опшэ и сахарозой, в 7 — только с биологическими тестами, а в 6 случаях — только с сахарозой, что подтверждает обоснованность вывода о необходимости использования как биологических, так и химических тестов при контроле стерилизации горячим воздухом.
В общей сложности неблагоприятные результаты контроля стерилизации паром и воздухом имели место более чем в 12 % случаев, что подчеркивает важность и неотложность решения проблемы совершенствования контроля стерилизации.
Литература
1. Рамкова Я. В., Дишкант И. П.// Проблемы дезинфекции и стерилизации. — М., 1971. — Ч. 1. — С. 167—171.
Поступила 27.02.89
каемый Ленинградским заводом медицинских полимеров (ТУ 64-2-162—77), и нержавеющую сталь марки 25Х18Н9С2 (ТУ 14-1-23-53—78), а также экспериментальные, разработанные в ОНИИС сплавы: № 1 на основе кобальта, хрома, никеля, №2 на основе кобальта, хрома и № 3 на основе никеля, хрома.
Образцы сплавов в виде прямоугольных пластин с площадью поверхности 20 см2 помещали в емкости с притертыми пробками; соотношение массы образцов к объему модельной среды 1:10. Экстракцию проводили при термо-статировании (40 °С) в течение 10, 30, 60 и 90 сут. После термостатирования вытяжки упаривали до объема 10 мл и анализировали их на содержание никеля, железа, меди, марганца, хрома. Количество ионов железа, никеля и марганца определяли фотометрическим методом с помощью фотоэлектроколориметра КФК-2. Медь и хром определяли атомно-абсорбцион-ным методом на атомно-абсорбционном спектро-
В. Н. Корень, Т. П. Бедряк, О. И. Всеволодова, И. В. Крючкова,
А. В. Козлов
САНИТАРНО-ХИМИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
СТОМАТОЛОГИЧЕСКИХ СПЛАВОВ
НИИ стоматологии, Одесса; Технологический институт пищевой промышленности им.
М. В. Ломоносова, Одесса
